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作 者 ：杨帆

期 刊 ：湖南农业大学 2010年 03期 页码：62

关键词：单叶省藤；cDNA文库；EST；测序；

摘 要 ：1.本研究用改进后的CTAB法,异硫氰酸胍法和Trizol法分别提取单叶省藤根茎花组织总RNA。对比结果后使用CTAB法所提RNA构建单叶省藤全长文库文库。等量混合三种组织RNA,利用SMART法构建全长cDNA文库。cDNA文库质量经检测：文库初始滴度为1.40×105 cfu/mL,扩增后滴度为5.82×106cfu/μL。随机挑取16个单克隆,M13通用引物PCR扩增,重组率约为87.5%,插入片段长度在1.0-4.0kb之间。 2.单叶省藤cDNA全长文库中随机选取2860个克隆用ABI3130XL测序仪进行测序条件优化并测序,用Phred软件进行编辑后,去除小于...

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