全 文 ：亡主立些卫学 _ _9 1里年雍 4)男
白鹤芋试管苗快速繁殖及移栽试验 ’
:
!
l国科学院华南植物所 张云开 朱西儒 黄玛枢
提 要 白鹤芋 ( SPa ,川 !lP叫 l姗 ; f l or 乞bu 玲血 m ) 离体培养快速繁殖结果丧 明 , 用 M S 培养基 , 附
加 B A 6 . 。毫克 /升 ( 单位下 同 ) 、 N A A O . 2 、 蔗糖 .3 0% , 培养温度保持在25 一 30 ℃ , 可诱导出不 定芽 。
丛生芽分切转入诱根生长培养基 , 即 M S + B A o · 2 + N A A O · 2 + I B A O . 2 , 添加 。 . 3% (w / v) 活性炭 , 就
可形成完整的试管苗植株 。 移入装有腐殖土为基质的花盆内 , 放在阴凉处 , 喷雾保湿 , 成活率高达 85 一
9 0%
, 可 以商品化生产 。
白鹤芋 , 又名 白掌 , 是天南星科的一种多 比较不同浓度激素的诱导效果 。
年生草本植物 , 原产于美洲 。 60 年代台湾省便
己引种 , 近年来 , 有的省进行试种 。 由于其观
赏价值较高 , 花形为 白雪般佛焰苞式 , 肉穗花
序为浅黄色 , 花期长 。 既可赏花 , 又能观姿 ,适
于阴生 , 作为一种室内观赏植物是很理想的 。
用常规方法繁殖系数太低 , 每株一年只有
4 一 6 个芽 , 不能满足市场需求 。 组织培养可
以提高几十倍或成 一百倍 , 从而加速了 良种的扩
大推广 。 作者于 1 9 8 7一 1 9 9 0 年 进 行 了反复试
验 , 获得 了大量不定芽和许多试管苗 。
材 料 与 方 法
顺德县陈村花卉研究所提供盆栽白鹤芋植
株 , 、作为原始材料 , 切取培养的外植体用苗 。
为了防止外植体被污染 , 对这种宿根类植
物作了预处理 , 以免根茎处常带菌 、 消毒不彻
底而影响培养试验 。
具体做法 : 将带回的苗先除去老叶 , 切掉
顶芽 , 在室内重新栽种 。 待长出新 芬才用作外
植体 , 进行离体培养试验 。
表面消毒 : 将嫩芽用 75 %酒精浸 2 一 3 秒
钟 , 立即用无菌水冲洗千净 。 在无菌操作条件
下 , 再用 O· 1%升汞 ( H g CI : )消毒 7 分钟 , 无菌
水洗 4 次 , 最后切块移入培养基 。
培养基配制 : 以 M S 基 本 培 养基为主 ,
1
. 芽的诱导 : 培 养 基 组 成为 B A 0 . 5毫
克 /升 (单位下同 ) , 1 . 0 、 3 . 0 、 和 6 . 0 , 每一
处理分别加等量的 N A A O . 2 。 另 一 组 配方为
N A A O
.
1
、
0
.
2
、
0
.
5和 1 . 0四种 浓 度 , 而 每个
处理中均加 B A 6 . 0。 其它成分均相同 , 进行单
因子比较试验 。
2
. 根的诱导 : 分 切 诱导的丛芽 , 移入下
述生根培养基 , 比较小苗生长情况 , 共设 4 个
处理 , 即 ( 1 )M S + B A O . 1 + N A A o . 2 , ( 2 )M S +
B A 0
.
5 + N A A 0
.
2 , ( 3 ) M s + B A O
.
2 + N A A
0
.
2 + I B A o
.
2 , ( 4 ) M S + B A O
.
2 + N A人0 . 2 +
I B A O
.
5
。 对照处理为 M S 培 养 基 。 上述 4 种
培养基均加入 0 . 3%活性炭 。
3
. 温度对芽生长的影响 : 试 验 中进行了
5 种不同温度的比较试 验 , 用 L R H一 1 50 一 G
型光照培养箱 ( 广东省医疗器械厂产 ) 控制 ,
分别设 15 、 20 、 25 、 30 和 3 4 ℃培 养 继代丛生
芽 , 观察其生长情况 。
4
. 试管苗移栽技术 : 盆 栽 土花泥 、 沙之
比为 2 : 1 , 或者用腐殖土丰富的泥土 。 移栽后 ,
初期 ( 约 15 天 ) 用 自来水每日喷 3一 4 次 , 以
保持一定的湿度 。 置阴凉通风处 , 待成活后再
分苗定植 。
结 果
意见 ,
承蒙华南农业大学范怀忠教授审阅并提出修改
谨此致谢 !
( 一 ) 丛芽的诱导
经过预处理的外植体有 80 % 成活 , 而对照
( 直接取原始材料移 殖 生长 ) 1 0 %污染 。 所
DOI : 10. 16768 /j . i ssn. 1004 -874x . 1991. 04. 012
以 , 新生芽可减少污染杂菌 , 提高了成功培养
的百分率 。
不同培养基对丛芽的诱导效果不同 (表 1 ) ,
表 1 不同激素培养基芽增殖的效果
B A
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N A A …增殖芽 {芽 高 …增殖率通型竺 ~ }{墅竺 )卜~竺之}一 i里兰二}一瞥” · 5
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5
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.
6
1
。
3
注 : 每处理 60 个芽 , 计算其平均值 , 接种时基数
2 个芽 /块 , 重复 3 次 ,培养60 天记录结果 。
3 0 ℃条件下芽增殖最为理想 , 生长正常 。 .
( 三 ) 试管苗根系的诱导
根系正常化的诱导是试管苗生产的重要环
节 , 也是保证高成活率移栽的先决条件 。 本试
验选用了不同诱导根系生长培养基 , 其结果出
现一定差异 ( 表 3 ) 。 试验表明 , 在 B A O . 1 、
N A A O
.
2培养基上 , 生根率为 2 2 . 6% 。 将其中
的 B A 浓度提高到 0 . 5毫克 /升时 , 出现生根率
下降趋势 , 说明较高 浓 度 的 B A 会抑制根的
诱导 。 而在 含有 BI A o . 2 、 B A o . 2 、 N A A o . 2
的培养基上 , 诱导生根率为 5 3 . 5% , 表明 BI A
对白鹤芋试管健翻廷系生长有较明显的作用 , 根
系发达 , 不定根较多 。
表 3 不同培养基对试管苗根系的诱导作用
其中以细胞分裂素和生长素影响较大 。
试验表 明 , 在 N A A O . 2 、 B A 6 . O的培养基
上诱导增殖的芽数最多 , 但是当 N A A 浓度提
高到 1 . 0毫克 /升时 , 反而抑制芽的增殖 , 高度
也减少 。 此外 , 试 验 过 程中 , 曾以 K T 代替
B A 的培养基 , 结果无明显差异 。
仁二 ) 温度对丛芽生长的影响
在同一培养基和光照条件下 , 由于培养温
度不同 , 丛芽增殖 、 生长表现有差异 (表 2 ) 。
表 2 不同温度对芽增殖的影响
培养基邀若水平 卜_ …_ ’ _ ’ { _ 一
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3 4
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“州 “ .9 } 稍呈透 明状注 : 培养 40 天 , 每样品为 32 块芽 , 重复 2 次平均
值 。
试验表明 , 在 20 ℃条件下 , 生长缓慢 , 温
度升至25 ℃时 , 增殖速度增加一倍 , 生长较旺
盛 。 当在 34 ℃时芽增殖数多 , 生长快 , 但叶片
趋于透明状 , 培养瓶璧凝聚小水珠 。 因此 , 在
注 : 培养 30 天 , 接种时株高均为 2 厘米 , 3 次试
验平均数 。 表中 4 种培养基均加有 N A A O 。 2毫克 /升 、
活性炭 0 . 3% 。
( 四 ) 影响根系生长的因素
1
. 不同激素水平下培 养 时间的影响 : 经
过 3 次试验 , 看出不同水平激素条件下 , 由于
培养的天数延长 , 其根系生长效果有较明显的
差异 ( 表 4 ) 。 结果表明 , 在 3 种激素同一水
平 ( 0 . 2 毫克 /升 ) 下 , 培 养 30 天 生 根 率为
5 3
.
5%
。 延长培养 20 天 , 根系继续分化 , 生根
率可达到 9 8 . 6% 。 这说明白鹤芋试管苗根系对
激素反应不灵敏 , 而且生长较慢 。 其它几种培
养基虽然生根率低一些 , 但也存在同样现象 ,
培养 50 天的效果比较好 。
2
. 无根苗的高度对试管 植 株根系诱导的
影响 : 在丛芽继代培养过程中 , 我们发现在同
表 4 不同激家水平下培养时间
对根系诱导的影度
表 6 试管苗移栽成活率比较
移栽基质与处理
耳激素水平(毫克 / 升 )
移栽
次数
移栽数
( 株) 成活数(株 ) 成话本( 叹石)
5 0天— ! (株 )I B A百石一 瓜 。6 9。 7
.
2 { 0
.
2 } 0 9
.
3
.
2 } 0
。
5 { 4 9
.
0
生根株数 ( % )
2 0
。
7 2 2
一
5
1 4
。
7 1 5
.
2
4 8
。
3 5 3
。
5
3 9
。
04 1
。
4
1
。
0 1
.
7
泥 :沙 (2 :1) ,遮阴
一般泥土 , 遮阴
一般泥土 , 不遮阴
腐殖土 , 遮阴
注 : 无根苗移植时 , 株高为 2 。 O 厘米 。 每一种培
养基均含N A A O . 2毫克 /升 、 活性炭 0 . 3% 。 3 次试验
的平均值 。
一种培养基上 , 无根苗高的易生根 。 经过不同
高度无根苗移植诱导分化比较 , 其生根效果有
差异 ( 表 5 ) 。 试验表明 , 在高 3 . 0 厘米 以上
表 5 芽的高度对根系生长的影响
处理…株高 (厘米 )…移植数 (株 )…生根数 (株 ){生根率 (% )
殖土作基质 , 放在阴凉处 , 保持一定湿度 , 移
栽成活 率可 达到 8 8 . 8% , 而且生长健壮 。 移
栽初期遮阴作用比较明显 , 与小植株适应外界
环境有关 , 因为试管内外条件相差太大 。 在管
理中 , 若浇水过量 , 也会常造成烂苗死亡 。 此
外 , 在高温季节移栽效果差 。
9 0
。
3
9 0
。
0
5 3
。
5
I } 2
.
5
l { 3
.
0以上 ! 91 .
6 2
。
2
8 5
。
4
注 : 3 次重复 , 培养 30 天 。
时 , 其生根率最高 , 达 8 5 . 4% 。 在 2 . 0 厘米以
下时 , 诱导生根较少 , 仅 53 . 5% 。
( 五 ) 试管苗的移栽
离体培养可以提高繁殖指数 , 但移栽成活
率不高时 , 就达不到快速繁殖的目的 , 损失较
大 。 我们经过反复试验 , 比较不同条件的移栽
成活效果 , 见表 6 。 从表 6 看出 , 用肥沃的腐
结 论 与 讨 论
1
. 反复试验 , 在 上 述培养基和生长条件
下 , 可以达到批量生产 。 从而解决了商品化用
苗的技术问题 , 供应市场需求 。
2
. 试管苗玻璃化 现 象 , 卜学贤 ( 1 9 8 7) 做
过专题研究 , 认为是培养瓶内高温高湿小环境
引起小苗体内生理变化的结果 , 导致植株呈半
透明状态 。 我们认为 , 在本试验条件下 , 控制
温度不超过 32 ℃这种现象很少发生 。
3
. 本文对 白鹤芋试管苗的 批 量生产 , 并
系统研究有关影响因素方面的试验是比较成功
的 , 对此只有何炎明 、 关永全 ( 1 9 9 0) 作过简报
报道 。
4
. 白鹤芋离体培养快 速 繁殖获得成功 ,
可以人为控制 , 根据季节和市场需求生产试管
苗 , 这一技术有待开发利用。
…Rù确七00d孟ù匕行了
》 , 】》 》】 , ” 》 》 , 》》 , 》 】】〕】〕》打
作者更正 : 本刊今年第 3期第 43 页右边倒数第 17 行 “ 亩产 2 2 6 . 7公斤 ” 应改为 t’3 36 . 7公斤 ” , 第 4 页 左边
第 13 行 “ 稍长” 应改为 “ 穗长 ” , 倒数第 9 行 “ 亩产 2 76 . 0公斤 ” 应改为 a3 7 6 . p公斤 ” 。