全 文 ：实用中医药杂志 2016年9月 第32卷9期（总第284期）
JOURNAL OF PRACTICAL TRADITIONAL CHINESE MEDICINE 2016.Vol.32 No.09
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论　著
［基金项目］　湖南省卫生厅科研课题编号（B2014-068），湖南省科技厅项目（2014SK3010）
三叶青具有祛风化痰、活血止痛的作用［1］，用于
治疗支气管炎、肺炎、咽喉炎及病毒性脑膜炎，外敷可
治疗扁桃体炎、蜂窝织炎和跌打损伤［2］。研究证明，三
叶青提取物中含有黄酮类有机酸类和花青素类等成分，
长期用于治疗慢性阻塞性肺疾病，但机制未完全明了。
本研究旨在通过三叶青水提物干预慢性阻塞性肺疾病大
鼠，观察IL-23和IL-17的改变，探讨其治疗慢性阻塞性
肺疾病的炎症机制。
1　方法与材料
实验动物：清洁级健康SD雄性大鼠30只（湖南
长沙开福区东创实验动物科技服务部提供，动物编号
HNACSDC20140293），体质量（284±19）g，鼠龄12
周。随机分为对照组、模型组和三叶青组，每组10只。
制备慢性阻塞性肺疾病模型：采用气管内两次滴注
LPS和反复烟熏的方法制作COPD大鼠模型［3］。在第1
天和第14天两次向气管内缓慢滴注脂多糖200μg，将大
鼠放入自制的有机玻璃烟熏箱内其右上角开一直径1cm
的通气孔，每天大鼠被动熏烟2次，每次时间30min，香
烟16支（黄果树牌香烟），2次间隔4h以上，共持续28
天。整个过程是通过三通管将点燃的香烟的烟雾吸入
100mL的注射器中，然后关闭吸烟通路一端，再打开三
通管的另一端将烟雾注入烟熏箱内，造成大鼠被动吸
烟。三叶青组在吸烟8天后每天吸烟前利用灌胃针灌三
叶青水提物1次，剂量为1.0g/kg，加生理盐水至2mL，
持续到实验结束。对照组不熏烟，8天后给予等量的生
理盐水灌胃。模型组吸烟8天后给予等量的生理盐水灌
胃。3组均28天后处死。
制备三叶青水提物：三叶青采集于湖南吉首郊区。
三叶青水提物对慢性阻塞性肺疾病大鼠IL-23和IL-17的影响
王小莉
（湖南吉首大学医学院，湖南 吉首 416000）
［中图分类号］R256.126.225 ［文献标识码］B ［文章编号］1004-2814（2016）09-0848-03
［摘　要］　目的：研究三叶青水提物对慢性阻塞性肺疾病（COPD）大鼠白细胞介素23（IL-23）和白细胞
介素17（IL-17）的影响及其作用机制。方法：清洁级健康雄性SD大鼠共30只，将其随机分成对照组、模型组和三
叶青组，每组10只。利用烟熏加气管内滴入脂多糖（LPS）复制COPD模型，第8天开始用三叶青水提物进行干预，
28天后采集标本，观察各组大鼠肺组织的病理变化，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清、肺组织及支气管肺
泡灌洗液（BALF）中IL-23和IL-17的表达情况。结果：血清中IL-23和IL-17的表达分别为模型组（25.38±1.25）
ng/L、（63.78±4.98）ng/L，对照组（10.23±0.35）ng/L、（40.28±3.08）ng/L，三叶青组（15.79±2.38）ng/L、
（49.97±3.65）ng/L，三组两两比较差异均有统计学意义（P＜0.05）。肺组织匀浆中的IL-23和IL-17表达分别为
模型组（45.83±2.22）ng/L、（90.68±0.12）ng/L，对照组（16.39±1.14）ng/L、（56.23±1.24）ng/L，三叶青组
（30.89±6.13）ng/L、（70.79±0.08）ng/L，三组两两比较差异均有统计学意义（P＜0.05）。BALF中的IL-23和
IL-17表达分别为模型组（35.83±3.22）ng/L、（83.34±4.35）ng/L，对照组（14.68±1.14）ng/L、（52.17±3.92）
ng/L，三叶青组（24.89±1.13）ng/L、（62.65±2.23）ng/L，三组两两比较差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论：
三叶青水提物可降低COPD大鼠血清、肺组织及支气管肺泡灌洗液中IL-23和IL-17的表达，对COPD炎症的防治有重
要的意义。
［关键词］　三叶青水提物；慢性阻塞性肺疾病；IL-23；IL-17
［Abstract］Objective：To evaluate the effect and molecular mechanism of extracts of Sanyeqing in preventing experimental
chronic obstructive pulmonary diseases in rats through measuring IL-23 and IL-17.Method：30 SD rats were divided into three groups
evenly in random， including the control group, the model group and the Sanyeqing group. COPD model was replicated by exposion to
cigarette smoke and endotracheal instillation of LPS, intervened by extracts of Sanyeqing at the 8th day. After 28 days, the specimens
were collected to observe the pathological changes in lung tissue and to detect the expression of of IL-23 and IL-17 in serum, lung
tissue and BALF by ELISA. Result： The expression of IL-23 and IL-17 in serum was 25.38±1.25ng/L and 63.78±4.98ng/L in the
model group， 10.23±0.35ng/L and 40.28±3.08ng/L in the control group and 15.79±2.38ng/L and 49.97±3.65ng/L in the Sanyeqing
group. There was statistical significance among the three groups in multiple comparison（P＜0.05）. The expression of IL-23 and IL-
17 in lung tissue was 45.83±2.22ng/L and 90.68±0.12ng/L in the model group, 16.39±1.14ng/L and 56.23±1.24ng/L in the control
group， 30.89±6.13ng/L and 70.79±0.08ng/L in the Sanyeqing treatment group. There was statistical significance among the three
groups in multiple comparison（P＜0.05）. The expression of IL-23 and IL-17 in BALF in the model group was 35.83±3.22ng/L and
83.34±4.35ng/L， 14.68±1.14ng/L and 52.17±3.92ng/L in the control group comparison and 24.89±1.13ng/L and 62.65±2.23ng/
L in the Sanyeqing group. There was statistical significance among the three groups in multiple comparison（P＜0.05）. Conclusion：
Sanyeqing could decrease the expression of IL-17 and IL-23 in serum, lung tissue and bronchoalveolar lavage fluid, which has important
significance in preventing and treating chronic obstructive pulmonary diseases.
［Key Words］ Extracts of Sanyeqing；Chronic obstructive pulmonary diseases；IL-23；IL-17
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称三叶青干燥全株1500g，将其切碎后浸泡，水煎3次，
每次30min，将3次水滤液合并浓缩为每毫升1g，得到三
叶青水提物。
采集血清：3组于第29天，以10%水合氯醛3.5mL/kg
腹腔注射麻醉后，仰卧固定于操作台，切开胸部，充分
暴露出心脏和双肺，用注射器心脏穿刺取血约5mL，室
温放置2h后，3500r/min离心10min，取血清于-20℃冰箱
保存，用于IL-23和IL-17的检测。
采集BALF：将大鼠右主支气管结扎，用套管针穿
刺至左肺，将3mL无菌生理盐水缓慢注入左肺，再缓慢
回抽，反复3次，回收灌注液，然后将灌洗液用纱布过
滤放入无菌离心管中，于1500r/min转速下离心10min，
收集上清液得到BALF，－20℃冻存备用，用于IL-23和
IL-17的检测。
制备肺组织匀浆：称取右肺上叶组织500mg，加生
理盐水1.0mL，用组织匀浆器充分研磨，5000r/min离心
10min，取上清液0.1mL，加生理盐水至1.0mL，充分混
匀，5000r/min离心10min，取上清液待测。
制备肺组织切片：取大鼠右中叶肺组织，包埋制成
石蜡块，然后切片进行HE染色，在光学显微镜下观察肺
组织的病变特点。
检测IL-23和IL-17的表达：应用IL-23和IL-17检测
试剂盒用酶联免疫试验对大鼠肺组织匀浆、血清和BALF
进行检测（ELISA试剂盒购买于武汉博士德生物有限公
司）。
采用SPSS13.0软件包进行数据处理，计量资料用
（x±s）表示，进行方差分析。P＜0.05为差异有统计学
意义。
2　实验结果
病理改变。肉眼观察显示模型组与正常组大鼠比
较，双肺颜色苍白，体积增大，弹性减弱，肺组织HE染
色光学显微镜下观察，表现为支气管壁黏膜上皮脱落、
变性和坏死，不同程度的炎性细胞浸润，肺泡壁不同程
度变薄并有部分断裂，肺泡扩张呈囊状。三叶青组与模
型组大鼠比较，可见支气管壁炎症程度有所减轻，肺泡
扩张、囊泡形成情况较模型组减轻，但较对照组重。
各组血清中IL-23和IL-17表达见表1。
表1　各组大鼠血清中IL-23和IL-17表达比较　（ng/L，x±s）
组 别 n IL-23 IL-17
对照组 10 10.23±0.35 40.28±3.08
模型组 10 25.38±1.25* 63.78±4.98*
三叶青组 10 15.79±2.38*△ 49.97±3.65*△
注：与对照组比较，*P＜0.05；与模型组比较，△P＜0.05。
各组BALF中IL-23和IL-17表达见表2。
表2　各组大鼠BALF中IL-23和IL-17表达比较　（ng/L，x±s）
组 别 n IL-23 IL-17
对照组 10 14.68±1.14 52.17±3.92
模型组 10 35.83±3.22* 83.34±4.35*
三叶青组 10 24.89±1.13△ 62.65±2.23△
注：与对照组比较，*P＜0.05；与模型组比较，△P＜0.05。
各组肺组织匀浆中IL-23和IL-17表达见表3。
表3　各组大鼠肺组织匀浆中IL-23和IL-17表达比较　（ng/L，x±s）
组 别 n IL-23 IL-17
对照组 10 16.39±1.14 56.23±1.24
模型组 10 45.83±2.22* 90.68±0.12*
三叶青组 10 30.89±6.13△ 70.79±0.08△
注：与对照组比较，*P＜0.05；与模型组比较，△P＜0.05。
3　讨　论
慢性阻塞性肺疾病是各种炎症细胞参与的全身异常
炎症反应性疾病， 以不完全可逆的气流受限为主要特
点［4］，其发病机制尚未完全明了，大量的研究表明气
道慢性炎症在COPD的发生发展中起重要作用。利用LPS
和烟熏制作COPD模型，形态学结果显示大鼠具有明显
的慢性支气管炎和肺气肿的改变，利用三叶青水提物干
预后气道炎症和肺气肿的形态学有较明显的改变，表明
三叶青能够有效地减轻COPD的炎症程度。
近年来，血清白介素-17（IL-17）、白介素-23（IL-
23）与慢阻肺的病情程度关系受到临床研究关注［5］。血
清IL-17、IL-23可反映慢阻肺炎性反应程度，与病情程
度存在一定的关系［6］。IL-23是由多种组织及细胞分泌
的一种炎症因子。IL-23在COPD、肺炎链球菌感染、牙
周疾病及炎症性肠病性关节炎等疾病的发生及发展过程
中均扮演着不可忽视的角色［7- 8］。本研究结果显示，模
型组血清、肺匀浆组织及BALF中的IL-23与对照组比较
显著增高，提示IL-23与COPD的发生发展具有一定的相
关性。利用三叶青提取物干预后大鼠血清、肺匀浆组织
和BALF中的IL-23表达明显下降，提示三叶青可以抑制
炎症介质IL-23的释放。
Th17是一类近些年来发现的淋巴细胞亚群，其主要
分泌 IL-17，发挥相应的效应。相关研究证实，在自身
免疫性疾病及炎症性疾病中，特别是脓毒症中，其外周
血中Th17细胞比例及IL-17明显高于健康对照者，并且
随着疾病严重程度的加重，Th17细胞数量及IL-17水平
也明显增加［9］。IL-17是诱导炎症反应的启动因子，可
以促进C-X-C趋化因子诱导中性粒细胞在呼吸道的激活
和募集，参与气道炎症。研究表明IL-17与包括感染性疾
病、哮喘在内的多种疾病密切相关［10］，COPD患者呼吸
道IL-17A/F的表达是上调的，且IL-17A基因缺失降低香
烟烟雾引起的炎症和肺泡Ⅱ型细胞凋亡［11］。有研究显
示，COPD患者外周血中Th17细胞数量及IL-17水平较正
常对照者显著升高，提示Th17在COPD的发病过程中起
着重要的作用［12］。Kristina等［13］报道慢阻肺急性加重
期造模小鼠肺组织中IL-17mRNA的水平明显升高，并且
伴有明显的中性粒细胞浸润，在给予IL-17抗体后小鼠肺
组织中的中性粒细胞浸润明显减少。本实验中COPD模
型组血清、肺匀浆组织及BALF中IL-17浓度与对照组比
较明显增高，三叶青水提物干预后IL-17水平的降低，提
示IL-17与COPD的形成过程有密切联系，三叶青对COPD
炎症介质IL-17有一定的抑制作用。通过检测外周血Th17
细胞水平，其不仅可作为评判COPD症状严重程度，还
可能为其治疗提供新的靶点。
综上所述，IL-23和IL-17参与了COPD的发病过程，
三叶青提取物可通过对IL-23和IL-17的抑制，减轻COPD
气道炎症及肺气肿程度，使炎症细胞的聚集和趋化程度
减轻。
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［收稿日期］2016-04-22
急性冠脉综合征（ACS）是导致冠心病患者住院和
死亡的主要原因，其发生主要与不稳定粥样硬化斑块破
裂、继发血栓形成有密切相关，而炎症反应是引起斑块
不稳定的主要因素，主要的炎症因子有可溶性细胞间粘
附分子-1（sICAM-1）、C反应蛋白（CRP）、血管细胞
粘附分子-1（sVCAM-1）等。我们观察通心络胶囊治疗
ACS后血中sICAM-1和CRP水平变化，以探讨通心络胶囊
对ACS的影响及机制，报道如下。
1　临床资料
共80例，均为2008年1月至2009年12月收治患者。
随机分为常规治疗组和通心络治疗组。常规治疗组40
例，男30例、女10例，年龄平均72.8岁。通心络治疗组
40例，男29例、女11例，年龄平均73.8岁。
诊断标准：参照2007年中华医学会心血管病学分
会制定的指南［1］。所有患者均有阵发性或持续性心前
区疼痛，依据临床表现及心电图、心肌酶谱、肌钙蛋白
通心络胶囊对急性冠脉综合征
可溶性细胞间粘附分子-1和C反应蛋白水平的影响
李　媛，田文华，张桂侠，党小军
（陕西省人民医院老年心内科、检验科，陕西 西安 710068）
［中图分类号］R256.224.14 ［文献标识码］B ［文章编号］1004-2814（2016）09-0850-03
［摘　要］　目的：观察通心络胶囊对急性冠脉综合征（ACS）可溶性细胞间粘附分子-1和C反应蛋白水平的
影响。方法：80例随机分为常规治疗组和通心络治疗组，观察治疗前、治疗后第14天血清可溶性细胞间粘附分子-1
（sICAM-1）、C反应蛋白（CRP）的变化。结果：两组sICAM-1和CRP水平均较本组治疗前下降（P＜0.05），
治疗后sICAM-1和CRP水平通心络组均明显低于常规治疗组（P＜0.05）。结论：通心络胶囊能明显降低ACS血中
sICAM-1和CRP水平，从而起到保护血管内皮的作用。
［关键词］　急性冠脉综合征；通心络胶囊；细胞间粘附分子-1；C反应蛋白
［Abstract］Objective：To observe the effect of Tongxinluo Capsule on soluble intercellular adhesion molecule-1 and
C-reactive protein in patients with acute coronary syndrome（ACS）.Method：40 patients with ACS were randomly divided
into two groups, the conventional therapy group and Tongxinluo group（conventional therapy+ Tongxinluo capsule）. To
observe the changes of serum soluble intercellular adhesion molecule-1（sICAM-1） and C-reactive protein（CRP）
before the treatment and the 14th day after the treatment. Result：After the treatment，the level of serum sICAM-1 and
CRP were significantly decreased in both group（P＜0.05）.It was lower in Tongxinluo group than that in conventional
therapy group significantly（P＜0.05）.Conclusion：Tongxinluo Capsule could decrease the level of serum sICAM-1 and
CRP in patients with ACS to play an important role in protecting blood vessel endothelium.
［Key Words］ Acute coronary syndrome；Tongxinluo；Intercellular adhesion molecule-1；C-reactive protein