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三十烷醇对海萝孢子萌发、幼苗及藻体生长的影响



全 文 :第 32卷 第 1期
2011年 1月           
华南农业大学学报
JournalofSouthChinaAgriculturalUniversity           
Vol.32, No.1
Jan.2011
 收稿日期:2010-01-21
 作者简介:陈素文(1968—), 女 ,研究员 , E-mail:chensuwen407@163.com
 基金项目:广东省科技计划项目(2006B20201061);中国水产科学研究院南海水产研究所中央级公益性科研院所专项资金
项目(2007TS01);广东省海洋渔业科技推广专项(A200899E01)
三十烷醇对海萝孢子萌发 、幼苗及藻体生长的影响
陈素文1 , 吴进锋 1 , 陈利雄 1 , 陈师亮2 , 肖瑞红 2
(1中国水产科学研究院 南海水产研究所 , 广东 广州 510300;2华南农业大学 动物科学学院 , 广东 广州 510642)
摘要:研究了三十烷醇对海萝孢子萌发 、幼苗及藻体生长的影响.第 1个试验 , 用 0.50、1.00、2.00 mg· L-1的三十
烷醇分别对附着后 3 d的海萝孢子进行 14和 24 h的浸泡 ,每隔 10d处理 1次 , 共处理 3次 , 试验进行 2个月.第 2
个试验 , 用 0.25、0.50、 1.00、2.00mg· L-1的三十烷醇浸泡平均长度为 1.5mm海萝幼苗 , 分别处理 1次和 4次(每
隔 15d处理 1次),每次处理时间 24h,试验进行 2个月.第 3个试验 , 用 0.50、1.00、2.00 mg· L-1的三十烷醇分别
对海萝藻体进行 18和 24 h的浸泡 , 只处理 1次 ,试验进行 1个月.试验结果表明:三十烷醇对藻体增质量及幼苗长
度生长影响不明显 , 对幼苗的分叉以及孢子萌发形成的盘状体的生长 、萌发 、存活影响显著.三十烷醇质量浓度为
0.50和 1.00mg· L-1时 ,对海萝盘状体的生长及盘状体萌发出直立体都有促进作用 ,其中 , 0.50 mg· L-1的三十烷
醇 , 处理 14 h效果最好;2.00 mg· L-1三十烷醇处理 24 h时 ,其盘状体的生长和存活比对照组明显差.0.25 ~ 2.00
mg· L-1三十烷醇对幼苗的分叉都具有促进作用 , 处理 4次的效果比处理 1次的好;而处理 1次的以质量浓度为
1.00 mg· L-1的效果最好 , 且与处理 4次的相似.
关键词:三十烷醇;萌发;生长;盘状体;幼苗;藻体;海萝
中图分类号:S968.433      文献标识码:A     文章编号:1001-411X(2011)01-0078-05
TheEfectofTriacontanolontheGerminationofSporeandtheGrowthof
GermlingandFrondofGloiopeltisfurcata
CHENSu-wen1 , WUJin-feng1 , CHENLi-xiong1 , CHENShi-liang2 , XIAORui-hong2
(1 SouthChinaSeaFisheriesResearchInstitute, ChineseAcademyofFisherySciences, Guangzhou510300, China;
2ColegeofAnimalSciences, SouthChinaAgriculturalUniversity, Guangzhou510642, China)
Abstract:Threeexperimentswereconductedtostudytheinfluenceoftriacontanolonthegerminationof
spore, andgrowthofgermlingandfrondinGloiopeltisfurcata.Inexperiment1, theatachmentsporesafter
incubationfor3 dfolowinginoculationweredippedintriacontanolatconcentrationof0.50, 1.00,
2.00mg·L-1 , andfor14or24h, respectively.Thedippingwasrepeatedat10-dintervalsfor3times.In
experiment2, 1.5-mmlonggermlingwasdippedintriacontanolatconcentrationsof0.25, 0.50, 1.00and
2.00mg·L-1 , respectivelyfor24 h.Thetreatmentswerecarriedoutforonceorrepeated4timesat15-
dintervals, respectively.Inexperiment3, thefrondwasdippedintriacontanolatconcentrationsof0.50,
1.00and2.00 mg· Loncefor18 or24 h, respectively.Theresultsrevealedthattriacontanolhadno
efectonthemassgainandfrondgrowth, butsignificantlyafectedsporegerminationandgermlingout-
shootramification.Atconcentrationsof0.50or1.00mg·L-1 , triacontanolpromotedthesporegermina-
tingdiscgrowthandthegerminatingburgeons, withthebestefectsachievedbydippinginconcentration
of1.00 mg·L-1 for14h.Treatmentwithtriacontanolatconcentrationof2.00mg· L-1 andfor24him-
paireddiscsgrowthandsurvival.Concentrationsof0.25-2.00mg·L-1 alenhancedthegermlingout-
shootramification, withbeterresultsachievedafter4-timerepeatedtreatmentthanoncesingledipping.
Keywords:triacontanol;germination;growth;disc;germling;frond;Gloiopeltisfurcata
  海萝 Gloiopeltisfurcata隶属于红藻门红藻纲隐
丝藻目内枝藻科海萝属 ,广泛分布在我国沿海地区 ,
山东一带俗称 “牛毛 ” ,广东沿海俗称 “赤菜 ” 、“红
菜 ”、“胶菜” [ 1] .海萝属藻类直接食用 、药用和作为浆
料的历史悠久[ 1] .从 20世纪 90年代开始 ,海萝属藻
类被广泛应用于食品 、药品和纺织工业 [ 1-2] ,而对其
抗肿瘤功能的研究[ 3-4] ,则进一步提高其经济价值和
市场需求.到目前为止 ,海萝属藻类仍然停留在天然
开采和粗放式增殖状态 ,由于其价格高(干品价格高
达 400元 /kg),群众自发采摘的热情高 ,以致于采摘
过度 ,资源遭到破坏 ,对其进行人工育苗及增养殖的
研究成为必然.在海萝属藻类人工育苗中 ,孢子从附
着到长出直立体需要较长时间 ,在这过程往往由于
其他杂藻或霉菌的侵害等原因造成孢子萌发成的盘
状体没法萌发出直立体.因而 ,研究如何促进盘状体
生长及萌发就成为海萝属藻类人工育苗的一个关
键.另一方面 ,研究如何缩短育苗及养殖时间也就是
如何提高幼苗及藻体的生长也成为海萝属藻类育苗
及养殖的关键.三十烷醇(TA)是一种植物生长调节
剂 ,可促进植物细胞的分裂和生长 ,促进植物对矿物
质的吸收 ,增强其呼吸强度和光合作用 [ 5] .目前三十
烷醇已试验用于水稻 、黄瓜等多种农作物 ,效果显
著 [ 6-7] ;用于 3种单胞藻 、螺旋藻 、扁藻 、紫菜 、海带 、
小石花菜等的试验也都表明其明显的促生长作
用 [ 8-16] ,对绳江蓠的生长及孢子萌发也有显著效
果 [ 17] .本试验采用不同质量浓度三十烷醇分别对海
萝附着孢子 、幼苗 、藻体进行处理 ,试验其促生长发
育的效果 ,有望为海萝的人工育苗及养殖提供参考.
1 材料与方法
1.1 试验条件
采用人工智能气候培养箱进行控温及控制光
照 ,控制温度为 16 ℃、光照为 7 000 lx,光周期为
10 h(光)∶14h(暗).试验于 2007年 2月 — 2009年 6
月期间进行 ,根据海萝不同的生长发育阶段 ,分期进
行试验 ,每个试验重复 1次.
1.2 材料
三十烷醇系由厦门大学化工厂生产的三十烷醇
乳片 ,其纯度为每片 0.25 g,用开水(90 ℃以上)配
成质量浓度为 500 mg· L-1的母液 ,放凉用于试验.
培养用水为盐度 32‰的海水黑暗沉淀 5 d后经 400
目筛绢过滤.
海萝成熟种藻取自于深圳杨梅坑 ,种藻释放出
孢子后让其均匀附着于载玻片上 ,附苗后第 4 d,取
附着孢子数差异性不显著 、孢子平均附着密度
6 mm-2的载玻片 ,用于三十烷醇对孢子的影响试验.
从实验室所培育的幼苗中 , 选择长度为 1.4 ~
1.6mm,且不分枝的幼苗作为试验用的幼苗.供试验
用的海萝藻体取自广东汕头南澳县坪屿岛 ,藻体高
度 1.1 ~ 2.4cm,平均藻体高度为 1.55 cm.
1.3 方法
1.3.1 三十烷醇对孢子萌发的影响试验 每个
500mL烧杯底部放 1片附有孢子的载玻片并加入
300mL海水.用不同质量浓度三十烷醇(0.50、1.00、
2.00mg· L-1)分别进行不同时间(14、24 h)处理.
每一种处理设 3个平行组 ,每隔 10d处理 1次 ,共处
理 3次 ,每次处理后即换新鲜海水.日常管理是每周
换水 3次 ,在试验进行半个月后每次换水时添加营养
盐 ,其质量浓度为硝酸钠 10 mg· L-1 、磷酸氢二钾
1 mg·L-1.试验进行 1个月和 2个月时用显微镜测
量盘状体的大小 ,每片载玻片随机测量 10个盘状
体 ,对于盘状体形状不是圆形的测最长和最小边 ,取
平均值;试验进行 2个月时用显微镜(放大倍数 10×
10)随机测量每片载玻片 20个视野中的盘状体数以
及萌发出直立体的盘状体数.盘状体的萌发率以每
个视野中萌发出直立体的盘状体数占每个视野中总
盘状体数来计算.
1.3.2 三十烷醇对幼苗生长的影响试验  用
100mL的锥形瓶装 100mL海水 ,每瓶装 10棵幼苗.
用不同质量浓度三十烷醇 (0.25、0.50、1.00、 2.00
mg·L-1)分别进行不同次数的处理(1、4次).处理
4次的每隔 15d处理 1次 ,每次处理时间都为 24 h,
每种处理分别设置 3个平行组.每周换水 2次 ,换水
时添加营养盐(硝酸钠 10 mg· L-1 ,磷酸二氢钾 1
mg· L-1).试验进行了 8周 ,结束时测量全部幼苗的
长度及分枝数.分枝率为每瓶幼苗总的分枝数与幼
苗数的百分比率.
1.3.3 三十烷醇对藻体生长的影响试验  海萝藻
体清洗干净后用滤纸吸去海萝藻体表面水分 ,再用
干净纱布充分吸干后称其质量(所用电子天平分辨
率为 1mg),每个 500mL锥形瓶放入(0.50±0.01)g
藻体 ,加入 200 mL海水后 ,用不同质量浓度的三十
烷醇(0.50、1.00、2.00mg· L-1)分别进行不同时间
的处理(18、24 h),只处理 1次 ,处理后的藻体用海
水冲洗干净后 ,加入 400 mL添加营养盐的海水(硝
酸钠 10 mg· L-1 、磷酸二氢钾 1 mg· L-1)进行培
养.每周换水 2次 ,换水时添加营养盐.试验进行 1
个月 ,结束时用滤纸吸去海萝藻体表面水分 ,再用干
79 第 1期      陈素文等:三十烷醇对海萝孢子萌发 、幼苗及藻体生长的影响    
净纱布充分吸干后称其质量.
1.4 数据分析
采用统计软件 SPSS12进行方差分析.不同数据
之间的差异性比较采用单因子方差分析的 LSD进行
多重比较.
2 结果
2.1 三十烷醇对海萝盘状体的影响
用于试验的海萝附着孢子处于萌发成为盘状体
阶段 ,在用三十烷醇处理第 1次后 6 d,包括空白对
照组在内的所有组 ,附着孢子基本上已萌发为盘状
体.1个月和 2个月时 ,相同质量浓度 ,不同处理时间
的组别之间 ,盘状体的大小差异不显著(P>0.05).
用 0.50和 1.00 mg· L-1三十烷醇处理的 4个组之
间 ,盘状体大小差异不显著(P>0.05),这 4个组的
盘状体在 1个月时 ,平均大小为 (210.64±6.03)~
(228.43±7.56)μm,而空白对照组的盘状体大小为
(195.32±5.15)μm.方差分析表明这 4个组与空白
对照组的盘状体大小在 1个月时差异显著 (P<
0.05),而 2个月时则差异不显著(P>0.05).用 2.00
mg·L-1三十烷醇处理 14h的组与对照组的盘状体
大小在 1个月时没有显著差异(P>0.05),而 2个月
时 ,这一组与空白对照组有显著性差异(P<0.05).
用 2.00mg· L-1三十烷醇处理 24h的组 , 1个月与 2
个月时盘状体大小明显比对照组的小 (P<0.05)
(图 1).
凡柱上标有一个相同字母者 ,示组别之间差异不显著(P>0.05, LSD法).
图 1 1个月(A)和 2个月(B)时不同处理组盘状体的大小
Fig.1 Thediscsizeofdifferentgroupsatonemonth(A)andtwomonths(B)
  试验进行 40d左右 ,有些大小为 250μm以上的
盘状体开始萌发出直立体 ,有些则继续扩大面积生
长 ,试验进行 2个月时 ,用 0.50和 1.00 mg· L-1三
十烷醇分别处理 14、24h的 4个组 ,萌发出直立体的
百分率明显比对照组的高(P<0.05),其中 ,用 0.50
mg·L-1三十烷醇处理 14 h的组 ,萌发出直立体的
百分率最高 ,达到 59.9%,其他 3组之间则没有显著
性差异.用 2.00 mg·L-1三十烷醇分别处理 14和 24
h的组与对照组之间 ,萌发出直立体的百分率差异不
显著(P>0.05)(图 2A).
试验进行 2个月时 ,用 2.00mg·L-1三十烷醇处理
24h的组 ,存活盘状体的密度明显比对照组及其他处理
组的小(P<0.05),而对照组与其他处理组之间 ,存活
盘状体的密度差异性不显著(P>0.05)(图 2B).
凡柱上标有一个相同字母者 ,示组别之间差异性不显著(P>0.05, LSD法).
图 2 2个月时不同处理组盘状体的萌发率(A)和存活密度(B)
Fig.2 Thegerminationrate(A)andsurvivaldensity(B)ofdiscofdifferentgroupsattwomonths
80    华 南 农 业 大 学 学 报    第 32卷 
2.2 三十烷醇对幼苗生长的影响
用 0.25 ~ 2.00 mg· L-1三十烷醇分别处理海萝
幼苗 1、4次 ,不同组别之间 ,幼苗的长度差异不显著
(P>0.05)(图 3A),但幼苗产生分枝的百分率却有显
著性差异(P<0.05)(图 3B).不同三十烷醇质量浓
度处理 1或 4次 ,幼苗产生分枝的百分率都明显高
于对照组(P<0.05).处理次数相同的不同质量浓度
三十烷醇处理组间 ,幼苗的分枝率没有显著性差异
(P>0.05);处理 1次的各组 ,除 1.00 mg· L-1三十
烷醇处理的组 ,与处理 4次的组幼苗分枝百分率差
异不明显外 ,其他组的幼苗分枝率都明显比处理 4
次的组低(P<0.05).
凡柱上标有一个相同字母者 ,示组别之间差异不显著(P>0.05, LSD法).
图 3 2个月时不同处理组幼苗的长度(A)及分枝率(B)
Fig.3 Thelength(A)andoutshootramificationrate(B)ofgermlingofdiferentgroupsattwomonths
2.3 三十烷醇对藻体生长的影响
用 0.50 ~ 2.00mg·L-1的三十烷醇对海萝藻体
分别处理 18、24 h后培养 1个月 ,不同处理组之间海
萝藻体的质量差别不明显 ,处理组与对照组之间也
没有显著性差异 (P>0.05)(图 4),但藻体培养到
25 d左右就陆续有孢子释放 ,经三十烷醇处理的藻
体释放孢子的时间较早.
凡柱上标有一个相同字母者 , 示组别之间差异不显著(P>0.05,
LSD法).
图 4 1个月时不同处理组藻体质量
Fig.4 Themassoffrondofdiferentgroupsatonemonth
3 讨论与结论
三十烷醇对海藻的促进作用是各种各样的 ,如能
够提高极大螺旋藻生物量及生化组成的含量;能够促
进海带宽 、厚的增长[ 14] ;能够促进紫菜丝状体的成熟 ,
提高紫菜的采苗率[ 13] ;能够促进小石花菜藻体的增质
量 [ 16] ;能够促进绳江蓠藻体的生长及孢子的萌发 [ 17] .
本试验表明 ,三十烷醇对海萝幼苗的分叉和盘状体的
生长 、萌发有促进作用.用 0.50和 1.00mg·L-1三十
烷醇处理的孢子培养 1个月时所形成的盘状体明显
比对照组的大 ,而到 2个月时 ,盘状体的大小却与对
照组的相似 ,这并不是三十烷醇在 1个月后抑制了
盘状体的生长 ,而是有些盘状体停止面积的增长而
开始萌发出直立体的缘故 ,从试验结果可看出这 2
个质量浓度作用下的盘状体萌发出直立体的百分率
比对照组的高.经三十烷醇处理过的海萝幼苗长度
虽然没有明显地得到提高 ,但幼苗的分叉数却明显
高于没处理过的 ,而海萝幼苗分叉数的增加也是其
生长旺盛的一个特征 ,这说明了三十烷醇在一定程
度上促进了海萝幼苗的生长.三十烷醇对海萝藻体
的质量增长影响不明显 ,但经三十烷醇处理的藻体
释放孢子的时间较早.关于三十烷醇是否促进了藻
体的成熟则有待进一步研究.
张丽娟 [ 17]的研究表明 0.5 ~ 16.0 mg· L-1三十
烷醇对绳江蓠的孢子萌发及藻体的生长具有促进作
用 ,最适为 1.0 mg· L-1三十烷醇.本试验的结果表
明 ,三十烷醇对海萝孢子的合适作用质量浓度为
0.50和 1.00 mg· L-1 ,最适为 0.50 mg· L-1;2.00
mg·L-1则对盘状体的生长及存活有抑制作用 ,显然
三十烷醇对海萝盘状体的最适作用质量浓度要比对
绳江蓠的低.本试验所设三十烷醇对海萝孢子的最
低作用质量浓度为 0.50 mg· L-1 ,是否更低的质量
81 第 1期      陈素文等:三十烷醇对海萝孢子萌发 、幼苗及藻体生长的影响    
浓度对孢子的萌发更有利 ,有待进一步的研究.三十
烷醇对海萝幼苗的影响试验是在对孢子影响试验基
础上进行的 ,鉴于前面试验结果所得出的最适质量
浓度为 0.50mg·L-1 ,因而在设计三十烷醇对幼苗
的作用质量浓度上 ,采用了比 0.50 mg· L-1更低的
质量浓度(0.25mg· L-1),但试验结果表明三十烷醇
对幼苗的最适作用质量浓度为 1.00 mg· L-1.这表
明 ,三十烷醇对海萝幼苗的作用质量浓度要比对其孢
子的高.
张丽娟 [ 17]在用三十烷醇处理绳江蓠附着孢子时
采用 24h的处理时间 ,本试验则分别进行 14和 24 h
的处理 ,结果表明处理时间的长短对海萝盘状体生
长影响不明显 ,但对盘状体的萌发有影响 , 14 h的处
理比 24 h的好.梁玉林等 [ 14]的试验表明 ,用三十烷
醇浸泡海带苗 ,浸泡 1次的比浸泡 2次的效果好.本
试验则表明 ,用三十烷醇处理海萝幼苗 ,浸泡 4次的
比 1次的好.
姚南瑜等[ 15]的研究表明三十烷醇能提高海带叶
绿素和岩藻黄素含量 ,促进光合作用 ,并可在相当长
时间内 ,提高海带对磷酸盐和硝酸离子的吸收 ,还可
使海带体内核酸含量增加 ,进而促进海带迅速生长.
本试验没有研究三十烷醇对海萝的作用机制 ,但表
观的研究表明合适质量浓度的三十烷醇对海萝盘状
体和幼苗的生长均具有明显的促进作用 ,这可为三
十烷醇用于海萝育苗提供参考.
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【责任编辑 柴 焰】
82    华 南 农 业 大 学 学 报    第 32卷