全 文 ：书云南大学学报(自然科学版)，2014，36(6):903 ～ 906 DOI:10． 7540 / j． ynu． 20140330
Journal of Yunnan University
羊脆木的化学成分研究(Ⅱ)*
罗 蕾1，张吕丽1，李祖强2，曲云峰1，杨亚丹1，马国义3
(1．云南师范大学 化学化工学院，云南 昆明 650500;2．云南大学 化学科学与工程学院，云南 昆明 650091;
3．密西西比大学药学系，美国)
摘要:对滇产羊脆木(Pittosporum kerrii Craib)枝叶粗提物的有效部位进行化学成分研究．采用萃取、硅胶柱
色谱、重结晶等方法，分离纯化得到 8 个单体，通过理化数据测定及波谱数据分析鉴定了它们的结构，分别
是 2－二十九烷酮(2－nonacosanone，1)，1－二十九烷醇(nonacosan－1－ol，2)，1－二十六烷醇(ceryl alcohol，3)，三
十二烷酸(lacceroic acid，4)，三十烷酸(melissic acid，5)，二十八烷酸(octacosanic acid，6)，棕榈酸(palmitic acid，
7)，(2S，3S，4Ｒ，8E)－2－［(2Ｒ)－2－羟基二十三酰胺］－8－十八碳烯－1，3，4－三醇{(2S，3S，4Ｒ，8E)－2－［(2Ｒ)－
2－hydroxytricosanoylamino］－8－octadecene－1，3，4－triol，8}．以上化合物均为首次从该植物中分离得到，化合物 8
为首次从该属植物中分离得到． 药理试验表明化合物 7、8 具有细胞毒活性，对 K562 细胞的 IC50 分别为 10．
0、15． 0 μg /mL．
关键词:羊脆木;化学成分;细胞毒性;神经酰胺;脂肪酸;脂肪醇
中图分类号:Q 949． 758． 5;Q 946 文献标志码:A 文章编号:0258－7971(2014)06－0903－04
海桐花科(Pittosporaceae)海桐花属(pittosporum Bank)植物羊脆木(Pittosporum kerrii Craib)，又叫杨翠
木、滇南海桐等，在我国仅见于云南省，分布于滇东南至西南部．该植物的根皮及树皮可入药，具有疏风，解
表、止疟等功效．前文分离、鉴定出 6 个化合物［1］．本文在 K562 细胞系的细胞毒试验结果指导下，从该植
物枝叶中分离、鉴定出的另外 8 个单体，包括 1 个脂肪酮、2 个脂肪醇、4 个脂肪酸和 1 个神经酰胺，其结构
分别为:2－二十九烷酮(2－nonacosanone，1)，1－二十九烷醇(nonacosan－1－ol，2)，1－二十六烷醇(ceryl alco-
hol，3)，三十二烷酸(lacceroic acid，4)，三十烷酸(melissic acid，5)，二十八烷酸(octacosanic acid，6)，棕榈
酸(palmitic acid，7)，(2S，3S，4Ｒ，8E)－2－［(2Ｒ)－2－羟基二十三酰胺］－8－十八碳烯－1，3，4－三醇{(2S，
3S，4Ｒ，8E)－2－［(2Ｒ)－2－hydroxytricosanoylamino］－8－octadecene－1，3，4－triol，8}．以上化合物均为首次从
该植物中分离得到(图 1)，化合物 8 为首次从该属植物中分离得到．药理试验表明化合物 7、8 具有细胞毒
活性．
1 实验部分
1． 1 植物样品 羊脆木(Pittosporum kerrii Craib)枝叶采自云南省石屏县，由云南大学胡志浩教授鉴定．
1． 2 仪器与材料 熔点测定:用 XT－4 型显微熔点测定仪(温度计未校正);MS测定:用Waters公司 Xevo
TQ－S质谱仪;NMＲ测定:用 Brucker公司 Avance 500 型核磁共振仪(TMS 为内标)． 柱色谱用硅胶(37 ～
75、40 ～ 60 μm)，青岛海洋化工厂;TLC硅胶板(F254)，Merck公司．
1． 3 提取与分离 干燥的羊脆木枝叶(15 kg)，用 95%乙醇浸泡，过滤，蒸馏提取液，得粗提物浸膏 K－0
(950 g)，此浸膏加入等质量的粗硅胶，再加入 95%乙醇混合均匀，在水浴上炒干，磨细，装入索氏提取器
* 收稿日期:2014－06－28
基金项目:国家自然科学基金(20962024)．
作者简介:罗 蕾(1961－)，女，广东人，硕士，副教授，主要从事天然药物化学研究． E－mail:514992264@ qq． com．
中，用石油醚、CHCl3、CH3COOCH2CH3、(CH3)2CO和 CH3OH等 5 种溶剂依次萃取、蒸馏，得 K－1 ～ K－5 共
5 个组分，质量分别为 70、90、80、100、400 g．对经筛选有活性的组分(K－1 ～ K－3) ，经过多次硅胶柱色谱及
重结晶等分离、纯化，并经理化常数测定及现代波谱技术(MS、1D NMＲ和 2D NMＲ)等方法，鉴定了其中的
8 个单体的结构．其中，化合物 1(65 mg)、2(33 mg)、4(34 mg)、5(33 mg)由石油醚部位分离得到，化合物 3
(29 mg)、6(32 mg)、7(50 mg)由氯仿部位分离得到，化合物 8(38 mg)由乙酸乙酯部位分离得到．
1． 4 药理试验 分别称取 K－2 ～ K－5 共 4 个组分及化合物 1 ～ 8 等样品，用 DMSO溶解配成 0、1、10、100
μg /mL等 4 种质量浓度，加入含有等同数目的 K562(人白血病)细胞的 10 %小牛血清的 ＲPMI1640 培养
基，保存在 5% CO2 的 37 ℃的恒温箱内．观察细胞生长情况，并用染料排斥试验法计算细胞死亡率，画出
剂量反应曲线，计算半数抑制浓度(IC50)．药理试验由美国密西西比大学药学系药理实验室负责人马国义
合作完成．
图 1 化合物 1 ～ 8 的结构
Fig． 1 Structures of compounds 1 ～ 8
2 结构鉴定
化合物 1 白色针晶，m． p． 56 ～ 57 ℃，分子式:C29H58O． ESI－MS(m/z) :445［M+Na］
+ ． 1H NMＲ(500
MHz，CDCl3)δ:2． 41(2H，t，J=7． 5 Hz，H－3) ，2． 13(3H，s，H－1) ，1． 57(2H，dd，J = 14． 3，7． 1 Hz，H－4) ，1．
25(48H，s，H－5 ～ H－28) ，0． 88(3H，t，J = 6． 9 Hz，H－29) ;13C NMＲ(125 MHz ，CDCl3)δ:43． 8(q，C－1) ，
209． 4(s，C－2) ，31． 9(t，C－3) ，29． 8 ～ 22． 7(t，C－4 ～ C－28) ，14． 1(q，C－ 29)．由以上波谱数据，该化合物
确定为 2－二十九烷酮(2－nonacosanone)．
化合物 2 白色粉末，m． p． 79 ～ 81 ℃ ．分子式:C29H60O． ESI－MS(m/z) :447［M + Na］
+ ． 1H NMＲ(500
MHz，CDCl3)δ:3． 65(2H，t，J=6． 7 Hz，H－1) ，1． 58(2H，dd，J=13． 9，7． 2 Hz，H－2) ，1． 26(52H，m，H－3 ～ H
－28) ，0． 89(3H，t，J=6． 9 Hz，H－29) ;13C NMＲ(125 MHz，CDCl3)δ:63． 1(t，C－1) ，32． 8 ～ 21． 0(t，C－2 ～ C
－28) ，14． 1(q，C－29)．以上数据与文献［2］报道的 1－二十九烷醇一致，故鉴定为 nonacosan－1－ol．
化合物 3 白色针晶(石油醚－乙酸乙酯) ，m． p． 75 ～ 76 ℃ ．分子式:C26H54O． ESI－MS(m/z) :405［M +
Na］+ ． 1H NMＲ(500 MHz ，CDCl3)δ:3． 65(2H，t，J=6． 7 Hz，H－1) ，1． 60 ～ 1． 53(2H，m，H－2) ，1． 26(46H，
m，H－3 ～ H－25) ，0． 89(3H，t，J=6． 9 Hz，H－26) ;13C NMＲ(125 MHz，CDCl3)δ:63． 1(t，C－1) ，32． 8(t，C－
2) ，31． 9(t，C－3) ，29． 7 ～ 29． 4(t，C－4 ～ C－23) ，25． 8(t，C－24) ，22． 7(t，C－25) ，14． 1(q，C－26)．以上数
据与 1－二十六烷醇［3］一致，故确定为 ceryl alcohol．
化合物 4 白色粉末，m． p． 70 ～ 71 ℃ ．分子式:C32H64O2 ． ESI－MS(m/z) :479［M－H］
－ ． 1H NMＲ(500
MHz，CDCl3)δ:2． 34(2H，d，J = 7． 1 Hz，H－2) ，1． 62(2H，m，H－3) ，1． 24(56H，d，J = 6． 8 Hz，H－4 ～ H－
31) ，0． 87(2H，t，J=6． 7 Hz，H－32)．上述数据与三十二烷酸［4］一致，故确定为 lacceroic acid．
409 云南大学学报(自然科学版) http:/ /www． yndxxb． ynu． edu． cn 第 36 卷
化合物 5 白色粉末，m． p． 78 ～ 81 ℃ ．分子式:C30H60O2 ． ESI－MS(m/z) :451［M－H］
－ ． 1H NMＲ(500
MHz，CDCl3)δ:2． 35(2H，t，J=7． 5 Hz，H－2) ，1． 63(2H，dd，J = 14． 6，7． 3 Hz，H－3) ，1． 25(52H，H－4 ～ H－
29) ，0． 88(3H，t，J=6． 8 Hz，H－30) ;13C NMＲ(125 MHz，CDCl3)δ:179． 9(C－1) ，140． 6(C－2) ，24． 8(C－
3) ，29． 2 ～ 29． 8(C－4 ～ C－27) ，32． 0(C－28) ，22． 8(C－29) ，14． 2(C－30)．上述数据与三十烷酸［5］对照一
致，故确定为 melissic acid．
化合物 6 白色块晶，m． p． 71 ～ 72 ℃ ．分子式:C28H56O2 ． ESI－MS(m/z) :423［M－H］
－ ． 1H NMＲ(500
MHz，CDCl3)δ:2． 35(2H，t，J=7． 5 Hz，H－2) ，1． 63(2H，dd，J=15． 0，7． 5 Hz，H－3) ，1． 25 ～ 1． 20(48H，m，H
－4 ～ H－27) ，0． 88(3H，t，J = 6． 9 Hz，H－28)． 上述数据与二十八烷酸［6］对照一致，故确定为 octacosanic
acid．
化合物 7 白色针晶，m． p． 50 ～ 55 ℃ ．分子式:C16H32O2 ． ESI－MS(m/z) :255［M－H］
－ ． 1 3C NMＲ(125
MHz，CDCl3)δ:180． 4(C－1) ，34． 1(C－2) ，31． 9 ～ 22． 7(C－3 ～ C－15) ，14． 1(C－16)。上述数据与棕榈
酸［7］一致，故确定为 palmitic acid．
化合物 8 白色粉末，m． p． 131 ～ 132 ℃，分子式:C41H81O5N． ESI－MS(m/z) :690［M+Na］
+ ． 1H NMＲ
(500 MHz，C5D5N)δ:8． 62(1H，d，J=8． 9 Hz，－NH) ，5． 55(1H，H－8) ，5． 52(1H，H－9) ，5． 11(1H，H－2) ，4．
65(1H，d，J=4． 0 Hz，H－2) ，4． 522(1H，dd，J = 6． 3，11． 2 Hz，H－1) ，4． 37(1H，dd，J=4． 7，10． 8Hz，H－1) ，
4． 36(1H，H－3) ，4． 31(1H，H－4) ，2． 24(2H，H－7) ，2． 00(2H，H－10) ，1． 98(2H，H－5) ，1． 81，1． 80(2H，H－
6) ，1． 27(2H，H－3) ，1． 25 ～ 1． 37(2H，H－11 ～ H－15，H－4 ～ H－22) ，0． 89(3H，t，J = 6． 7 Hz，H－18，H－
23) ;13C NMＲ(125 MHz，C5D5N)δ:61． 7(t，C－1) ，52． 7(d，C－2) ，76． 6(d，C－3) ，72． 7(d，C－4) ，33． 6(t，C
－5) ，26． 5(t，C－6) ，33． 1(t，C－7) ，130． 6(d，C－8) ，130． 5(d，C－9) ，32． 8(t，C－10) ，29． 4 ～ 29． 8(t，C－11 ～
C－15) ，175． 1(s，C－1) ，72． 2(d，C－2) ，35． 5(t，C－3) ，25． 6(t，C－4) ，29． 3(t，C－5) ，29． 4 ～ 29． 8(t，C－
6 ～ C－20) ，31． 9(t，C－16，C－21) ，22． 7(t，C－17，C－22) ，14． 1(q，C－18，C－23)．上述数据与文献［8］的
(2S，3S，4Ｒ，8E)－2－［(2Ｒ)－2－羟基二十三酰胺］－8－十八碳烯－1，3，4－三醇一致，故确定为(2S，3S，4Ｒ，
8E)－2－［(2Ｒ)－2 －hydroxytricosanoylamino］－8－octadecene－1，3，4－triol．
3 结果与讨论
3． 1 药理试验结果 组分中对 K562 细胞系有活性的是 K－2 和 K－3 两个组分，其 IC50 分别为 24． 0、14． 0
μg /mL;单体中有活性的是化合物 7 和 8，其 IC50 分别为 10． 0、15． 0 μg /mL．结果表明，极性中等的氯仿和
乙酸乙酯部位及化合物 7、8 有细胞毒活性．
3． 2 结果讨论 本课题的化学成分研究是在药理筛选结果指导下进行的，对有活性的部位进行化学成分
提取分离、结构鉴定．我们先后采用 HL60［1］、K652 两种细胞系对羊脆木枝叶的粗提物、组分、单体进行试
验，由于不同细胞系对样品的敏感度不同，所以细胞毒活性有差异．这种情况与本课题组对另一该属植物
柄果海桐(P． podocarpum Gagnep)的研究结果［9］相似．
本文从活性组分中分离、鉴定出 8 个成分，这些化合物均为首次从该植物中分离得到．通过药理试验
发现其中的 2 个化合物(7，8) ，具有明显细胞毒活性．神经酰胺(ceramide)是由细胞膜神经鞘磷脂(sphin-
gomyelin)水解产生的一种脂质分子，是一个重要的第二信使，可介导细胞凋亡、分化、生长抑制等多种生
物效应，具有肿瘤抑制功能［10］． 本文首次从海桐花属植物中得到神经酰胺类化合物(8) ，试验表明其对
K562 的 IC50 为 15． 0 μg /mL，为其中的主要有效成分．因此，继续对此类化合物的抗癌活性及机理进行研
究，可为该属植物的应用提供更多科学依据．
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The chemical constituents from Pittosporum kerrii Craib(Ⅱ)
LUO Lei1，ZHANG Lyu-li1，LI Zu-qiang2，QU Yun-feng1，YANG Ya-dan1，MA Guo-yi3
(1． Chemical ＆ Engineering College of Yunnan Normal University，Kunming 650500，China;
2． School of Chemical Science and Technology，Yunnan University，Kunming 650091，China;
3． Faculty of Pharmacy，The University of Mississibi，USA)
Abstract:The chemical constituents from the branches and leaves of Pittosporum kerrii Craib were studied．
Eight compounds were isolated from this plant by silica column chromatography and recrystallization． Their struc-
tures were identified by spectral data analysis． These are:2－nonacosanone(1) ，nonacosan－1－ol(2) ，ceryl alco-
hol(3) ，lacceroic acid(4) ，melissic acid(5) ，octacosanic acid(6) ，palmitic acid(7) ，(2S，3S，4Ｒ，8E)－2 －
［(2Ｒ)－2 －hydroxytricosanoylamino］－8－octadecene－1，3，4－triol(8)． All these compounds were isolated for the
first time from this plant． Compound 8 was isolated for the first time from Pittosporum． Cytotoxicity screening of
extracts and the eight of compounds from P． kerrii Craib was carried out by K562 cell． Two compounds(7，8 )
possess cytotoxic activities and the IC50 are 10． 0 and 15． 0 μg /mL for K562，respectively．
Key words:Pittosporum kerrii Craib;chemical constituents;cytotoxicity;ceramide;fatty acid;fatty alcohol
609 云南大学学报(自然科学版) http:/ /www． yndxxb． ynu． edu． cn 第 36 卷