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不同产地和品种对浙贝母主成分与生理生化特性的影响



全 文 :不同产地和品种对浙贝母主成分
与生理生化特性的影响
沈 秋1,周 洁2,王卓琼1,陈玉玲1,王忠华1*
(1. 浙江万里学院生物技术研究所,浙江 宁波 315100;2. 浙江理工大学生命科学学院,浙江 杭州 310018)
摘要 目的:研究不同产地和品种对浙贝母生物碱含量与内在生理生化特性如苯丙氨酸解氨酶(PAL)、多酚
氧化酶(PPO)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)的活性及叶绿素含量等的影响。方法:分别采用超声波法和
常规生理生化技术提取浙贝母总生物碱和 PAL、PPO、CAT、POD 及叶绿素,并采用分光光度法进行含量与活性测
定。结果:不同产地对浙贝母生物碱含量的影响较大,其中狭叶浙贝母鳞茎以金华磐安种植的最高,为 0. 0158%,
其他产地的含量比较接近。不同品种生物碱含量测定结果表明不同组织部位的含量不尽相同,其中鳞茎和地上茎
的生物碱含量以狭叶贝母最高,其次为宽叶、多籽、大个和小个;而叶中生物碱含量以多籽贝母为最高,其次为宽
叶、狭叶、小个和大个。生理生化检测结果表明 5 个品种中狭叶贝母的各项酶活性和叶绿素含量最高;其他品种酶
活性和叶绿素含量各有差异,且不同部位活性也各不相同。从不同产地来看,磐安、章水、南通的贝母在不同酶活
性和叶绿素含量上各有差异,其中在 PAL、CAT、POD的活性上,章水贝母均要高于金华和南通贝母,而从 PPO的活
性和叶绿素的含量来看,则是金华贝母要高于章水和南通贝母。结论:不同产地和品种对浙母主成分生物碱含量
与生理生化特性有明显影响。
关键词 浙贝母;生物碱含量;生理生化特性
中图分类号:R284. 1 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2011)10-1503-06
收稿日期:2011-04-19
基金项目:浙江省科技厅重点项目(2009C12088) ;浙江省大学生科技创新基金(2010R419022)
作者简介:沈秋(1989-) ,女,本科生,专业方向:生物技术。
* 通讯作者:王忠华,E-mail:wang1972@ zwu. edu. cn。
贝母属百合科,种类繁多。主要分布在江苏南
部、浙江北部和湖南,也分布于日本。其中浙贝母
Fritillaria thunbergii Miq. 别名浙贝、大贝、象贝、元
宝贝、珠贝。其干燥的鳞茎是著名的中药材“浙八
味”之一。浙贝母性喜温暖湿润气候,适宜在 10 ~
25 ℃气温中生长,较耐寒,怕高温,忌渍水,要求土
层深厚,对土壤质地要求严。光照、温度、水分、土壤
质地等都会影响浙贝母的生长,会直接影响浙贝母
的产量和品质,对其药用成分的形成、积累也会起到
一定的影响〔1〕。
我国贝母的出口中浙贝母占总量的 40%。同
时浙贝母是贝母族中个体最大的一种,浙贝母主要
分布在樟溪河及鄞江流域两岸,主产区是章水、鄞江
两镇,龙观乡也有少量种植,商品贝母面积为 3500
亩,总产量 900 t 左右,占全省产量的 85%以上,其
中尤以章水贝母最为有名,是产区农户的主要经济
收入〔2〕。
本文分别以浙江宁波鄞州区章水、金华磐安、江
苏南通采集的狭叶浙贝、宽叶浙贝、多籽浙贝、大个
种、小个种 5 个不同品种为材料,研究不同产地与品
种对浙贝母生物碱含量及内在生理生化特性包括苯
丙氨酸解氨酶(PAL)、多酚氧化酶(PPO)、过氧化氢
酶(CAT)、过氧化物酶(POD)的活性及叶绿素含量
等的影响,以期为建立浙贝母品种原产地保护技术
与育种应用提供一定的基础性数据。
1 材料和方法
1. 1 材料 2010 年分别从金华磐安县、宁波市章
水镇和江苏南通市的浙贝母种植基地采集狭叶浙
贝、宽叶浙贝、多籽浙贝、大个种、小个种 5 个品种,
部分材料由浙江省中药研究所沈晓霞高级工程师提
供。标准对照品购自浙江省药品检验所。
1. 2 方法
1. 2. 1 样品预处理:将新鲜贝母洗净后晾干水分,
剪下叶、茎、花、鳞茎,- 18 ℃冰箱分装保存。
1. 2. 2 对照品溶液的制备:鳞茎:精密称取 2. 5 mg
浙贝素甲于 50 mL容量瓶中,用氯仿溶解并定容,得
50 μg /mL的贝母素标准溶液。地上茎、叶:精密称
取 1. 8 mg浙贝素甲于 50 mL容量瓶中,用氯仿溶解
并定容,得 36 μg /mL的贝母素标准溶液。
1. 2. 3 标准曲线的绘制:精密吸取贝母素标准品
溶液 0. 5、1. 0、1. 5、2. 0、2. 5、3. 0 mL 分别置于 6 只
100 mL 的具塞锥形瓶中,分别加入 9. 5、9. 0、8. 5、
8. 0、7. 5、7. 0 mL氯仿,再分别加入 5. 0 mL 蒸馏水
和 2. 0 mL pH 4. 5 的 0. 04%溴甲酚绿缓冲液,密塞,
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DOI:10.13863/j.issn1001-4454.2011.10.021
剧烈振摇 3 min 后,移入 60 mL 分液漏斗中,静置
0. 5 h。取 5 mL 下层氯仿液置于已加入了 1. 0 mL
的 0. 001 mol /L氢氧化钾的无水乙醇溶液的具塞刻
度试管中,摇匀,随行空白对照。最后,在 620 nm处
测定光密度,并用最小二乘法,以吸收值为纵坐标,
溶液浓度为横坐标,即得回归方程。
1. 2. 4 样品生物碱含量的测定:称取 2 g 浙贝母
粉末,置于 100 mL具塞锥形瓶中,加入 60 mL 80%
乙醇,在超声波仪中以1 280 w超声波输出功率处理
140 s后,摇床振荡提取 48 h,转速为 130 r /min,用
中速定性滤纸进行过滤,得到粗液,加热使醇提液挥
发蒸干,再加入 20 mL 2%的盐酸,溶解,过滤,滤液
用氨水调 pH值至 11。然后用氯仿萃取 3 次,每次
10 mL,萃取液蒸干,得到浸膏,最后用氯仿定容至 1
mL。再用分光光度计在 620 nm 下测其光密度,按
照标准曲线得到的回归方程,计算出生物碱的含
量〔5〕。每个样品重复 3 次。
1. 2. 5 主要生理生化特性测定:对上述不同浙贝
母组织进行生理生化指标测定,其中苯丙氨酸解氨
酶活性测定采用分光光度法进行〔3〕;叶绿素含量测
定采用赵亚华等的方法进行〔4〕;过氧化氢和过氧化
物酶活性的测定参照张志良等的方法进行〔5〕。上
述生理生化指标每个处理重复 3 次。
2 结果与分析
2. 1 不同产地和品种对浙贝母生物碱含量的影响
不同产地和品种对浙贝母鳞茎、叶片和茎中总生
物碱含量的影响结果见表 1。由表 1 可看出,不同
产地浙贝母总生物碱含量依次为:磐安、章水、南通。
这可能和不同产地的气候、土壤、光照等条件有关。
不同品种浙贝母生物碱含量也存在差异,且在同一
品种不同组织中也有一定差异。鳞茎和地上茎的生
物碱含量以狭叶贝母最高,其次为宽叶、多籽、大个
种和小个种;而叶中生物碱含量以多籽贝母为最高,
其次为宽叶、狭叶、小个种和大个种。
表 1 不同产地和品种对浙贝母生物碱含量的影响(%)
品种和产地 鳞茎 叶片 茎
章水狭叶贝母 0. 0137 ± 0. 0011 0. 0064 ± 0. 0006 0. 0101 ± 0. 0009
磐安狭叶贝母 0. 0146 ± 0. 0013 0. 0071 ± 0. 0005 0. 0115 ± 0. 0008
南通狭叶贝母 0. 0124 ± 0. 0009 0. 0055 ± 0. 0004 0. 0096 ± 0. 0007
章水宽叶贝母 0. 0131 ± 0. 0010 0. 0062 ± 0. 0006 0. 0098 ± 0. 0009
磐安宽叶贝母 0. 0139 ± 0. 0012 0. 0068 ± 0. 0006 0. 0109 ± 0. 0010
南通宽叶贝母 0. 0121 ± 0. 0009 0. 0052 ± 0. 0005 0. 0089 ± 0. 0008
章水多籽贝母 0. 0121 ± 0. 0013 0. 0057 ± 0. 0004 0. 0092 ± 0. 0009
磐安多籽贝母 0. 0131 ± 0. 0012 0. 0062 ± 0. 0005 0. 0101 ± 0. 0009
南通多籽贝母 0. 0118 ± 0. 0009 0. 0051 ± 0. 0004 0. 0087 ± 0. 0007
章水大个种 0. 0115 ± 0. 0010 0. 0055 ± 0. 0006 0. 0089 ± 0. 0008
磐安大个种 0. 0120 ± 0. 0011 0. 0060 ± 0. 0006 0. 0099 ± 0. 0009
南通大个种 0. 0114 ± 0. 0009 0. 0048 ± 0. 0004 0. 0085 ± 0. 0008
章水小个种 0. 0117 ± 0. 0011 0. 0052 ± 0. 0006 0. 0084 ± 0. 0008
磐安小个种 0. 0116 ± 0. 0011 0. 0059 ± 0. 0005 0. 0091 ± 0. 0009
南通小个种 0. 0115 ± 0. 0008 0. 0047 ± 0. 0004 0. 0081 ± 0. 0006
注:表中数据为平均数 ±标准差
2. 2 不同产地和品种对苯丙氨酸解氨酶(PAL)活
性的影响 苯丙氨酸解氨酶(phenylalanine ammoni-
alysase,PAL)是一种只存在于植物及微生物细胞内
的酶,它存在于所有绿色植物中,已从水稻、小麦、玉
米等多种植物中得到分离纯化。PAL是连接生物初
级代谢和苯丙烷类代谢、催化苯丙烷类代谢第一步
反应的酶,是苯丙烷类代谢的关键酶和限速酶,它是
苯丙烷类代谢途径中研究最多的酶。苯丙烷类代谢
可生成类黄酮、木质素、苯甲酸酯糖苷等多种次生代
谢产物,这些次生产物在植物的生长发育、抗病、抗
逆反应中起着重要作用〔6〕。因此 PAL 活性可以作
为植物抗逆境能力的一个生理指标。本试验对不同
品种和产地浙贝母不同组织的苯丙氨酸解氨酶活性
进行了检测,结果见表 2。由表 2 可见,不同品种、
产地和组织对苯丙氨酸解氨酶活性有较大影响,其
中就不同品种而言,以狭叶和大个种活性较高;从产
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地来看,宁波章水的活性最高,其次为金华磐安,江
苏南通的活性最低;从不同组织部位来看,鳞茎和叶
片中的活性较高,而茎和花的 PAL 活性较低,前二
者接近后二者的 2 倍。
表 2 不同产地和品种对浙贝母苯丙氨酸解氨酶活性的影响(U/g·h)
品种和产地 鳞茎 叶片 茎 花
章水狭叶贝母 11. 88 ± 1. 01 12. 51 ± 1. 24 6. 82 ± 0. 48 7. 45 ± 0. 75
磐安狭叶贝母 10. 58 ± 1. 03 11. 61 ± 1. 04 6. 61 ± 0. 54 7. 21 ± 0. 61
南通狭叶贝母 10. 34 ± 0. 92 11. 13 ± 1. 04 6. 24 ± 0. 52 6. 95 ± 0. 62
章水宽叶贝母 10. 48 ± 0. 85 11. 42 ± 1. 12 6. 51 ± 0. 39 7. 13 ± 0. 62
磐安宽叶贝母 10. 21 ± 0. 84 11. 05 ± 1. 01 5. 86 ± 0. 48 6. 86 ± 0. 63
南通宽叶贝母 9. 86 ± 0. 83 10. 35 ± 0. 89 5. 36 ± 0. 46 6. 12 ± 0. 58
章水多籽贝母 10. 76 ± 0. 95 11. 52 ± 1. 08 6. 64 ± 0. 62 7. 23 ± 0. 65
磐安多籽贝母 10. 82 ± 1. 01 11. 38 ± 0. 97 6. 23 ± 0. 47 7. 18 ± 0. 68
南通多籽贝母 10. 15 ± 0. 96 11. 05 ± 1. 08 6. 05 ± 0. 54 6. 48 ± 0. 63
章水大个种 11. 56 ± 1. 23 12. 42 ± 1. 35 6. 76 ± 0. 38 7. 34 ± 0. 64
磐安大个种 10. 84 ± 1. 14 11. 86 ± 0. 89 6. 42 ± 0. 57 7. 21 ± 0. 72
南通大个种 10. 52 ± 0. 86 11. 53 ± 1. 21 6. 58 ± 0. 49 7. 18 ± 0. 48
章水小个种 10. 58 ± 1. 05 10. 98 ± 1. 07 6. 71 ± 0. 59 7. 28 ± 0. 62
磐安小个种 10. 82 ± 1. 07 11. 02 ± 0. 85 6. 78 ± 0. 74 7. 35 ± 0. 75
南通小个种 9. 58 ± 0. 58 9. 85 ± 10. 86 5. 86 ± 0. 48 6. 25 ± 0. 61
注:表中数据为平均数 ±标准差
2. 3 不同产地和品种对多酚氧化酶(PPO)活性的
影响 PPO是一类质体酶,主要存在于叶绿体、黄色
体和白色体等内膜上,与分布于细胞质中的酚类底
物在正常情况下是隔离的。只有当膜破裂,酶释放
出来,酶才催化酚氧化,导致褐变生物体内的 PPO
分布是不均匀的。在没有质体的组织,如植物筛管
等,不含 PPO。在植物中,该酶的分布与物种及年龄
有关。不同物种或同一物种的不同品种,或同一植
株的不同部位,甚至同一部位的不同发育时期,PPO
的含量、种类都有所不同。一般来说,幼嫩部位的
PPO含量高于老化部位〔10〕。本试验对不同品种和
产地浙贝母不同组织的多酚氧化酶活性进行了检
测,结果见表 3。由表 3 可见,不同品种、产地和组
织对多酚氧化酶的活性也有较大影响,以狭叶浙贝
母的活性最高,其他依次为大个种、宽叶贝母、多籽
贝母和小个种;从产地来看,金华磐安种植的活性最
高,其次为宁波章水,江苏南通的活性最低;从不同
组织部位来看,叶片和茎中的活性较高,其次为花,
鳞茎中的 PPO 活性最低。同时,笔者还发现,PPO
的酶活与植株的花序有无和大小有关系。花序少且
小的 PPO酶活较小,花序多且大的酶活较高。
2. 4 不同产地和品种对过氧化氢酶(CAT)活性的
影响 过氧化氢酶(Hydrogen Peroxidase)又名触酶
(Catalase,CAT) ,是一种广泛存在于生物组织中的
氧化还原酶。生物体内的活性氧和自由基的积累,
会导致膜脂过氧化,从而引起生物体本身代谢的紊
乱。H2O2 是有毒害作用的活性氧的前体
〔11〕。CAT
的功能主要清除体内的过氧化氢,从而使细胞免于
遭受 H2O2 的毒害。本试验对不同品种和产地浙贝
母不同组织的过氧化氢酶活性进行了检测,结果见
表 4。由表 4 可见,不同品种、产地和组织对过氧化
氢酶的活性有较大影响,以狭叶浙贝母的活性最高,
其他依次为大个种、宽叶贝母、多籽贝母和小个种;
从产地来看,金华磐安种植的活性最高,其次为宁波
章水,江苏南通的活性最低;从不同组织部位来看,
叶片和茎中的活性较高,其次为鳞茎,花中的 CAT
活性最低。
2. 5 不同产地和品种对过氧化物酶(POD)活性的
影响 过氧化物酶活性与植物的代谢强度及抗病能
力相关,可以使植物细胞免受毒性物质的侵害。与
过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)一起构
成了生物体内重要的酶促反应防御体系,从而维护
生物体内细胞正常的生理代谢和生化反应〔12〕。本
试验对不同品种和产地浙贝母不同组织的过氧化物
酶活性进行了检测,结果见表 5。由表 5 可见,不同
品种、产地和组织对过氧化物酶的活性也有较大影
响,以狭叶浙贝母的活性最高,其他依次为大个种、
宽叶贝母、多籽贝母和小个种;从产地来看,金华磐
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表 3 不同产地和品种对浙贝母多酚氧化酶活性的影响(U/g·h)
品种和产地 鳞茎 叶片 茎 花
章水狭叶贝母 28. 58 ± 2. 42 41. 58 ± 3. 86 39. 58 ± 3. 57 35. 82 ± 3. 01
磐安狭叶贝母 29. 32 ± 2. 95 42. 27 ± 3. 84 41. 22 ± 4. 12 36. 87 ± 3. 42
南通狭叶贝母 27. 56 ± 2. 52 40. 21 ± 4. 10 38. 42 ± 3. 21 34. 25 ± 3. 52
章水宽叶贝母 26. 43 ± 2. 47 34. 32 ± 3. 05 33. 24 ± 3. 12 33. 52 ± 2. 42
磐安宽叶贝母 27. 42 ± 2. 31 36. 25 ± 2. 65 35. 58 ± 3. 54 34. 52 ± 3. 24
南通宽叶贝母 25. 48 ± 2. 23 35. 42 ± 3. 15 33. 12 ± 3. 01 32. 85 ± 3. 12
章水多籽贝母 26. 52 ± 2. 24 35. 47 ± 3. 43 34. 17 ± 3. 05 33. 64 ± 2. 52
磐安多籽贝母 27. 24 ± 2. 55 36. 12 ± 3. 42 35. 42 ± 3. 16 34. 86 ± 3. 42
南通多籽贝母 25. 67 ± 2. 14 35. 62 ± 3. 32 33. 12 ± 3. 01 33. 12 ± 3. 08
章水大个种 28. 12 ± 2. 17 40. 20 ± 3. 82 36. 85 ± 3. 52 34. 85 ± 2. 53
磐安大个种 28. 98 ± 2. 42 40. 86 ± 3. 86 37. 56 ± 3. 21 35. 92 ± 3. 42
南通大个种 27. 85 ± 2. 43 39. 52 ± 3. 48 35. 42 ± 3. 27 34. 21 ± 3. 54
章水小个种 24. 58 ± 2. 14 32. 28 ± 3. 01 30. 52 ± 3. 01 30. 62 ± 2. 42
磐安小个种 26. 52 ± 2. 59 33. 85 ± 2. 35 31. 23 ± 3. 14 32. 33 ± 3. 12
南通小个种 23. 85 ± 2. 39 31. 02 ± 3. 05 29. 54 ± 2. 54 29. 99 ± 2. 82
注:表中数据为平均数 ±标准差
表 4 不同产地和品种对浙贝母过氧化氢酶活性的影响(mg/g·min)
品种和产地 鳞茎 叶片 茎 花
章水狭叶贝母 3. 81 ± 0. 29 5. 18 ± 0. 42 4. 45 ± 0. 39 3. 35 ± 0. 21
磐安狭叶贝母 3. 88 ± 0. 28 5. 21 ± 0. 51 4. 52 ± 0. 36 3. 41 ± 0. 24
南通狭叶贝母 3. 45 ± 0. 24 5. 04 ± 0. 46 4. 42 ± 0. 33 3. 31 ± 0. 29
章水宽叶贝母 3. 68 ± 0. 31 4. 95 ± 0. 43 4. 38 ± 0. 24 3. 21 ± 0. 28
磐安宽叶贝母 3. 71 ± 0. 21 4. 98 ± 0. 33 4. 42 ± 0. 39 3. 32 ± 0. 32
南通宽叶贝母 3. 35 ± 0. 38 4. 86 ± 0. 45 4. 32 ± 0. 36 3. 18 ± 0. 28
章水多籽贝母 3. 52 ± 0. 31 4. 75 ± 0. 35 4. 28 ± 0. 41 3. 18 ± 0. 38
磐安多籽贝母 3. 58 ± 0. 29 4. 62 ± 0. 39 4. 32 ± 0. 31 3. 27 ± 0. 26
南通多籽贝母 3. 31 ± 0. 30 4. 36 ± 0. 36 4. 12 ± 0. 34 3. 09 ± 0. 25
章水大个种 3. 78 ± 0. 32 5. 01 ± 0. 49 4. 39 ± 0. 32 3. 28 ± 0. 25
磐安大个种 3. 81 ± 0. 33 5. 12 ± 0. 55 4. 42 ± 0. 39 3. 32 ± 0. 28
南通大个种 3. 56 ± 0. 26 4. 98 ± 0. 47 4. 28 ± 0. 38 3. 18 ± 0. 23
章水小个种 3. 21 ± 0. 22 4. 58 ± 0. 40 4. 12 ± 0. 31 3. 08 ± 0. 25
磐安小个种 3. 35 ± 0. 29 4. 61 ± 0. 57 4. 24 ± 0. 37 3. 11 ± 0. 29
南通小个种 3. 18 ± 0. 25 4. 35 ± 0. 41 3. 98 ± 0. 32 2. 91 ± 0. 21
注:表中数据为平均数 ±标准差
安种植的活性最高,其次为宁波章水,江苏南通的活
性最低;从不同组织部位来看,叶片和茎中的活性较
高,其次为鳞茎,花中的 POD活性最低。
2. 6 不同产地和品种对叶绿素含量的影响 叶片
叶绿素含量与光合作用密切相关,是反映叶片生理
状态的重要指标。在植物光合生理、发育生理和抗
性生理研究中经常需要测定叶绿素含量。叶绿素含
量也是指导作物栽培生产和选育作物品种的重要指
标。本试验对不同品种和产地浙贝母叶片中叶绿素
含量进行了检测,结果见表 6。由表 6 可见,不同品
种和产地对浙贝母的叶绿素含量影响不大,狭叶贝
母和大个种略高于其他 3 种,这可能和不同品种的
叶色深浅有关〔1〕。从不同产地来看,章水种植的最
高,其次为金华磐安,江苏南通的最低。
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表 5 不同产地和品种对浙贝母过氧化物酶活性的影响(mg/g·min)
品种和产地 鳞茎 叶片 茎 花
章水狭叶贝母 1. 84 ± 0. 10 1. 95 ± 0. 08 1. 98 ± 0. 09 1. 75 ± 0. 06
磐安狭叶贝母 1. 95 ± 0. 15 2. 31 ± 0. 18 2. 14 ± 0. 18 1. 82 ± 0. 13
南通狭叶贝母 1. 83 ± 0. 12 1. 88 ± 0. 17 1. 86 ± 0. 12 1. 67 ± 0. 08
章水宽叶贝母 1. 78 ± 0. 11 1. 92 ± 0. 06 1. 89 ± 0. 07 1. 68 ± 0. 09
磐安宽叶贝母 1. 83 ± 0. 12 2. 15 ± 0. 12 2. 08 ± 0. 12 1. 73 ± 0. 18
南通宽叶贝母 1. 68 ± 0. 10 1. 78 ± 0. 16 1. 72 ± 0. 11 1. 62 ± 0. 12
章水多籽贝母 1. 79 ± 0. 11 1. 85 ± 0. 09 1. 91 ± 0. 09 1. 69 ± 0. 11
磐安多籽贝母 1. 92 ± 0. 13 2. 04 ± 0. 19 2. 08 ± 0. 12 1. 72 ± 0. 15
南通多籽贝母 1. 86 ± 0. 16 1. 68 ± 0. 22 1. 84 ± 0. 10 1. 59 ± 0. 12
章水大个种 1. 86 ± 0. 11 1. 96 ± 0. 09 1. 99 ± 0. 10 1. 81 ± 0. 15
磐安大个种 1. 99 ± 0. 12 2. 28 ± 0. 14 2. 18 ± 0. 16 1. 91 ± 0. 19
南通大个种 1. 85 ± 0. 11 1. 91 ± 0. 16 1. 89 ± 0. 13 1. 75 ± 0. 15
章水小个种 1. 53 ± 0. 13 1. 72 ± 0. 09 1. 68 ± 0. 05 1. 42 ± 0. 12
磐安小个种 1. 61 ± 0. 16 2. 01 ± 0. 14 1. 86 ± 0. 18 1. 58 ± 0. 13
南通小个种 1. 41 ± 0. 12 1. 62 ± 0. 11 1. 52 ± 0. 11 1. 35 ± 0. 11
注:表中数据为平均数 ±标准差
表 6 不同产地和品种对浙贝母叶片叶绿素含量的影响
产地 品种 叶绿素含量 mg /g
金华磐安 狭叶贝母 5. 15 ± 0. 47
宽叶贝母 4. 56 ± 0. 41
多籽贝母 4. 74 ± 0. 38
大个种 4. 95 ± 0. 45
小个种 4. 42 ± 0. 38
宁波章水 狭叶贝母 5. 32 ± 0. 51
宽叶贝母 4. 68 ± 0. 43
多籽贝母 4. 85 ± 0. 44
大个种 5. 18 ± 0. 48
小个种 4. 59 ± 0. 52
江苏南通 狭叶贝母 4. 98 ± 0. 49
宽叶贝母 4. 42 ± 0. 33
多籽贝母 4. 52 ± 0. 23
大个种 4. 86 ± 0. 43
小个种 4. 21 ± 0. 34
注:表中数据为平均数 ±标准差。
3 讨论
3. 1 不同产地和品种对浙贝母生物碱含量的影响
根据试验所得不同产地的浙贝母鳞茎中的总生物
碱的含量依次为:磐安、章水、南通。其中产地为南
通的浙贝母鳞茎中总生物碱含量相差较少。这可能
和不同产地的气候、土壤、光照等条件有关。根据实
验结果可看出不同品种浙贝母地上茎和鳞茎中生物
碱的含量从高至低依次为:狭叶浙贝、宽叶浙贝、多
籽浙贝、大个种、小个种。根据实验结果,不同品种
浙贝母叶中生物碱的含量从高至低依次为:多籽浙
贝、宽叶浙贝、狭叶浙贝、小个种、大个种。根据崔培
章的研究发现,浙贝母各品种间的光和强度有较大
差异,多籽贝母高于狭叶贝母和宽叶贝母。从叶片
性状看,多籽贝母叶面蜡质较薄,叶片伸展度好,有
利于光能的捕获。据此分析多籽贝母的光和强度为
最强,从而增加了生物碱的形成和积累量。所以其
总生物碱含量高于其他 2 个品种〔9〕。
根据实验结果,浙贝母鳞茎、地上茎和叶 3 个部
分中生物碱含量最高的是鳞茎,叶和地上茎的含量
高低因品种不同而不同。地上茎中的总生物碱含量
为鳞茎中的50. 6% ~60. 7%。叶中的总生物碱含量
为鳞茎中的33. 3% ~38. 3%。证明地上茎和叶同样
具有一定的药用价值,且根据研究〔10〕证明地上茎中
的总皂苷含量高于鳞茎,则理论上地上茎的祛痰作
用将优于鳞茎。此外可以通过两者药效实验比较进
行深入研究。
3. 2 不同产地和品种对浙贝母生理生化特性的影
响 从不同产地来看,磐安、章水、南通的贝母在不
同酶活性和叶绿素含量上各有差异,其中在 PAL、
CAT、POD的活性上,章水贝母均要高于金华和南通
贝母,而从 PPO 的活性和叶绿素的含量来看,则是
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金华贝母要高于章水和南通贝母。这可能和两地的
生长环境有关。从日照情况来看,2010 年 2 月浙北
月日照时数为 73 ~ 110 h,浙中南地区月日照时数为
65 ~ 93 h。从降水情况来看,降雨量也是自南向北
呈现由多到少。大棚和田间湿度偏高,加上温度偏
高,土壤湿度过饱和,容易产生渍害。磐安地区的日
夜温差大,土壤由深厚的火山灰形成基质,土壤肥
沃,土层深厚,土壤有机质含量高,呈略酸性等。种
植条件有利于浙贝母生长,叶绿素含量和主要存在
于叶绿体、黄色体和白色体等内膜上的 PPO 活性较
高;章水位于鄞州西南方向,土壤中有机质较少,相
比磐安对浙贝母有效成分的积累较为不利,但更有
利于 PAL、CAT、POD等抗逆酶的表达。
实验结果发现,从不同品种来看,狭叶贝母的
PAL、PPO、CAT、POD活性以及叶绿素的含量均要高
于其他 4 种,这说明狭叶贝母的生长发育、抗病抗逆
等的品种特性方面表现较为优良,这与目前生产上
大多种植狭叶贝母相吻合。宽叶贝母、多籽贝母、大
个种和小个种在不同酶活性和叶绿素含量上各有差
异,这可能和它们各自的品种特性有关。从 PAL 活
性来看,狭叶贝母的活性最高,宽叶贝母的鳞茎和叶
的活性要高于茎和花的活性,这也和宽叶贝母茎枯
速率最快,特别是茎杆的迅速枯萎相符合,相对于狭
叶贝母来说,宽叶贝母属于迟发型,其茎始枯迟,枯
萎速率要快于狭叶贝母;多籽贝母属于早发型,其茎
枯期要比狭叶贝母早。从 PPO 活性来看,狭叶贝母
的活性要高于其他 4 种,这可能和狭叶贝母的单个
鳞茎较大,白质体较多有关。从 CAT 活性来看,狭
叶贝母的活性也最高。
参 考 文 献
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收稿日期:2011-04-19
基金项目:江西省教育厅资助课题(GJJ08328) ;江西省卫生厅资助课题(006A58)
作者简介:钟凌云(1971-) ,女,博士,教授,主要从事中药饮片质量标准及炮制作用机制研究;E-mail:ly1638163@ 163. com。
·加工炮制与养护·
黄精炮制前后成分及药效变化初步研究
钟凌云,张 莹,霍慧君,龚千锋
(江西中医学院药学院,江西 南昌 330004)
摘要 目的:探讨黄精炮制前后成分及药效变化,从成分与药效变化关联性角度探讨黄精炮制机制。方法:制
备得到黄精生、制品,比较生、制品不同溶剂提取部位 HPLC 图谱,并对炮制前后差异较大的二氯甲烷部位进行成
分分析和药效试验。结果:通过比对,黄精炮制前后二氯甲烷部位主要变化成分之一为 5-羟甲基糠醛,经炮制后其
含量显著增加;与生品组相比,制黄精二氯甲烷部位能显著提高小鼠碳粒廓清指数(P < 0. 05)和吞噬系数(P <
0. 05) ,提示其能明显提高小鼠非特异性免疫功能。结论:制黄精增强免疫功能可能与炮制后 5-羟甲基糠醛含量
变化相关,本实验为阐明黄精炮制作用机制奠定基础。
关键词 黄精;炮制;成分变化;药效变化
中图分类号:R283 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2011)10-1508-04
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