全 文 ：研究报告　REPORTS
Marine Sciences/ Vol.33 , No.5/ 2009
瘤状软骨凹顶藻化学成分研究
苏　华1 , 2 , 朱校斌1 , 袁兆慧1 , 李　敬1 , 2 , 郭书举1 , 2 , 韩丽君1 , 史大永1
(1.中国科学院 海洋研究所 , 山东 青岛 266071;2.中国科学院 研究生院 , 北京 100049)
摘要:采用硅胶柱色谱以及 Sephadex LH-20 凝胶色谱手段 , 对海洋红藻瘤状软骨凹顶藻(Chondrophycus
papi llous Garba ry et H arper)进行化学成分研究 ,分离得到 5 个化合物 。通过 MS 、NMR 等方法对得到的化
合物进行结构确证 ,分别鉴定为邻苯二甲酸二丁酯(Ⅰ), 邻苯二甲酸二异辛酯(Ⅱ),胆甾醇(Ⅲ), 植醇(Ⅳ)和
4-羟基苯甲醛(Ⅴ)。所有化合物均为首次从该种海藻中分离得到。通过 M TT 法对得到的单体化合物进行
细胞毒活性筛选 ,结果显示所有化合物在 10 mg/ L浓度下均无明显活性。
关键词:瘤状软骨凹顶藻(Chondrophycus papillous Garbar y et Harpe r);化学成分;细胞毒活性
中图分类号:Q501　　　　　文献标识码:A　　　　　文章编号:1000-3096(2009)05-0033-03
　　20世纪 60年代以来的化学和药理研究表明 ,海
洋红藻凹顶藻属海藻中含有大量结构新颖 、生理活
性独特的次生代谢产物[ 1 ～ 4] , 主要包括倍半萜 、二
萜 、三萜以及 C15聚乙酰类化合物[ 5] ,其中萜类衍生
物的结构多样性与生物活性多样性尤其引人注目。
瘤状软骨凹顶藻(Chondrophycus pap il lous Garba-
ry et Harper)属红藻门(Rhodophy ta)、仙菜目(Ce-
ramiales)、松节藻科(Rhodomalaceae)、凹顶藻属
(Laurencia),在我国广东 、海南等海域分布广泛 ,尚
未见对其化学成分的研究报道 。作者对采自海南大
东海海域的瘤状软骨凹顶藻的化学成分进行了初步
研究 , 从中已分离得到 5个化合物 ,分别鉴定为邻苯
二甲酸二丁酯(Ⅰ)、邻苯二甲酸二异辛酯(Ⅱ)、胆甾
醇(Ⅲ)、植醇(Ⅳ)、4-羟基苯甲醛(Ⅴ)。这些化合物
均为首次从该种海藻中分离得到。另外 ,对得到的
单体化合物进行了人肿瘤细胞毒活性测试。
1　仪器与材料
Boet ius显微熔点测定仪(温度未校正);Bruker
Avance-500 MHz 核磁共振仪(TMS 内标), Auto-
specUlt ima-Tof 质谱仪。Sephadex LH-20 凝胶为
Pharmacia 公司产品;柱色谱硅胶(160 ～ 200 目)和
薄层色谱硅胶 GF254(60 型)均为青岛海洋化工厂产
品;所用溶剂均为分析纯或色谱纯 。
瘤状软骨凹顶藻(Chondrophycus papi llous
Garbary et Harper)于 2006年 3月采自海南大东海
海域 ,由中国科学院海洋研究所丁兰平博士鉴定 ,标
本现存于中国科学院海洋研究所海藻化学研究室 ,
标本编号为 2006012。
2　提取分离
常温风干的瘤状软骨凹顶藻样品(4 kg),粉碎
后用 95%乙醇室温下提取 3次 ,每次浸泡 6 d 。合并
提取液 ,减压浓缩(温度低于 45℃)得浸膏 87.0 g 。
浓缩物混悬于蒸馏水中 ,用乙酸乙酯进行萃取 ,减压
浓缩得浸膏 26.7 g 。乙酸乙酯萃取部位进行硅胶柱
色谱 ,以石油醚:丙酮(体积比 100∶0 ～ 0∶100)梯度
洗脱 ,薄层色谱检查 ,合并相似组分 ,减压浓缩得 10
个部分 F 1 ～ F 10 。F5 部分(1.4 g)[石油醚-丙酮(体
积比 20∶1)]经凝胶 Sephadex LH-20 柱色谱[石油
醚-氯仿-甲醇 ,体积比 5∶5∶1] 分离纯化得化合物Ⅰ
(7.3 mg)和化合物Ⅱ(10.2 mg);F6 部分(1.3 g)[石油
醚-丙酮(体积比15∶1)]经凝胶Sephadex LH-20柱色
谱脱色后用正相硅胶柱色谱反复分离纯化重结晶后
得化合物Ⅲ(9.4 mg);F7部分(0.9 g)[石油醚-丙酮(体
积比 10∶1)]经正相硅胶柱色谱分离后用凝胶 Sepha-
dex LH-20柱色谱[石油醚-氯仿-甲醇 ,5∶5∶1]纯化
得化合物Ⅳ(8.2 mg);F10部分(2.7 g)[石油醚-丙酮
(体积比 3∶1)]经凝胶 Sephadex LH-20柱色谱[石油
醚-氯仿-甲醇 ,体积比 5∶5∶1] 分离纯化得化合物Ⅴ
(12.1 mg)。
收稿日期:2008-05-30;修回日期:2008-07-09
基金项目:国家自然科学基金重点项目(30530080);国家 863计划项
目(2007AA09Z410);中国科学院知识创新项目(KZCX2-YW-209)
作者简介:苏华(1978-),男 ,博士研究生 ,研究方向为海洋天然产物 ,
E-mail:suh ua @ms.qdio.ac.cn;朱校斌 , 通信作者 , 电话:0532-
82898512;E-mai l:xbzhu @m s.qdio.ac.cn;史大永 , 通信作者 ,
82898719 , E-mai l:shidayong@ms.qdio.ac.cn
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研究报告　REPORTS
海洋科学/2009年/第 33卷/第 5 期
3　结构鉴定
化合物Ⅰ 　C16 H22O 4 , 无色油状物。 IR(film)
cm-1 :2 960 , 2 935 , 2 873(C-H), 1 732(C O ),
1 601 ,1 466(苯环), 1 286 , 1 122 , 1 074(C-O-C),
744。1H-NMR(CDCl3 , 500 MHz)δ:0.97(6H , m ,
H 3-11和 H3-11′), 1.44(4H , m , H 2-10和 H2-10′),
1.72(4H , m , H 2-9 和 H2-9′), 4.29(4H , t , J =
6.8 Hz , H 2-8 和 H 2-8′), 7.52(2H , dd , J =3.4 ,
5.6 Hz , H-4 和 H-5), 7.71(2H , dd , J =3.4 ,
5.6 Hz , H-3和 H-6)。13 C-NMR(CDCl3 , 125 MHz)
δ:13.7(C-11 和 C-11′), 19.2(C-10 和 C-10′), 30.6
(C-9和 C-9′), 65.6(C-8和C-8′), 128.8(C-3 和 C-
6),130.9(C-4和C-5), 132.4(C-1和 C-2), 167.7(C-
7 和 C-7′)。 EI-MS m/z (%):278 [ M ] + (13),
223(15), 205(10),149(100), 104(8),76(7), 57(7),
41(8)。以上数据与文献[ 6] 报道一致 ,因此确定化
合物 Ⅰ的结构为邻苯二甲酸二丁酯 。
化合物 Ⅱ 　C24 H 38 O4 ,无色油状物。1H-NM R
(CDCl3 ,500 MHz)δ:0.91(12H , m ,H 3-14 , H3-14′和
H 3-15 ,H 3-15′), 1.49(16H , m , H 2-9 , H 2-9′, H 2-10 ,
H 2-10′, H 2-11 , H 2-11′, 和 H 2-12 , H 2-12′), 1.69
(2H , m , H-13 和 H-13′), 4.22(4H , m , H 2-8 和
H 2-8′), 7.52(2H ,dd , J =5.7 ,3.3 Hz , H-4和 H-5),
7.70(2H , dd , J =5.7 , 3.3 Hz , H-3 和 H-6)。
1 3
C-NMR(CDCl3 , 125 MHz)δ:10.9(C-14和C-14′),
14.0(C-15 和 C-15′236()), 23.0(C-12 和 C-12′),
23.9(C-11和C-11′),29.0(C-10和 C-10′),30.4(C-9
和 C-9′), 38.8(C-13和 C-13′), 68.1(C-8和 C-8′),
128.8(C-3 和 C-6), 130.8(C-4和 C-5), 132.5(C-1
和 C-2), 167.7(C-7和 C-7′)。以上数据与文献[ 7]
中的数据一致 ,因此确定化合物 Ⅱ的结构为邻苯二
甲酸二异辛酯。
化合物Ⅲ　C27 H46O ,无色针晶(甲醇), mp146
～ 147°C 。1H-NMR(CD3COCD 3 , 500 MHz)δ∶5.35
(1H ,d , J =5.4 Hz , H-6),3.60(1H , d , J =4.6 Hz ,
3-OH),3.38(1H ,m ,H-3),1.08(3H , s , H-19),0.99
(3H , d , J =6.5 Hz , H-21),0.90(3H , d , J =6.5 Hz ,
H-27),0.8(3H , d , J =6.5 Hz , H-26), 0.72(3H , s ,
H-18)。13 C-NMR(CD3COCD3 , 125 MHz)δ∶38.2
(C-1),32.4(C-2), 71.6(C-3),43.3(C-4), 142.3(C-
5),121.3(C-6),32.5(C-7), 32.7(C-8),51.8(C-9),
37.2(C-10),21.3(C-11),40.5(C-12), 43.5(C-13),
57.0(C-14),24.9(C-15), 28.9(C-16), 57.6(C-17),
12.4(C-18),19.8(C-19), 36.7(C-20),19.0(C-21),
36.4(C-22),24.5(C-23),40.2(C-24),28.6(C-25),
23.0(C-26), 22.8(C-27)。 EIMS m/z(%)∶386
[M] +(100), 368[ M-H2O ] +(45), 353[ M-H 2O –
Me] +(35),301(36), 275(55), 273[ M-side chain] +
(17), 255(22), 247(12), 231(16), 213(30), 199
(10), 173(12), 159(23), 145(31), 133(21), 107
(32),95(21),81(11)。以上数据与文献[ 8 , 9] 中的
数据基本一致 ,因此确定化合物 Ⅲ的结构为胆甾醇 。
化合物 Ⅳ　C20 H 40 O , 无色油状物。1H-NMR
(CD3 COCD3 ,500 MHz)δ∶5.36(1H , t , J =6.5 Hz ,
H-2), 4.04(2H , br.s , H-1), 3.36(1H , s , OH-1),
1.95(2H ,m , H-4), 1.61(3H , s , H-17), 1.53(1H ,
m ,H-15),1.43(2H , m , H-5), 1.40(1H , m , H-6a),
1.37(2H ,m , H-7 , H-11), 1.33(1H ,m ,H-6b), 1.26
(4H , m , H-9 , H-13), 1.25(3H , m , H-8a , H-10a , H-
12a), 1.14(2H , m , H-14), 1.08(3H , m , H-8b , H-
10b , H-12b), 0.88(6H ,d , J =6.5 Hz ,H-16 , H-20),
0.88(6H , d , J =7.0 Hz , H-18 , H-19)。13 C-NMR
(CD3 COCD3 ,125 MHz)δ∶59.2(C-1),126.0(C-2),
137.6(C-3),40.5(C-4), 25.7(C-5),37.3(C-6),33.4
(C-7),38.3(C-8),25.1(C-9), 38.1(C-10), 33.5(C-
11), 38.4(C-12), 25.5(C-13), 40.1(C-14), 28.4
(C-15), 22.9(C-16),16.1(C-17), 20.1(C-18), 20.2
(C-19), 23.0(C-20)。EIMS m/z(%)∶296[ M ] +
(24),278[ M-H2O] +(9),263(6),196(5),126(16),
123(49), 111(14), 97(20), 81(42), 71(100)。以上
波谱数据与文献[ 10 ～ 12]中数据基本一致 ,因此确
定化合物Ⅳ的结构为 3 , 7 , 11 , 15-tet ramethy l-hexa-
dec-2-en-1-o l即植醇 。
化合物 Ⅴ 　C7H6O2 , 白色 粉 末。1H-NMR
(CD3 COCD3 ,500 MHz)δ∶9.85(1H , s , CHO-1),
9.36(1H , s ,OH-4), 7.79(2H , dd , J =6.5 ,2.0 Hz ,
H-2 , 6), 6.99(2H , dd , J =6.5 , 2.0 Hz , H-3 , 5)。
EIMS m/z(%)∶122 [ M ] +(100), 121(96), 111
(10),93(42),65(28)。以上波谱数据与文献[ 13] 中
的数据基本一致 ,因此确定化合物Ⅴ的结构为 4-羟
基苯甲醛。
4　肿瘤细胞毒活性测试
用 MT T 法[ 14]对上述 5个化合物在人肿瘤细胞
HCT-8 , BEL-7402 , BGC-823 , A549 和 HELA 模型
上进行了细胞毒活性测试 ,结果表明所有化合物对以
上细胞株均无明显细胞毒活性(IC50 >10 mg/ L)。
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Studies on chemical constituents of Chondrophycus papillous
SUHua1 , 2 , ZHUXiao-bin1 , YUANZhao-hui1 , LI Jing1 ,2 , GUOShu-ju1, 2 , HANLi-jun1 , SHI
Da-yong1
(1.Institute of Oceanology , Chinese Academy of Sciences , Qingdao 266071 , China;2.Graduate University of the
Chinese Academy of Scinese , Beijing 100049 , China)
Received:May , 30 , 2008
Key words:Chondrophycus papillous Garbary et Harper;chemical constituents;MTT assay
Abstract:In order to search fo r bioactivie natural products from marine algae , the chemical constituents of red alga
Chondrophycus papi llous was investigated by the combination of normal phase silica gel and Sephadex LH-20 col-
umn chromatography.Five compounds , Dibutyl o rthophthalates(Ⅰ), 1 ,2-benzenedicar boxylic acid , diisoocty lester
(Ⅱ), cholesterol(Ⅲ), Phy tol(Ⅳ), p-hydro xy pheny l aldehyde(Ⅴ), were isolated and their structures were elucida-
ted by spectroscopic methods including NMR and MS techniques.All these compounds were isolated f rom the C.
papil lous fo r the first time.Cy totoxicities of the purified compounds were evaluated by MTT methods , however ,
all of them were found inactive(IC50 >10 mg/ L).
(本文编辑:张培新)
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