全 文 :第 32 卷 第 1 期
2 0 1 4 年 1 月
中 华 中 医 药 学 刊
CHINESE ARCHIVES OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
Vol. 32 No. 1
Jan. 2 0 1 4
中
华
中
医
药
157
学
刊
DOI:10. 13193 / j. issn. 1673-7717. 2014. 01. 053
葶苈子对 S180荷瘤小鼠动物模型的影响
马梅芳1,李洁2
(1.枣庄市食品药品检验中心,山东 枣庄 277102;2.山东中医药大学基础医学院,山东 济南 250355)
摘 要:目的:探讨不同品种葶苈子对 S180荷瘤小鼠动物模型的影响。方法:观察不同品种葶苈子对 S180荷瘤
小鼠肿瘤的抑瘤率、生命延长率、肝体比、肺体比、胸腺指数、脾指数以及用药前后的体重变化等指标的影响。结
果:南北葶苈子的抑瘤作用与荷瘤对照组比较有显著性差异(P < 0. 05) ;南北葶苈子与环磷酰胺合用组与单用环
磷酰胺组比较有极显著性差异(P < 0. 01)。结论:葶苈子具有一定的抑瘤作用;与环磷酰胺合用,可以明显对抗
环磷酰胺对肺的损伤和对机体的免疫抑制作用,一定程度的降低环磷酰胺对肝脏的损伤,具有显著的减毒增效作
用。
关键词:葶苈子;肿瘤;小鼠
中图分类号:R -332 文献标志码:A 文章编号:1673-7717(2014)01-0157-02
Study of Tinglizi on Anti - tumor Effects of Mice Bearing S180 Tumor
MA Meifang1,Li Jie2
(1. Zaozhuang Institute of Food and Drug Control,Zaozhuang 277102,Shandong,China;
2. Basic Medical College of Shandong University of TCM,J i’nan 250355,Shandong,China)
Abstract:Objective:To investigate the anti - tumor effects of Tinglizi of different varieties on mice bearing S180
Tumor. Method:Model of transplanting tumor of S180 sarcoma was founded to observe anti - tumor rate,prolonging survival
rate,liver - body ratio,lung - body ratio,chest gland - body ratio and spleen - body ratio of Tinglizi. Result:Tinglizi
groups had difference with collate group(P < 0. 05). Tinglizi combined with CTX groups had significant difference with
CTX group(P < 0. 01). Conclusion:Tinglizi has certain anti - tumor effect,indicating Tinglizi could reduce damn of body
by CTX,protect immunity of body,reduce side - effects of CTX,increase the effect and reduce the poisonous action of
CTX.
Key words:Tinglizi;tumor;mice
收稿日期:2013 - 08 - 22
基金项目:枣庄市科技发展计划(201039)
作者简介:马梅芳(1973 -) ,女,山东枣庄人,副主任中药师,博士
研究生,研究方向:中药质量控制。
葶苈子为十字花科植物播娘蒿 Descurainia sophia(L.)
Webb. ex Prantl. 或独行菜 Lepidium apetalum Willd. 的干燥
成熟种子。前者习称“南葶苈子”,后者习称“北葶苈子”。
具有泻肺平喘,行水消肿之功效。文献报道[1],葶苈子具
有抗肿瘤的药理作用,但是有关葶苈子抗肿瘤作用机理的
研究尚未见报道。本文采用活体研究的实验方法,经皮下
注射肿瘤细胞建立荷瘤小鼠动物模型,通过灌胃给药探讨
不同品种葶苈子的体内抗肿瘤作用,为葶苈子临床的合理
应用和药材资源的进一步开发提供实验依据与参考资料。
1 实验材料
南葶苈子(产地山东滨州)、北葶苈子(产地山东威海)
经山东中医药大学石俊英教授鉴定分别为十字花科植物播
娘蒿 Descurainia sophia(L.)Webb ex Prantl.的种子和十字
花科植物独行菜 Lepidium apetalum Willd.的种子。
昆明种小鼠,18 ~ 22 g,雄性,由山东大学实验动物中
心提供,质量合格许可证号:SCXK(鲁)20030004。实验条
件:室温 22 ~ 24 ℃,相对空气湿度 50 ~ 60%,排气扇通风,
保持整洁,每 2 ~ 3 d打扫一次鼠舍,光 /暗时间为 12 /12 h。
S180腹水瘤小鼠购自山东省医学科学院药物研究所。
超净工作台(北京半导体设备厂) ,FA2004 型电子天
平(上海天平仪器厂) ,蒸汽消毒器(山东新华医疗器械
厂) ,一次性无菌注射器,三角烧瓶等。
环磷酰胺(CTX,批号:20050305,规格:200mg /支) (上海
华联制药有限公司生产) ,台盼兰为分析纯,水为蒸馏水。
SPSS 13. 0 for Windows统计软件。
2 实验方法与结果
2. 1 S180腹水瘤细胞悬液的制备
无菌条件下操作,取接种 10 天的 S180肉瘤腹水型荷瘤
小鼠,消毒动物腹部皮肤,用 5 mL 一次性无菌注射器穿入
腹腔,吸取肿瘤细胞生长良好的腹水(腹水应为乳白色浓
稠液体,若为黄色或有大量红细胞的血性腹水则弃之不
用) ,所抽腹水放入无菌三角烧瓶内,放置于冰盒上。另取
少量腹水进行细胞计数即用生理盐水稀释 100 倍,取稀释
液 0. 9 mL加台盼兰(0. 2%台盼兰生理盐水溶液)0. 1 mL,
混匀,用细胞计数法分析肿瘤细胞总数及死细胞数(紫或
蓝色,活细胞数应 > 95%)。腹水用生理盐水稀释,调整瘤
细胞浓度为 1 × 107 /mL(整个操作在冰盒上进行,以此来保
持肿瘤细胞的活性)。
2. 2 昆明种小鼠移植 S180肉瘤模型的制作
[2 ~ 3]
取体重 20 g左右的昆明种小鼠,每鼠 0. 2 mL 接种于
751
第 32 卷 第 1 期
2 0 1 4 年 1 月
中 华 中 医 药 学 刊
CHINESE ARCHIVES OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
Vol. 32 No. 1
Jan. 2 0 1 4
中
华
中
医
药
158
学
刊
右前肢腋窝皮下,(肿瘤细胞数约为 2 × 106个) ,24 h 后称
重,随机分成 6 组,分组情况为:荷瘤对照组,环磷酰胺组,
南葶苈子组,北葶苈子组,环磷酰胺 +南葶苈子组,环磷酰
胺 +北葶苈子组。以上共分 2 大组,1 组观察存活期以计
算平均生存率,另 1 组计算瘤重及其他相关指标。
2. 3 给药与记录观察指标
荷瘤对照组:移植肿瘤后,灌胃 0. 4 mL生理盐水,每天
1 次,连续 10 d。
环磷酰胺组:按 50 mg /kg 体重腹腔注射环磷酰胺,每
天 1 次,连续 3 d。
南葶苈子组:每天按 20 g /kg体重灌胃 0. 15 g生药 /mL
南葶苈子水煎液 1 次,连续 10 d。
北葶苈子组:每天按 20 g /kg体重灌胃 0. 15 g生药 /mL
北葶苈子水煎液 1 次,连续 10 d。
环磷酰胺 +南葶苈子组:每天按 20 g /kg体重灌胃 0. 15
g生药 /mL南葶苈子水煎液 1 次,连续 10 d;其中前 3 天,按
50 mg /kg体重腹腔注射环磷酰胺,每天 1次,连续 3 d。
环磷酰胺 +北葶苈子组:每天按 20 g /kg体重灌胃 0. 15
g生药 /mL北葶苈子水煎液 1 次,连续 10 d;其中前 3 天,按
50 mg /kg体重腹腔注射环磷酰胺,每天 1次,连续 3 d。
给药 10 d后停止给药,停药次日处死小鼠,称取小鼠
体重,解剖瘤体、肝、肺、脾、胸腺,分别称重,出现提早死亡
的动物则提前解剖称重纪录。根据公式计算抑瘤率、生命
延长率、肝体比、肺体比、胸腺指数、脾指数以及用药前后的
体重变化等[4 ~ 5]。用 SPSS 13. 0 for Windows统计软件作方
差分析,比较组间均数,结果见表 1 ~ 4。
抑瘤率(%)= 对照组平均瘤重 -实验组平均瘤重
对照组平均瘤重
×
100
生命延长率(%)=
实验组平均生存时间 -对照组平均生存时间
对照组平均生存时间
× 100
表 1 不同品种葶苈子对 S180荷瘤小鼠体重的影响(珋x ± s)
组别 n 给药前体重(g) 给药后体重(g)
荷瘤对照组 10 20. 19 ± 1. 02 18. 21 ± 1. 96*▲▲
南葶苈子组 10 20. 17 ± 0. 90 20. 49 ± 2. 02●▲▲
北葶苈子组 10 20. 13 ± 1. 03 20. 32 ± 1. 82●▲▲
CTX +南葶苈子组 10 20. 06 ± 0. 99 18. 20 ± 2. 10*▲▲
CTX +北葶苈子组 10 20. 11 ± 0. 98 18. 12 ± 1. 85*▲▲
CTX组 10 20. 05 ± 1. 09 15. 40 ± 2. 14**●●
注:与给药前比较,* P < 0. 05,**P < 0. 01;与荷瘤对照组比
较,●P < 0. 05,●●P < 0. 01;与环磷酰胺组比较,▲P < 0. 05,▲▲
P < 0. 01。
表 2 不同品种葶苈子对 S180荷瘤小鼠
抑瘤率的影响(珋x ± s)
组别 n 瘤重(g) 抑瘤率(%)
荷瘤对照组 10 1. 69 ± 0. 25▲▲ -
南葶苈子组 10 1. 42 ± 0. 26●▲▲ 15. 86
北葶苈子组 10 1. 39 ± 0. 29●▲▲ 17. 57
CTX +南葶苈子组 10 0. 76 ± 0. 24●● 55. 15
CTX +北葶苈子组 10 0. 70 ± 0. 29●● 58. 46
CTX组 10 0. 84 ± 0. 23●● 50. 42
注:与给药前比较,* P < 0. 05,**P < 0. 01;与荷瘤对照组比
较,●P < 0. 05,●●P < 0. 01;与环磷酰胺组比较,▲P < 0. 05,▲▲
P < 0. 01。
表 3 不同品种葶苈子对 S180 荷瘤小鼠
生存时间的影响(珋x ± s)
组别 n 生存时间(天) 生命延长率(%)
荷瘤对照组 10 11. 9 ± 1. 91▲ -
南葶苈子组 10 14. 2 ± 2. 74● 19. 33
北葶苈子组 10 14. 4 ± 2. 99● 21. 01
CTX +南葶苈子组 10 17. 3 ± 2. 54●●▲ 45. 38
CTX +北葶苈子组 10 17. 2 ± 2. 57●●▲ 44. 54
CTX组 10 14. 3 ± 2. 45● 20. 17
注:与给药前比较,* P < 0. 05,**P < 0. 01;与荷瘤对照组比
较,●P < 0. 05,●●P < 0. 01;与环磷酰胺组比较,▲P < 0. 05,▲▲
P < 0. 01。
表 4 不同品种葶苈子对 S180 荷瘤小鼠肺体比、肝体比、
胸腺指数、脾指数的影响(mg /g,n = 10,珋x ± s)
组别 肺体比 肝体比 胸腺指数 脾指数
荷瘤对照组 10. 73 ± 1. 82▲▲ 66. 12 ± 3. 79 2. 05 ± 0. 37▲▲ 4. 57 ± 0. 54▲▲
南葶苈子组 8. 92 ± 1. 56●▲▲ 63. 10 ± 5. 73 2. 30 ± 0. 38▲▲ 4. 98 ± 0. 64▲▲
北葶苈子组 8. 85 ± 1. 39●▲▲ 62. 62 ± 3. 98 2. 28 ± 0. 52▲▲ 4. 91 ± 0. 59▲▲
CTX +南葶苈子组 11. 62 ± 2. 29▲▲ 64. 12 ± 3. 58 1. 77 ± 0. 46▲▲ 3. 66 ± 0. 47●●▲▲
CTX +北葶苈子组 11. 52 ± 2. 01▲▲ 64. 09 ± 5. 00 1. 74 ± 0. 47▲▲ 3. 56 ± 0. 54●●▲▲
CTX组 13. 87 ± 2. 02●● 68. 50 ± 8. 69 1. 01 ± 0. 42●● 2. 15 ± 0. 19●●
注:与给药前比较,* P < 0. 05,**P < 0. 01;与荷瘤对照组比
较,●P < 0. 05,●●P < 0. 01;与环磷酰胺组比较,▲P < 0. 05,▲▲
P < 0. 01。
3 讨 论
通过建立 S180荷瘤小鼠动物模型,观察抑瘤率、生命延
长率、肝体比、肺体比、胸腺指数、脾指数以及用药前后的体
重变化等指标,对葶苈子的体内抗肿瘤作用进行了研究。
实验结果显示:葶苈子单用,有一定的抑瘤作用,但是效果
不明显(抑瘤率 < 20%) ;与环磷酰胺合用,有增强环磷酰
胺抑瘤作用的趋势,并能明显对抗环磷酰胺的不良反应,增
加荷瘤小鼠的平均体重,延长荷瘤小鼠的平均生存时间。
众所周知,机体免疫机能的降低有利于肿瘤的形成和
发展,而癌症患者常常伴有免疫机能低下及免疫器官的萎
缩,特别是化疗药物的应用,常引起机体免疫机能严重下
降。实验结果显示:环磷酰胺在发挥有效的抑瘤作用的同
时,对机体的脏器造成了一定的损伤,出现肺体比增大、肝
体比增大、脾指数和胸腺指数减小等现象,降低了机体的抵
抗力。葶苈子单用即可以体现出保护肺损伤、减轻肺水肿
的作用,并有一定的增强免疫、减轻肿瘤代谢产物对肝脏损
伤,减轻肝肿大的趋势;与环磷酰胺合用,可以明显对抗环
磷酰胺对肺的损伤和对机体的免疫抑制作用,一定程度的
降低环磷酰胺对肝脏的损伤,具有显著的减毒增效作用,从
而有利于抑瘤作用的发挥,在肿瘤的治疗中有积极的意义。
参考文献
[1] 常敏毅.抗癌中药[M].长沙:湖南科学技术出版社,1998.
[2] 韩锐.抗癌药物研究与实验技术[M]. 北京:北京医科大学、
中国协和医科大学联合出版社,1997:271 - 272.
[3] 徐淑云,卞如濂,陈修.药理实验方法学[M].北京:人民卫生
出版社,2002(3) :1786.
[4] 李仪奎.中药药理实验方法学[M].上海:上海科学技术出版
社,1991.
[5] 陈奇. 中药药理研究方法学[M]. 北京:人民卫生出版社,
1993.
851