全 文 ：收稿日期:2004-05-20;修回日期:2004-10-08
基金项目:国家 863青年基金(2001AA628100);广东省自然科学基金(31920)资助项目
通讯联系人:徐石海(1967-),男 ,教授 ,博导 ,主要从事天然产物研究与开发。 Email:txush@jnu.edu.cn.
文章编号:1004-1656(2005)01-0073-02
长枝沙菜乙醇-乙酸乙酯溶出物的化学成分
杨剑萍 ,徐石海＊ ,郭书好 ,曾向潮
(暨南大学化学系 ,广东 广州 510632)
关键词:长枝沙菜;神经酰胺;甾醇;结构鉴定
中图分类号:O629.24 文献标识码:A
海洋药物具有显著的药理稳定性和强效性 ,
毒副作用相对较小 ,对防治癌症 、艾滋病 、心脑血
管病 、老年病等疑难杂症具有独特的作用 ,已成为
开发新药 、特效药的主要方向之一[ 1] 。长枝沙菜
(Hyphea Charoides Lamx.)属红藻门沙菜科 ,其微
量元素含量丰富[ 2] 。本文首次对长枝沙菜的化学
成分进行了研究 ,从中分离得到神经酰胺和甾醇
两类具有较强生理活性的物质 。
1 实验部分
1.1 仪器及色谱分析条件
5-X国产显微熔点测定仪(温度计未校正)、
Trace GC-MS 气质联用仪(美国 FINNIN 公司)、
INOVA 500NB 超导核磁共振仪(美国 Varian 公
司)、EQUINOX 55红外吸收光谱仪器(德国 BRUK-
ER公司)、VGZAB-HS 质谱仪 。分离用硅胶材料
(青岛海洋化工厂)。
DB5柱 ,30m×0.25mm×0.25μm , EI:70eV ,程
序升温 , 起始温度 80℃, 停留 2min , 升温速度
15℃/min ,最终温度 250℃,停留温度 20min ,进样
口温度260℃。
1.2 提取分离
长枝沙菜采自中国南海西沙群岛 ,由中国科
学院南海海洋研究所邹仁林研究员鉴定其种属为
Hypnea Charoides Lamx.将 3.8kg(湿重)长枝沙菜
敲碎 ,用质量分数 95%的乙醇在室温下浸泡 4×
15d ,浸泡液减压浓缩 ,得到深褐色的粗提物 ,粗提
物用乙酸乙酯反复萃取 ,浓缩萃取液得浸膏 。干
燥后进行硅胶柱层析 ,从质量分数 20%乙酸乙酯-
石油醚部分分得一无色针状晶体 ,为甾醇类物质
(Ⅱ),从质量分数 70%乙酸乙酯-石油醚中洗脱出
一白色固体 ,经 1:1(V:V)的甲醇-氯仿重结晶 ,得
到神经酰胺(Ⅰ)为无定形白色粉末状固体 ,m.P.
148 ～ 149℃。
2 结果与讨论
2.1 化合物Ⅰ的结构分析
FAB-MS给出 m/ z 684(M++1)的离子峰 ,表
明该化合物是含氮类物质 ,结合 IR谱 、1H NMR 、13
C NMR 、EI-MS的数据分析 ,确定(Ⅰ)的分子式为
C42H85NO5 。
IR(KBr)谱中 3338 、1071cm-1的吸收信号以
及1H NMR 谱中的 6.25(1H , br)、6.74(2H , m)、
7.66(1H ,m)均可氘代 ,表示该化合物存在多羟
基 ,再从13C NMR(DEPT)可以看出有四个连氧碳
信号:76.8 、73.0 、72.5 、62.1 ,说明分子中有一个伯
羟基和三个仲羟基 。3223是酰胺吸收峰 , 1622为
酰胺(Ⅰ)的吸收峰 ,1541 、1466为酰胺(Ⅱ)的吸收
峰 , 2919 、2850 、722cm-1为长碳链的吸收带。1H
NMR中δ8.58(1H ,d , J=8.3Hz ,CD3OD可部分交
换)为酰胺氢的信号峰 , 13C NMR中的δC175.3为
酰胺羰基碳的信号 ,δC53.0为连氮的碳信号 ,由此
可以推断出(Ⅰ)存在-CONH-CH-基团 。除在
175.3有羰基碳吸收峰外 ,在 100以上无吸收峰 ,
因此该化合物无双键 。仅有一种甲基碳的信号
δC14.4 ,且1H NMR谱中出现强质子信号δH 1.25-
1.33和 2 个末端甲基信号 δH0.86(6H , t , J =
5.4Hz),表明分子中有两条没有分支的脂肪烷基
链。可以推断出该化合物具有 N-酰基神经鞘氨
醇的骨架结构[ 3] 。神经酰胺的两条长链则是通过
EI-MS确定:碎片峰 m/z 357为分子电离脱水后经
第 17卷第 1 期
2005年 2 月 化 学 研 究 与 应 用Chemical Research and Application Vol.17 , No.1Feb., 2005
麦氏重排脱去脂肪酸端长链所形成的 ,此碎片离
子进一步脱水得 m/ z 339 ,或先经麦氏重排再脱去
鞘氨醇端长链得碎片离子 m/ z 439 ,亦可直接脱去
鞘氨醇端长链得m/ z 468后脱水得m/z 450 ,经波谱
分析以及与文献[ 4] 对照 ,可以确定化合物 I 为 N-
(1 ,-羟甲基-2, 3 ,-二羟基)十七烷基-2-羟基肪酰胺。
2.2 甾醇组分(Ⅱ)
甾醇(1)-(6)的结构分析 白色针状晶体 ,
熔点:138 ～ 141℃(乙酸乙酯), Liebermann反应呈
阳性 , 其 IR(KBr)max/(cm-1)谱中的 3431 , 1641 , 1056
处的吸收峰初步推测其为甾醇混合物。TLC 展开
为一圆点 ,用常规层析方法很难将其分开 。本实
验采用 GC/MS 联用技术对混合甾醇进行测定 ,将
此甾醇混合物直接进样 ,得离子流色谱图 ,经过计
算机检索和质谱图解析 ,结合其生源关系 ,从中检
出六种甾醇:麦角甾-5 ,22-二烯-3β-醇(1)、麦角甾-
5-烯-3β-醇(2)、豆甾-5 , 22-一烯-3β-醇(3)、胆甾-5 ,
22-二烯-3β-醇(4)、胆甾-5-烯-3β-醇(5)、豆甾-5-烯-
3β-醇(6)。这六个化合物的 MS谱具有共同甾核
的特征峰(m/ z):255(ABCD环峰)、213(ABCD环 D
环裂解峰)。其中(4)、(1)、(3)的分子质量分别相
差14个质量单位 ,即支链相差一个-H2-,而(1)的
碎片峰m/ z 337(M-18-C3H7)、(3)的碎片峰 351m/ z
(M-18-C3H7)是相应的■24(25)双键烯丙位断裂的特
征峰 ,证明了它们的■22(23)位双键的存在;(4)的
碎片峰m/ z 300为侧链双键外移后经麦氏重排裂
解所得 ,且碎片峰为 m z 271(M-SC-2),这是胆甾
-5 , 22-二烯类化合物的特征裂解[ 5] ,这也为
■22(23)位双键的存在提供了依据 。而(5)、(2)、
(6)分别为(4)、(1)、(3)的■22(23)位双键饱和产
物。化合物(1)-(6)的结构式见图1 。
图 1 甾醇化合物(1)-(6)的结构式
Fig.1 Structure of sterols(1)-(6)
神经酰胺普遍具有抗真菌 、抗细菌及细胞毒性
等活性[ 6-8] ,最近的研究又发现其还可抑止乙酰胆
甾转化蛋白酶 ,从而为研制动脉粥样硬化等心血管
疾病的治疗提供了一种可选择的导向化合物[ 9] 。
参考文献:
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Lett , 1997 , 7:1481.
Studies on the chemical constituents of the Hypnea Charoides Lamx.
YANG Jian-ping ,XU Shi-hai ,GUO Shu-hao ,ZENG Xiang-chao
(Dept.of Chemistry , Jinan University , Guangzhou 510632 , China)
Abstract:Two compositions , a pure ceramide and a sterol mixture ,were isolated from the ethylacetate phase of etha-
nol extract of the Hypnea Charoides Lamx , collected from the South China Sea.The ceramide was identified by spec-
troscopic analysis as N-(2hydroxytetracosyl)-1 , 3 , 4-trihydroxy-2-am ino-octadecane;The six sterols were detected
by gas chromatography mass spectrometry , and their structures were confirmed by spectroscopic analysis as Ergost-5 ,
22-dien-3-ol ,Ergost-5-en-3-ol ,Stigmasta-5 ,22-dien-3-ol ,Cholesta-5 , 22-dien-3-ol , Cholesta-5-en-3-ol , Stigmasta-5-
en-3-ol.
Key words:Hypnea Charoides Lamx;ceramide;sterol , spectroscopic analysis
(责任编辑 李 瑛)
74 化 学 研 究 与 应 用 第 17卷