全 文 ：海南粪箕笃根茎中总生物碱含量的测定
程 彬1，戴 华2，白丽丽1* (1．海南医学院药学院，海南海口 571199;2．海南医学院公共卫生学院，海南海口 571199)
摘要 ［目的］建立海南粪箕笃总生物碱含量测定的方法。［方法］以盐酸小檗碱为对照品，溴甲酚绿为酸性染料，在缓冲溶液 pH = 5． 4
条件下，于 421 nm波长处测定其吸光度。［结果］粪箕笃在 0 ～ 15． 75 μg /ml 浓度范围内线性关系良好(r = 0． 999 5)，平均回收率为
103． 21%，ＲSD =0． 30%。［结论］该法简便、灵敏度高、重复性好，可用于粪箕笃总生物碱的含量测定。
关键词 粪箕笃;生物碱含量;分光光度法;根茎
中图分类号 S567 文献标识码 A 文章编号 0517 －6611(2015)16 －067 －02
Determination of Total Alkaloids in Ｒhizome of Stephania longa L． from Hainan Province
CHENG Bin1，DAI Hua2，BAI Li-li1* (1． School of Pharmaceutical Sciences，Hainan Medical University，Haikou，Hainan 571199;
2． School of Public Health，Hainan Medical University，Haikou，Hainan 571199)
Abstract ［Objective］To establish a method for the determination of total alkaloids in Stephania longa L． from Hainan Province． ［Meth-
od］With berberine hydrochloride as the control，bromocresol green as acid dye colorimetry，the content of total alkaloids in Stephania longa
L． was determined by spectrophotometry at 421 nm and sodium citrate buffer solution at pH = 5． 4． ［Ｒesult］The linear ranges of the total al-
kaloids were 0 － 15． 75 μg /ml (r = 0． 999 5)． The average recovery was 103． 21% (ＲSD = 0． 30%)． ［Conclusion］The method is simple，
accurate and reproducible，which can be used for content determination of total alkaloids in S． longa．
Key words Stephania longa L．;Alkaloids content;Spectrophotometry;Ｒhizome
基金项目 海南医学院大学生创新创业项目(HYCX201219)。
作者简介 程彬(1991 － )，男，重庆人，本科生，专业:药学。* 通讯作
者，副教授，硕士，从事天然产物有机化学及合成研究。
收稿日期 2015-04-14
粪箕笃(Stephania longa L．)为防己科千金藤属植物，多
年生草质藤本，广泛分布于广东、福建、台湾、海南等我国南
部地区［1］。在海南全省各地可见，生于村边或旷野灌木丛
中，是天然的南药资源。全株可入药，味辛、性平，具有清热
解毒、利湿消肿、袪风活络、抑菌、镇静和镇痛等功效［2 －3］。
该属植物富含生物碱，近年来对该属植物的化学成分及药理
进行研究［4 －8］，但有关粪箕笃总生物碱含量的测定鲜有报
道。笔者主要采用分光光度法，以盐酸小檗碱为对照品，对
海南粪箕笃根茎中的总生物碱进行含量测定，为粪箕笃及其
千金藤属其他植物的药用开发与利用奠定基础。
1 材料与方法
1． 1 仪器 UV1600型紫外可见分光光度计(北京瑞利分析
仪器有限公司);PHS －3C型酸度计(上海精密科学仪器有限
公司) ;B210S分析天平(北京赛多利斯有限公司)。
1． 2 试药 盐酸小檗碱标准品(中国药品生物制品检定所，
批号 110713 －201212，纯度 86． 7%) ;粪箕笃药材(采自海南
文昌)，经海南医学院曾念开副教授鉴定为粪箕笃 Stephania
longa L．根茎，晾干粉碎后备用。所用试剂均为分析纯，水为
蒸馏水。
1． 3 试验方法
1． 3． 1 试液配制。
1． 3． 1． 1 对照品溶液的制备。精密称取在 110 ℃干燥至恒
重的盐酸小檗碱对照品 10． 1 mg置于 50 ml 容量瓶中，加蒸
馏水至刻度，摇匀，按 86． 7%计算，即得 175 μg /ml。
1． 3． 1． 2 供试品溶液的制备。粪箕笃粉末约 2． 0 g 精密称
量 6份，置于圆底烧瓶中，用 85%乙醇回流 2 h，浓缩后经氯
仿提取，于 100 ml容量瓶中定容至刻度，低温冷藏、备用。
1． 3． 1． 3 显色液和缓冲液的配制。按药典方法配制溴甲酚
绿酸性染料溶液，以及 pH =5． 4的柠檬酸 －柠檬酸钠缓冲溶
液［9］。
1． 3． 2 吸收波长的选择。精密量取盐酸小檗碱对照品溶液
和供试品溶液各 0． 5 ml，置分液漏斗中，加柠檬酸 －柠檬酸
钠缓冲液 5． 0 ml，溴甲酚绿溶液 2． 0 ml，摇匀，加入氯仿 10． 0
ml，充分振摇，静置 1 h，分出氯仿层，于 200 ～ 600 nm波长范
围内进行扫描，同时以氯仿作为空白参比液。
1． 3． 3 方法学考察。
1． 3． 3． 1 线性关系考察。精密量取对照品溶液 0． 1、0． 2、
0． 3、0． 5、0． 7、0． 9 ml，加水 0． 9、0． 8、0． 7、0． 5、0． 3、0． 1 ml，按
“1． 3． 2”项操作，充分振摇后，静置 1 h，分出氯仿层。室温放
置 40 min后，在 421 nm下测定吸光度值，同时以氯仿为空白
对照。
1． 3． 3． 2 稳定性考察。取供试品溶液，在室温和室内光照
条件下密闭放置，分别在 0、5、10、30、60、120 min时测定吸光
度值。
1． 3． 3． 3 精密度试验。精密量取对照品溶液 0． 5 ml，余下
操作同“1． 3． 2”项，依次测得吸光度值，以空白溶液作参比。
1． 3． 3． 4 重复性试验。取供试品溶液 6份，操作同“1． 3． 2”
项，依次测得吸光度值，以空白溶液作参比。
1． 3． 3． 5 加标回收试验。取 6份供试品溶液，分别加入 175
μg /ml盐酸小檗碱对照品溶液 0． 23 ml，依照“1． 3． 2”项操
作，在 421 nm波长处测定吸光度值。
1． 3． 4 总生物碱含量的测定。取供试品溶液 6份，每份 0． 5
ml，用氯仿定容至 10． 0 ml，按“1． 3． 2”项操作，分别测得吸光
度值，根据标准曲线进行含量计算。
2 结果与分析
2． 1 波长的选择 取供试品与对照品在 200 ～ 600 nm的波
长范围内进行扫描，结果显示(图 1)，盐酸小檗碱对照品溶
安徽农业科学，Journal of Anhui Agri． Sci． 2015，43(16):67 － 68 责任编辑 黄小燕 责任校对 况玲玲
DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2015.16.028
液和供试品溶液均在 421 nm处有吸收峰，而空白参比液在 421 nm处没有吸收，故该试验选择 421 nm作为测定波长。
图 1 对照品溶液(a)和空白参比液(b)全波长扫描图
2． 2 方法学考察
2． 2． 1 线性关系的考察。精确量取对照品溶液，在 421 nm
处测其吸光度。以吸光度值为纵坐标、浓度(μg /ml)为横坐
标绘制标准曲线(图 2) ，得出线性回归方程为 A = 0． 074 0C
+0． 014 5，相关系数 r = 0． 999 5，在浓度 0 ～ 15． 75 μg /ml 范
围内线性关系良好。
图 2 标准曲线图
2． 2． 2 稳定性试验。平行测定 6 次，得其 ＲSD = 0． 20%(n
=6)，表明供试品溶液在 0 ～ 120 min内基本稳定，满足试验
要求。
2． 2． 3 精密度试验。平行测定 6 次，得其 ＲSD = 0． 16%(n
=6)，表明仪器精密度良好。
2． 2． 4 重复性试验。平行测定 6 次，得其 ＲSD = 2． 20%(n
=6) ，表明重现性较好，符合试验要求。
2． 2． 5 加标回收试验。由表 1 可知，该法回收率为
102． 75% ～103． 57%，平均回收率为 103． 21%，ＲSD = 0． 30%
(n =6)，表明回收率较好，符合试验要求。
表 1 加标回收率试验结果
测量
次数
样品含量
μg
加标量
μg
吸光度
回收率
%
平均回收
率∥%
ＲSD
%
1 34． 05 40． 25 0． 630 9 103． 46 103． 21 0． 30
2 34． 07 40． 25 0． 628 1 102． 96
3 34． 00 40． 25 0． 629 2 103． 23
4 34． 05 40． 25 0． 626 6 102． 75
5 34． 09 40． 25 0． 631 9 103． 57
6 34． 03 46． 46 0． 629 8 103． 31
2． 3 总生物碱含量的测定 平行测定 6 份试液，由表 2 可
知，粪箕笃根茎中总生物碱含量为 0． 38% ～ 0． 40%，平均含
量为 0． 39%，ＲSD =2． 20%(n =6)。
表 2 粪箕笃根茎中总生物碱含量测定结果
序号 吸光度 含量∥%
1 0． 313 3 0． 40
2 0． 297 3 0． 38
3 0． 297 0 0． 38
4 0． 308 0 0． 40
5 0． 305 7 0． 39
6 0． 310 3 0． 40
平均值 0． 305 3 0． 39
3 结论与讨论
采用分光光度法测定粪箕笃根茎中总生物碱含量平均
为 0． 39%，操作简便快捷，灵敏度高，重现性好，测定结果准
确可靠。溴甲酚绿显色法测定总生物碱含量时，选择合适的
pH很重要，其他条件对测定结果影响较小［10］，故该试验参考
文献［9］选定 pH = 5． 4。该方法与液相色谱法比较，具有所
用仪器简单、操作方便、耗时少的优点。
参考文献
［1］中国科学院中国植物志编写委员会．中国植物志，第三十卷［M］．北京:
科学出版社，1996:41．
［2］代正福，彭明，戴好富．海南中药资源图集 第 1集［C］．昆明:云南科技
出版社，2010．
［3］马养民．千金藤属植物化学成分的研究［J］．西北林学院学报，2004，19
(3):125 －130．
［4］林启云，谢金鲜．粪箕笃利尿、镇静及镇痛作用研究［J］．广西中医药，
2001，24(3):43 －45．
［5］宁蕾，邓业成，骆海玉．粪箕笃提取液抑菌活性初步研究［J］．江苏农业
科学，2011(1):166 －168．
［6］利奕成，杨珂，黄立，等．千金藤属植物地不容和云南地不容中多糖和
葡聚糖的含量测定［J］．时珍国医国药，2009，20(12):2921 －2922．
［7］黄建明，郭济贤，段更利． ＲP －HPLC法测定千金藤属植物中 7种生物
活性生物碱［J］．药学学报，1998，33(7):528 －533．
［8］唐丽佳，张援虎，郝小燕，等．桐叶千金藤中莲花烷类生物碱的研究
［J］．中国中药杂志，2010，35(15):1973 －1977．
［9］刘秀萍，黄祥卫，刘炜．小叶地不容中总生物碱含量的测定［J］．海南师
范大学学报，2011，24(2):174 －175．
［10］孟祥松，时军．溴甲酚绿比色法测定苦参总碱含量的研究［J］．安徽医
药，2007，11(1):41 －42．
86 安徽农业科学 2015 年