全 文 ：第３４卷第６期
２０１５年１２月
中 国 海 洋 药 物
ＣＨＩＮＥＳＥ　ＪＯＵＲＮＡＬ　ＯＦ　ＭＡＲＩＮＥ　ＤＲＵＧＳ
Ｖｏｌ．３４　Ｎｏ．６
Ｄｅｃｅｍｂｅｒ，２０１５
冈村凹顶藻的倍半萜类化学成分
及抗菌活性研究△
＊
汤宣亮１，余小青１，张毅１，刘爱红２，姚立功３，郭跃伟３，汪玢１＊，
冯丽华１，毛水春１
（１．南昌大学医学部药学院，江西 南昌３３０００６；２．南昌大学分析测试中心，江西 南昌３３００４７；
３．中国科学院上海药物研究所新药研究国家重点实验室，上海２０１２０３）
摘　要：目的 分离鉴定冈村凹顶藻（Ｌａｕｒｅｎｃｉａ　ｏｋａｍｕｒａｉ　Ｙａｍａｄａ）中的倍半萜类成分，供抗菌活性筛选。方法
综合利用各种柱层析方法分离纯化化合物并利用光谱学方法解析化合物结构；选择４株真菌为实验菌株，对
６个倍半萜进行体外抗真菌活性测定；选择２株细菌为实验菌株，对所有倍半萜进行体外抗细菌活性测定。
结果 分离得到１７个倍半萜，分别鉴定为海兔阿普里醇 （１）、劳藻过氧素 （２）、海兔阿普里醛 （３）、α－异溴花侧
伯烯 （４）、α－异花侧伯烯醇 （５）、花侧伯烯醚 （６）、月桂烷－１１－烯－１０－醇 （７）、劳藻酚 （８）、劳藻酚乙酰化物 （９）、
去溴劳藻酚 （１０）、异劳藻酚 （１１）、异劳藻酚乙酰化物 （１２）、约翰斯顿醇 （１３）、帕西菲醇 （１４）、１０－溴－α－花柏烯
（１５）、１０－溴－β－花柏烯 （１６）、９－羟基－３－氯－４，１０－二溴－α－花柏烯 （１７），并对所获得的倍半萜进行抗菌活性筛选。
结论 化合物５和７为首次从冈村凹顶藻中分离得到；应用１Ｄ和２ＤＮＭＲ首次对化合物６的１　Ｈ和１３　Ｃ　ＮＭＲ
数据进行了全归属；化合物５和１３对光滑假丝酵母菌显示了明显的抑制作用，其 ＭＩＣ８０值分别为１和４μｇ·
ｍＬ－１，与两性霉素Ｂ（２μｇ／ｍＬ）和氟康唑（１μｇ／ｍＬ）相当，而化合物２、８和９对新生隐球菌均具有一定的抑
制作用；另外，化合物２、８～１０、１５和１７对金黄色葡萄球菌均显示了不同程度的抑制作用，其中化合物８和９
具有良好的杀菌活性，其 ＭＩＣ８０值分别为２．３和１０．５μｇ／ｍＬ。
关键词：冈村凹顶藻；化学成分；倍半萜；抗真菌活性；抗细菌活性
中图分类号：Ｒ９３１　　　文献标志码：Ａ　　　文章编号：１００２－３４６１（２０１５）０６－０１２－１１
Ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｃｈｅｍｉｃａｌ　ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ　ａｎｄ　ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ｏｆ
ｓｅｓｑｕｉｔｅｒｐｅｎｅｓ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｒｅｄ　ａｌｇａＬａｕｒｅｎｃｉａ　ｏｋａｍｕｒａｉ　Ｙａｍａｄａ
ＴＡＮＧ　Ｘｕａｎ－ｌｉａｎｇ１，ＹＵ　Ｘｉａｏ－ｑｉｎｇ１，ＺＨＡＮＧ　Ｙｉ　１，ＬＩＵ　Ａｉ－ｈｏｎｇ２，ＹＡＯ　Ｌｉ－ｇｏｎｇ３，ＧＵＯ　Ｙｕｅ－ｗｅｉ　３，
ＷＡＮＧ　Ｂｉｎ１＊，ＦＥＮＧ　Ｌｉ－ｈｕａ１，ＭＡＯ　Ｓｈｕｉ－ｃｈｕｎ１＊
（１．Ｓｃｈｏｏｌ　ｏｆ　Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｎａｎｃｈａｎｇ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｃｈａｎｇ３３０００６，Ｃｈｉｎａ；
２．Ｃｅｎｔｅｒ　ｏｆ　Ａｎａｌｙｓｉｓ　ａｎｄ　Ｔｅｓｔｉｎｇ，Ｎａｎｃｈａｎｇ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｃｈａｎｇ３３００４７，Ｃｈｉｎａ
３．Ｓｔａｔｅ　ｋｅｙ　ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　ｏｆ　Ｄｒｕｇ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ，Ｓｈａｎｇｈａｉ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｏｆ　Ｍａｔｅｒｉａ　Ｍｅｄｉｃａ，
Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ａｃａｄｅｍｙ　ｏｆ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｓｈａｎｇｈａｉ　２０１２０３，Ｃｈｉｎａ）
＊ △基金项目：国家自然科学基金项目 （２１３６２０２４，２１１６２０１６，８１００１３９７，２０８６２０１３）；江西省青年科学家 培 养 对 象 计 划
（２０１３３ＢＣＢ２３００４）；江西省自然科学基金（２０１０ＧＱＹ０２１７，２０１１４ＢＡＢ２０５０３４）；江西省教育厅课题（ＧＪＪ１２０２８）；教育
部留学回国人员科研启动基金资助
　作者简介：汤宣亮 （１９８８－），男，硕士研究生。Ｅ－ｍａｉｌ：１０９６４６９１５８＠ｑｑ．ｃｏｍ
＊通讯作者：毛水春，男，教授。Ｔｅｌ：８６－７９１－８６８１８１０１，Ｆａｘ：８６－７９１－８６３６１８３９，Ｅ－ｍａｉｌ：ｍａｏｓｈｕｉｃｈｕｎ＠ｎｃｕ．ｅｄｕ．ｃｎ；
汪玢，女，教授。Ｔｅｌ：８６－７９１－８６３６１８３９，Ｆａｘ：８６－７９１－８６３６１８３９，Ｅ－ｍａｉｌ：ｗｂｃｙ００８＠１６３．ｃｏｍ
　　收稿日期：２０１５－０４－０２
DOI:10.13400/j.cnki.cjmd.2015.06.002
６期 汤宣亮，等：冈村凹顶藻的倍半萜类化学成分及抗菌活性研究 １３　
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｉｓｏｌａｔｅ　ａｎｄ　ｉｄｅｎｔｉｆｙ　ｓｅｓｑｕｉｔｅｒｐｅｎｅｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｒｅｄ　ａｌｇａＬａｕｒｅｎｃｉａ　ｏｋａｍｕｒａｉ　Ｙａｍａｄａ
ａｎｄ　ｔｏ　ｅｖａｌｕａｔｅ　ｔｈｅｉｒ　ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　ｗｅｒｅ　ｉｓｏｌａｔｅｄ　ａｎｄ　ｐｕｒｉｆｉｅｄ　ｂｙ　ｍｅａｎｓ
ｏｆ　ｖａｒｉｏｕｓ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ　ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ　ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ　ｓｉｌｉｃａ　ｇｅｌ　ａｎｄ　Ｓｅｐｈａｄｅｘ　ＬＨ－２０ｃｏｌｕｍｎ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ
ａｎｄ　ｒｅｖｅｒｓｅ　ｐｈａｓｅ　ＨＰＬＣ，ｗｈｉｌｅ　ｔｈｅｉｒ　ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ　ｗｅｒｅ　ｅｌｕｃｉｄａｔｅｄ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｂａｓｉｓ　ｏｆ　ｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｉｃ　ａｎａｌｙｓｉｓ．
Ｔｈｅ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ａｎｔｉｆｕｎｇａｌ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　ｓｉｘ　ｓｅｓｑｕｉｔｅｒｐｅｎｅｓ　ａｇａｉｎｓｔ　ｆｏｕｒ　ｆｕｎｇｉ（Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ　ｎｅｏｆｏｒｍａｎｓ，
Ｃａｎｄｉｄａ　ｇｌａｂｒａｔａ，Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ　ｒｕｂｒｕｍ，ａｎｄ　Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ　ｆｕｍｉｇａｔｕｓ）ａｎｄ　ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　ａｌ
ｔｈｅ　ｉｓｏｌａｔｅｓ　ａｇａｉｎｓｔ　ｔｗｏ　ｂａｃｔｅｒｉａ（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ　ａｎｄ　Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）ｗｅｒｅ　ｅｖａｌｕａｔｅｄ
ｕｓｉｎｇ　ｂｒｏｔｈ　ｍｉｃｒｏ－ｄｉｌｕｔｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｓｅｖｅｎｔｅｅｎ　ｋｎｏｗｎ　ｓｅｓｑｕｉｔｅｒｐｅｎｅｓ　ｗｅｒｅ　ｉｓｏｌａｔｅｄ　ａｎｄ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ
ａｓ　ａｐｌｙｓｉｎｏｌ（１），ｌａｕｒｅｐｅｒｏｘｉｄｅ（２），ａｐｌｙｓｉｎａｌ（３），α－ｉｓｏｂｒｏｍｏｃｕｐａｒｅｎｅ（４），α－ｉｓｏｃｕｐａｒｅｎｏｌ（５），ｃｕ－
ｐａｒｅｎｅ－ｔｙｐｅ　ｅｔｈｅｒ （６），ｌａｕｒ－１１－ｅｎ－１０－ｏｌ（７），ｌａｕｒｉｎｔｅｒｏｌ（８），ｌａｕｒｉｎｔｅｒｏｌ　ａｃｅｔａｔｅ （９），ｄｅｂｒｏｍｏ－
ｌａｕｒｉｎｔｅｒｏｌ（１０），ｉｓｏｌａｕｒｉｎｔｅｒｏｌ（１１），ｉｓｏｌａｕｒｉｎｔｅｒｏｌ　ａｃｅｔａｔｅ（１２），ｊｏｈｎｓｔｏｎｏｌ（１３），ｐａｃｉｆｅｎｏｌ（１４），１０－
ｂｒｏｍｏ－α－ｃｈａｍｉｇｒｅｎｅ（１５），１０－ｂｒｏｍｏ－β－ｃｈａｍｉｇｒｅｎｅ（１６），ａｎｄ　４，１０－ｄｉｂｒｏｍｏ－３－ｃｈｌｏｒｏ－９－ｈｙｄｒｏｘｙ－α－ｃｈａｍ－
ｉｇｒｅｎｅ（１７），ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ａｌ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｉｓｏｌａｔｅｄ　ｓｅｓｑｕｉｔｅｒｐｅｎｅｓ　ｗｅｒｅ　ｅｖａｌｕａｔｅｄ　ｆｏｒ　ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ．
Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　５　ａｎｄ　７　ｗｅｒｅ　ｉｓｏｌａｔｅｄ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｆｉｒｓｔ　ｔｉｍｅ　ｆｒｏｍＬａｕｒｅｎｃｉａ　ｏｋａｍｕｒａｉ．Ｔｈｅ　ｆｕｌ　１　Ｈ
ａｎｄ　１３Ｃ　ＮＭＲ　ｄａｔａ　ｗｅｒｅ　ｕｎａｍｂｉｇｕｏｕｓｌｙ　ａｓｓｉｇｎｅｄ　ｂｙ　１Ｄａｎｄ　２ＤＮＭＲ（１　Ｈ１　Ｈ　ＣＯＳＹ，ＨＭＱＣ，ＨＭＢＣ，
ａｎｄ　ＲＯＥＳＹ）ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ．Ｉｎｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ａｎｔｉｆｕｎｇａｌ　ｂｉｏａｓｓａｙｓ，ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　５　ａｎｄ１３　ｅｘｈｉｂｉｔｅｄ　ｐｏｔｅｎｔ　ｉｎｈｉｂ－
ｉｔｏｒｙ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ａｇａｉｎｓｔ　ｔｈｅ　ｆｕｎｇｕｓ　Ｃａｎｄｉｄａ　ｇｌａｂｒａｔａ　ｗｉｔｈ　ＭＩＣ８０ｖａｌｕｅｓ　ｏｆ　１ａｎｄ　４μｇ／ｍＬ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，
ｗｈｅｎ　ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｃｏｎｔｒｏｌｓ，ａｍｐｈｏｔｅｒｉｃｉｎ　Ｂ（ＭＩＣ８０＝２μｇ／ｍＬ）ａｎｄ　ｆｌｕｃｏｎａｚｏｌｅ （ＭＩＣ８０
＝１μｇ／ｍＬ），ｗｈｉｌｅ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　２，８，ａｎｄ　９　ｓｈｏｗｅｄ　ｍｏｄｅｒａｔｅ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ａｇａｉｎｓｔ　ｔｈｅ　ｆｕｎｇｕｓ
Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ　ｎｅｏｆｏｒｍａｎｓ．Ｉｎ　ａｄｄｉｔｉｏｎ，ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　２，８－１０，１５，ａｎｄ　１７　ｄｉｓｐｌａｙｅｄ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｌｅｖｅｌｓ　ｏｆ　ａｎ－
ｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ａｇａｉｎｓｔ　ｔｈｅ　ｂａｃｔｅｒｉｕｍＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ．Ａｍｏｎｇ　ｔｈｅｍ，ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　８ａｎｄ　９ｅｘ－
ｈｉｂｉｔｅｄ　ｐｏｔｅｎｔ　ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｗｉｔｈ　ＭＩＣ８０ｖａｌｕｅｓ　ｏｆ　２．３ａｎｄ　１０．５μｇ／ｍＬ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｌａｕｒｅｎｃｉａ　ｏｋａｍｕｒａｉ；ｃｈｅｍｉｃａｌ　ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ；ｓｅｓｑｕｉｔｅｒｐｅｎｅｓ；ａｎｔｉｆｕｎｇａｌ　ａｃｔｉｖｉｔｙ；ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉ－
ａｌ　ａｃｔｉｖｉｔｙ
　　顶藻属（Ｌａｕｒｅｎｃｉａ）海藻在分类学上隶属红藻
门（Ｒｈｏｄｏｐｈｙｔａ）、红藻纲（Ｒｈｏｄｏｐｈｙｃｅａｅ）、仙菜目
（Ｃｅｒａｍｉａｌｅｓ）、松节藻科（Ｒｈｏｄｏｍｅｌａｃｅａｅ），主要分
布于热带、亚热带以及温带海域的低潮线附近，全
球约有１３０余种，其中中国海域已查明的有３１
种［１］。凹顶藻富含结构类型多样的次级代谢产
物，迄今为止，已从８０余种该属海藻中发现了
１　１００多个小分子化合物［２］。这些化学物质的结构
类型主要包括倍半萜、二萜、三萜、脂类和Ｃ１５烯炔
类等，其中倍半萜类化合物含量最为丰富、结构类
型最为多样，按其骨架可分为马兜铃烷 （ａｒｉｓｔｏ－
ｌａｎｅ）、香橙烷 （ａｒｏｍａｄｅｎｄｒａｎｅ）、红没药烷 （ｂｉｓ－
ａｂｏｌａｎｅ）、巴西烷 （ｂｒａｓｉｌｅｎａｎｅ）、杜松烷 （ｃａｄｉ－
ｎａｎｅ）、恰 米 烷 （ｃｈａｍｉｇｒａｎｅ）、花 侧 伯 烷 （ｃｕ－
ｐａｒａｎｅ）、月桂烷 （ｌａｕｒａｎｅ）、桉叶烷 （ｅｕｄｅｓｍａｎｅ）、
吉马烷 （ｇｅｒｍａｃｒａｎｅ）、愈创木烷 （ｇｕａｉａｎｅ）、蛇麻
烷 （ｈｕｍｕｌａｎｅ）、橄榄烷 （ｍａａｌｉａｎｅ）、法泥烷 （ｆａｒ－
ｎｅｓａｎｅ）、石竹烷 （ｃａｒｙｏｐｈｙｌａｎｅ）、ｇｕｉｍａｒａｎｅ、ｐｅｒ－
ｆｏｒａｎｅ、ｐｏｉｔａｎｅ、ｏｐｐｏｓｉｔａｎｅ、ｃａｌｅｎｚａｎｅ、ｐａｎｎｏｓａｎｅ、
ｒｈｏｄｏｌａｕｒａｎｅ、ｐｅｒｆｏｒａｔａｎｅ、ｃｙｃｌｏｃｏｃａｎｅ、３，６－ｃｙｃｌｏ－
ｐｒｅｃａｐｎｅｌａｎｅ等２５种类型［３］。值得关注的是，由
于海洋中卤素离子含量高，凹顶藻中的倍半萜类
分子结构中常有溴原子、氯原子甚至碘原子取代。
这些倍半萜类成分不但结构新颖，而且许多化合
物还显示了抗肿瘤、抗真菌、抗细菌、抗病毒、杀
虫、降血糖以及抑制各种生物酶等多方面的生物
活性［４，５］。因此，凹顶藻是海洋生物中具有显著生
物活性化合物的重要来源之一。
冈村凹顶藻（Ｌ．ｏｋａｍｕｒａｉ）广泛分布于中国
海南、浙江、广东、香港等沿海海域，是中国海域最
为常见的凹顶藻属海藻。该藻由于富含卤代的花
侧伯烷型和月桂烷型倍半萜而受到海洋天然产物
化学家及药理学家的广泛关注。为了开发中国海
洋生物资源，从中寻找具有生物活性或药用前景
１４　 中　国　海　洋　药　物 ３４卷
的海洋天然产物，作者对采自中国浙江南麂岛海
域的冈村凹顶藻的化学成分进行了系统研究。经
反复硅胶和 Ｓｅｐｈａｄｅｘ　ＬＨ－２０凝胶柱层析，从其
９５％乙醇提取物的乙醚萃取部位中分离得到１７
个倍半萜类化合物，经波谱数据与文献对照，已知
化合物的结构分别鉴定为海兔阿普里醇 （１）［６］、劳
藻过氧素 （２）［７］、海兔阿普里醛 （３）［８］、α－异溴花
侧伯烯 （４）［９］、α－异花侧伯烯醇 （５）［１０］、花侧伯烯
醚 （６）［１１］、月桂烷－１１－烯－１０－醇 （７）［１２］、劳藻酚
（８）［１３］、劳藻酚乙酰化物 （９）［１４］、去溴劳藻酚
（１０）［１４］、异劳藻酚 （１１）［１３］、异劳藻酚乙酰化物
（１２）［１３］、约翰斯顿醇 （１３）［１５］、帕西菲醇 （１４）［１６］、
１０－溴－α－花柏烯 （１５）［１７］、１０－溴－β－花柏烯 （１６）
［１８］
和９－羟基－３－氯－４，１０－二溴－α－花柏烯 （１７）［１９］（见图
１）。化合物５和７为首次从冈村凹顶藻中分离得
到。应用 １Ｄ 和 ２Ｄ ＮＭＲ（１　Ｈ –１　Ｈ　ＣＯＳＹ、
ＨＭＱＣ、ＨＭＢＣ和ＲＯＥＳＹ）波谱技术首次对化合
物６的１　Ｈ和１３Ｃ　ＮＭＲ数据进行了全归属；在体外
抗真菌活性筛选中，所有测试化合物对光滑假丝
酵母菌（Ｃａｎｄｉｄａ　ｇｌａｂｒａｔａ）均显示一定的抑制作
用，其中化合物５和１３显示了明显的抗真菌活
性，其 ＭＩＣ８０值分别为１和４μｇ／ｍＬ，与两性霉素
Ｂ（２μｇ／ｍＬ）和氟康唑（１μｇ／ｍＬ）相当；化合物２、
８和９对新生隐球菌（Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ　ｎｅｏｆｏｒｍａｎｓ）
均具有一定的抑制作用，其 ＭＩＣ８０值分别为６４、８
和６４μｇ／ｍＬ，而化合物８对红色毛癣菌（Ｔｒｉｃｈｏ－
ｐｈｙｔｏｎ　ｒｕｂｒｕｍ）显示了中等强度的抑制活性，其
ＭＩＣ８０值为１６μｇ／ｍＬ。另外，在体外抗细菌活性
筛选中，化合物２、８～１０、１５和１７对金黄色葡萄
球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ）均显示了不同程度
的抑制作用，其中化合物８和９具有良好的杀菌
活性，其 ＭＩＣ８０值分别为２．３和１０．５μｇ／ｍＬ。
图１　化合物１～１７的结构式
Ｆｉｇ．１　Ｔｈｅ　ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ　ｏｆ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　１～１７
１　实验部分
１．１　仪器试剂
核磁共振由Ｂｒｕｋｅｒ　ＤＲＸ－４００ＭＨｚ型核磁共
振仪测定 ［１　Ｈ　ＮＭＲ位移值以氘代溶剂中残存的
ＣＨＣｌ３（δ７．２６）为内标；１３Ｃ　ＮＭＲ位移值以ＣＤＣｌ３
（δ７７．０）为内标］。质谱用Ｆｉｎｎｉｇａｎ－ＭＡＴ－９５型
质谱仪（测定 ＥＩ－ＭＳ）和 Ｑ－ＴＯＦ　Ｍｉｃｒｏ　ＬＣ－ＭＳ－
ＭＳ质谱仪（测定ＥＳＩ－ＭＳ）测定。Ｓｅｐｈａｄｅｘ　ＬＨ－
２０凝胶由 Ａｍｅｒｓｈａｍ　Ｐｈａｒｍａｃｉａ　Ｂｉｏｔｅｃｈ生产。
柱层析硅胶由青岛海洋化工分厂生产。ＴＬＣ预制
板 （Ｆ２５４）由烟台江友硅胶开发有限公司提供。各
种试剂均为分析纯。
６期 汤宣亮，等：冈村凹顶藻的倍半萜类化学成分及抗菌活性研究 １５　
１．２　生物材料
实验样品于２０１０年６月采自中国浙江南麂
岛海域水下０．５～１ｍ处，－２０℃冷冻储藏。种属
由南麂列岛国家海洋自然保护区研究所陈万东研
究员鉴定为冈村凹顶藻（Ｌａｕｒｅｎｃｉａ　ｏｋａｍｕｒａｉ）。
样品标本 （Ｎｏ．ＭＰ０１－０４）保存在南昌大学药学
院天然药物化学实验室。
１．３　提取与分离
将冷冻的海藻样品室温下解冻（干质量为
１７０ｇ），放于渗漉桶中用９５％乙醇室温浸泡提取３
次，每次７２ｈ，提取液合并后减压浓缩得粗浸膏
（２３ｇ）。粗浸膏混悬于蒸馏水中，用等体积的乙醚
萃取３次，合并萃取液减压浓缩得到油状的乙醚
浸膏１４ｇ。乙醚浸膏经硅胶（２００～３００目）柱层析，
以石油醚／二氯甲烷梯度洗脱（丙酮０～９０％），合
并后得６个组分 （Ｆｒ．Ｉ～ＶＩ）。将其中的ＩＩ、ＩＩＩ和
ＶＩ共３个组分分别进一步经反复的硅胶（４００～
６００目，石油醚／丙酮）和 Ｓｅｐｈａｄｅｘ　ＬＨ－２０凝胶
［石油醚／二氯甲烷／甲醇 （２∶１∶１）］柱层析，得
到化合物１（９．０ｍｇ），２（８．１ｍｇ），３（０．９ｍｇ），
４（２６．２ｍｇ），５（４．６ｍｇ），６（７．８ｍｇ），７（５．７ｍｇ），
ＳＴＨＺ〗８（１．６ｇ），９（２．１ｍｇ），１０（３．０ｍｇ），１１
（１．７ｍｇ），１２（２．７ｍｇ），１３（４．０ｍｇ），１４（０．８ｍｇ），
１５（２．２ｍｇ），１６（５．８ｍｇ）和１７（１２．０ｍｇ）。
２　结构鉴定
化合物１：无色针状晶体。由ＥＩ－ＭＳ谱中峰
强度为１∶１的同位素分子离子峰 ｍ／ｚ３１２／３１０
［Ｍ］＋提示分子中含有１个溴原子，并结合１　Ｈ 和
１３Ｃ　ＮＭＲ谱数据确定其分子式为Ｃ１５Ｈ１９ＢｒＯ２。其
１　Ｈ　ＮＭＲ谱显示有２个单峰芳香质子信号δ７．１６
（１Ｈ，ｓ，Ｈ－１１）和６．６７（１Ｈ，ｓ，Ｈ－８），提示分子
中含有１个１，２，４，５－四取代苯环；此外，１　Ｈ　ＮＭＲ
谱中还显示２个 ＡＢ型亚甲基质子信号δ３．８６
（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ，Ｈ－１４ａ）和３．７１（１Ｈ，ｄ，
Ｊ＝１２．０Ｈｚ，Ｈ－１４ｂ），３个甲基信号δ２．３１（３Ｈ，
ｓ，Ｈ－１２），１．４８（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１３）和１．０９（３Ｈ，ｄ，Ｊ
＝６．８Ｈｚ，Ｈ－１５）。１３Ｃ　ＮＭＲ谱显示了１５个碳信
号，包括３个甲基碳，３个次甲基碳（其中２个芳香
碳），３个亚甲基碳和６个季碳（其中４个芳香碳），
提示化合物 １ 为月桂烷型倍半萜。１　Ｈ　ＮＭＲ
（ＣＤＣｌ３，４００ ＭＨｚ）δ：７．１６ （１Ｈ，ｓ，Ｈ－１１），
６．６７（１Ｈ，ｓ，Ｈ－８），３．８６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ，
Ｈ－１４ａ），３．７１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ，Ｈ－１４ｂ），
２．３１（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１２），１．８５（２Ｈ，ｍ，Ｈ－３，５α），
１．６３（２Ｈ，ｍ，Ｈ－４α，５β），１．４８（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１３），
１．２６（１Ｈ，ｍ，Ｈ－４β），１．０９（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，
Ｈ－１５）。１３　Ｃ　ＮＭＲ （ＣＤＣｌ３，１００ＭＨｚ）δ：１５８．４
（Ｃ－７），１３７．１（Ｃ－９），１３６．３（Ｃ－６），１２６．４（Ｃ－
１１），１１４．７（Ｃ－１０），１１０．８（Ｃ－８），１００．３（Ｃ－２），
６３．９（Ｃ－１４），５４．６（Ｃ－１），４２．５（Ｃ－５），４２．４（Ｃ－
３），３１．７ （Ｃ－４），２２．９ （Ｃ－１２），２３．１ （Ｃ－１３），
１３．８（Ｃ－１５）。ＥＩ－ＭＳｍ／ｚ（％）：３１２／３１０［Ｍ］＋（３５
∶３５），２９７／２９５（２８∶２８），２７７（５６），２３９（７２），
２０８（８９），１６０ （７９），１１８ （９２），９１ （１００），７７
（９２）。以上数据经与文献［６］对照，鉴定化合物１
为海兔阿普里醇。
化合物２：无色油状物。由ＥＩ－ＭＳ谱中的同
位素分子离子峰ｍ／ｚ３２８／３２６［Ｍ］＋（１∶１）提示分
子中含有１个溴原子并知其分子式为 Ｃ１５Ｈ１９
ＢｒＯ３，表明化合物２分子中比１多１个氧原子。
其１　Ｈ 和１３　Ｃ　ＮＭＲ谱与１基本相同，所不同是，２
的Ｃ－１４亚甲基信号明显向低场位移，其中质子信
号从δ３．８６和３．７１位移到δ４．３０和４．２６，碳信
号从δ６３．９位移到δ７８．１。结合ＥＩ－ＭＳ数据，提
示化合物２与１的分子结构差异在于１的１４－ＯＨ
被过氧基取代。１　Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）δ：
７．１６（１Ｈ，ｓ，Ｈ－１１），６．６８（１Ｈ，ｓ，Ｈ－８），４．３０
（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ，Ｈ－１４ａ），４．２６（１Ｈ，ｄ，Ｊ
＝１２．０Ｈｚ，Ｈ－１４ｂ），２．３２（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１２），１．９８
（１Ｈ，ｍ，Ｈ－３），１．８７（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１２．５，６．０，
４．０Ｈｚ，Ｈ－５α），１．６９ （１Ｈ，ｍ，Ｈ－４α），１．６３
（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１２．５，１１．８，６．５ Ｈｚ，Ｈ－５β），
１．４１（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１３），１．１７（１Ｈ，ｍ，Ｈ－４β），１．１４
（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，Ｈ－１５）。１３　Ｃ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，
１００ＭＨｚ）δ：１５８．０（Ｃ－７），１３７．４（Ｃ－９），１３５．５
（Ｃ－６），１２６．４（Ｃ－１１），１１５．０（Ｃ－１０），１１１．０（Ｃ－
８），９９．７（Ｃ－２），７８．１（Ｃ－１４），５５．３（Ｃ－１），４２．７
（Ｃ－３），４２．３（Ｃ－５），３１．６（Ｃ－４），２３．２（Ｃ－１２），
２３．１（Ｃ－１３），１３．７（Ｃ－１５）。ＥＩ－ＭＳ　ｍ／ｚ：３２８／
３２６［Ｍ］＋ （２６∶２６），３１３／３１１ （３１∶３１），２９４
（４３），２７９（５２），２２４（６８），２１０（８３），１６０（８６），
１１５（９４），７７（１００），７１（８３）。以上数据与文献
［７］报道一致，鉴定化合物２为劳藻过氧素。
１６　 中　国　海　洋　药　物 ３４卷
化合物３：无色油状物。分子式为 Ｃ１５Ｈ１７
ＢｒＯ２。其１　Ｈ 和１３　Ｃ　ＮＭＲ谱与１和２基本相同，
所不同是，１和２的Ｃ－１４亚甲基信号被醛基信号
取代［δ９．７６（１Ｈ，ｓ，Ｈ－１４）和２０４．４（Ｃ－１４）］，表
明１和２的Ｃ－１４亚甲基被氧化成醛基。１　Ｈ　ＮＭＲ
（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）δ：９．７６（１Ｈ，ｓ，Ｈ－１４），７．１６
（１Ｈ，ｓ，Ｈ－１１），６．７９（１Ｈ，ｓ，Ｈ－８），２．５９（１Ｈ，
ｍ，Ｈ－３），２．３５ （３Ｈ，ｓ，Ｈ－１２），２．０１，１．８９，
１．７５，１．２６（ｅａｃｈ　１Ｈ，ｍ，Ｈ－４，５），１．２９（３Ｈ，
ｓ，Ｈ－１３），１．０２（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，Ｈ－１５）。
１３Ｃ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，１００ＭＨｚ）δ：２０４．４（Ｃ－１４），
１６０．２（Ｃ－７），１３９．５（Ｃ－９），１３５．８（Ｃ－６），１２７．９
（Ｃ－１１），１１７．１（Ｃ－１０），１１３．１（Ｃ－８），１０５．５（Ｃ－
２），６０．３（Ｃ－１），４４．５（Ｃ－５），４４．０（Ｃ－３），３３．２
（Ｃ－４），２５．６（Ｃ－１２），２４．８（Ｃ－１３），１４．６（Ｃ－１５）。
以上数据与文献［８］报道一致，鉴定化合物３为海
兔阿普里醛。
化合物４：无色油状物。ＥＩ－ＭＳ谱中显示同位
素分子离子峰ｍ／ｚ２８２／２８０［Ｍ］＋（１∶１），表明分
子中含有１个溴原子并知其分子式为Ｃ１５Ｈ２１Ｂｒ。
１　Ｈ　ＮＭＲ谱显示有４个芳香质子δ７．２７（２Ｈ，
ｄｄ，Ｊ＝８．０，０．４Ｈｚ，Ｈ－７，１１）和７．１３（２Ｈ，ｄｄ，
Ｊ＝８．０，０．４Ｈｚ，Ｈ－８，１０），提示分子中含有１，４－
二取代苯环；１个含杂原子取代的次甲基质子
δ４．４６（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，Ｈ－３）和４个甲基信
号：δ２．３４（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１２），１．２６（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１３），
１．１０（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１４）和０．６５（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１５）。结
合１３Ｃ　ＮＭＲ谱数据，可知化合物４为花侧伯烷型
倍半萜。１　Ｈ　ＮＭＲ （ＣＤＣｌ３，４００ ＭＨｚ）δ：７．２７
（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．０，０．４ Ｈｚ，Ｈ－７，１１），７．１３
（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．０，０．４ Ｈｚ，Ｈ－８，１０），４．４６
（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，Ｈ－３），２．７１（１Ｈ，ｍ，Ｈ－
４α），２．５１（１Ｈ，ｍ，Ｈ－４β），２．３４（３Ｈ，ｓ，Ｈ－
１２），２．１９（１Ｈ，ｍ，Ｈ－５α），１．６０（１Ｈ，ｓ，Ｈ－
５β），１．２６（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１３），１．１０（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１４），
０．６５ （３Ｈ，ｓ， Ｈ－１５）；１３　Ｃ　ＮＭＲ （ＣＤＣｌ３，
１００ＭＨｚ）δ：１４３．１（Ｃ－６），１３５．５（Ｃ－９），１２８．６
（２Ｃ，Ｃ－８，１０），１２６．５（２Ｃ，Ｃ－７，１１），６３．５（Ｃ－
３），４８．５（Ｃ－１），４７．８（Ｃ－２），３３．７（Ｃ－５），３１．３
（Ｃ－４），２５．４（Ｃ－１３），２２．２（Ｃ－１４），２０．８（Ｃ－１２），
２０．７（Ｃ－１５）。ＥＩ－ＭＳ　ｍ／ｚ：２８２／２８０［Ｍ］＋（１００∶
１００），２６７／２６５（８２∶８２），２２０（５３），２１０（５０），
１６０（６１），１１５（４２），７７（３２），７１（５６）。以上数
据与文献［９］报道一致，鉴定化合物４为α－异溴花
侧伯烯。
化合物５：无色油状物；由ＥＩ－ＭＳ谱中分子离
子峰ｍ／ｚ　２１８［Ｍ］＋ 可知其分子式为 Ｃ１５Ｈ２２Ｏ。
其１　Ｈ　ＮＭＲ谱与４基本相同，所不同是，化合物５
的Ｃ－３位次甲基质子信号由δ４．４６（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝
９．２Ｈｚ）位移到δ４．０６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９．６，９．２
Ｈｚ）。综合ＥＩ－ＭＳ和１　Ｈ　ＮＭＲ数据可知５和４的
结构差异在于４的Ｃ－３位溴原子被羟基取代。１　Ｈ
ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）δ：７．１０（４Ｈ，ｓ，Ｈ－７，
８，１０，１１），４．０６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９．６，９．２Ｈｚ，Ｈ－
３），２．５３（１Ｈ，ｍ，Ｈ－４α），２．３２（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１２），
２．２７（１Ｈ，ｍ，Ｈ－４β），２．２１（１Ｈ，ｍ，Ｈ－５α），
１．９５（１Ｈ，ｓ，Ｈ－５β），１．４２（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１３），１．０９
（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１４），０．６２（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１５）。ＥＩ－ＭＳ
ｍ／ｚ：２１８［Ｍ］＋（１００），２０３（８６），２００（４６），１５４
（３２），１１２（３１），９７（４０），７７（９４），５４（７２）。以
上数据与文献［１０］报道一致，鉴定化合物５为α－
异花侧伯烯醇。
化合物６：无色油状物。由ＥＩ－ＭＳ谱可知其
分子式为Ｃ１５Ｈ２０Ｏ。其１　Ｈ　ＮＭＲ谱显示３个芳香
质子信号δ７．００（１Ｈ，ｄ， Ｊ＝７．８Ｈｚ，Ｈ－１１），
６．６５（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝７．８，１．２，０．６Ｈｚ，Ｈ－１０）和
６．５４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，Ｈ－８），表明分子中含
有１个１，２，３－三取代苯环；此外，１　Ｈ　ＮＭＲ谱还显
示有１个含杂原子取代的次甲基质子δ４．１４
（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，Ｈ－３）和４个甲基信号δ２．２７
（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１２），１．２７ （３Ｈ，ｓ，Ｈ－１３），１．０１
（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１４）和０．９４（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１４）。其１３　Ｃ
ＮＭＲ谱显示了１５个碳信号，包括４个甲基碳，４
个次甲基碳（其中３个芳香碳），２个亚甲基碳和５
个季碳（其中３个芳香碳）。通过仔细解析化合物
６的１　Ｈ－１　Ｈ　ＣＯＳＹ，ＨＭＱＣ，ＨＭＢＣ和 ＲＯＥＳＹ
谱，从而对所有１　Ｈ 和１３　Ｃ　ＮＭＲ数据进行了全归
属。１　Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，６００ＭＨｚ）δ：７．００（１Ｈ，
ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，Ｈ－１１），６．６５（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝７．８，
１．２，０．６Ｈｚ，Ｈ－１０），６．５４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，
Ｈ－８），４．１４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，Ｈ－３），２．２７
（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１２），２．０５ （１Ｈ，ｍ，Ｈ－４β），１．９５
（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１５．０，８．４，６．０Ｈｚ，Ｈ－４α），１．９１
（２Ｈ，ｏｖｅｒｌａｐｐｅｄ，Ｈ－５），１．２７（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１３），
６期 汤宣亮，等：冈村凹顶藻的倍半萜类化学成分及抗菌活性研究 １７　
１．０１ （３Ｈ，ｓ，Ｈ－１４），０．９４ （３Ｈ，ｓ，Ｈ－１４）；
１３Ｃ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，１５０ ＭＨｚ）δ：１５２．４ （Ｃ－７），
１３７．０（Ｃ－９），１３０．５（Ｃ－６），１２４．０（Ｃ－１１），１２０．７
（Ｃ－１０），１１５．９（Ｃ－８），８６．２（Ｃ－３），４５．７（Ｃ－２），
４１．０（Ｃ－１），４１．４（Ｃ－５），３０．１（Ｃ－４），２１．０（Ｃ－
１２），２０．５（Ｃ－１４），１８．２（Ｃ－１５），１４．９（Ｃ－１３）。
ＥＩ－ＭＳ　ｍ／ｚ：２１６ ［Ｍ］＋ （８４），２０１ （７５），１８６
（３２），１２３（４２），１０９（９５），９７（１００），７７（８３），
５４（４８）。以上数据与文献［１１］报道一致，鉴定化
合物６为花侧伯烯醚。
化合物７：无色针状晶体。其ＥＩ－ＭＳ谱显示
其分子式与化合物６相同，互为同分异构体。其１
Ｈ　ＮＭＲ谱显示有４个芳香质子δ７．２３（２Ｈ，ｄ，
Ｊ＝８．０Ｈｚ，Ｈ－７，１１）和７．０９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０
Ｈｚ，Ｈ－８，１０），２个末端双键质子δ５．４６（１Ｈ，ｂｒ
ｓ，Ｈ－１４ａ）和５．０１（１Ｈ，ｂｒ　ｓ，Ｈ－１４ｂ）以及３个甲
基δ２．３１（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１２），１．５０（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１３）
和１．３８（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１５）。１　Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００
ＭＨｚ）δ：７．２３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，Ｈ－７，１１），
７．０９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，Ｈ－８，１０），５．４６（１Ｈ，
ｂｒ　ｓ，Ｈ－１４ａ），５．０１（１Ｈ，ｂｒ　ｓ，Ｈ－１４ｂ），２．３１
（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１２），２．０７（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１２．４，６．８，
６．４Ｈｚ，Ｈ－５α），１．９８（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１２．４，７．２，
６．４Ｈｚ，Ｈ－５β），１．８０（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１２．４，６．８，
６．４Ｈｚ，Ｈ－４β），１．６６（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１２．４，７．２，
６．４ Ｈｚ，Ｈ－４α），１．５０ （３Ｈ，ｓ，Ｈ－１３），１．３８
（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１５）。１３Ｃ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，１００ＭＨｚ）δ：
１６７．４（Ｃ－２），１４６．７（Ｃ－６），１３５．６（Ｃ－９），１２９．４
（２Ｃ，Ｃ－８，１０），１２７．０（２Ｃ，Ｃ－７，１１），１０８．２（Ｃ－
１４），７８．９（Ｃ－３），５０．８（Ｃ－１），３９．９（Ｃ－５），３９．８
（Ｃ－４），３０．７（Ｃ－１３），２９．０（Ｃ－１５），２０．８（Ｃ－１２）。
ＥＩ－ＭＳ　ｍ／ｚ：２１６ ［Ｍ］＋ （１００），２０１ （８１），１８６
（２４），１２３（５３），１０９（８６），９７（９８），７７（８６），５４
（４０）。以上数据与文献［１２］报道一致，鉴定化合
物７为月桂烷－１１－烯－１０－醇。
化合物８：无色油状物。分子式为 Ｃ１５Ｈ１９
ＢｒＯ。其１　Ｈ　ＮＭＲ谱中除了显示特征的芳香质子
和甲基信号以外，还显示了２个位于极高场的亚
甲基质子信号δ０．５７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９．０，４．８Ｈｚ，
Ｈ－１５ａ）和０．５４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．８，４．８Ｈｚ，Ｈ－
１５ｂ），提示分子中还有１个环丙烷结构片段。
１　Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，６００ＭＨｚ）δ：７．６１（１Ｈ，ｓ，Ｈ－
１１），６．６１（１Ｈ，ｓ，Ｈ－８），５．３４（１Ｈ，ｂｒ　ｓ，７－
ＯＨ），２．２９（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１２），２．０９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝
１３．２，８．４Ｈｚ，Ｈ－５α），１．９４（１Ｈ，ｍ，Ｈ－４α），
１．６４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１３．２，７．８Ｈｚ，Ｈ－５β），１．４０
（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１３），１．３１ （３Ｈ，ｓ，Ｈ－１４），１．２９
（１Ｈ，ｍ，Ｈ－４β），１．１４ （１Ｈ，ｍ，Ｈ－３），０．５７
（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９．０，４．８Ｈｚ，Ｈ－１５ａ），０．５４（１Ｈ，
ｄｄ，Ｊ＝７．８，４．８Ｈｚ，Ｈ－１５ｂ）；１３Ｃ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，
１５０ＭＨｚ）δ：１５３．３（Ｃ－７），１３６．０（Ｃ－９），１３４．１
（Ｃ－６），１３２．４（Ｃ－１１），１１８．９（Ｃ－８），１１５．０（Ｃ－
１０），４８．８（Ｃ－１），３６．１（Ｃ－５），２９．７（Ｃ－２），２５．３
（Ｃ－４），２４．５（Ｃ－３），２３．６（Ｃ－１２），２２．２（Ｃ－１３），
１８．６（Ｃ－１４），１６．３（Ｃ－１５）。以上数据与文献［１３］
报道一致，鉴定化合物８为劳藻酚。
化合物９：无色油状物。分子式为 Ｃ１７Ｈ２１
ＢｒＯ２。通过仔细比较化合物８和９的１　Ｈ　ＮＭＲ
谱，可以发现化合物９的１　Ｈ　ＮＭＲ谱中无酚羟基
质子信号，而出现了额外的１个甲基信号δ２．３０
（３Ｈ，ｓ，７－ＯＡｃ），清楚地提示化合物９为８的乙
酰化物。１　Ｈ　ＮＭＲ （ＣＤＣｌ３，４００ ＭＨｚ）δ：７．８１
（１Ｈ，ｓ，Ｈ－１１），６．８７（１Ｈ，ｓ，Ｈ－８），２．３４（３Ｈ，
ｓ，Ｈ－１２），２．３０（３Ｈ，ｓ，７－ＯＡｃ），１．９４（１Ｈ，ｍ，
Ｈ－４α），１．８１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１２．４，８．０Ｈｚ，Ｈ－
５α），１．６５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１２．４，７．８Ｈｚ，Ｈ－５β），
１．４１ （１Ｈ，ｍ，Ｈ－４β），１．３３ （３Ｈ，ｓ，Ｈ－１３），
１．３０（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１４），１．０９（１Ｈ，ｍ，Ｈ－３），０．５２
（２Ｈ，ｍ，Ｈ－１５）。以上波谱数据与文献［１４］报道
一致，鉴定化合物９为劳藻酚乙酰化物。
化合物１０：无色油状物。由ＥＩ－ＭＳ谱中的分
子离子峰ｍ／ｚ：２１６［Ｍ］＋可知其分子式为Ｃ１５Ｈ２０
Ｏ。其１　Ｈ　ＮＭＲ谱与化合物８极其类似，两者的
区别在于低场的芳香质子信号。化合物１０的１　Ｈ
ＮＭＲ谱中显示３个芳香质子信号δ７．３９（１Ｈ，
ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，Ｈ－１１），６．６９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．６
Ｈｚ，Ｈ－１０）和６．５７（１Ｈ，ｓ，Ｈ－８），表明其苯环的
取代方式为１，２，４－三取代。１　Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００
ＭＨｚ）δ：７．３９ （１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．６ Ｈｚ，Ｈ－１１），
６．６９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，Ｈ－１０），６．５７（１Ｈ，ｓ，
Ｈ－８），５．０５（１Ｈ，ｂｒ　ｓ，７－ＯＨ），２．２７（３Ｈ，ｓ，
Ｈ－１２），２．１１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１２．８，８．０Ｈｚ，Ｈ－
５α），１．９５（１Ｈ，ｍ，Ｈ－４α），１．６５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝
１２．８，７．６Ｈｚ，Ｈ－５β），１．４２ （３Ｈ，ｓ，Ｈ－１３），
１８　 中　国　海　洋　药　物 ３４卷
１．３２（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１４），１．３０（１Ｈ，ｍ，Ｈ－４β），１．１２
（１Ｈ，ｍ，Ｈ－３），０．５８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝４．４，４．０
Ｈｚ，Ｈ－１５ａ），０．５１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．６，４．４Ｈｚ，
Ｈ－１５ｂ）。１３　Ｃ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，１００ＭＨｚ）δ：１５４．１
（Ｃ－７），１３６．７（Ｃ－９），１３１．４（Ｃ－６），１２８．８（Ｃ－
１１），１２０．８（Ｃ－１０），１１７．３（Ｃ－８），４８．０（Ｃ－１），
２９．７（Ｃ－２），２６．１（Ｃ－５），２５．４（Ｃ－４），２４．４（Ｃ－
３），２３．６（Ｃ－１２），２０．７（Ｃ－１３），１８．８（Ｃ－１４），
１６．３（Ｃ－１５）。ＥＩ－ＭＳ　ｍ／ｚ：２１６［Ｍ］＋（１００），１８６
（４８），１０９（９３），９７（７５），７７（９６），５４（７９）。以
上数据与文献［１４］报道一致，鉴定化合物１０为去
溴劳藻酚。
化合物１１：无色油状物。分子式为 Ｃ１５Ｈ１９
ＢｒＯ。其１　Ｈ　ＮＭＲ谱中可以观察到２个芳香质子
δ７．４５（１Ｈ，ｓ，Ｈ－１１）和６．７３（１Ｈ，ｓ，Ｈ－８），２
个末端双键质子δ５．１０（１Ｈ，ｂｒ　ｓ，Ｈ－１４ａ）和
４．９４（１Ｈ，ｂｒ　ｓ，Ｈ－１４ｂ），３个甲基信号δ２．３１
（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１２），１．４６ （３Ｈ，ｓ，Ｈ－１３）和１．２１
（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，Ｈ－１５）以及１个酚羟基活泼
氢信号 δ５．５６ （１Ｈ，ｂｒ　ｓ，７－ＯＨ）。１　Ｈ　ＮＭＲ
（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）δ：５．５６（１Ｈ，ｂｒ　ｓ，７－ＯＨ），
５．１０（１Ｈ，ｂｒ　ｓ，Ｈ－１４ａ），４．９４（１Ｈ，ｂｒ　ｓ，Ｈ－
１４ｂ），２．８５（１Ｈ，ｍ，Ｈ －３），２．３１（３Ｈ，ｓ，Ｈ－
１２），２．２０，２．０５（ｅａｃｈ　２Ｈ，ｍ，Ｈ－４，５），１．４６
（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１３），１．２１（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，Ｈ－
１５）。以上数据与文献［１３］报道一致，鉴定化合物
１１为异劳藻酚。
化合物１２：无色油状物。分子式为 Ｃ１７Ｈ２１
ＢｒＯ２。通过仔细比较化合物１２和１１的１　Ｈ　ＮＭＲ
谱，可以发现化合物１２的１　Ｈ　ＮＭＲ谱中无酚羟基
质子信号，而出现了额外的１个甲基信号δ２．２９
（３Ｈ，ｓ，７－ＯＡｃ），清楚地表明化合物１２为１１的
乙酰化物。１　Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）δ：７．５９
（１Ｈ，ｓ，Ｈ－１１），６．８９（１Ｈ，ｓ，Ｈ－８），５．０４（１Ｈ，
ｂｒ　ｓ，Ｈ－１４ａ），４．７２（１Ｈ，ｂｒ　ｓ，Ｈ－１４ｂ），２．６９
（１Ｈ，ｍ，Ｈ－３），２．３３ （３Ｈ，ｓ，Ｈ－１２），２．２９
（３Ｈ，ｓ，７－ＯＡｃ），２．１８，１．８７（ｅａｃｈ　２Ｈ，ｍ，Ｈ－
４，５），１．４５（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１３），１．１４（３Ｈ，ｄ，Ｈ－
１５）；以上数据与文献［１３］报道一致，鉴定化合物
１２为异劳藻酚乙酰化物。
化合物１３：无色针状晶体。由ＥＳＩ－ＭＳ谱中
准分子离子峰ｍ／ｚ４４３／４４５／４４７／４４９［Ｍ ＋ Ｈ］＋
（３∶７∶５∶１）提示分子中含有２个溴原子和１个
氯原子，并可推算其分子式为 Ｃ１５Ｈ２１Ｂｒ２ＣｌＯ３。
其１　Ｈ　ＮＭＲ中可以观察到４个杂原子取代的次甲
基质子信号δ４．６６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１３．６，４．４Ｈｚ，
Ｈ－５），４．２８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１３．２，２．０Ｈｚ，Ｈ－２），
４．０３（１Ｈ，ｂｒ　ｓ，Ｈ－９）和３．２０（１Ｈ，ｂｒ　ｓ，Ｈ－８）
以及４个甲基信号δ１．７４（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１５），１．４５
（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１４），１．２８（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１３）和１．１６
（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１２）。其１３　Ｃ　ＮＭＲ谱中可以观察到７
个杂原子取代的碳信δ１１３．７（Ｃ－１０），７４．９（２Ｃ，
Ｃ－５，９），６８．１（Ｃ－３），６１．４（Ｃ－７），６０．１（Ｃ－８）和
５８．２（Ｃ－２）。综合考虑ＥＳＩ－ＭＳ、１　Ｈ 和１３　Ｃ　ＮＭＲ
谱数据可知化合物 １３ 为恰 米 烷 型 倍 半 萜。
１　Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）δ：４．６６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝
１３．６，４．４Ｈｚ，Ｈ－５），４．２８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１３．２，２．０
Ｈｚ，Ｈ－２），４．０３（１Ｈ，ｂｒ　ｓ，Ｈ－９），３．２０（１Ｈ，ｂｒ
ｓ，Ｈ－８），２．５９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，９－ＯＨ），２．５６
（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１４．４，４．４Ｈｚ，Ｈ－４ｅｑ），２．２３（２Ｈ，
ｏｖｅｒｌａｐｐｅｄ，Ｈ－１ｅｑ，４ａｘ），２．１３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝
１４．４，１４．２Ｈｚ，Ｈ－１ａｘ），１．７４（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１５），
１．４５（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１４），１．２８（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１３），１．１６
（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１２）。１３Ｃ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，１００ＭＨｚ）δ：
１１３．７（Ｃ－１０），７４．９（２Ｃ，Ｃ－５，９），６８．１（Ｃ－３），
６１．４（Ｃ－７），６０．１（Ｃ－８），５８．２（Ｃ－２），５０．７（Ｃ－
６），４９．６（Ｃ－１１），４５．４（Ｃ－４），３３．９（Ｃ－１），３１．３
（Ｃ－１５），２４．８（Ｃ－１３），２１．７（Ｃ－１４），１８．４（Ｃ－１２）。
ＥＳＩ－ＭＳ　ｍ／ｚ：４４３／４４５／４４７／４４９［Ｍ ＋ Ｈ］＋。以
上数据与文献［１５］报道一致，鉴定化合物１３为约
翰斯顿醇。
化合物１４：无色针状晶体。分子式为Ｃ１５Ｈ２１
Ｂｒ２ＣｌＯ２。其１　Ｈ 和１３　Ｃ　ＮＭＲ谱数据与１３非常类
似，两者的区别在于１４的 ＮＭＲ谱中出现了１个
双键的信号 ［δＨ６．０５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，Ｈ－９）
和５．３８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，Ｈ－８）；δＣ１３４．３（Ｃ－
８）和１３２．６（Ｃ－９）］，而１３中Ｃ－８和Ｃ－９的次甲基
信号消失，清楚地表明化合物１４为１３脱水产物。
１　Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）δ：６．０５（１Ｈ，ｄ，Ｊ
＝９．６Ｈｚ，Ｈ－９），５．４３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１２．８，３．２
Ｈｚ，Ｈ－２），５．３８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，Ｈ－８），
４．６７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１２．８，５．２Ｈｚ，Ｈ－５），２．６８
（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１４．４，５．２Ｈｚ，Ｈ－４ｅｑ），２．３４（２Ｈ，
ｏｖｅｒｌａｐｐｅｄ，Ｈ－１ｅｑ，４ａｘ），２．１７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝
６期 汤宣亮，等：冈村凹顶藻的倍半萜类化学成分及抗菌活性研究 １９　
１４．０，１３．６Ｈｚ，Ｈ－１ａｘ），１．７８（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１５），
１．５１（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１４），１．２９（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１３），１．１１
（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１２）；１３Ｃ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，１００ＭＨｚ）δ：
１３４．３（Ｃ－８），１３２．６（Ｃ－９），９９．８（Ｃ－１０），７７．２
（Ｃ－７），７４．２（Ｃ－５），６９．１（Ｃ－３），５９．４（Ｃ－２），
５３．５（Ｃ－６），５２．１（Ｃ－１１），４６．２（Ｃ－４），３４．３（Ｃ－
１），３３．６（Ｃ－１５），２５．２（Ｃ－１４），２４．７（Ｃ－１３），
２３．６（Ｃ－１２）。以上数据与文献［１６］报道一致，鉴
定化合物１４为帕斯菲醇。
化合物１５：无色油状物。其ＥＩ－ＭＳ谱中显示
分子离子峰ｍ／ｚ　２８４／２８２（１∶１），提示分子中含
有１个溴原子并知其分子式为 Ｃ１５Ｈ２３Ｂｒ。１　Ｈ
ＮＭＲ谱中低场中仅显示了 ２ 个烯质子信号
δ５．４３（１Ｈ，ｂｒ　ｓ，Ｈ－２）和５．１９（１Ｈ，ｂｒ　ｓ，Ｈ－８），
提示分子中含有２个三取代的双键；此外，在该区
域还显示了１个溴原子取代的次甲基信号δ４．７５
（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．４，６．８Ｈｚ，Ｈ－１０）；在高场区域
可以观察到４个甲基信号δ１．６５（６Ｈ，ｓ，Ｈ－１４，
１５），１．１０（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１３）和０．９３（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１２）
以及一些亚甲基质子信号。１　Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００
ＭＨｚ）δ：５．４３（１Ｈ，ｂｒ　ｓ，Ｈ－２），５．１９（１Ｈ，ｂｒ
ｓ，Ｈ－８），４．７５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．４，６．８Ｈｚ，Ｈ－
１０），２．６６（１Ｈ，ｍ，Ｈ－９ａ），２．５７（１Ｈ，ｍ，Ｈ－
９ｂ），２．２６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１８．０Ｈｚ，Ｈ－１ａ），１．９５～
１．８５（３Ｈ，ｏｖｅｒｌａｐｐｅｄ，Ｈ－１ｂ，４ａ，５ａ），１．８０
（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１４．５，１２．４，６．８ Ｈｚ，Ｈ－４ｂ），
１．６２（１Ｈ，ｍ，Ｈ－５ｂ），１．６５（６Ｈ，ｓ，Ｈ－１４，１５），
１．１０（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１３），０．９３（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１２）。ＥＩ－
ＭＳ　ｍ／ｚ：２８４／２８２［Ｍ］＋（１２∶１２），２６９／２６７（３２
∶３２），１８７（２），１７２（２），１６０（４２），１４９（１００），
１１５（８），９１（３）。以上数据与文献［１７］报道一
致，鉴定化合物１５为１０－溴－α－花柏烯。
化合物１６：无色油状物。由ＥＩ－ＭＳ可知化合
物１６是１５的同分异构体。两者的１　Ｈ　ＮＭＲ谱数
据差异在于化合物１６的低场区域出现了３个烯
质子信号，其中有２个信号归属为末端双键信号δ
４．９３（１Ｈ，ｂｒ　ｓ，Ｈ－１４ａ）和４．６１（１Ｈ，ｂｒ　ｓ，Ｈ－
１４ｂ），而在高场区相对于化合物１５则少了１个烯
甲基信号。综合ＥＩ－ＭＳ和１　Ｈ　ＮＭＲ谱数据可以推
断化合物１６与１５的结构区别仅在于Δ７（８）双键位
移到 Δ７（１４）。１　Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）δ：５．２７
（１Ｈ，ｂｒ　ｓ，Ｈ－４），４．９３（１Ｈ，ｂｒ　ｓ，Ｈ－１４ａ），４．６４
（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１２．８，４．８Ｈｚ，Ｈ－１０），４．６１（１Ｈ，
ｂｒ　ｓ，Ｈ－１４ｂ），２．３６（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１８．４，１４．０，
４．８Ｈｚ，Ｈ－８ａ），２．２５～２．０１（５Ｈ，ｏｖｅｒｌａｐｐｅｄ，
Ｈ－２，５，８ｂ），１．８８～１．５９（４Ｈ，ｏｖｅｒｌａｐｐｅｄ，Ｈ－
１，９），１．５７（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１５），１．０９（３Ｈ，ｓ，Ｈ－
１３），０．９３（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１２）。ＥＩ－ＭＳ　ｍ／ｚ：２８４／２８２
［Ｍ］＋（１６∶１６），２６９／２６７（２３∶２３），１８７（９），
１７２（１４），１６０ （２０），１４９ （１００），１１５ （６），９１
（８）。以上数据与文献［１８］报道一致，鉴定化合物
１６为１０－溴－β－花柏烯。
化合物１７：无色油状物。分子式为Ｃ１５Ｈ２３Ｂｒ２
ＣｌＯ。其１　Ｈ　ＮＭＲ谱中１个烯质子信号δ５．４５
（１Ｈ，ｂｒ　ｓ　Ｈ－８）、３个杂原子取代的次甲基信号δ
４．９０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．６，６．８Ｈｚ，Ｈ－２），４．３６
（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，Ｈ－１０）和４．２８（１Ｈ，ｂｒ　ｓ，
Ｈ－９）以及恰米烷型倍半萜典型的４个甲基信号δ
２．０６（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１４），１．７０（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１５），１．２２
（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１３）和０．９８（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１２）。１　Ｈ　ＮＭＲ
（ＣＤＣｌ３，４００ ＭＨｚ）δ：５．４５（１Ｈ，ｂｒ　ｓ　Ｈ－８），
４．９０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．６，６．８Ｈｚ，Ｈ－２），４．３６
（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，Ｈ－１０），４．２８（１Ｈ，ｂｒ　ｓ，Ｈ－
９），２．３５～２．２１ （４Ｈ，ｏｖｅｒｌａｐｐｅｄ，Ｈ－１，４），
２．１０（１Ｈ，ｍ，Ｈ－５ａ），１，７４ （１Ｈ，ｍ，Ｈ－５ｂ），
２．０６（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１４），１．７０（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１５），１．２２
（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１３），０．９８（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１２）。以上数据
与文献［１９］报道一致，鉴定化合物１７为９－羟基－
４，１０－二溴－３－氯－α－花柏烯。
３　生物活性测试
抗真菌药理活性筛选［２］：实验采用美国临床
实验 室 标 准 化 协 会 （Ｃｌｉｎｉｃａｌ　ａｎｄ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ
Ｓｔａｎｄａｒｄｓ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，ＣＬＳＩ）所推荐的 Ｍ３８－Ａ 方
案，以 新 生 隐 球 菌 ［Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ　ｎｅｏｆｏｒｍａｎｓ
（３２６０９）］、光滑假丝酵母菌［Ｃａｎｄｉｄａ　ｇｌａｂｒａｔａ
（５３７）］、烟 曲 霉 菌 ［Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ　ｆｕｍｉｇａｔｕｓ
（０７５４４）］和红色毛癣菌［Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ　ｒｕｂｒｕｍ
（Ｃｍｃｃｆｔｌａ）］四株临床常见致病真菌为实验菌株，
通过微量液基稀释法对化合物１、２、５、８、９和１３
进行体外抗真菌活性测试，以目标化合物抑制所
选真菌８０％ 生长的浓度（ＭＩＣ８０）作为指标，以两
性霉素 Ｂ （Ａｍｐｈｏｔｅｒｉｃｉｎ　Ｂ）、氟康唑 （Ｆｌｕｃｏｎ－
ａｚｏｌｅ）、伏立康唑 （Ｖｏｒｉｃｏｎａｚｏｌｅ）和酮康唑（Ｋｅｔｏ－
２０　 中　国　海　洋　药　物 ３４卷
ｃｏｎａｚｏｌｅ）为阳性对照药，观察化合物对所选真菌
的抑制作用。结果见表１。结果表明所有测试化
合物对光滑假丝酵母菌（Ｃ．ｇｌａｂｒａｔａ）均显示一定
的抑制作用，其中化合物５和１３抑菌作用最为显
著，其 ＭＩＣ８０值分别为１和４μｇ／ｍＬ，与两性霉素
Ｂ（２μｇ／ｍＬ）和氟康唑（１μｇ／ｍＬ）相当；化合物２、
８和９对新生隐球菌（Ｃ．ｎｅｏｆｏｒｍａｎｓ）均具有一定
的抑制作用，其 ＭＩＣ８０值分别为６４、８和６４μｇ·
ｍＬ－１；化合物８对红色毛癣菌（Ｔ．ｒｕｂｒｕｍ）显示
了中等强度的抑制活性，其ＭＩＣ８０值为１６μｇ／ｍＬ。
此外，所有测试化合物对烟曲霉菌（Ａ．ｆｕｍｉｇａｔｕｓ）
均无抑制作用 （ＭＩＣ８０＞６４μｇ／ｍＬ）。
表１　化合物１，２，５，８，９和１３的体外抗真菌活性
Ｔａｂｌｅ　１　Ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ａｎｔｉｆｕｎｇａｌ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ｏｆ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　１，２，５，８，９，ａｎｄ　１３
测试样品及阳性对照药
Ｓａｍｐｌｅｓ　ａｎｄ　Ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｃｏｎｔｒｏｌｓ
最低抑菌浓度 ＭＩＣ８０／μｇ·ｍＬ
－１
新生隐球菌
Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ
ｎｅｏｆｏｒｍａｎｓ（３２６０９）
光滑假丝酵母菌
Ｃａｎｄｉｄａ
ｇｌａｂｒａｔａ（５３７）
烟曲霉菌
Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ
ｆｕｍｉｇａｔｕｓ（０７５４４）
红色毛癣菌
Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ
ｒｕｂｒｕｍ（Ｃｍｃｃｆｔｌａ）
化合物１　Ｃｏｍｐｏｕｎｄ　１ ＞６４　 ８ ＞６４ ＞６４
化合物２　Ｃｏｍｐｏｕｎｄ　２　 ６４　 ６４ ＞６４ ＞６４
化合物５　Ｃｏｍｐｏｕｎｄ　５ ＞６４　 １ ＞６４ ＞６４
化合物８　Ｃｏｍｐｏｕｎｄ　８　 ８　 １６ ＞６４　 １６
化合物９　Ｃｏｍｐｏｕｎｄ　９　 ６４　 ６４ ＞６４ ＞６４
化合物１３　Ｃｏｍｐｏｕｎｄ　１３ ＞６４　 ４ ＞６４ ＞６４
两性霉素Ｂ　Ａｍｐｈｏｔｅｒｉｃｉｎ　Ｂ　 １　 ２　 ２　 １
氟康唑Ｆｌｕｃｏｎａｚｏｌｅ　 １　 １　 ８ ＞６４
伏立康唑Ｖｏｒｉｃｏｎａｚｏｌｅ　 ０．０２　 ０．０３　 ０．２５　 ０．０３
酮康唑Ｋｅｔｏｃｏｎａｚｏｌｅ　 ０．１３　 ０．５　 ８　 １
　　抗细菌药理活性筛选：实验采用ＣＬＳＩ所推荐
的 Ｍ０７－Ａ９方案，以金黄色葡萄球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏ－
ｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ）和铜绿假单孢菌 （Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ
ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）２株细菌为实验菌株，通过微量液基
稀释法对所有化合物进行体外抗细菌活性测试，
以目标化合物抑制所选细菌８０％生长的浓度
（ＭＩＣ８０）作为指标，以托普霉素（ｔｏｂｒａｍｙｃｉｎ）和甲
氧苄氨嘧啶（ｔｒｉｍｅｔｈｏｐｒｉｍ）为阳性对照药，观察化
合物对所选细菌的抑制作用，测定目标化合物的
最低抑菌质量浓度（ＭＩＣ８０）值。将化合物粉末溶于
一定体积的ＤＭＳＯ中配制成质量浓度为１２．８ｇ／Ｌ
的溶液，再用 ＤＭＳＯ进行连续对倍稀释后待用。
在９６孔细胞培养板上，每排由第１～１０孔按低浓
度到高浓度的顺序依次加入１００μＬ相应的目标
化合物溶液，第１１孔中不加药物作为生长对照
孔，向生长对照孔的肉汤培养液中加入 ＤＭＳＯ
（终浓度与测定孔相同），第１２孔中不加样品和菌
液，只加培养液作为无菌对照孔。向每排第１～１１
孔中分别加入浓度为每毫升３．０×１０３　ＣＦＵ的菌
液１００μＬ，使得每一浓度梯度的化合物与菌液分
别被对倍稀释，最终得到的质量浓度为１２８～
０．２５ｍｇ／Ｌ的待测定药液，于３７℃培养２４ｈ后观
察抑菌结果，测得完全抑制细菌生长的 ＭＩＣ８０值。
结果表明化合物２、８～１０、１５和１７对金黄色葡萄
球菌（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ）均显示了不同程度的抑制作用，
其中化合物８和９具有良好的杀菌活性，其 ＭＩＣ８０
值分别为２．３和１０．５μｇ／ｍＬ，与阳性对照药托普
霉素（２μｇ／ｍＬ）和甲氧苄氨嘧啶（２μｇ／ｍＬ）强度相
当，２、１０、１５和１７则显示中等强度的杀菌活性，其
ＭＩＣ８０值分别为１６３．０，１０８．６，１４１．３和１０３．２μｇ·
ｍＬ－１。此 外，所 有 化 合 物 对 铜 绿 假 单 孢 菌
（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）均无明显的抗菌活性 （ＭＩＣ８０＞
５００μｇ／ｍＬ）。
６期 汤宣亮，等：冈村凹顶藻的倍半萜类化学成分及抗菌活性研究 ２１　
４　结果与讨论
冈村凹顶藻（Ｌ．ｏｋａｍｕｒａｉ）在中国海域分布
广泛，资源极其丰富，以富含结构新颖、类型多样
的卤代倍半萜而著称。作者对冈村凹顶藻进行了
系统的化学成分研究，从中分离得到１７个倍半萜
类化合物，分别鉴定为海兔阿普里醇（１）、劳藻过
氧素（２）、海兔阿普里醛（３）、α－异溴花侧伯烯（４）、
α－异花侧伯烯醇（５）、花侧伯烯醚（６）、月桂烷－１１－
烯－１０－醇（７）、劳藻酚（８）、劳藻酚乙酰化物（９）、去
溴劳藻酚（１０）、异劳藻酚（１１）、异劳藻酚乙酰化物
（１２）、约翰斯顿醇（１３）、帕西菲醇（１４）、１０－溴－α－花
柏烯（１５）、１０－溴－β－花柏烯（１６）、９－羟基－３－氯－４，１０－
二溴－α－花柏烯 （１７）。化合物６虽然作为凹顶藻
次级代谢产物先后被报道过三次［１１，２０－２１］，但本文
首次综合应用１Ｄ和２ＤＮＭＲ波谱技术对其１　Ｈ
和１３Ｃ　ＮＭＲ数据进行了全归属。在体外抗菌活性
筛选中，化合物１、２、５、８、９和１３对光滑假丝酵母
菌均显示一定的抑制作用，其中化合物５和１３抑
菌作用最为显著，与阳性对照药两性霉素Ｂ和氟
康唑相当；化合物２、８和９对新生隐球菌均具有
一定的抑制作用；化合物８对红色毛癣菌显示了
中等强度的抑制活性。此外，化合物２、８～１０、１５
和１７对金黄色葡萄球菌均显示了不同程度的抑
制作用，其中化合物８和９具有良好的杀菌活性，
与阳性对照药托普霉素和甲氧苄氨嘧啶强度相
当，而化合物２、１０、１５和１７则显示了中等强度的
杀菌活性。
文献查阅显示，目前国内外对本文所发现的
１７个已知的倍半萜类化合物的生物活性研究主要
集中在细胞毒、抗细菌、抗污浊、杀虫及抗黏附等
方面，其中化合物１、８～１１、１３、１４和１７对金黄色
葡萄球菌的抑菌活性已有文献报道［２２－２５］，并与本
文筛选结果基本吻合，但化合物２～７、１２、１５和１６
对金黄色葡萄球菌的抑菌活性为本文首次报道。
此外，本文还首次报道了化合物１、２、５、８、９和１３
的抗真菌活性。本文对中国冈村凹顶藻的倍半萜
类化合物进行了深入系统的研究，并对分离得到
的倍半萜类化合物进行了抗真菌和抗细菌活性筛
选。上述研究结果进一步丰富了冈村凹顶藻的化
学及生物学多样性，为阐述该海藻的药效物质基
础提供了一定的科学依据，也对研制开发新型高
效抗菌剂具有重要意义。
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ｐｌａｎｔｓ．ＸＸＶＩ．α－Ｂｒｏｍｏｃｕｐａｒｅｎｅ　ａｎｄα－ｉｓｏｂｒｏｍｏｃｕｐａｒｅｎｅ，
ｎｅｗ　ｂｒｏｍｏ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　ｆｒｏｍ　Ｌａｕｒｅｎｃｉａ　ｓｐｅｃｉｅｓ［Ｊ］．Ｔｅｔｒａ－
ｈｅｄｒｏｎ　Ｌｅｔｔ，１９７５，３５：３０５７－３０５８．
［１０］　Ｔｏｍｉｔａ　Ｂ，Ｈｉｒｏｓｅ　Ｙ，Ｎａｋａｔｓｕｋａ　Ｔ．Ｔｅｒｐｅｎｏｉｄｓ．ＸＶＩ．
Ｎｅｗ　ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ　ｏｆ　Ｂｉｏｔａ　ｏｒｉｅｎｔａｌｉｓ［Ｊ］．Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ
Ｌｅｔｔ，１９６８，７：８４３－８４８．
［１１］　Ｓｕｚｕｋｉ　Ｍ，Ｋｕｒｏｓａｗａ　Ｅ．Ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ　ｏｆ　ｍａｒｉｎｅ　ｐｌａｎｔｓ．
Ｐａｒｔ　ＸＸＶＩＩＩ．Ｎｅｗ　ａｒｏｍａｔｉｃ　ｓｅｓｑｕｉｔｅｒｐｅｎｏｉｄｓ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｒｅｄ
ａｌｇａＬａｕｒｅｎｃｉａ　ｏｋａｍｕｒａｉ　Ｙａｍａｄａ［Ｊ］．Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ　Ｌｅｔｔ，
１９７８，２８：２５０３－２５０６．
［１２］　Ｓｕｎ　Ｊ，Ｓｈｉ　Ｄ　Ｙ，Ｍａ　Ｍ，ｅｔ　ａｌ．Ｓｅｓｑｕｉｔｅｒｐｅｎｅｓ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｒｅｄ
ａｌｇａ　Ｌａｕｒｅｎｃｉａ　ｔｒｉｓｔｉｃｈａ［Ｊ］．Ｊ　Ｎａｔ　Ｐｒｏｄ，２００５，６８（６）：
９１５－９１９．
［１３］　Ｉｒｉｅ　Ｔ，Ｓｕｚｕｋｉ　Ｔ，Ｋｕｒｏｓａｗａ　Ｅ，ｅｔ　ａｌ．Ｌａｕｒｉｎｔｅｒｏｌ，ｄｅｂｒｏ－
ｍｏｌａｕｒｉｎｔｅｒｏｌ　ａｎｄ　ｉｓｏｌａｕｒｉｎｔｅｒｏｌ，ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ　ｏｆ　Ｌａｕｒｅｎｃｉａ
ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａ　Ｙａｍａｄａ［Ｊ］．Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ，１９７０，２６（１３）：
３２７１－３２７７．
［１４］　Ｉｒｉｅ　Ｔ，Ｓｕｚｕｋｉ　Ｔ，Ｋｕｒｏｓａｗａ　Ｅ，ｅｔ　ａｌ．Ｌａｕｒｉｎｔｅｒｏｌ　ａｎｄ　ｄｅ－
ｂｒｏｍｏｌａｕｒｉｎｔｅｒｏｌ，ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ　ｆｒｏｍＬａｕｒｅｎｃｉａ　ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａ
［Ｊ］．Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ　Ｌｅｔｔ，１９６６，１７：１８３７－１８４０．
［１５］　Ｓｉｍｓ　Ｊ　Ｊ，Ｆｅｎｉｃａｌ　Ｗ，Ｗｉｎｇ　Ｒ　Ｍ，ｅｔ　ａｌ．Ｍａｒｉｎｅ　ｎａｔｕｒａｌ
ｐｒｏｄｕｃｔｓ　ＩＩＩ．Ｊｏｈｎｓｔｏｎｏｌ，ａｎ　ｕｎｕｓｕａｌ　ｈａｌｏｇｅｎａｔｅｄ　ｅｐｏｘｉｄｅ
ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｒｅｄ　ａｌｇａＬａｕｒｅｎｃｉａ　Ｊｏｈｎｓｔｏｎｉｉ［Ｊ］．Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ
Ｌｅｔｔ，１９７２，３：１９５－１９８．
［１６］　Ｓｉｍｓ　Ｊ　Ｊ，Ｆｅｎｉｃａｌ　Ｗ，Ｗｉｎｇ　Ｒ　Ｍ，ｅｔ　ａｌ．Ｍａｒｉｎｅ　ｎａｔｕｒａｌ
２２　 中　国　海　洋　药　物 ３４卷
ｐｒｏｄｕｃｔｓ．Ｉ．Ｐａｃｉｆｅｎｏｌ，ａ　ｒａｒｅ　ｓｅｓｑｕｉｔｅｒｐｅｎｅ　ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ
ｂｒｏｍｉｎｅ　ａｎｄ　ｃｈｌｏｒｉｎｅ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｒｅｄ　ａｌｇａ，Ｌａｕｒｅｎｃｉａ　ｐａｃｉｆｉ－
ｃａ［Ｊ］．Ｊ　Ａｍ　Ｃｈｅｍ　Ｓｏｃ，１９７１，９３（１５）：３７７４－３７７５．
［１７］　Ｈｏｗａｒｄ　Ｂ　Ｍ，Ｆｅｎｉｃａｌ　Ｗ．１０－ｂｒｏｍｏ－α－ｃｈａｍｉｇｒｅｎｅ［Ｊ］．
Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ　Ｌｅｔｔ，１９７６，２９：２５１９－２５２０．
［１８］　Ｊｉ　Ｎ　Ｙ，Ｌｉ　Ｘ　Ｍ，Ｌｉ　Ｋ，ｅｔ　ａｌ．Ｄｉｔｅｒｐｅｎｅｓ，ｓｅｓｑｕｉｔｅｒｐｅｎｅｓ，
ａｎｄ　ａ　Ｃ１５－ａｃｅｔｏｇｅｎｉｎ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｍａｒｉｎｅ　ｒｅｄ　ａｌｇａＬａｕｒｅｎｃｉａ
ｍａｒｉａｎｅｎｓｉｓ［Ｊ］．Ｊ　Ｎａｔ　Ｐｒｏｄ，２００７，７０（１２）：１９０１－１９０５．
［１９］　Ｆｅｎｉｃａｌ，Ｗ．Ｃｈｅｍｉｃａｌ　ｖａｒｉａｔｉｏｎ　ｉｎ　ａ　ｎｅｗ　ｂｒｏｍｏｃｈａｍｉｇｒｅｎｅ
ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｒｅｄ　ｓｅａｗｅｅｄ　Ｌａｕｒｅｎｃｉａｐａｃｉｆｉｃａ［Ｊ］．
Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１９７６，１５（４）：５１１－５１２．
［２０］　Ｓｕｚｕｋｉ　Ｍ，Ｋｕｒｏｓａｗａ　Ｅ．Ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ　ｆｏｒ　ｍａｒｉｎｅ　ｐｌａｎｔｓ．
ＸＸＸＶ．Ｈａｌｏｇｅｎａｔｅｄ　ａｎｄ　ｎｏｎ－ｈａｌｏｇｅｎａｔｅｄ　ａｒｏｍａｔｉｃ　ｓｅｓ－
ｑｕｉｔｅｒｐｅｎｅｓ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｒｅｄ　ａｌｇａｅ　Ｌａｕｒｅｎｃｉａ　ｏｋａｍｕｒａｉ　Ｙａｍａ－
ｄａ［Ｊ］．Ｂｕｌｌ　Ｃｈｅｍ　Ｓｏｃ　Ｊｐｎ，１９７９，５２（１１）：３３５２－３３５４．
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ｑｕｉｔｅｒｐｅｎｅｓ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｒｅｄ　ａｌｇａｅ　Ｌａｕｒｅｎｃｉａ　ｏｂｔｕｓａ　ａｎｄ
Ｌａｕｒｅｎｃｉａ　ｍｉｃｒｏｃｌａｄｉａ［Ｊ］．Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ，２００６，６２（１）：
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ｂａｃｔｅｒｉａｌ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　ｈａｌｏｇｅｎａｔｅｄ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　ａｇａｉｎｓｔ　ａｎｔｉｂｉ－
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ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｂｒｉｔｔｌｅ　ｓｔａｒ　Ｏｐｈｉｏｐｌｏｃｕｓ　ｊａｐｏｎｉｃｕｓ［Ｊ］．Ｎａｔ　Ｐｒｏｄ
Ｓｃｉ，２００４，１０（６）：２５３－２６１．
［２４］　Ｔｓｕｋａｍｏｔｏ　Ｓ，Ｙａｍａｓｈｉｔａ　Ｙ，Ｏｈｔａ　Ｔ．Ｎｅｗ　ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ　ａｎｄ
ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　ｉｓｏｌａｔｅｄ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｓｅａ　ｈａｒｅ，Ａｐｌｙ－
ｓｉａ　ｋｕｒｏｄａｉ［Ｊ］．Ｍａｒ　Ｄｒｕｇｓ，２００５，３（２）：２２－２８．
［２５］　Ｏｃｈｉ　Ｍ．Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ　ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ　ｏｆ　ｍａｒｉｎｅ　ａｌｇａｅ［Ｊ］．
Ｓｕｉｓａｎｇａｋｕ　Ｓｈｉｒｉｚｕ，１９８３，４５：１０１－１１９．