全 文 ：　　　　　　 天然产物研究与开发　 　　　　　
2005　Vol.17　No.3 NATURAL PRODUCT RESEARCH AND DEVELOPMENT　 　　　　　　　　
　
　
　
　
　　收稿日期:2005-01-31　　　接受日期:2005-03-01
　　基金项目:国家“ 863”基金项目(2004AA628030);广东省自然科
学基金项目(39120)
　＊通讯作者 Tel:86-20-85221346;E-mai l:txush@jnu.edu.cn
软骨凹顶藻 Laurencia cartilaginea 代谢产物的研究
杨晓艳1 ,徐石海1＊ ,郭书好1 ,曾向潮1 ,吕俊华2
(1.暨南大学生命科学技术学院 , 广洲 510632;2.暨南大学药学院 ,广州 510632)
摘　要:本文对采自中国南海西沙群岛永兴岛的软骨凹顶藻的代谢产物进行了研究 ,从乙醇浸提物的乙酸乙酯
相分离得到了三种单体化合物 ,经波谱技术分析确定其结构分别为:胆甾-4-烯-3β , 6β-二醇(1), 豆甾-5 , 22-二烯-
3-O-β-D-吡喃葡萄糖甙(2),(2S , 3S , 4R , 2′R)-2-(2′-羟基二十四碳酰氨基)十八碳-1 , 3 , 4-三醇(3),这三种化合物
均是首次从该藻中分离得到的。
关键词:软骨凹顶藻;胆甾;豆甾醇糖苷;神经酰胺
中图分类号:O655.4　　　
Study on the Metabolite of Laurencia cartilaginea
YANG Xiao-yan1 ,XU Shi-hai1＊ ,GUO Shu-hao1 ,ZENG Xiang-chao1 , LV Jun-hua2
(1.College of Life Science and Technology , Jinan University , Guang zhou 510632 , China;
2.Pharmacy College , J inan University , Guangzhou 510632 , China)
Abstract:Three compounds have been isolated from the ethyl acetate fraction of EtOH extracts of the alga Laurencia carti-
laginea collected from South China Sea , and their structures were identified as:cholest-4-ene-3β , 6β-diol(1), stigmast-5 , 22-di-
en-3-O-β-D-glucopyranoside(2) and (2S , 3S , 4R , 2′R)-2-(2′-hydroxytetracosanoylamino)octadecane-1 , 3 , 4-triol(3)by
means of spectroscopy.All compounds were isolated from this alga for the first time.
Key words:Laurencia cartilaginea;cholesterol;stigmasterol glycoside;ceramide
　　海藻是海洋生物中的一大家族 ,因其特殊的生
态环境(高盐 、高压 、低温 、缺氧),产生了许多结构新
颖 、功能独特的次生代谢产物 ,如多糖类 、蛋白类 、萜
类 、甾醇类 、生物碱等[ 1] 。凹顶藻(Laurencia)属于红
藻门的松节藻科 ,是卤代烯萜的丰富来源 ,从中已经
分离出多种含卤倍半萜 、二萜 、三萜 ,许多都有细胞
毒杀性和抗菌活性 ,具有极高的药学研究价值 ,倍受
国内外学者的关注[ 2] 。我们对南海软骨凹顶藻的代
谢产物进行研究 ,从乙酸乙酯相分离得到三种化合
物:胆甾-4-烯-3β , 6β-二醇(1),豆甾-5 , 22-二烯-3-O-
β-D-吡喃葡萄糖甙(2), (2S , 3S , 4R , 2′R)-2-(2′-羟
基二十四碳酰氨基)十八碳-1 ,3 ,4-三醇(3)。
303
1　实验部分
1.1　样品
　　软骨凹顶藻 Laurencia cartilaginea 于 2001 年 5
月采集于中国南海西沙群岛永兴岛 ,由中科院南海
海洋研究所的邹仁林研究员鉴定其种属 ,标本保存
于暨南大学化学系有机化学教研室 。
1.2　实验仪器与试剂
　　5-X 国产显微熔点仪(温度计未校正);A-
VANCE-500 型核磁共振仪(德国 Bruker 公司 ,内标
TMS);ZAB-HS质谱仪(英国 VG公司);HP 5989A质
谱仪(美国 HP 公司);柱层析硅胶和薄层硅胶板均
为青岛海洋化工有限公司生产;LiChroprep RPC-18
反相材料(Merck 公司);试剂均为广州化学试剂厂
产品 。
1.3　提取分离
　　将 2.75 kg 湿样品用 95%的工业酒精室温浸泡
提取(15 d×4),合并浸提液 ,减压浓缩 ,得深褐色浸
膏。将浸膏悬浮于 700 mL蒸馏水中 ,依次以等体积
的乙酸乙酯 、正丁醇分配萃取 。各萃取液分别减压
浓缩得乙酸乙酯相(14 g)和正丁醇相(13 g)。乙酸
乙酯相进行硅胶柱层析 ,先以乙酸乙酯/石油醚为洗
脱剂 , 进行梯度洗脱 , 然后换用甲醇/氯仿体系 。
35%的乙酸乙酯-石油醚洗脱下的流分经 RPC-18分
离得到化合物 1(5.8 mg);60%的乙酸乙酯-石油醚
部分经硅胶柱层析及 RPC-18分离得到化合物2(4.2
mg)和化合物 3(12.4 mg)。
2　物理常数及波谱数据
　　化合物 1 　无色针状结晶 , 分子式 C27H46O2 ,
mp.222.5 ～ 225 ℃。1H NMR(C5D5N ,500 Hz)δH :5.54
(1H ,brs),4.22(1H ,brs),4.18(1H ,m),1.54(3H , s),
0.99(3H , d , J =6.4 Hz), 0.89(6H , d , J =6.6 Hz),
0.73(3H , s);13C NMR(C5D5N ,500 Hz)δC:147.2(C-5 ,
s),129.9(C-4 , d), 73.79(C-6 , d), 67.56(C-3 , d),
56.62(C-17 ,d),56.55(C-14 ,d),55.08(C-9 ,d),42.88
(C-13 , s),40.75(C-16 , t),40.28(C-24 , t),39.75(C-1 ,
t),37.74(C-22 , t),37.36(C-10 , s),36.53(C-8 , t),36.
06(C-20 ,d),30.97(C-12 ,d),30.19(C-2 , t), 28.50(C-
7 , t),28.21(C-25 , d),24.59(C-23 , t),24.20(C-15 , t),
22.89 (C-27 , q), 22.66(C-26 , q), 21.66(C-19 , q),
21.40(C-11 , t), 18.95(C-21 , q), 12.22(C-18 , q);EI-
MS m/z:402 , 384 , 369 , 366 , 271 , 247 , 229 , 211 , 197 ,
175 ,161 , 135 ,105 ,95 ,55。
　　化合物 2　白色粉末 , 分子式 C35H58O6 , mp.
202.5～ 204.9 ℃。1H NMR(C5D5N ,500 Hz)δH :5.37
(1H ,brs),5.27(1H ,m), 5.07(1H , d , J =7.7 Hz ),
3.97 ～ 4.56(7H ,m),1.09(3H , s), 1.01(3H , d),0.96
(3H ,d),0.91(3H , d), 0.89(3H , d), 0.69(3H , s);13C
NMR(C5D5N ,500 Hz)δC :141.0(C-5 , s), 136.6(C-22 ,
d),132.1(C-23 , d), 121.7(C-6 , d), 102.6(C-1′, d),
78.59(C-3′,d),78.36(C-5′, d), 78.24(C-3 , d), 75.33
(C-2′, d),71.83(C-4′, d), 62.95(C-6′, t), 56.89(C-
14 ,d),56.18(C-17 , d), 50.44(C-9 , d), 46.15(C-24 ,
d), 43.27(C-25 , d), 42.53(C-13 , s),40.01(C-12 , t),
39.39(C-4 , t), 37.52(C-1 , t), 36.96(C-10 , s), 36.38
(C-20 ,d),34.29(C-2 , t), 32.19(C-7 , t), 32.12(C-8 ,
d),28.51(C-16 , t), 24.51(C-15 , t), 23.47(C-28 , t),
21.29(C-11 , t), 19.94(C-26 , q), 19.77(C-19 , q),
19.41(C-27 , q), 19.02(C-21 , q), 12.16(C-18 , q),
11.98(C-29 , q);FAB-MS:597([M+Na] +)。
化合物 3　白色粉末 , C42H85NO5 , mp.143.3 ～
144.7 ℃。1H NMR(C5D5N ,500 Hz)δH :8.57(1H ,d , J
=8.9 Hz), 6.64(1H , brs),6.17(1H , brs),5.11(1H ,
m),4.62(1H ,brs), 4.52(1H ,dd , J =10.0 , 5.0 Hz),
4.43(1H , dd , J =10.0 , 5.0 Hz), 4.36(1H , brs),4.29
(1H ,brs),2.24(2H ,m), 2.04(1H , m),1.96(2H ,m),
0.87(6H , t);13C NMR(C5D5N , 500 Hz)δC :175.2(C-
1′, s),76.86(C-3 , d), 73.05(C-4 , d), 72.48(C-2′,
d), 62.10(C-1 , t), 53.04(C-2 , d), 35.69(C-5 , t),
34.17(C-3′, t), 26.56(C-6 , t),25.78(C-4′, t), 14.18
(q);EI-MS m/z :468 , 408 , 384 , 357 , 339 , 308 , 265 ,
97 ,69 ,57;FAB-MS:684([M+H] +)。
3　结果与讨论
　　化合物 1　Liebermann-Burchard 反应呈阳性 ,说
明该化合物为甾体类化合物 。EI-MS显示分子离子
峰 402 ,从而确定该物质的分子量为 402 ,结合其它
波谱数据 ,确定该化合物的分子式为 C27H46O2 ,其不
饱和度为 5。EI-MS 显示的特征离子峰 m/z 402
(M+)、384(M+-H2O)、366(M+-2H2O)、271(M+-SC
-H2O)、229(M+-SC-H2O-42)符合典型的甾体化
合物的裂解规律[ 3] 。13C NMR(DEPT)显示出 27个碳
原子的信号(5 个伯碳 , 10 个仲碳 , 9个叔碳 , 3个季
碳),其中 δC 73.79(d), 67.56(d)为连氧叔碳的信
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号 ,亦即该化合物为含有 2个仲羟基的甾醇。δH1.
54 ppm(3H , s)和 δC 21.66分别为 19-Me的质子化学
位移和碳的化学位移 ,由于化学位移均向低场运动 ,
说明6 β-OH 的存在[ 4] 。δC 147.2(s)和 δC129.9(d)
结合 δH5.54 ppm (1H ,brs)表明该化合物含有一个
三取代双键 ,与文献对照[ 4 ,5] , 确定 1为胆甾-4-烯-
3 β ,6β-二醇 。
化合物 2　FAB-MS 显示准分子离子峰为 m/z
597[M+Na] + ,确定相对分子量为 574 ,结合其它波
谱数据 ,确定其分子式为 C35H58O6 ,不饱和度为 7。
Liebermann-Burchard 反应呈阳性 ,说明该化合物为甾
体类化合物 。δH3.97 ～ 4.56 ppm 表明该化合物可
能存在系列糖质子信号 ,结合 δH4.23 ppm(d , J =
7.8 Hz)和 δC102.6(d),说明化合物2为甾体的糖苷
衍生物 。δC :102.6(d), 78.59(d), 78.36(d),75.33
(d),71.83(d),62.95(t)和 m/z 166表明糖元为葡萄
糖。13C NMR(DEPT)显示出 35个碳原子的信号(6个
伯碳 ,10个仲碳 ,16个叔碳 , 3个季碳),除去糖元的
6 个碳原子 , 甾体还有 29 个碳原子 , 与文献对
照[ 6 ,7] ,该甾体母核为豆甾醇 ,即该化合物为豆甾-5 ,
22-二烯-3-O-β-D-吡喃葡萄糖甙[ 7] 。
化合物 3　FAB-MS给出准分子离子峰为 m/z
684[M+H] + ,确定相对分子量为 683 ,结合其它波
谱数据 ,推出其分子式为 C42H85NO5 ,不饱和度为 1。
δH8.57(1H ,d , J =8.9 Hz), 5.11(1H , m)和 δC175.2
(s),53.04(d)表明了分子中存在酰胺片段(-CO-NH-
CH-)。δC76.86(d),73.05(d), 72.48(d),62.10(t)
和δH 4.62(brs),4.52 (dd , J =10.0 ,5.0 Hz),4.43
(dd , J =10.0 ,5.0 Hz),4.36(brs), 4.29(brs)表明分
子中含有 3个仲羟基和一个伯羟基。另外 , δH0.87
(6H , t)以及 δC14.18(2×CH3)信号说明分子中有两
条没有支链的长链 。EI-MS 表明:m/z 468(M+ -
H2O-C14H29)为分子脱水后直接脱去鞘氨醇端长链
所得 , m/z 439(M+-H2O -C15H30O)为分子脱水经
麦氏重排脱去鞘氨醇端长链得到的 , m/z 357(M+-
H2O-C22H44)为分子脱水后经麦氏重排脱去脂肪酸
端长链所得。与文献对照[ 8] ,确定 3为(2S ,3S ,4R ,
2′R)-2-(2′-羟基二十四碳酰氨基)十八碳-1 , 3 , 4-三
醇 。
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3052005　Vol.17　No.3 杨晓艳等:软骨凹顶藻 Laurencia cartilaginea 代谢产物的研究