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江蓠及其共附微生物活性物质的研究进展



全 文 :江蓠及其共附微生物活性物质的研究进展
李云冰,张付云* ,李 妍,杨 阳,苍桂璐 (大连海洋大学食品工程学院,辽宁大连 116023)
摘要 江蓠属于大型红藻,含有多种活性物质,具有营养保健功能。对江蓠及其共附微生物的活性物质研究进展进行了概述,旨在为开
发利用江蓠资源提供理论基础。
关键词 江蓠;活性物质;共附微生物
中图分类号 R282. 5 文献标识码 A 文章编号 0517 -6611(2011)35 -21660 -02
Research Progress of Active Substances in Gracilaria and Symbiotic and Epiphytic Microorganism
LI Yun-bing et al (College of Food Engineering,Dalian Ocean University,Dalian,Liaoning 116023)
Abstract The Gracilaria is one kind of rhodophyta,which contains many kinds of active substances and possesses nutrition and health function.
The research progress of active substances in Gracilaria and symbiotic and epiphytic microorganism were summarized,so as to provide theoretical
basis for development and utilization of Gracilaria.
Key words Gracilaria;Active substances;Symbiotic and epiphytic microorganism
基金项目 辽宁省教育厅计划基金项目(2009A164) ;大连市科学技术
基金计划项目(2010J21DW017)。
作者简介 李云冰(1986 - ) ,女,河南新乡人,在读硕士,研究方向:海
洋生物资源利用。* 通讯作者,副教授,硕士生导师,
E-mail:zhangfuyun@ dlou. edu. cn。
收稿日期 2011-09-02
江蓠(G. verrucosa)又名龙须菜、鹿角菜、凤菜等,是多年
生的大型红藻,属于红藻门真红藻纲、杉藻目江蓠科江蓠属,
江蓠属共约 100 种。近年来,江蓠在广东、福建沿海等地大
量种植,已成为我国第 3 大经济藻类。江蓠的含胶量达
30%,所以,它的主要用途为工业生产琼胶[1]。江蓠新鲜的
藻体具有独特的风味和营养保健功能,可用作鲍鱼饵料或者
加工成海洋蔬菜作为风味食品[2]。海藻类食物普遍是高蛋
白、低脂肪,膳食纤维含量高,且富含矿物质、微量元素和维
生素,经常食用江蓠,可以用来防治肥胖、胆结石、便秘、肠胃
病等代谢性疾病以及高血脂和高胆固醇疾病[3]。此外,研究
表明许多海洋活性物质是由海藻共附生菌产生的,海藻共附
微生物是一个潜在的资源库[4 -8]。因此,笔者将对江蓠的活
性物质及共附生微生物的研究进展进行综述。
1 江蓠的活性物质
1. 1 多糖类 目前江蓠多糖是研究报道较多的活性成分之
一,它占物质含量的 30%左右,是江蓠中最丰富的活性物质。
江蓠多糖多用热水提取,该法提取的多糖多为琼脂型多
糖[9]。Sutapa Mazumder等则用冷水提取江蓠多糖并用红外
光谱进行化学分析,结果显示冷水提取的多糖主要成分为高
分子量硫酸半乳糖[9]。
江蓠多糖具有抗肿瘤、抗病毒等多种生物学活性。很早
就有研究报道江蓠多糖对小鼠 S180肿瘤细胞具有一定的抑
制作用[10]。不同分子量的多糖对 HeLa 细胞的增殖均有明
显的抑制作用,并伴随有剂量效应关系,高分子量的多糖的
抗肿瘤效果优于低分子量多糖,未经降解的粗多糖抗肿瘤活
性最强[11];还有研究表明当多糖中硫酸基含量在 13%时,抗
感冒病毒能力最强,过高或过低均会降低其抗病毒能力[12]。
这些结果表明多糖不同的结构和分子量对其生物活性影响
很大。Sutapa Mazumder等研究发现江蓠多糖对单纯疱疹病
毒 1型和 2 型有抗病毒活性,可以抑制病毒对细胞的粘
附[9]。通过小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验和抗精子畸变
试验表明龙须菜多糖对环磷酰胺诱发的突变有明显抑制作
用,并表现出量效关系,说明江蓠多糖具有抗辐射,抗突变作
用[13]。王亚飞等则证明了不同浓度的江蓠多糖对辐射损伤
的细胞具有保护作用,一定浓度的江蓠多糖可以促进胸腺细
胞增殖,抑制脾细胞增殖,从而增强其免疫活性[14]。此外,
江蓠多糖也有一定的抗氧化作用,刘慧燕等研究发现江蓠低
分子量多糖,对超氧阴离子抑制率可达 51. 06%,对羟自由基
的抑制率为 51. 54%,且其清除能力均存在量效关系[15]。
1. 2 蛋白类 江蓠粗蛋白的含量为 20. 0%左右,其中的蛋
白为藻胆蛋白,是藻类中特有的扑光色素蛋白,按光谱分可
分为藻红蛋白、藻蓝蛋白和异藻蓝蛋白。研究发现龙须菜中
藻红蛋白含量占藻胆蛋白总量的 74. 1%,其生物活性研究发
现,龙须菜的藻胆蛋白和藻红蛋白对自由基均有一定的清除
作用,且藻胆蛋白的清除能力大于藻红蛋白,对于超氧阴离
子藻胆蛋白有一定的清除作用,藻红蛋白未见效果[16]。这
说明除红藻蛋白,其他藻胆蛋白也具有一定的活性。通过骨
髓嗜多染色性红细胞(PEC)微核试验来检测龙须菜藻胆蛋
白的抗突变和抗肿瘤作用,结果表明低、中、高剂量的龙须菜
藻红蛋白粗提物对小鼠骨髓细胞微核率均有明显的抑制作
用,且抑制率随浓度增加而增加,这说明龙须菜藻红蛋白粗
提物能够拮抗环磷酰胺诱发的小鼠染色体突变。在抗肿瘤
试验中龙须菜藻蛋白对小鼠 S180 肉瘤的抑制率达到 44%,
说明它有很好的抗肿瘤和抗突变作用[17]。尽管目前对江蓠
藻胆蛋白的生物活性进行了一些研究,但主要还是其分离纯
化和光谱特性方面,而对其生物活性作用及机理还有待深入
研究。
1. 3 膳食纤维 膳食纤维具有通便、减肥、降血糖、降血脂
等作用。江蓠中膳食纤维含量很高,干基含量高达 90. 00%,
其中水溶性膳食纤维含量为 87. 52%,是一种高活性的膳食
纤维[18]。研究表明,江蓠的膳食纤维经便秘患者服用后,正
常率为 52. 5%,效果显著,优于陆生植物麦麸膳食纤维[19]。
江蓠的膳食纤维还能显著降低四氧嘧啶糖尿病小鼠的血糖
值,具有良好的降血糖作用[19]。Yu - HsinLin等[20]用淡水蛤
蛋白水解物和江蓠的膳食纤维联用处理大鼠,通过 3 组试
验,分别在饲料中添加 16. 6%蛋白水解物,13. 0%的江蓠膳
责任编辑 周婷婷 责任校对 傅真治安徽农业科学,Journal of Anhui Agri. Sci. 2011,39(35):21660 - 21661,21739
DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2011.35.096
食纤维、水解物和膳食纤维二者联用,大鼠的血浆甘油三酯
的含量分别下降 65. 8%、27. 9%、44. 3%,血浆中胆固醇总量
分别下降 26. 1%、24. 2%、17. 1%,在肝脏中,甘油三酯水平
下降了 27. 6%、21. 0%和 28. 0%,而总胆固醇水平分别下降
了 50. 0%、38. 5%和 48. 6%,说明其复合物可以降低胆固醇
含量,对血脂具有调节作用。另研究表明江蓠膳食纤维中的
可溶性膳食纤维对脂肪、胆固醇、胆酸钠具有很强的吸附作
用,可以减少人体对脂肪和胆固醇的吸收[21],这可能是降低
胆固醇的原因。
江蓠的膳食纤维还具有吸附和抗氧化作用。研究表明
江蓠膳食纤维对体内的雌激素和有害金属离子有一定的吸
附作用,尤其是对铅离子吸附作用最佳[22],可减少铅对人体
的损伤。研究报道江蓠膳食纤维在羟自由基体系中和超氧
阴离子自由基体系中清除率较高,半抑制浓度(IC50)分别为
5. 2 mg /ml和 4. 8 mg /ml,同时还能够通过提高机体内超氧化
物歧化酶活性,将组织细胞中的超氧阴离子自由基歧化,减
少氧自由基对细胞的损伤[23]。此外,江蓠藻膳食纤维还可
通过增强机体超氧化物歧化酶活性,清除体内自由基及过氧
化物产物丙二醛等,阻止膜脂质过氧化[19]。所以江蓠膳食
纤维可以用作抗氧化、抗自由基和治疗便秘的保健食品。
1. 4 醇提活性物质 近年对江蓠研究的一个热点是其醇提
物,研究发现江蓠的醇提物具有良好的杀菌、抗炎等作用。
江蓠的乙醇提取物对部分植物真菌有良好的抑制作用,其中
对立枯丝核菌和甜椒灰霉菌菌丝生长的抑制率分别达到
42. 9%和 72. 6%,对香蕉炭疽菌、苹果青霉菌的孢子萌发抑
制率在 90%以上[24]。因此,江蓠的乙醇提取物可被开发成
为安全、低毒的新型植物农药。研究报道用浓度 95%乙醇提
取江蓠中的脂溶性物质,发现其乙醇提取物能抑制金黄色葡
萄球菌,同时乙醇提取的脂溶性物质也可以抑制枯草芽孢杆
菌和大肠埃希氏菌等受试菌。进一步用层析的方法对提取
物的各组分进行分离,各组分均能抑制 2 种以上的菌,对金
黄色葡萄球菌都有抑制作用。这说明活性物质对金黄色葡
萄球菌抑制作用较强,可以用来作为特定的抑制剂应用于食
品当中[25]。徐秀丽等分别采用 MTT法、双碟法、酶标法、亮
度法和增重法测定了多种海藻甲醇提取物的抗肿瘤、抗菌、
免疫、抗炎、抑制葡萄糖苷酶和抗氧化的活性,结果表明江蓠的
甲醇提取物有抗炎活性,对 B细胞增殖有增强作用,其脂溶性
提取物能有效抑制葡萄糖苷酶的活性[26]。而对江蓠的甲醇提
取液进行免疫调节活性分析表明其对小鼠脾淋巴细胞没有直
接毒性,对 T、B淋巴细胞有较强的调节作用,并且有明显的剂
量依赖性[27],说明江蓠甲醇提取物具有一定的免疫调节作用。
目前虽然对醇提物的一些生物活性进行了测定,但是这些醇提
物的结构、性质及作用机理还有待深入研究。
1. 5 溴过氧化物酶 红藻是卤素过氧化物的主要来源[28],
卤素过氧化物酶是至今唯一被广泛认可的,与有机卤化物合
成相关的酶[29],可以使很多有机卤化物形成具有生理活性
的有机物,该酶还具有催化硫氧化、环氧化、吲哚氧化等多种
反应的功能。李海燕等从龙须菜中提取溴过氧化物酶,将样
品除去多糖以及色素得到含有活性酶的蛋白,提取的溴过氧
化物酶最佳 pH为 6. 0,最佳温度为室温,溴过氧化物酶的酶
含量为 0. 3 u /g(湿藻) ,与来自美国的野生龙须菜的溴过氧
化物酶含量 21. 0 u /g有一定差异[30 -31]。这可能是由于酶的
含量随季节和品种的不同而不同。溴过氧化物酶是工业重
要的催化剂,具有良好的热稳定性及良好的对丙酮和甲醇等
有机溶剂的耐受性[32],可以催化多种有机底物的溴化反
应[33]以及有机硫化物的氧化反应[34],也可以用来做催化环
己烯环氧化体系的催化剂[35],对其研究可以作为龙须菜深
加工的一个研究方向,从而提高龙须菜的附加值。
1. 6 凝集素 凝集素是一类含糖并能与糖专一结合的蛋白
质,它具有凝集细胞并刺激细胞分裂的作用。研究发现脆江
蓠凝集素能够凝集兔的绵羊红细胞,尤其是对兔红细胞凝集
活性较强,对人 A、B、O型血红细胞均无凝集活性[36]。糖和
糖蛋白由于能与凝集素分子结合,阻止其与细胞表面糖分子
的结合,从而抑制凝集素的凝集活性。因此,通过抑制试验
可知某种凝集素能与哪些糖类专一性结合,江蓠凝集素能被
阿拉伯糖,麦芽糖,葡萄糖,乳糖,木糖抑制,说明其既可以与
双糖结合,也可以与单糖结合[37]。关于植物凝集素对细菌
的凝集作用的研究很少,Bird. K. T等人的研究表明,海藻凝
集素粗品对细菌只有微弱的凝集活性,但纯化后的江蓠凝集
素对枯草杆菌有较好的凝集活性,这可能与其纯化后提高活
性有关[38]。除了细胞学上的意义,Yskara Fabíola Monteiro
Marques Leite等人的研究表明,在豇豆贮藏过程中加入江蓠
凝集素,可以显著抑制四纹豆象对豇豆的危害[39],说明其还
有一定的生物技术方面的作用。目前还没有其在人体生理
学作用方面的研究报道。
1. 7 其他活性成分 江蓠其他活性物质也正在研究当中,
用乙醚提取江蓠中的脂溶性物质,发现乙醚提取物能抑制金
黄色葡萄球菌[26]。罗先群等用超临界 CO2 流体萃取技术对
海南细基江蓠进行精油提取并分析其成分,发现有的成分可
以抑制肿瘤并增强免疫能力[40]。华玉琴等用有机溶剂从江
蓠中提取了计划生育用药前列腺 E2
[41]。而关于江蓠维生
素、矿物质的报道则较少。
2 江蓠共附微生物的活性物质
藻类在生长过程中向环境释放大量的有机物质,使藻细
胞周围形成一个独特的微环境,称为藻际微环境。在藻际微
环境中,生活着大量的细菌,这些细菌具有独特的结构与功
能,同藻细胞之间构成复杂的关系。如对藻体的附着和变态
产生影响[42],调控藻体分泌的物质[43],已发现的许多海洋活
性物质是由海藻附生菌产生的[4,44]。马悦欣等在 2003 年就
发现江蓠的附生菌具有良好的抑菌作用[45]。郑忠辉等在研
究厦门海域的江蓠时,发现 5株具有抗细菌作用的共附生微
生物,这些菌株对枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、霍乱弧菌有
较好的抑制作用,对金黄色葡萄球菌有一定的抑制作用,同
时,还分离出 3 株抗放线菌,1 株抗真菌的菌株[46]。徐永健
等对宁波海域内受电镀废水中铜污染的龙须菜体表的附生
微生物进行分离,共得到 6 株优势附生细菌,对环境中的
Cu2 +有较好的清除作用,所以龙须菜的这些共附生菌在治理
环境污染上有很大潜力。目前为止,上述活性菌株的活性成
分分离、活性物质的结构及作用机理有待进一步研究。
(下转第 21739页)
1661239 卷 35 期 李云冰等 江蓠及其共附微生物活性物质的研究进展
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408 -412.
(上接第 21661页)
3 结语
综上所述,江蓠是一种重要的经济藻类,具有很高的营
养和保健价值。目前对于江蓠的应用主要是提取其中的琼
胶,而对江蓠的活性物质及其共附微生物的活性物质研究还
不深入,集中在分离纯化等理论研究水平,其结构、性质和作
用机理仍不清楚,所以这些活性物质未能工业化生产而应用
于实际。因此进行江蓠及其共附微生物的天然活性物质研
究,对开发利用江蓠资源具有十分重要的意义。
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