全 文 ：水平
1
2
3
温度 ／ ℃
60
80
100
表 1 因素水平设计
时间 ／ h
1
2
3
料水比 ／倍
10
20
30
收稿日期：2010－12－12
作者简介：王宫（1962—），男，副研究员，主要从事中药化学及中
药保健品研究。
樟芝（antrodia camphorata）又名牛樟菇、樟窟内
菇、红樟芝，是一种原产于我国台湾省的珍稀药用菌。
它主要分布在我国台湾省的桃园、苗栗、南投、高雄
及屏东等地海拔 1 000 m 以上的深山密林中，腐生
于台湾名贵树木——牛樟树（cinnamomum kanehirae
hayata）的树干空洞内。 东南亚国家盛传樟芝能解毒
抗癌， 对癌症、 食物中毒等危急病症具有神奇的疗
效。 在台湾地区，樟芝被用于排毒、清血脂、解毒保
肝、补肾强心、益胃整肠、镇痛抗菌、增强免疫、抗过
敏、抗癌等，至今未发现有不良反应。 因此樟芝在台
湾素有“药中之王”、“台湾森林中之红宝石”的美誉。
现代研究表明，樟芝含有的生理活性物质有：多糖、
三萜、超氧化物歧化酶（SOD）、腺苷、小分子蛋白质
（含免疫蛋白）、维生素、固醇类、木质素、不饱和长链
脂肪酸、麦角甾醇、微量元素锗等、凝集素、氨基酸、
薄孔菌酸（antrodiaacid）等 ［1-9］，但最主要的生理活性
成分是多糖（β-D-葡聚糖）和三萜类化合物。 本研究
以台湾牛樟芝子实体为试验对象， 以热水浸提法提
取多糖，通过正交试验，确立牛樟芝多糖提取的优化
条件，为工业化生产和制剂研究提供依据。
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.1.1 仪器 旋转蒸发仪（R201D，河南英峪予华仪
器厂）；电子天平（上海奥豪斯国际贸易有限公司，
AR2140）；751 型紫外——可见分光光度计（上海分
析仪器厂）。
1.1.2 试剂 无水葡萄糖对照品（105℃干燥恒重）；
无水乙醇（分析纯）；95%乙醇（分析纯）；浓硫酸（分
析纯）；苯酚（分析纯）。
1.1.3 供试品 牛樟芝子实体（由台湾亚新生物科
技股份有限公司提供）。
1.2 苯酚—硫酸法标准曲线制作 精密称取 105℃
干燥恒重的标准葡萄糖 50.00 mg 定容于 100 mL 量
瓶中，配制成浓度为 0.5000 mg ／mL 的葡萄糖标准母
液；取上述母液 10 mL 定容于 50 mL 量瓶中，配制
成浓度为 0.1000 mg ／mL的葡萄糖标准液。精密吸取
0.1%葡萄糖标准液 0.0，0.1，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0，1.2，
1.4 mL 分别置于具塞试管中， 分别加水至 2.0 mL，
各加 5%苯酚试液 1.0 mL 摇匀，迅速滴加浓硫酸 5.0
mL，立即振荡混匀，置于水浴中 20 min，取出置于室
温；另以蒸馏水 2 mL为空白对照，操作方法同上。于
490 nm 处测定吸光度，绘制葡萄糖标准曲线，得到
葡萄糖标准曲线的回归方程为：A＝49.886c＋0.012，
相关系数 r＝0.9993。
1.3 牛樟芝多糖的水提方法优化 子实体粉末（过
20 目筛）10 g，5 倍量 95%乙醇回流提取 3 次， 每次
1.5 h，离心分离乙醇，用 60～100℃热水浸提料渣 1～
3 h（浸提温度、浸提时间和加水量依正交表设计进
行），旋转蒸发仪上减压浓缩热水浸提液至浸膏（约
为母液的 1 ／6），加无水乙醇至乙醇体积分数为 75%，
置冰箱沉淀过夜，离心分离沉淀，得牛樟芝粗多糖样
品。 牛樟芝多糖的提取条件与提取温度、时间、料水
比有密切关系。 为了选择适宜提取条件，实验设计 3
个因素，分别为因素 A：温度，因素 B：时间，因素 C：
料水比，以多糖含量为指标，选用 L9（34）正交表进行
实验，其因素水平见表 1。
1.4 多糖含量测定 称取 5.0 mg 粗多糖样品定容
于 25 mL 量瓶中，吸取多糖样品液 1 mL，按上述方
法操作， 并从回归曲线中求出样品液所对应的葡萄
糖溶液的浓度 c（mg ／mL）。粗多糖样品中多糖含量＝
c×V×25×8 ／G×100%， 其中 V 为样品的取样量
牛樟芝多糖提取条件研究
王 宫，王 瑾，徐 蔚
（福建省中医药研究院 台湾亚新牛樟芝大陆研发中心，福建 福州 350003）
摘 要： 目的 确定牛樟芝多糖的水提条件。 方法 以牛樟芝多糖含量为检测指标， 以苯酚- 硫酸法作为
多糖的测定方法，对浸提过程中的温度、时间及料水比 3 个因素进行三水平正交试验，优选其最佳提取工艺。 结果
浸提温度对多糖得率的影响较大，其次是时间和料水比。 结论 牛樟芝多糖水提的优化条件为：温度 100℃，料水
比 1∶20，提取时间 2 h，在此条件下单次浸提可获得较高得率的多糖。
关键词：牛樟芝；多糖； 提取；正交实验
中图分类号：R284.1 文献标志码：A 文章编号：1000-338X（2011）01-0052-02
福建中医药 2011年 2月 第 42卷 第 1期
Fujian Journal of TCM February 2011，42（1）52
DOI:10.13260/j.cnki.jfjtcm.010090
实验号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
k1
k2
k3
R
A
1
1
1
2
2
2
3
3
3
1.17
1.50
1.69
0.17
表 2 L9（34）正交实验结果
B
1
2
3
1
2
3
1
2
3
1.35
1.48
1.53
0.06
C
1
2
3
2
3
1
3
1
2
1.36
1.47
1.53
0.06
D
1
2
3
3
1
2
2
3
1
—
—
—
—
多糖含量 ／%
0.32
0.41
0.44
0.47
0.53
0.50
0.56
0.54
0.59
因素
（mL），G为样品的取样重量（mg）。
2 结果与分析
2.1 结果 L9（34）正交试验测定了提取温度、时间
和料水比对多糖得率的影响，结果见表 2。
2.2 分析 从正交实验结果的直观分析中可以看
出，各因素对多糖含量的影响程度为 A＞B＝C，最佳
工艺条件为 A3B3C3； 对正交实验的结果进行方差分
析后发现， 因素 A 温度各水平间有非常显著性差
异，P＜0.01；而因素 B 时间、C 加水量各水平间有差
异，P＜0.1。方差分析见表 3。从生产效率及便于操作
的角度出发，可选择选择 A3B2C2作为多糖提取条件。
3 讨 论
本研究通过对水提过程中的温度、 时间及料水
比的正交试验， 确定了牛樟芝子实体多糖的热水浸
提的优化条件为： 子实体粉末经 5 倍量 95%乙醇回
流提取 3 次，每次 1.5 h，离心，热水浸提料渣：温度
100℃，料水比 1∶20，时间 2 h，旋转蒸发仪上减压浓
缩提取液至浸膏（约为母液的 1 ／ 6），加无水乙醇至
乙醇体积分数为 75%，冰箱放置过夜，得粗多糖样品。
由于多糖易溶于热水，难溶于有机溶剂，采用乙
醇预处理，能有效去除一些脂溶性物质如三萜，还能
有效软化和破坏细胞壁膜，有利于多糖的提取，同时
可以有效去除大部分色素， 避免后处理引起多糖的
损失。本研究采用苯酚-硫酸法测定提取的粗多糖中
的纯多糖含量的方法，显色稳定，灵敏度高，重现性
好，不受蛋白存在的干扰，既能客观表征牛樟芝子实
体多糖的实际含量，又保留了活性多糖。
牛樟芝作为一种著名的药用菌． 在我国台湾地
区已有悠久的应用历史。 大陆对牛樟芝的研究则是
近几年才兴起，并日益受到重视。 有报道说，牛樟芝
的药用、保健功能是其他同类食用菌的十几倍。相信
随着研究和开发的不断深入， 台湾地区特有的物种
牛樟芝必将在治疗人类多种顽疾和保健方面发挥它
的重要作用。
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方差来源
A
B
C
SSe
离差平方和
0.046
0.0057
0.0049
0.0004
表 3 方差分析结果
自由度
2
2
2
8
方差
0.023
0.0028
0.0025
0.0002
F 值
115
14
12.5
—
P 值
＜0.01
＜0.1
＜0.1
—
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