全 文 ：书·研究论文·
［基金项目］湖南省教育厅科研课题（编号：１１Ｃ－１０２４）　［作者简介］王小莉，女，硕士，讲师，研究方向：病理学及病理生理学，Ｅ－ｍａｉｌ：ｗａｎｇｘｉａｏ－
ｌｉｆ＠１６３．ｃｏｍ
滇白珠水提物对实验性大鼠慢性阻塞性肺疾病炎症的影响
王小莉，吕江明　 （湖南吉首大学医学院，湖南 吉首４１６０００）
［摘要］　目的：利用滇白珠水提物对慢性阻塞性肺疾病实验性大鼠进行干预，检测其炎症细胞和Ｃ－反应蛋白（ＣＲＰ）、白介素８
（ＩＬ－８）变化并对其机制进行探讨。方法：健康ＳＤ雄性大鼠６０只，随机分为５组：正常对照组、模型组和滇白珠水提物低、中、高
剂量组（分别为０．５，１．０，２．０ｇ·ｋｇ－１），每组１２只。选择熏吸香烟加气管内注射脂多糖（ＬＰＳ）法复制慢阻肺模型，并观察各组大
鼠肺组织的病理改变，行支气管肺泡灌洗液细胞计数和白细胞比率测定，测定各组血清和肺组织匀浆中Ｃ－反应蛋白、ＩＬ－８水平。
结果：模型组大鼠出现明显慢性支气管炎特征性病理改变，出现肺气肿，肺泡结构不完整，肺泡壁变薄断裂，气管及血管周围大量
炎症细胞浸润，滇白珠水提物低、中、高剂量治疗组也出现肺气肿和炎症浸润，但程度较模型组轻。模型组大鼠肺匀浆组织和血
清ＣＲＰ、ＩＬ－８明显较正常对照组增多，高、中、低剂量治疗组大鼠肺匀浆组织和血清ＣＲＰ、ＩＬ－８均明显较模型组减少，差异有显著
性（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）；模型组中炎症细胞总数增加，与正常对照组比较差异有极显著性（Ｐ＜０．０１）；各剂量治疗组炎症细胞总
数较模型组明显减少（Ｐ＜０．０１），差异均有显著性。与正常对照组比较，模型组和治疗组中细胞总数和中性粒细胞比例均显著升
高，与模型组比较，高中低剂量治疗组细胞总数和中性粒细胞比例显著下降，并呈一定的剂量效应关系（Ｐ＜０．０１）。结论：滇白珠
水提物可降低大鼠肺组织和血清中的Ｃ－反应蛋白及ＩＬ－８，减轻肺组织及气道炎症，对大鼠的慢阻肺炎症有抑制作用。
［关键词］　Ｃ－反应蛋白；慢性阻塞性肺疾病；滇白珠水提物
［中图分类号］Ｒ３６１　　［文献标识码］Ａ　　［文章编号］１００１－５２１３（２０１３）１８－１４６９－０４
Ａｍｅｌｉｏｒａｔｉｎｇ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｗａｔｅｒ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｆｒｏｍＧａｕｌｔｈｅｒｉａ　ｌｅｕｃｏｃａｒｐａ　ｖａｒ　ｏｎ　ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｃｈｒｏ－
ｎｉｃ　ｏｂｓｔｒｕｃｔｉｖｅ　ｐｕｌｍｏｎａｒｙ　ｄｉｓｅａｓｅｓ　ｏｆ　ｒａｔｓ
ＷＡＮＧ　Ｘｉａｏ－ｌｉ，ＬＶ　Ｊｉａｎｇ－ｍｉｎｇ（Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｃｏｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｊｉｓｈｏｕ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈｕｎａｎ　Ｊｉｓｈｏｕ　４１６０００，Ｃｈｉｎａ）
ＡＢＳＴＲＡＣＴ：ＯＢＪＥＣＴＩＶＥ　Ｔｏ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ　ｔｈｅ　ｗａｔｅｒ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｆｒｏｍ　Ｇａｕｌｔｈｅｒｉａ　ｌｅｕｃｏｃａｒｐａ　ｖａｒ　ｏｎ　ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｃｈｒｏｎｉｃ　ｏｂ－
ｓｔｒｕｃｔｉｖｅ　ｐｕｌｍｏｎａｒｙ　ｄｉｓｅａｓｅ　ｏｆ　ｒａｔｓ，ｔｏ　ｅｘｐｌｏｒｅ　ｔｈｅ　ｃｈａｎｇｅｓ　ｏｆ　ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ　ｃｅｌｓ　ａｎｄ　Ｃ－ｒｅａｃｔｉｖｅ　ｐｒｏｔｅｉｎ（ＣＲＰ），８　ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ
（ＩＬ－８）ａｎｄ　ｔｈｅ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ　ｏｆ　ａｃｔｉｏｎｓ．ＭＥＴＨＯＤＳ　６０　ｈｅａｌｔｈｙ　ＳＤ　ｍａｌｅ　ｒａｔｓ　ｗｅｒｅ　ｒａｎｄｏｍｌｙ　ｄｉｖｉｄｅｄ　ｉｎｔｏ　５　ｇｒｏｕｐｓ　ａｓ　ｆｏｌｏｗｓ：
ｎｏｒｍａｌ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ，ｍｏｄｅｌ　ｇｒｏｕｐ　ａｎｄ　Ｇａｕｌｔｈｅｒｉａ　ｌｅｕｃｏｃａｒｐａ　ｖａｒ　ｌｏｗ，ｍｉｄｄｌｅ，ｈｉｇｈ　ｄｏｓｅ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｇｒｏｕｐｓ，１２　ｒａｔｓ　ｉｎ　ｅａｃｈ
ｇｒｏｕｐ．Ｔｈｅ　ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ　ｃｈａｎｇｅｓ　ｏｆ　ｌｕｎｇ　ｗｅｒｅ　ｅｖａｌｕａｔｅｄ．Ｔｈｅ　ｌｅｕｋｏｃｙｔｅｓ　ｃｏｕｎｔ　ａｎｄ　ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅ　ｗｅｒｅ　ｄｅｔｅｃｔｅｄ　ｉｎ　ｂｒｏｎｃｈｏａｌｖｅｏｌａｒ
ｌａｖａｇｅ　ｆｌｕｉｄ，ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｏｆ　Ｃ－ｒｅａｃｔｉｏｎ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ａｎｄ　ＩＬ－８　ｗｅｒｅ　ｍｅａｓｕｒｅｄ　ｉｎ　ｓｅｒｕｍ　ａｎｄ　ｌｕｎｇ　ｔｉｓｓｕｅ　ｈｏｍｏｇｅｎａｔｅ．ＲＥＳＵＬＴＳ　Ｔｈｅ
ｍｏｄｅｌ　ｒａｔｓ　ａｐｐｅａｒｅｄ　ｏｂｖｉｏｕｓ　ｃｈｒｏｎｉｃ　ｂｒｏｎｃｈｉｔｉｓ　ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ，ｅｍｐｈｙｓｅｍａ，ｔｒａｃｈｅａ　ａｎｄ　ｐｅｒｉｖａｓｃｕｌａｒ　ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ
ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ　ｃｅｌｓ；ｌｏｗ，ｍｅｄｉｕｍ　ａｎｄ　ｈｉｇｈ　ｄｏｓｅ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｇｒｏｕｐ　ａｌｓｏ　ａｐｐｅａｒｅｄ　ｅｍｐｈｙｓｅｍａ　ａｎｄ　ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ　ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ，ｂｕｔ
ｔｈｅ　ｄｅｇｒｅｅ　ｗａｓ　ｌｉｇｈｔｅｒ　ｔｈａｎ　ｉｎ　ｍｏｄｅｌ　ｇｒｏｕｐ．Ｉｎ　ｍｏｄｅｌ　ｒａｔｓ，ｌｕｎｇ　ｔｉｓｓｕｅ　ｈｏｍｏｇｅｎａｔｅ　ａｎｄ　ｓｅｒｕｍ　ＣＲＰ，ＩＬ－８ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ
ｔｈａｎ　ｔｈｏｓｅ　ｉｎ　ｎｏｒｍａｌ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ；ｉｎ　ｔｈｅ　ｈｉｇｈ，ｍｉｄｄｌｅ　ａｎｄ　ｌｏｗ　ｄｏｓｅ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｒａｔｓ，ｌｕｎｇ　ｔｉｓｓｕｅ　ｈｏｍｏｇｅｎａｔｅ　ａｎｄ　ｓｅｒｕｍ　ＣＲＰ，
ＩＬ－８　ｗｅｒｅ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｒｅｄｕｃｅｄ　ｔｈａｎ　ｔｈｏｓｅ　ｉｎ　ｍｏｄｅｌ　ｇｒｏｕｐ，ｔｈｅ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ　ｗａｓ　ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌｙ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ（Ｐ＜０．０５　ｏｒ　０．０１）．Ｉｎ　ｔｈｅ
ｍｏｄｅｌ　ｇｒｏｕｐ　ｔｈｅ　ｔｏｔａｌ　ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ　ｃｅｌｓ　ｗｅｒｅ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ａｓ　ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｗｉｔｈ　ｎｏｒｍａｌ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ（Ｐ＜０．０１）．Ｉｎ
ｅａｃｈ　ｄｏｓｅ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｇｒｏｕｐ　ｔｈｅ　ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ　ｃｅｌｓ　ｗｅｒｅ　ｏｂｖｉｏｕｓｌｙ　ｒｅｄｕｃｅｄ　ｔｈａｎ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｍｏｄｅｌ　ｇｒｏｕｐ，ｗｉｔｈ　ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌｙ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ
ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ（Ｐ＜０．０１）．Ｃｏｍｐａｒｉｎｇ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｎｏｒｍａｌ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ，ｉｎ　ｍｏｄｅｌ　ｇｒｏｕｐ　ａｎｄ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｇｒｏｕｐ　ｔｈｅ　ｔｏｔａｌ　ｌｅｕｋｏｃｙｔｅｓ
ｃｏｕｎｔｓ　ａｎｄ　ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌ　ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅ　ｗｅｒｅ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ，ａｎｄ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｇｒｏｕｐ　ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｍｏｄｅｌ　ｇｒｏｕｐ　ｔｈｅ
ｔｏｔａｌ　ｌｅｕｋｏｃｙｔｅｓ　ｃｏｕｎｔｓ　ａｎｄ　ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌ　ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅ　ｗｅｒｅ　ｄｅｃｒｅａｓｅｄ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ，ａｎｄ　ｄｏｓｅ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔｌｙ（Ｐ ＜０．０１）．
ＣＯＮＣＬＵＳＩＯＮ　Ｇａｕｌｔｈｅｒｉａ　ｌｅｕｃｏｃａｒｐａ　ｖａｒ　ｃａｎ　ｒｅｄｕｃｅ　ｒａｔｓ＇ｌｕｎｇ　ｔｉｓｓｕｅ　ａｎｄ　ｂｌｏｏｄ　ｓｅｒｕｍ　ｌｅｖｅｌｓ　ｏｆ　Ｃ－ｒｅａｃｔｉｖｅ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ａｎｄ　ＩＬ－８，
ｒｅｄｕｃｅ　ｔｈｅ　ｌｕｎｇ　ｔｉｓｓｕｅ　ａｎｄ　ａｉｒｗａｙ　ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ，ｈａｓ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｎ　ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｒａｔｓ．
ＫＥＹ　ＷＯＲＤＳ：Ｃ－ｒｅａｃｔｉｖｅ　ｐｒｏｔｅｉｎ（ＣＲＰ）；ｃｈｒｏｎｉｃ　ｏｂｓｔｒｕｃｔｉｖｅ　ｐｕｌｍｏｎａｒｙ　ｄｉｓｅａｓｅｓ；ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｏｆ　Ｇａｕｌｔｈｅｒｉａ　ｌｅｕｃｏｃａｒｐａ　ｖａｒ
　　滇白珠（Ｇａｕｌｔｈｅｒｉａ　ｌｅｕｃｏｃａｒｐａ　ｖａｒ）分布江南 各省，四川、云南为集中分布区，在湖南湘西地区有
·９６４１·中国医院药学杂志２０１３年第３３卷第１８期Ｃｈｉｎ　Ｈｏｓｐ　Ｐｈａｒｍ　Ｊ，２０１３　Ｓｅｐ，Ｖｏｌ　３３，Ｎｏ．１８
DOI:10.13286/j.cnki.chinhosppharmacyj.2013.18.006
分布。现代研究证明，滇白珠含有机酸、苷类、黄酮
类、木脂素、槲皮素类等多种化合物，具有祛风除湿、
通络止痛、清热解毒等功效，用于风湿性关节炎、慢
性气管炎、风寒感冒等症［１］。本实验用滇白珠全株
水提物对慢性阻塞性肺疾病大鼠模型进行干预，通
过观察肺组织的病理变化，支气管肺泡灌洗液中细
胞计数及其中性粒细胞比率，肺组织和血清中Ｃ－反
应蛋白、ＩＬ－８的改变，探讨滇白珠对炎症的影响及
其机制，从而为临床防治慢性阻塞性肺疾病提供理
论支持。
１　材料
１．１　实验动物　健康ＳＤ雄性大鼠６０只（湖南长
沙市开福区东创实验动物科技服务部提供，动物合
格证号 ＨＮＡＣＳＤＣ２０１２０２９２），鼠龄１２周，体质量
（２７４±２９）ｇ。
１．２　药物　滇白珠由湖南吉首医学院吕江明老师
２０１１年９月采集于湘西凤凰腊尔山镇两林乡，由我
院中药学李春艳教授鉴定。
２　方法
２．１　滇白珠水提物制备　称取滇白珠干燥全株
１　０００　ｇ、切碎，浸泡、水煎３次，每次３０　ｍｉｎ，合并水
滤液，浓缩为１　ｇ·ｍＬ－１（生药），得到滇白珠水提物。
２．２　实验动物分组　将健康ＳＤ大鼠随机分为正
常对照组、模型组、滇白珠水提物高剂量组、中剂量
组、低剂量组，共５组，每组１２只。
２．３　ＣＯＰＤ模型制备　采用两次气管内注入脂多
糖（ＬＰＳ）和反复烟熏的方法制作 ＣＯＰＤ 大鼠模
型［２］。第１、１４天各向气管内缓慢注入脂多糖２００
μｇ（２００μＬ），将模型组的大鼠放入的有机玻璃制成
的烟熏箱内，在其右上角开通一个直径１　ｃｍ的通气
孔。大鼠每天吸烟２次，每次１６支，时间３０　ｍｉｎ，２
次间隔４　ｈ，连续２８　ｄ。被动吸烟方法：将点燃的香
烟（购买的长沙卷烟厂生产的白沙牌香烟）通过三通
将烟雾吸入１００　ｍＬ的注射器中，关闭吸烟通路一
端，再打开三通的另一端将烟雾注入烟熏箱内进行
大鼠被动吸烟。
２．４　动物给药　用药组大鼠吸烟８　ｄ后每天吸烟
前通过灌胃器给大鼠灌胃滇白珠水提物一次（低剂
量组０．５　ｇ·ｋｇ－１、中剂量组１．０ｇ·ｋｇ－１、高剂量组
２．０ｇ·ｋｇ－１，加生理盐水至２　ｍＬ）。正常对照组灌
胃等容量的生理盐水，２８　ｄ后处死大鼠。
２．５　肺组织匀浆制备　称取５００　ｍｇ肺组织，加入
生理盐水１．０ｍＬ，组织匀浆器充分研磨，５　０００　ｒ·
ｍｉｎ－１离心１０　ｍｉｎ，取上清０．１　ｍＬ，加生理盐水至
１．０ｍＬ，充分混匀，５　０００　ｒ·ｍｉｎ－１离心１０　ｍｉｎ，取上
清液备测。
２．６　病理标本制作　病理光镜标本制备，实验各组
于吸烟结束后次日取每只大鼠右中叶肺组织，制成石
蜡切片，进行ＨＥ染色，光学显微镜下观察病变组织。
２．７　血清及支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）的采集　
将大鼠用３％的戊巴比妥（２５　ｍｇ·ｋｇ－１）麻醉后仰卧
固定于操作台，切开胸部，暴露出气管和双肺，从心
脏取血约５　ｍＬ，３　５００　ｒ·ｍｉｎ－１，离心１０　ｍｉｎ，取血
清－２０℃保存。结扎右主支气管，在隆突上用套管
针穿刺至左肺，缓慢注入无菌生理盐水３　ｍＬ，每次
注入后立即回吸得到ＢＡＬＦ，重复３次。灌洗液纱
布过滤，回收率为６０％～７０％，混匀灌洗液进行白
细胞总数计数和白细胞比率测定。
２．８　测定血清和肺组织匀浆中Ｃ－反应蛋白、ＩＬ－８
水平　利用 Ｈ６０００－０２０全自动生化分析仪，大鼠
Ｃ－反应蛋白试剂盒、ＩＬ－８试剂盒（武汉博士德生物
有限公司）并严格按照说明书进行检测。
２．９　统计学处理　采用ＳＰＳＳ１３．０版统计软件进
行检验，计量资料用珚ｘ±ｓ表示，进行ｔ检验。Ｐ＜
０．０５表示差异有显著性。
３　结果
３．１　病理改变　模型组的大鼠肉眼观察可见肺体
积较正常对照组明显增大，颜色苍白，弹性减弱，有
数量不等的肺泡融合形成大疱。光镜下观察，可见
肺泡管、肺泡囊和肺泡明显扩张，肺泡壁变薄，并有
不同程度的断裂，形成大囊泡。低剂量、中剂量及高
剂量用药组大鼠的支气管黏膜上皮脱落较模型组减
轻，炎性细胞浸润以及肺泡壁断裂和肺泡腔扩大亦
较模型组减轻，较对照组严重。见图１。
图１　滇白珠水提物对各组大鼠肺组织形态学的影响（ＨＥ染色，
×１００）
Ａ．模型组；Ｂ．正常对照组；Ｃ．低剂量组；Ｄ．中剂量组；Ｅ．高剂量
组
Ｆｉｇ　１　Ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ　ｏｆ　ｗａｔｅｒ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｏｆ　Ｇａｕｌｔｈｅｒｉａ　ｌｅｕｃｏｃａｒｐａ　ｖａｒ　ｏｎ
ｒａｔｓ　ｌｕｎｇ　ｔｉｓｓｕｅ　ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ（ＨＥ　ｓｔａｉｎｉｎｇ，×１００）
Ａ．ｍｏｄｅｌ　ｇｒｏｕｐ；Ｂ．ｎｏｒｍａｌ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ；Ｃ．ｌｏｗ　ｄｏｓｅ　ｇｒｏｕｐ；Ｄ．
ｍｉｄｄｌｅ　ｄｏｓｅ　ｇｒｏｕｐ；Ｅ．ｈｉｇｈ　ｄｏｓｅ　ｇｒｏｕｐ
·０７４１· 中国医院药学杂志２０１３年第３３卷第１８期Ｃｈｉｎ　Ｈｏｓｐ　Ｐｈａｒｍ　Ｊ，２０１３　Ｓｅｐ，Ｖｏｌ　３３，Ｎｏ．１８
３．２　各组大鼠支气管肺泡灌洗液中细胞计数及分
类　模型组中炎症细胞总数增加，与正常对照组比
较差异有极显著性（Ｐ＜０．０１）；各剂量治疗组炎症
细胞总数较模型组明显减少，差异有极显著性（Ｐ＜
０．０１）；与正常对照组比较，模型组和治疗组中细胞
总数和中性粒细胞比例均显著升高，与模型组比较，
高、中、低剂量治疗组细胞总数和中性粒细胞比例显
著下降，并呈一定的剂量效应关系（Ｐ＜０．０１）。结
果见表１。
表１　各组大鼠ＢＡＬＦ细胞总数、白细胞比率比较（珚ｘ±ｓ，ｎ
＝１２）
Ｔａｂ　１　Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ　ｏｆ　ＢＡＬＥ　ｔｏｔａｌ　ｌｅｕｋｏｃｙｔｅｓ　ｃｏｕｎｔｓ　ａｎｄ
ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌ　ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅ　ｉｎ　ｅａｃｈ　ｇｒｏｕｐ　ｏｆ　ｒａｔｓ（珚ｘ±ｓ，ｎ＝１２）
组别 白细胞总数／（×１０８／Ｌ） 中性粒细胞比率／％
对照组 １．７±０．５　 １０．９±２．７
模型组 ６．８±０．５ａ ２４．５±５．０ａ
低剂量治疗组 ５．０５±０．２８ｂ　 １９．８±２．０ｂ
中剂量治疗组 ４．５７±０．３４ｂ　 １７．６±２．５ｂ
高剂量治疗组 ３．２±０．６ｂｃ　 １４．４±２．２ｂｃ
注：与对照组比较，ａＰ＜０．０１；治疗组与模型组比较，ｂ　Ｐ＜０．０５；高剂
量与低剂量组比较，ｃ　Ｐ＜０．０５
３．３　血清中ＣＲＰ、ＩＬ－８的测定　模型组血清ＣＲＰ、
ＩＬ－８明显较正常对照组增多，差异有极显著性（Ｐ＜
０．０１）；高、中、低剂量治疗组血清ＣＲＰ、ＩＬ－８均明显
较模型组减少，差异有显著性（Ｐ＜０．０５）；低、中剂
量组间血清 ＣＲＰ、ＩＬ－８水平均无明显差异（Ｐ＞
０．０５），高剂量组与低剂量组比较，差异有显著性（Ｐ
＜０．０５）。结果见表２。
表２　各组大鼠血清中ＣＲＰ、ＩＬ－８活性比较（珚ｘ±ｓ，ｎ＝１２）
Ｔａｂ　２　Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　ＣＲＰ、ＩＬ－８　ｉｎ　ｅａｃｈ
ｇｒｏｕｐ　ｏｆ　ｒａｔｓ（珚ｘ±ｓ，ｎ＝１２）
组别 ＣＲＰ／μｇ·ｍＬ－１　 ＩＬ－８／ｎｇ·ｍＬ－１
对照组 ０．４９５　８±０．０２３　 ０．５４±０．０８
模型组 １．２５９　６±０．０１７ａ １．１２±０．１８ａ
低剂量组 ０．９２８　９±０．０１２ｂ　 ０．８２±０．０９ｂ
中剂量组 ０．８３７　８±０．０３４ｂ　 ０．７０±０．３２ｂ
高剂量组 ０．４８１　８±０．０１８ｂｃ　 ０．６１±０．１４ｂｃ
注：与对照组比较，ａＰ＜０．０１；治疗组与模型组比较，ｂ　Ｐ＜０．０５；高剂
量与低剂量组比较，ｃ　Ｐ＜０．０５
３．４　各组大鼠肺组织匀浆中ＣＲＰ、ＩＬ－８的测定　
模型组大鼠肺组织ＣＲＰ、ＩＬ－８明显较正常对照组增
多，差异有极显著性（Ｐ＜０．０１）；各治疗组肺组织
ＣＲＰ、ＩＬ－８均明显较模型组减少，差异有显著性（Ｐ
＜０．０５或Ｐ＜０．０１）。低、中剂量组间血清ＣＲＰ、ＩＬ－
８水平无明显差异（Ｐ＞０．０５）。高剂量组与低剂量
组比较，差异有显著性（Ｐ＜０．０５）。结果见表３。
４　讨论
慢性阻塞性肺疾病（ＣＯＰＤ）是呼吸系统常见
病，是世界各国研究的热点。吸烟和反复下呼吸道
感 染是ＣＯＰＤ发生发展的主要原因。本实验通过
表３　各组大鼠肺组织匀浆中ＣＲＰ、ＩＬ－８活性比较（珚ｘ±ｓ，ｎ
＝１２）
Ｔａｂ　３　Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　ＣＲＰ，ＩＬ－８ｉｎ　ｌｕｎｇ　ｔｉｓ－
ｓｕｅ　ｈｏｍｏｇｅｎａｔｅ　ｏｆ　ｅａｃｈ　ｇｒｏｕｐ　ｏｆ　ｒａｔｓ（珚ｘ±ｓ，ｎ＝１２）
组别 ＣＲＰ／μｇ·ｍＬ－１　 ＩＬ－８／ｎｇ·ｍＬ－１
对照组 ０．４３２　７±０．０１３　 ０．６５±０．１３
模型组 １．２３８　０±０．０２５ａ １．２２±０．２３ａ
低剂量组 ０．９２６　３±０．０１５ｂ　 ０．９４±０．１５ｂ
中剂量组 ０．８２５　６±０．０２０ｂ　 ０．８３±０．１２ｂ
高剂量组 ０．５４１　６±０．００６ｂ　 ０．７８±０．１４ｂ
注：与对照组比较，ａＰ＜０．０１；治疗组与模型组比较，ｂ　Ｐ＜０．０５
熏吸香烟加气管内注射ＬＰＳ法建立ＣＯＰＤ大鼠模
型，结果显示模型组大鼠肺气肿形成，肺泡结构不完
整，肺泡壁变薄断裂，肺泡间隔也可见大量炎症细胞
浸润，黏膜下层、肌层、血管周围大量炎症细胞浸润，
符合ＣＯＰＤ病理改变，说明造模成功。利用滇白珠
水提物进行干预后结果显示与模型组相比，高、中、
低剂量治疗组病理炎症改变减轻，提示滇白珠水提
物可以减轻ＣＯＰＤ肺组织病理改变，对肺气肿结构
的改建有一定的防治作用。
气道炎症是慢性阻塞性肺疾病的基础病变，在
肺的不同部位有肺泡巨噬细胞、Ｔ淋巴细胞和中性
粒细胞增加。中性粒细胞在ＣＯＰＤ气道腔内聚集
增加，并通过释放蛋白酶、氧自由基等引起组织损
伤，参与ＣＯＰＤ气流阻塞的形成。ＩＬ－８是中性粒细
胞的重要趋化因子，诱导中性粒细胞脱颗粒，释放各
种酶引起组织严重损伤［３］，使得局部的炎性细胞增
加，促进甚至加重气道炎症反应，并在一定程度上反
映了气道炎症的严重程度［３］，可以作为评估呼吸道
炎症和受损程度的一个指标。当细菌或病毒侵入呼
吸道，细菌与毒素炎性坏死物可作为刺激物促使
ＴＮＦ－α释放入血，促使血循环中核转录因子和其他
转录因子激活来放大炎症，从而增加ＩＬ－８表达［５］。
实验结果显示模型组大鼠支气管肺泡灌洗液中细胞
总数和中性粒细胞百分数较正常对照组显著增高，
细胞总数和中性粒细胞比例显著下降，从而提示中
性粒细胞的活化和聚集是慢性支气管炎与肺气肿炎
症过程的一个重要环节。利用滇白珠水提物干预
后，各剂量治疗组与模型组比较，中性粒细胞明显减
少，高剂量组与低剂量组细胞总数及中性粒细胞百
分数有明显的差异，提示该药物对烟熏加脂多糖诱
发大鼠慢性阻塞性肺疾病模型有显著减少白细胞数
量的作用，呈现一定的剂量效应关系。本实验结果
还显示，模型组大鼠血清及肺组织中ＩＬ－８含量较
高，利用滇白珠水提物治疗后，各剂量治疗组血清及
肺组织中ＩＬ－８含量均较模型组降低，从而说明滇白
珠水提物能降低慢性阻塞性大鼠血清及肺组织中
·１７４１·中国医院药学杂志２０１３年第３３卷第１８期Ｃｈｉｎ　Ｈｏｓｐ　Ｐｈａｒｍ　Ｊ，２０１３　Ｓｅｐ，Ｖｏｌ　３３，Ｎｏ．１８
ＩＬ－８的表达，减少炎性细胞因子的释放，从而控制
气道炎症。
正常情况下呼吸道上皮细胞也可分泌ＣＲＰ，一
种急性时相反应蛋白，但当呼吸道受到病毒或细菌
感染时，它们所含的某些抗原成分或代谢产物，可激
活肺泡中的巨噬细胞也产生ＣＲＰ，使得其在患者血
清中的水平升高。ＣＲＰ可作为一种反映炎症、组织
损伤程度以及评价治疗反应的非特异性敏感指标。
从实验结果可知，模型组肺组织和血清的ＣＲＰ水平
高于正常对照组，提示ＣＲＰ在ＣＯＰＤ具有较高的
表达，是反映ＣＯＰＤ病情的重要生物学标志。高、
中、低剂量治疗组与ＣＯＰＤ模型组比较，肺组织和
血清ＣＲＰ均降低，提示高、中、低剂量治疗组能抑制
或减轻ＣＲＰ的表达，中、低剂量组效果相当，高剂量
效果最好。由此推测，滇白珠对大鼠ＣＯＰＤ模型的
炎症有一定的抑制作用，呈现一定的浓度依赖性。
综上所述，滇白珠水提物可以通过减少ＩＬ－８、
ＣＲＰ的表达，减少炎性物质的释放及激活，起到一
定的抗炎作用，为临床治疗ＣＯＰＤ提供理论依据。
参考文献：
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（２）：４７１－４７９．
［收稿日期］２０１２－１１－２０
［基金项目］国家自然科学基金资助（编号：８１０７０５５７）　［作者简介］仇丽茹，女，医学博士，主治医生，研究方向：肾脏疾病，电话：１３９８６０９５１９１；
Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｉｒｕｑｉｕ＠ｈｏｔｍａｉｌ．ｃｏｍ；ｘｉｏｎｇｗ７１７７＠１６３．ｃｏｍ
脂肪酸通过固醇调节元件结合蛋白１诱导足细胞的损伤
仇丽茹１，２，唐锦辉１，周建华１，Ｍｏｓｈｅ　Ｌｅｖｉ　２　 （１．华中科技大学同济医学院附属同济医院儿科，湖北 武汉４３００３０；２．美
国科罗拉多州大学医学院肾脏病研究中心，科罗拉多，奥罗拉８００４５，美国）
［摘要］　目的：确定脂代谢和固醇调节元件结合蛋白在糖尿病和肥胖相关肾病和足细胞损伤发病机制中的重要作用，为白桦
脂醇治疗糖尿病肾病提供理论依据。方法：游离脂肪酸２５０μｍ处理分化后的人足细胞４８　ｈ，检测足细胞脂滴形成和ＴＬＲ２／
ＴＬＲ４ｍＲＮＡ和活化的ＳＲＥＢＰ１以及ＴＬＲ４的蛋白表达情况以及炎性细胞因子ＩＬ－６的ｍＲＮＡ的表达；ＳＲＥＢＰ１ｃ脂质体转染
足细胞，检测足细胞脂滴形成和ＴＬＲ４和ＩＬ－６的表达。结果：游离脂肪酸２５０μｍ作用足细胞２４　ｈ即诱导人足细胞凋亡，
ＣＡＲＳ成像显示足细胞脂滴增加，活化的ＳＲＥＢＰ１的６５　ｋＤ部分表达增加，ＴＬＲ２／ＴＬＲ４的 ｍＲＮＡ和ＴＬＲ４的蛋白表达增
加，ＩＬ－６的ｍＲＮＡ增加；ＳＲＥＢＰ１ｃ转染足细胞后，足细胞内脂质合成明显增加，ＴＬＲ４的蛋白表达上调，ＩＬ－６ｍＲＮＡ 表达上
调。结论：ＳＲＥＢＰ１表达上调促进足细胞脂质沉积，诱导ＴＬＲ２／ＴＬＲ４通路活化，炎性细胞因子ＩＬ－６合成增加。ＳＲＥＢＰ１在２
型糖尿病和肥胖肾病足细胞损伤过程中发挥重要作用，为２型糖尿病肾病和肥胖性肾病提供新的治疗靶点。
［关键词］　足细胞；固醇调节元件结合蛋白；糖尿病肾病；白桦脂醇
［中图分类号］Ｒ９６９　　［文献标识码］Ａ　　［文章编号］１００１－５２１３（２０１３）１８－１４７２－０５
Ｆｒｅｅ　ｆａｔｔｙ　ａｃｉｄ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｐｏｄｏｃｙｔｅｓ　ｉｎｊｕｒｙ　ｂｙ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ＳＲＥＢＰ１
ＱＩＵ　Ｌｉ－ｒｕ１，２，ＴＡＮＧ　Ｊｉｎ－ｈｕｉ　１，ＺＨＯＵ　Ｊｉａｎ－ｈｕａ１，Ｍｏｓｈｅ　Ｌｅｖｉ　２（１．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｐｅｄｉａｔｒｉｃ　ｋｉｄｎｅｙ　ｄｉｓｅａｓｅ　ｏｆ　Ｔｏｎｇｊｉ
Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｔｏｎｇｊｉ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｓｃｈｏｏｌ，Ｈｕａｚｈｏｎｇ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｗｕｈａｎ　Ｈｕｂｅｉ　Ｃｈｉｎａ，４３００３０；２．Ｄｅｐａｒｔ－
ｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｄｉｖｉｓｉｏｎ　ｏｆ　Ｒｅｎａｌ　Ｄｉｓｅａｓｅｓ　ａｎｄ　Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ，Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　Ｃｏｌｏｒａｄｏ，Ａｕｒｏｒａ　Ｃｏｌｏｒａｄｏ　８００４５，ＵＳＡ）
ＡＢＳＴＲＡＣＴ：ＯＢＪＥＣＴＩＶＥ　Ｔｏ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ　ｔｈｅ　ｒｏｌｅ　ｏｆ　ｌｉｐｉｄ　ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｓｔｅｒｏｌ　ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ　ｅｌｅｍｅｎｔ　ｂｉｎｄｉｎｇ　ｐｒｏｔｅｉｎ　１
（ＳＲＥＢＰ１）ｉｎ　ｏｂｅｓｉｔｙ　ａｎｄ　ｄｉａｂｅｔｅｓ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｋｉｄｎｅｙ　ｄｉｓｅａｓｅ，ｈｕｍａｎ　ｐｏｄｏｃｙｔｅｓ　ｔｒｅａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｆｒｅｅ　ｆａｔｔｙ　ａｃｉｄ．ＭＥＴＨＯＤＳ　Ｔｈｅ　ｈｕ－
ｍａｎ　ｐｏｄｏｃｙｔｅｓ　ｗｅｒｅ　ｃｕｌｔｕｒｅｄ　ｗｉｔｈ　ｆｒｅｅ　ｆａｔｔｙ　ａｃｉｄ　ａｎｄ　ｔｒａｎｓｆｅｃｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ＳＲＥＢＰ１ｃ．Ｐｒｏｔｅｉｎ　ｌｅｖｅｌ　ｏｆ　ＳＲＥＢＰ１ｃ　ａｎｄ　ＴＬＲ４　ｗｅｒｅ
ｍＲＮＡ　ｌｅｖｅｌ　ｏｆ　ＴＬＲ２／ＴＬＲ４　ｗｅｒｅ　ｍｅａｓｕｒｅｄ．Ｐｒｏｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ　ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ　ｗｅｒｅ　ｃｈｅｃｋｅｄ．ＣＡＲＳ　ｉｍａｇｉｎｇ　ａｎｄ　Ｏｉｌ　Ｒｅｄ　Ｏ　ｍｅａｓ－
ｕｒｅｄ　ｔｈｅ　ｌｉｐｉｄ　ｏｆ　ｐｏｄｏｃｙｔｅｓ．ＲＥＳＵＬＴＳ　ＦＦＡ　ｃａｕｓｅｄ　ｐｏｄｏｃｙｔｅ　ｉｎｊｕｒｙ　ａｎｄ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＴＬＲ２／ＴＬＲ４　ｉｎ　ｃｕｌｔｕｒｅｄ
·２７４１· 中国医院药学杂志２０１３年第３３卷第１８期Ｃｈｉｎ　Ｈｏｓｐ　Ｐｈａｒｍ　Ｊ，２０１３　Ｓｅｐ，Ｖｏｌ　３３，Ｎｏ．１８