全 文 ：收稿日期:2008-12-16
作者简介:王茹萍(1985-), 女(汉族), 黑龙江肇东人 , 硕士研究生 , E-mailwangruping sy@yahoo.com;吴立军
(1945-), 男(汉族),黑龙江肇东人 , 教授 ,博士 , 主要从事天然产物活性成分的研究 , Tel.024-23986481, E-mailwu-
lijun 111@hotmail.com。
文章编号:1006-2858(2009)11-0874-04
天女木兰叶中甾类化合物的分离与鉴定
王茹萍 1 , 吴　迪2 , 高慧媛 1 , 孙博航1 , 黄　健 1 , 吴立军 1
(1.沈阳药科大学 中药学院 , 辽宁 沈阳 110016;2.辽宁省公安厅 刑科所 ,辽宁 沈阳 110032)
摘要:目的 对天女木兰叶的化学成分进行分离和结构鉴定。 方法 采用硅胶 、凝胶柱色谱和重结
晶等分离方法对天女木兰叶的体积分数为 90%的乙醇溶液提取物进行成分分离;通过谱学分析方
法结合化合物理化性质对分离得到的化合物进行结构鉴定。结果 分离得到 8个化合物 ,分别鉴定
为豆甾-4-烯-3, 6-二酮(stigmast-4-en-3, 6-dione, 1),豆甾-4-烯-3β, 6β-二醇(stigmast-4-en-3β, 6β-diol,
2), 5α, 8α-过氧-(22E, 24R)-麦角甾-6, 22-二烯-3β -醇 [ 5α, 8α-epidioxy-(22E, 24R)-ergosta-6, 22-
dien-3β-ol, 3] , 豆甾-4-烯-6β -羟基-3-酮(stigmast-4-en-6β-ol-3-one, 4), β-谷甾醇(β-sitosterol, 5),
(22E, 24R)-麦角甾-7, 22-二烯-3β, 5α, 6β-三醇 [ (22E, 24R)-ergosta-7, 22-dien-3β, 5α, 6β-triol, 6] ,豆
甾-5-烯-3β, 7α-二醇(stigmast-5-en-3β, 7α-diol, 7), 胡萝卜苷(daucosterol, 8)。结论 化合物 2-4、 6、 7
为首次从木兰属植物中分离得到 ,化合物 1为首次从该植物中分离得到。
关键词:天女木兰叶;化学成分;甾体;结构鉴定
中图分类号:R284　　　文献标志码:A
　　天女木兰(MagnoliasieboldiK.Koch)是木
兰科木兰属落叶乔木 ,为稀有珍贵树种之一。木
兰科植物是世界公认的多用途植物 ,在医药 ,化
工 ,科研和物种多样性保护方面都有着非常重要
的应用意义 。木兰属植物具有化学成分丰富 、药
理活性多样的特点。在中国该属植物分布广泛 ,
资源丰富。目前国内外对天女木兰的单体化合物
及药理活性研究甚少 ,为了更好的开发和利用天
女木兰 ,扩大对木兰属植物品种的研究范围 ,以加
强系统性化学成分研究 、寻找有效部位或具有生
物活性的先导化合物 ,本文作者对天女木兰进行
了初步研究 。
对天女木兰叶的体积分数为 90%的乙醇溶
液提取物进行了研究 ,通过硅胶 、凝胶柱色谱和重
结晶等方法从中分离得到了 8个化合物 ,根据其
理化性质和波谱数据并参考文献 ,确定了结构。
化合物 1-8结构式见图 1。
Fig.1　Structuresofcompounds1-8
第 26卷 第 11期
2 0 0 9年 1 1月
沈　阳　药　科　大　学　学　报
JournalofShenyangPharmaceuticalUniversity
Vol.26 　No.11
Nov.2009 p.874
1　仪器与材料
BrukerARX-300、AV-600型核磁共振仪(瑞
士 Bruker公司), YanacoMP-S3显微熔点测定仪
(温度未校正 ,日本 Yanaco制作所)。
薄层色谱用硅胶 G、H、GF254和柱色谱用硅胶
(青岛海洋化工有限公司),柱色谱用氧化铝(国
药集团化学试剂有限公司),其他试剂(分析纯 ,
市售)。
天女木兰叶于 2006年 9月采自辽宁省本溪
市 。由沈阳药科大学中药学院孙启时教授鉴定为
天女木兰(MagnoliasieboldiK.Koch)的叶。
2　提取分离
干燥天女木兰叶粗粉 6 kg用体积分数为
90%的乙醇溶液回流提取 3次 ,每次 2 h,合并滤
液 ,回收溶剂得浸膏提 475 g,用水分散后 ,依次用
石油醚 、二氯甲烷 、乙酸乙酯 、正丁醇萃取 ,萃取液
减压浓缩 ,得 4个组分 。取石油醚层浸膏 90 g,用
石油醚 -丙酮系统梯度洗脱 ,采用反复硅胶 、凝胶
柱色谱法 、重结晶等方法得化合物 1(14.2 mg)、2
(15.2 mg)、 3 (11.3 mg)、 4 (8.6 mg)、 5
(85.5 mg)、 6 (35.8 mg)、 7 (12.5 mg)、 8
(45.5 mg)。
3　结构鉴定
化合物 1:白色片晶(二氯甲烷), mp.160 ～
164 ℃。 Liebermann-Burchard反应颜色为污绿
色 , 示为甾类 化合物 。 1H-NMR(300 MHz,
CDCl3)谱中:δ6.17(1H, s)为双键质子信号 , δ:
0.72(3H, s)、0.82(3H, d, J=6.6 Hz)、0.84(3H,
d, J=6.3 Hz)、0.85(3H, t, J=7.2 Hz)、 0.94
(3H, d, J=6.3 Hz)、1.17(3H, s)为 6个甲基氢
信号。 13C-NMR(75 MHz, CDCl3)谱共给出 29
个碳信号 ,数据见表 1。其中 δ:202.3、 199.5
为 2个羰基碳信号 , δ:161.0、125.4为 2个烯
烃碳信号 , δ:11.9、 11.9、 17.5、 18.7、 19.0、
19.8为 6个甲基碳信号 。该化合物碳氢谱数
据与文献 [ 1]报道的豆甾 -4-烯 -3 , 6-二酮数据
相一致 ,故确定化合物 1为豆甾 -4-烯 -3 , 6-二酮
(stigmast-4-en-3, 6-dione)。化合物 1为首次从
天女木兰植物中分离得到 。
化合物 2:白色针晶(二氯甲烷), mp.331 ～
333 ℃。 Liebermann-Burchard反应颜色为污绿
色 , 示为甾体类化合物。 1H-NMR(600 MHz,
C5D5N)δ:0.71(3H, s)、0.84(3H, d, J=6.6 Hz)、
0.86 (3H, d, J=7.2 Hz)、 0.87 (3H, t, J=
7.2 Hz)、0.99(3H, d, J=6.6 Hz)、1.54(3H, s)
为 6个甲基氢信号。另外给出一个烯烃质子信号
δ6.00(1H, s)及 2个连氧碳上质子信号 δ4.57
(1H×2, s)。 13C-NMR(150 MHz, C5D5N)谱共
给出 29个碳信号 ,数据见表 1。其中 δ:130.0、
147.2为 2个烯烃碳信号 , δ:67.6、73.8为 2个连
氧碳信号 , δ:12.2、12.2、19.0、19.2、20.0、21.4为
6个甲基碳信号。该化合物碳氢谱数据与文献
[ 1]报道的豆甾-4-烯 -3β, 6β-二醇数据相一致 ,故
确定化合物 2为豆甾 -4-烯-3β, 6β -二醇(stigmast-
4-en-3 , 6-diol)。化合物 2为首次从木兰属植物中
分离得到。
化合物 3:白色片晶(二氯甲烷), mp.178 ～
180 ℃。 Liebermann-Burchard反应颜色为污绿
色 , 示为甾体类化合物。 1H-NMR(600 MHz,
CDCl3)δ:0.82(3H, s)、0.88(3H, s)、0.91(3H,
d, J=7.2 Hz)、 1.00(3H, d, J=6.6 Hz)、 0.81
(3H, d, J=6.6 Hz)、0.83(3H, d, J=6.6 Hz),为
6组甲基质子信号 , δ3.97(1H, m)为一连氧碳上
质子信号 , δ:6.50(1H, d, J=8.4 Hz)、6.24(1H,
d, J=8.4 Hz)、δ5.22(1H, dd, J=15.0, 7.8 Hz)、
5.14(1H, dd, J=15.0, 7.8 Hz)为 4个烯键质子
信号。 13C-NMR(150 MHz, CDCl3)谱共给出 28
个碳信号 ,数据见表 1。其中 δ:79.4、82.2为连氧
碳信号 , δ:130.8、132.3、 135.2、 135.4为 4个
烯烃碳信号 , δ:12.9、 17.6、18.2、19.6、 19.9、
20.9为 6个甲基碳信号 。该化合物碳氢谱数
据与文献 [ 2]报道的 5α, 8α-过氧 -(22E, 24R)-
麦角甾 -6, 22-二烯 -3β -醇数据相一致 ,故确定
化合物 3为 5α, 8α-过氧 -(22E, 24R)-麦角甾 -
6 , 22-二 烯 -3β -醇 [ 5α, 8α-epidioxy-(22E,
24R)-ergosta-6, 22-dien-3β-ol] 。化合物 3为首
次从木兰属植物中分离得到 。
化合物 4:白色针晶(二氯甲烷), mp.204 ～
206 ℃。 Liebermann-Burchard反应颜色为污绿
色 , 示为甾体类化合物。 1H-NMR(600 MHz,
CDCl3)谱中:δ:0.75(3H, s)、1.38(3H, s)、0.93
(3H, d, J=6.6 Hz)、 0.84(3H, d, J=7.2 Hz)、
0.82 (3H, d, J=6.6 Hz)、 0.86 (3H, t, J=
7.2 Hz),为 6组甲基质子信号 , δ:4.35(1H, s)为
一连氧碳上质子信号 , δ:5.82(1H, s)为双键质子
875第 11期 王茹萍等:天女木兰叶中甾类化合物的分离与鉴定
信号。 13C-NMR(150 MHz, CDCl3)谱共给出 29
个碳信号 ,数据见表 1。其中 δ:200.5为羰基碳
信号 , δ:168.4、126.3为 2个烯烃碳信号 , δ:11.9、
12.0、18.7、19.0、19.5、19.8为 6个甲基碳信号。
该化合物碳氢谱数据与文献 [ 3]报道的豆甾-4-
烯 -6β -羟基 -3-酮数据相一致 ,鉴定其为豆甾-4-烯 -
6β -羟基 -3-酮 (stigmast-4-en-6β-ol-3-one)。化合
物 4为首次从木兰属植物中分离得到 。
Table1　13C-NMRchemicalshifts(δ)dataofcompounds1-4, 6, 7
No. 1 2 3 4 6 7
1 35.5 37.7 34.7 37.1 32.7 37.0
2 33.8 30.2 30.1 34.3 33.8 31.4
3 199.5 67.6 66.5 200.5 67.6 71.3
4 125.4 130.0 37.0 126.3 42.0 42.1
5 161.0 147.2 82.2 168.4 76.1 146.2
6 202.3 73.8 135.4 73.3 74.3 123.9
7 46.8 40.2 130.8 38.5 120.5 65.3
8 39.1 31.0 79.4 29.7 141.5 37.5
9 51.0 55.0 51.1 53.6 43.8 42.2
10 34.2 37.4 36.9 38.0 38.1 37.4
11 20.8 21.4 23.4 21.0 22.4 20.7
12 39.8 40.7 39.4 39.6 39.9 39.2
13 42.5 42.8 44.6 42.5 43.8 42.3
14 55.8 56.4 51.7 55.9 55.3 49.4
15 23.9 24.6 20.6 24.1 23.5 24.3
16 28.0 28.6 28.6 28.2 28.5 28.3
17 56.5 56.5 56.2 56.0 56.1 55.7
18 11.9 12.2 12.9 12.0 12.5 12.0
19 17.5 21.7 18.2 19.5 18.8 18.2
20 36.0 36.5 39.7 36.1 40.9 36.1
21 19.0 19.0 20.9 19.0 20.1 19.0
22 33.9 34.3 135.2 33.9 136.2 33.9
23 26.0 26.5 132.3 26.1 132.1 25.9
24 45.8 46.1 42.8 45.8 43.1 45.8
25 29.1 29.5 33.0 29.1 33.3 29.1
26 19.8 20.0 19.9 19.8 21.4 19.8
27 18.7 19.2 19.6 18.7 19.8 18.8
28 23.0 23.4 17.6 23.0 17.8 23.0
29 11.9 12.2 11.9 12.0
　　化合物 5:白色针晶(二氯甲烷), mp.139 ～
140 ℃。 Liebermann-Burchard反应颜色为污绿
色 ,示为甾体类化合物 。与 β-谷甾醇样品共薄层
检测 ,经 3种不同的溶剂系统展开 , Rf值完全一
致 ,故确定化合物 5为 β-谷甾醇(β-sitosterol)。
化合物 6:白色针晶 (吡啶), mp.224 ～
227 ℃。Liebermann-Burchard反应颜色为污绿色 ,
示为甾体类化合物。在 1H-NMR(300 MHz,
C5D5N)谱中 δ:0.65(3H, s)、1.56(3H, s)、1.05
(3H, d, J=6.6 Hz)、 0.94(3H, d, J=6.8 Hz)、
0.84(3H, d, J=6.7 Hz)、 0.85 (3H, d, J=
6.7 Hz)为 6组甲基质子信号 , δ:4.83(1H, m)、
4.33(1H, brs)为 2个连氧碳上质子信号 , δ5.74
(1H, brs)为一个烯烃质子信号 , δ:5.19(1H, dd,
J=15.2, 7.6 Hz)、 5.24 (1H, dd, J=15.2,
7.5 Hz)为 双 键 碳 上 质 子 信 号 。 13C-NMR
(150 MHz, C5D5N)谱共给出 28个碳信号 ,数据
见表 1。其中 δ:67.6、76.1、74.3为连氧碳信号 ,
876 沈　阳　药　科　大　学　学　报 第 26卷　
δ:120.5、141.5、136.2、132.1为 4个烯烃碳信号 ,
δ:12.5、17.8、18.8、19.8、20.1、21.4为 6个甲基
碳信号 。该化合物碳氢谱数据与文献 [ 4]报道的
(22E, 24R)-麦角甾-7, 22-二烯-3β, 5α, 6β -三醇数
据相一致 ,故确定化合物 6为(22E, 24R)-麦角
甾 -7, 22-二烯-3β, 5α, 6β -三醇 [ (22E, 24R)-ergos-
ta-7 , 22-dien-3β, 5α, 6β-triol] 。化合物 6为首次
从木兰属植物中分离得到 。
化合物 7:白色片晶(二氯甲烷), mp.194 ～
196 ℃。 Liebermann-Burchard反应颜色为污绿
色 ,示为甾体类化合物 。在 1H-NMR(300 MHz,
CDCl3)谱中 δ:0.69(3H, s)、1.00(3H, s)、 0.94
(3H, d, J=6.4 Hz)、 0.84(3H, d, J=6.5 Hz)、
0.82(3H, d, J=6.5 Hz)、0.85(3H, t, J=7.2 Hz)
为 6组甲基质子信号 , δ:3.60(1H, m)、3.87(1H,
brs)为 2个连氧碳上质子信号 , δ5.62(1H, brs)
为双键碳上质子信号 。 13C-NMR(75 MHz,
CDCl3)谱共给出 29个碳信号 ,数据见表 1。其中
δ:146.2、123.9为 2个烯烃碳信号 , δ:11.6、12.0、
18.2、18.8、19.0、19.8为 6个甲基碳信号。该化
合物碳氢谱数据与文献 [ 5]报道的豆甾-5-烯-3β,
7α-二醇数据相一致 ,故确定化合物 7为豆甾-5-
烯 -3β, 7α-二醇(stigmast-5-en-3β, 7α-diol)。化合
物 7为首次从木兰属植物中分离得到 。
化合物 8:白色粉末(二氯甲烷-甲醇), mp.>
300 ℃, Liebermann-Burchard反应颜色为污绿色 ,
示为甾体类化合物。体积分数为 10%的硫酸乙
醇溶液显紫红色 。经与已知胡萝卜苷样品共薄层
检测 ,经 3种不同的溶剂系统展开 , Rf值完全一
致 ,故确定化合物 8为胡萝卜苷(daucosterol)。
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Isolationandidentificationofsteroidsfromtheleaves
oftheMagnoliasieboldiK.Koch
WANGRu-ping1 , WUDi2 , GAOHui-yuan1 , SUNBo-hang1 , HUANGJian1 , WULi-jun1
(1.SchoolofTraditionalChineseMateriaMedica, ShenyangPharmaceuticalUniversity, Shenyang110016,
China;2.TheLiaoningProvincialPublicSecurityOfice, Shenyang110032, China)
Abstract:ObjectiveToisolatethecomponentsfromtheleavesoftheMagnoliasieboldiK.Kochandeluci-
datetheirstructures.MethodsThecompoundswereisolatedbysilicagelcolumnchromatography, sephedex
LH-20, togetherwithrecrystalizingmethods.NMRspectralanalysisandTLCwereemployedforthestruc-
turalidentification.ResultsEightcompoundswereobtainedandelucidatedasstigmast-4-en-3, 6-dione(1),
stigmast-4-en-3, 6-diol(2), 5α, 8α-epidioxy-(22E, 24R)-ergosta-6, 22-dien-3β-ol(3), stigmast-4-en-6β-ol-
3-one(4), β-sitosterol(5), (22E, 24R)-ergosta-7, 22-dien-3β, 5α, 6β-triol(6), stigmast-5-en-3β, 7α-diol
(7), daucosterol(8), respectively.ConclusionsCompounds1 areobtainedfromthisplantforthefirsttime,
whilecompounds2-4, 6, 7 areisolatedfromtheMagnoliagenusforthefirsttime.
Keywords:MagnoliasieboldiK.Koch;chemicalconstituent;steroid;structureidentification
877第 11期 王茹萍等:天女木兰叶中甾类化合物的分离与鉴定