全 文 ：比色法测定华东蹄盖蔽黄酮类含量
刘清飞 朱爱兰 秦明珠 姿
关键词 华东蹄盖旋 黄酮 含童
杰 (南京中医 药大学 , 21 0 0 2 9)
华东蹄盖旅 A t勺 ,一水 in oP in o m 为蹄盖蔗科植
物 。 民间用其清热解毒 , 消肿止痛 , 治疗痢疾 , 疮毒疖
肿 , 配伍治疗各种癌症 。 《中华本草 》曰其 : “ 味苦 , 性凉 ,
消炎解毒 , 止血 ,驱虫 , 主治疮毒疖肿 ,痢疾 , 蛆血 , 蛔虫
病 。 ” 本文用比色法测定其黄酮类含量 。
1 实验材料与仪器
1
.
1 材料 采 自紫金山 ,经秦明珠教授鉴定为蹄盖截
科植物华东蹄盖旅 tA 勿 ,认 m n iP on i cu m 的干燥全草 。
1
.
2 试剂 芦丁对照品 (本校中心实验室 ) ,硅胶 G (青
岛海洋化工厂 ) , 实验所用试剂均为分析纯 。
1
.
3 仪器 752 型分光光度计 (上海分析仪器三厂 ) ,
紫外分析仪 ( 日本岛津 ) 。
1
.
4 样品制备 取原药材 , 除去杂质 ,洗净 , 切断 , 干
燥 ,粉碎过 20 目筛 。
1
.
5 化学定性 取药材粉末 0 . 5 9 , 加 95 % 乙醇 20
m l
,加热 5 m in ,过滤 , 取滤液 1 m l ,加镁粉少量与盐酸 2
~ 3滴 , 呈淡红色 。
1
.
6 T L C 定性 取药材粉末 0 . 5 9 , 加甲醇 10 m l , 密
塞振摇 10 m in 过滤 , 用毛 细管分别吸取滤液与 0 . 5
m g / m l芦丁对照品甲醇溶液点于同一硅胶 G 薄层板上
以正 丁醇 :醋酸 :水 (3 : l : l) 为展开剂 , 展开 , 取出晾干
后 , 喷以 1% A lo O 。 乙醇试液 ,待乙醇挥干后 ,置紫外灯
( 3 65 n m )下观察 , 见图 1 。
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1
.
2
图 1 华东蹄盖蔗 T L C 图谱
芦丁对 照品 2 华东蹄盖旅样品
2 总黄酮含量测定
2
.
1 对照 液制备 精密称取在 1z 。 ℃干燥至恒重的
芦丁对照品 50 m g 置 l o m l容量瓶中 ,加甲醇溶解后
稀释至刻度 ,摇匀 ,精密吸取 10 m l ,置 10 O m l 容量瓶
中 ,加水稀释至刻度 , 摇匀即得 。
2
.
2 检测波长的选择 分别吸取样品提取液和对照
品芦丁 2 . 0 m l , 按标准曲线制备法显色 , 以甲醇代替样
品溶液同法操作 ,所得溶液为空白 ,在 U V 一 3。。。 自动扫
描记录紫外分光光度计扫描吸收曲线 , 由曲线可知选
择 50 0 n m 作为样品测定波长 .
2
.
3 标准曲线的制备 精密吸取对照液 1. 0 m l、 2 . 。
m l
、
3
.
0 m l
、
4
.
0 m l
、
5
.
0 m l
、
6
.
0 m l
、
8
.
0 m l 分别置 2 5
m l容量瓶中 ,各加水至 6 m l ,加 5纬N a N O : 溶液 2 m l ,
混匀 ,放置 6 m in ,加 2 0% A I ( N O 3 ) : 溶液 l m l , 混匀 , 放
置 6 m i n ,加 4% N a O H 溶液 1 m l ,再加水至刻度 ,放置 6
m in
, 照分光光度法在 50 n m 波长处测定吸光度 , 以吸
光度为纵坐标 , 绘制出标准曲线 ,计算回归方程为 : y 一
0
.
0 1 2 8+ 4
.
o 2 9 x
,相关系数 r = 0 . 9 9 9 3 , 在 2 产g 一 1 6
拼g 范围内呈良好的线性关系 。
2
.
4 样品测定 取药材粉末 3 9 于 60 C 干燥 6 h , 精
密称定 ,置索氏提取器中加石油醚 10 m l , 加热回流至
无色 ,放冷 ,弃去石油醚 ,再加甲醇 90 m l , 加热回流至
无色 ,移置 10 m l 容量瓶中 ,用甲醇少量洗涤器皿 ,洗
液并入容量瓶 , 加甲醇至刻度摇匀 ,精密量取 3 m l , 置
sz ml 容量瓶中 , 照标准曲线制备方法自“ 加水至 6 ml ”
起依法操作 , 测定吸光度 ,计算总黄酮的含量 ,结果得 :
2
.
0 9 % (
n = 3 )
。
2
.
5 回收率实验 取药材粉末约 3 9 ,精密称定 ,加芦
丁对照品 。 . 2 m g (恒重 ) , 置索氏提取器中 , 按样品测定
法下操作测定 ,平均 回收率为 : 1 01 . 7% (n 二 3 ) , 变异系
数为 : 。 . 6 4纬
3 讨论
本文采用传统的黄酮检测方法 , 以 N a O H 、 N a N O Z 、
A l (N O
3
)
, 显色较佳 。 华东蹄盖旅在我国华北 、 华东 、 西
南等地区分布较广 ,经济蕴藏量大 。 其内所含成分及其
药理作用报道较少 , 民间常用治疗痢疾及各种癌症 ,具
有一 定的开发价值 。 ( 1 9 9 9; 0 4一 1 4 收稿 )
基层中药杂志 1 9 9 9 年第 13 卷第 4 期
DOI : 10. 13728 /j . 1673 -6427. 1999. 04. 006