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葶苈子对昆明种小鼠移植H_22肝癌移植瘤抑瘤作用的研究



全 文 :第 32 卷 第 2 期
2 0 1 4 年 2 月
中 华 中 医 药 学 刊
CHINESE ARCHIVES OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
Vol. 32 No. 2
Feb. 2 0 1 4





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DOI:10. 13193 / j. issn. 1673-7717. 2014. 02. 057
葶苈子对昆明种小鼠移植 H22肝癌移植瘤抑瘤作用的研究
马梅芳1,李芳2
(1.枣庄市食品药品检验中心,山东 枣庄 277102;2.陕西省中医药研究院 ,陕西 西安 710003)
摘 要:目的:探讨不同品种葶苈子对 H22荷瘤小鼠动物模型的影响。方法:观察不同品种葶苈子对 H22荷瘤
小鼠肿瘤的抑瘤率、生命延长率、肝体比、肺体比、胸腺指数、脾指数以及用药前后的体重变化等指标的影响。结
果:南北葶苈子的抑瘤作用与荷瘤对照组比较有显著性差异(P < 0. 05) ;南北葶苈子与顺铂合用组与单用顺铂组
比较有极显著性差异(P < 0. 01)。结论:葶苈子具有一定的抑瘤作用;与顺铂合用,可以明显对抗顺铂对肺的损
伤和对机体的免疫抑制作用,具有显著的减毒增效作用。
关键词:葶苈子;肿瘤;小鼠
中图分类号:R285. 5 文献标识码:A 文章编号:1673 - 7717(2014)02-0385-02
Study on Anti - tumor Effects of Tinglizi on Mice Bearing H22 Tumor
MA Meifang1,LI Fang2
(1. Zaozhuang Institute of Food and Drug Control,Zaozhuang 277102,Shandong,China;
2. Shanxi Provincial Academy of TCM,Xi’an 710003,Shanxi,China)
Abstract:Objective:To investigate anti - tumor effects of Tinglizi of different varieties on mice bearing H22 Tumor.
Method:Model of transplanting tumor of H22 sarcomawas founded to observe anti - tumor rate,prolonging survival rate,liv-
er - body ratio,lung - body ratio,chest gland - - body ratio and spleen - body ratio of Tinglizi. Result:Tinglizi groups
had difference compared with collate group(P < 0. 05). Tinglizi combined with DDP groups had significant difference(P
< 0. 01). Conclusion:Tinglizi has certain restrain tumor effect,indicating Tinglizi could reduce damn of body by DDP,
protect immunity of body,depress side - effect of DDP,increase the effect and reduce the poisonous action of DDP.
Key words:Tinglizi;tumor;mice
收稿日期:2013 - 09 - 19
基金项目:枣庄市科技发展计划项目(201039)
作者简介:马梅芳(1973 -) ,女,山东枣庄人,副主任中药师,博士,
研究方向:中药质量控制。
葶苈子为十字花科植物独行菜 Lepidium apetalum
Willd.或播娘蒿 Descurainia sophia(L.)Webb. ex Prantl.的干
燥成熟种子。前者习称“北葶苈子”,后者习称“南葶苈
子”。临床用于痰涎壅肺,喘咳痰多,胸胁胀满,不得平卧,
胸腹水肿,小便不利等的治疗。文献报道[1],葶苈子具有
抗肿瘤的药理作用,本实验观察了不同品种葶苈子提取物
对肝癌 H22荷瘤小鼠肿瘤生长的影响,为葶苈子的进一步
研究提供参考依据。
1 实验材料
北葶苈子(产地山东威海)、南葶苈子(产地山东滨州)
经山东中医药大学石俊英教授鉴定分别为十字花科植物独
行菜 Lepidium apetalum Willd.的种子和十字花科植物播娘
蒿 Descurainia sophia(L.)Webb ex Prantl.的种子。
昆明种小鼠,18 ~ 22g,雄性,山东大学实验动物中心提
供。H22腹水瘤小鼠购自山东省医学科学院药物研究所。
超净工作台(北京半导体设备厂) ,FA2004 型电子天
平(上海天平仪器厂) ,蒸汽消毒器(山东新华医疗器械
厂) ,组织研磨器,表面皿,手术刀,手术剪,止血钳,碘酊,
酒精,生理盐水等。
注射用顺铂(DDP,批号:20070805,规格:20 mg /支)
(齐鲁制药有限公司)。
SPSS 13. 0 for Windows 统计软件。
2 实验方法与结果
2. 1 H22肝癌肿瘤细胞悬液的制备
取传代后 14 d的 H22肝癌小鼠,脱颈椎处死,固定于鼠
板上,依次用碘酊、酒精消毒操作部位皮肤,置于超净工作
台中,无菌条件下,剥取肿瘤,选择生长良好无坏死及液化
的肿瘤组织,剔除纤维包膜,在无菌表面皿中剪碎,置组织
研磨器中,加入少量 4 ℃生理盐水轻轻研磨,制成肿瘤细胞
悬液,调整细胞浓度为 1 × 107 /mL。
2. 2 昆明种小鼠移植 H22肝癌移植瘤模型的制作
[2 - 3]
昆明种小鼠,每鼠 0. 2 mL 接种于右前肢腋窝皮下,
(肿瘤细胞数约为 2 × 106个) ,24 h后称重,随机分成 6 组,
分组情况为:荷瘤对照组,顺铂组,南葶苈子组,北葶苈子
组,顺铂 +南葶苈子组,顺铂 +北葶苈子组。以上共分两大
组,一组观察存活期以计算平均生存率,另一组计算瘤重及
其他相关指标。
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中 华 中 医 药 学 刊
CHINESE ARCHIVES OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
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2. 3 给药与记录观察指标
荷瘤对照组:移植肿瘤后,灌胃 0. 4 mL生理盐水,每天
1 次,连续 10 d。
顺铂组:按 2. 0 mg /kg体重隔日腹腔注射顺铂 0. 2 mL /
只 /次,共 2 次。
南葶苈子组:每天按 20 g /kg体重灌胃 0. 15 g生药 /mL
南葶苈子水煎液 1 次,连续 10 d。
北葶苈子组:每天按 20 g /kg体重灌胃 0. 15 g生药 /mL
北葶苈子水煎液 1 次,连续 10 d。
顺铂 +南葶苈子组:除每天按 20 g /kg体重灌胃 0. 15 g
生药 /mL南葶苈子水煎液 1 次,连续 10 d外,按 2. 0 mg /kg
体重隔日腹腔注射顺铂 0. 2 mL /只·次,共 2 次。
顺铂 +北葶苈子组:除每天按 20 g /kg体重灌胃 0. 15 g
生药 /mL北葶苈子水煎液 1 次,连续 10 d外,按 2. 0 mg /kg
体重隔日腹腔注射顺铂 0. 2 mL /只·次,共 2 次。
给药 10 d后停止给药,停药次日处死小鼠,称取小鼠
体重,解剖瘤体、肝、肺、脾、胸腺,分别称重,出现提早死亡
的动物则提前解剖称重记录。根据公式计算抑瘤率、生命
延长率、肝体比、肺体比、胸腺指数、脾指数以及用药前后的
体重变化等[4 - 5]。用 SPSS 13. 0 for Windows统计软件作方
差分析,比较组间均数,结果见表 1 ~ 4。
抑瘤率(%)= 对照组平均瘤重 -实验组平均瘤重
对照组平均瘤重
×
100
生命延长率(%)=
实验组平均生存时间 -对照组平均生存时间
对照组平均生存时间
× 100
表 1 不同品种葶苈子对 H22
荷瘤小鼠体重的影响(n = 10,珋x ± s)
组别 给药前体重(g) 给药后体重(g)
荷瘤对照组 20. 14 ± 0. 99 18. 18 ± 1. 89*▲
南葶苈子组 20. 12 ± 0. 84 20. 36 ± 1. 93●▲▲
北葶苈子组 20. 08 ± 1. 01 20. 38 ± 1. 80●▲▲
DDP +南葶苈子组 20. 05 ± 0. 97 18. 08 ± 1. 96*▲
DDP +北葶苈子组 20. 09 ± 0. 98 18. 12 ± 1. 93*▲
DDP组 20. 14 ± 1. 10 15. 99 ± 2. 02**●
注:与给药前比较,* P < 0. 05,**P < 0. 01;与荷瘤对照组比
较,●P < 0. 05,●●P < 0. 01;与顺铂组比较,▲P < 0. 05,▲▲P <
0. 01。
表 2 不同品种葶苈子对 H22
荷瘤小鼠抑瘤率的影响(n = 10,珋x ± s)
组别 瘤重(g) 抑瘤率(%)
荷瘤对照组 1. 72 ± 0. 26▲▲ -
南葶苈子组 1. 39 ± 0. 32●▲▲ 19. 19
北葶苈子组 1. 43 ± 0. 30●▲▲ 16. 69
DDP +南葶苈子组 0. 82 ± 0. 30●● 52. 50
DDP +北葶苈子组 0. 84 ± 0. 29●● 51. 10
DDP组 0. 93 ± 0. 22●● 46. 05
注:与给药前比较,* P < 0. 05,**P < 0. 01;与荷瘤对照组比
较,●P < 0. 05,●●P < 0. 01;与顺铂组比较,▲P < 0. 05,▲▲P <
0. 01。
表 3 不同品种葶苈子对 H22
荷瘤小鼠生存时间的影响(n = 10,珋x ± s)
组别 生存时间(天) 生命延长率(%)
荷瘤对照组 12. 6 ± 2. 46▲ -
南葶苈子组 14. 8 ± 2. 90 17. 46
北葶苈子组 15. 1 ± 3. 31 19. 84
DDP +南葶苈子组 16. 7 ± 2. 36●● 32. 54
DDP +北葶苈子组 17. 1 ± 3. 07●● 35. 71
DDP组 15. 5 ± 3. 03● 23. 02
注:与给药前比较,* P < 0. 05,**P < 0. 01;与荷瘤对照组比
较,●P < 0. 05,●●P < 0. 01;与顺铂组比较,▲P < 0. 05,▲▲P <
0. 01。
表 4 不同品种葶苈子对 H22荷瘤小鼠肺体比、肝体比、
胸腺指数、脾指数的影响(mg /g,n = 10,珋x ± s)
组别 肺体比 肝体比 胸腺指数 脾指数
荷瘤对照组 12. 09 ± 1. 73▲▲ 62. 32 ± 5. 97 2. 14 ± 0. 41▲▲ 4. 91 ± 0. 84▲▲
南葶苈子组 10. 29 ± 1. 36●▲▲ 62. 84 ± 6. 93 2. 32 ± 0. 51▲▲ 5. 05 ± 0. 73▲▲
北葶苈子组 10. 17 ± 1. 61●▲▲ 62. 15 ± 5. 56 2. 28 ± 0. 49▲▲ 5. 11 ± 0. 91▲▲
DDP +南葶苈子组 13. 87 ± 1. 68●▲ 64. 71 ± 6. 04 2. 01 ± 0. 46▲ 3. 96 ± 0. 77●▲▲
DDP +北葶苈子组 13. 72 ± 1. 75●▲ 64. 88 ± 6. 45 1. 96 ± 0. 47▲ 3. 92 ± 0. 78●▲▲
DDP组 15. 36 ± 1. 69●● 67. 44 ± 7. 56 1. 52 ± 0. 44●● 2. 86 ± 1. 07●●
3 讨 论
本实验通过建立 H22荷瘤小鼠动物模型,观察抑瘤率、
生命延长率、肝体比、肺体比、胸腺指数、脾指数以及用药前
后的体重变化等指标,对葶苈子的体内抗肿瘤作用进行了
研究。实验结果显示:与给药前相比,顺铂组体重降低最为
明显(P < 0. 01) ,提示顺铂在应用过程中不良反应较大。
与荷瘤对照组相比,南葶苈子组、北葶苈子组瘤重减轻有显
著性差异(P < 0. 05)。顺铂组、顺铂 +南葶苈子组、顺铂 +
北葶苈子组瘤重减轻有极显著性差异(P < 0. 01)。提示葶
苈子确有一定的体内抑瘤作用,但是效果不明显(抑瘤率
< 20%) ;与顺铂合用,有增强顺铂抑瘤作用的趋势,并能
一定程度的对抗顺铂所致的肺体比、肝体比增高,胸腺指
数、脾指数降低等不良反应,增加荷瘤小鼠的平均体重,延
长荷瘤小鼠的平均生存时间。在免疫指标方面,葶苈子有
一定的增强荷瘤小鼠机体免疫力的趋势;与顺铂合用,可以
明显改善顺铂对免疫器官的抑制和损伤,提示葶苈子可能
具有一定的免疫调节作用。在对肝脏、肺脏的影响方面,葶
苈子表现出明显的保护肺损伤、减轻肺水肿的作用,与顺铂
合用,可以明显对抗顺铂对肺的损伤,并有一定的减轻肝肿
大的趋势,表现出显著的减毒增效作用,在肿瘤的治疗中有
积极的意义。
参考文献
[1] 常敏毅.抗癌中药[M].长沙:湖南科学技术出版社,1998.
[2] 韩锐.抗癌药物研究与实验技术[M]. 北京:北京医科大学、
中国协和医科大学联合出版社,1997:271 - 272.
[3] 徐淑云,卞如濂,陈修.药理实验方法学[M].北京:人民卫生
出版社,2002(3) :1786.
[4] 李仪奎.中药药理实验方法学[M].上海:上海科学技术出版
社,1991.
[5] 陈奇. 中药药理研究方法学[M]. 北京:人民卫生出版社,
1993.