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龙须菜芽诱导研究



全 文 :-1-
中国园艺文摘  2014 年第 12 期
龙须菜芽诱导研究
鞠玉栋,李跃森,吴水金,张少平,吴维坚,赖正锋
(福建省农业科学院甘蔗研究所,福建 漳州 363005)
摘  要:试验以龙须菜茎段为外植体,研究不同消毒方法和不同培养基对龙须菜芽诱导的影响,建立龙须菜芽诱
导体系。结果表明:最佳的外植体消毒方法是先用70%的酒精消毒 15 s,再用 0.1%的升汞消毒 6 min,效果最好;
诱导培养基以 MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L 效果最好。
关键词:龙须菜;芽;诱导
龙须菜为葫芦科多年生植物佛手瓜 (Sechium edule
Swarte) 的嫩梢,因其须长而卷故名龙须菜 [1]。龙须菜营养
丰富、食味独特、品质好、极具保健功能,因此深受消费
者欢迎,近年来种植面积不断扩大,市场前景广阔 [2-4]。
但由于种植多采用种瓜繁殖育苗,每粒种瓜只有 1粒
种子,种子与瓜皮不能分离,存在贮藏程序复杂、育苗时
间长、繁殖系数低、成本高等缺点,严重限制了其种植推
广。因此,探索龙须菜组培快繁技术,提高其繁殖系数,
降低育苗成本,对龙须菜的种植推广具有重要意义。
1  材料与方法
1.1  试验材料
以福建省农业科学院甘蔗研究所原生蔬菜资源圃保
育的龙须菜嫩梢为外植体。在田间选取健壮无病虫害的植
株嫩梢,去掉叶片和嫩梢顶端幼嫩部分,洗净后流水冲洗…
30…min 以上,将其移至超净工作台上备用。
1.2  试验方法
1.2.1  外植体的消毒… 取经前述处理后的龙须菜嫩梢,按
照以下 4 种处理进行外植体消毒:(1)70% 酒精 15… s,无
菌水冲洗 3~ 4 遍,0.1% 升汞 3…min,无菌水冲洗 3~ 4
遍。(2)70% 酒精 15… s,无菌水冲洗 3 ~ 4 遍,0.1% 升汞…
6…min,无菌水冲洗 3~ 4 遍。(3)70% 酒精 15… s,无菌水
冲洗3~4遍,0.1%升汞9…min,无菌水冲洗3~4遍。(4)70%
酒精 15…s,无菌水冲洗 3~ 4遍,0.1%升汞 12…min,无菌
水冲洗 3~ 4 遍。接种于MS+6-BA…2…mg/L 培养基上,
20…d 后统计萌芽数及污染率。
1.2.2  6-BA 对芽诱导的影响… 以 MS 培养基为基本培
养基,分别配制 6-BA 浓度为 0.5…mg/L、1.0…mg/L、…
2.0…mg/L、3.0…mg/L 的诱导培养基,每处理接种外植体
50 个,试验重复 3次,记录每个处理的出芽时间,20…d 后
统计出芽率,以此确定较理想的 6-BA浓度。
1.2.3  NAA 对芽诱导的影响… 在上述试验完成后,以含最
第一作者简介:鞠玉栋(1976-),男,副研究员;研究方向为园
艺植物引种、栽培与生物技术。
通讯作者:赖正锋,副研究员。E-mail:lzf8827@sina.com
项目来源:福建省发改委五新项目“龙须菜绿色生产技术研究与
示范推广”( 闽发改投资 [2012]931 号 );福建省农业科学院科技
创新团队项目 (CXTD-2-1320)。
适浓度 6-BA 的 MS 培养基为基础,分别添加 0…mg/L、…
0.05…mg/L、0.1…mg/L、0.15…mg/L 的 NAA,每处理
接种外植体 50 个,试验重复 3次。记录每个处理的出芽时
间,20…d 后统计出芽率,以此确定较理想的NAA浓度。
1.2.4  培养基与培养条件… 上述培养基均以MS培养基为
基本培养基,蔗糖浓度 30…g/L,琼脂 5…g/L,pH值 5.8,
培养温度 25 ~ 28℃,光照 1…500 ~ 2…000…lx。
2  结果与分析
2.1  不同消毒处理对外植体诱导的影响
龙须菜植株全身遍布生长有许多绒毛,导致其带菌较
多,因此,消毒相对较困难,需要较长的消毒时间才能达
到降低污染的目的。从表 1中可以看出,随着升汞消毒时
间的延长,污染率逐渐下降,但消毒时间过长则会导致外
植体白化,逐渐死亡,萌芽率降低;消毒时间过短,其污
染率迅速上升。因此,采用方法 (2) 消毒,既可保持较低
的污染率,又可保证较高的萌芽率,是较理想的消毒处理
方法。
表 1  不同消毒处理对外植体诱导的影响
编号 消毒方法
样本数
(个 )
污染数
( 个 )
污染率
(%)
萌芽数
( 个 )
1 70% 酒精 15…s,0.1% 升汞
3…min
50 48 96.0 2
2 70% 酒精 15…s,0.1% 升汞
6…min
50 29 58.0 18
3 70% 酒精 15…s,0.1% 升汞
9…min
50 25 50.0 8
4 70% 酒精 15…s,0.1% 升汞
12…min
50 21 42.0 3
2.2  6-BA 浓度对芽诱导的影响
从表2可以看出,6-BA可明显影响外植体芽诱导效果,
随着 6-BA浓度升高,诱导率逐渐增加,浓度为 2.0 时达
到最大,为 90.9%,之后开始下降,说明低浓度的 6-BA
促进芽的萌发,高浓度时反而对芽的萌发有抑制作用。但
6-BA浓度过高 ( ≥ 2.0…mg/L) 时,诱导的芽变脆、玻璃
化影响进一步的生长和分化。因此,较适合的 6-BA浓度
为 1.0…mg/L。
-2-
表 2  不同浓度 6-BA 对外植体芽诱导的影响
编号 浓度 (mg/L) 样本数 ( 个 ) 出芽时间 (d) 出芽数 ( 个 ) 诱导率 (%)
1 0.5 30 8 17 56.7
2 1.0 35 6 31 88.6
3 2.0 33 7 30 90.9
4 3.0 31 6 29 83.9
注:样本数 =接种数 ( 各 60 个 )- 污染数;出芽时间按肉眼可见茎段叶腋
芽萌发记录。
2.3  NAA 浓度对芽诱导的影响
从表 3可以看出,NAA浓度对出芽时间影响不大,随
着NAA浓度增加,诱导率略有上升。但NAA浓度过高
时则会导致外植体切口及表面长出大量愈伤组织,覆盖在
整个外植体表面,导致新诱导的芽死亡。因此,较适合的
NAA浓度为 0.05…mg/L。
表 3  不同浓度 NAA 对芽诱导外植体的影响
编号
浓度
(mg/L)
样本数
( 个 )
出芽时间
(d)
出芽数
( 个 )
诱导率
(%)
备注
1 0 36 6 32 88.9 较少愈伤
组织长出
2 0.05 35 4 32 91.4 较少愈伤
组织长出
3 0.10 37 5 33 89.1 长出较多
愈伤组织
4 0.15 34 5 27 79.4 长出大量
愈伤组织
注:样本数=接种数 ( 各 60 个 )- 污染数。
3  结论与讨论
外植体消毒能否过关是成功建立组培无菌体系的第 1
步,消毒采用的药品种类、浓度和消毒时间等是影响消毒
效果的关键因素;激素种类和浓度均能影响外植体的芽诱
导,不同的外植体对激素的需求具有一定的专一性 [5]。该
试验通过研究不同消毒方法和不同激素对龙须菜芽诱导的
影响,最终确定适合龙须菜外植体的消毒方法为 70% 的酒
精消毒 15… s,0.1% 的升汞消毒 6…min;芽诱导培养基为
MS+6-BA…1.0…mg/L+NAA…0.05…mg/L,诱导的芽生长
健壮无异常 ( 见附图 )。龙须菜无菌体系的建立为下一步建
立龙须菜组培快繁体系奠定了重要基础。
附图  龙须菜芽诱导
参考文献:
[1] 王阿桂.龙须菜的无公害栽培技术[J].长江蔬菜,2005,(4):
15.
[2] 徐维杰,杨寅桂,霍光华等.佛手瓜嫩蔓营养成分测定及研究
[J].江西农业大学学报,1996,18(3):321-327.
[3] 王子忠,张安文,徐长奎等.茎用佛手瓜栽培试验[J].安徽农业
科学,2000,28(2):226.
[4] 赖正峰,李华东.龙须菜的产业化栽培和保鲜技术[J].长江蔬
菜,2008,(8):27-28.
[5] 李浚明.植物组织培养教程[M].北京:中国农业大学出版社,
2002.
Study on bud induction of Sechium edule Swarte
JU…Yu-dong,…LI…Yue-sen,…WU…Shui-jin,…ZHANG…Shao-ping,…WU…wei-jian,…LAI…Zheng-feng
Abstract: The…effect…of…different…sterilization…methods,…hormone…kinds…and…concentrations…on…bud…induction…of…Sechium edule Swarte…were…studied…
in…this…test.…The…results…indicated…that…the…most…effective…sterilization…treatment…was…70%…alcohol…15…s,…0.1%HgCl2…6…min;…The…optimum…initial…culture…
medium…is…MS+6-BA…1.0…mg/L+NAA…0.05…mg/L.
Key words: Sechium edule Swarte; bud;…induction