全 文 ：药学学报 1 9( 7 ): 5 1 9、 52 3, 1 9 8 4
朱砂七中葱醒类成分的脉冲极谱测定
张 秀 琴 徐 礼 桑
(中国医学科学院药物研究所 , 北京 )
提要 本文报道用脉冲极谱法测定生药朱砂七中蕙醒试元及其试的测定条件。 研究了大黄 素
在氯化锉电解液中的极谱还原波 , 峰电位为一 。 . 75 v v( 5 S E C ) , 波高与浓度在 6 . 4 义 1。一 ` ~ 3 . 1 、
1 0一` M范围呈线性关系 。 并研究了生药的提取及薄层分离方法 , 为评价生药的质量及蕙醒类 化 合
物的测定提供了有效的定性和定量方法 。
关链词 脉冲极谱 多 朱砂七 ; 蕙醒
朱砂七为萝科植物毛脉要 p o l y g o 。 。 , e￡11感n e , 。 e ( N a k a i ) o h w l 的块根 , 含 大 黄式
咬hr a p ot in ) 、 大黄素 、 大黄素甲醚 、 大黄酚及大黄酸等山 。 对金黄色葡萄球菌 、 白葡萄球
菌 、 福氏痢疾杆菌有较强的抑制作用 。 临床用于治疗扁桃体炎 、 胃肠炎 、 痢疾和外伤出血
等 。
葱醒类化合物在适当的电解液中可在滴汞电极上还原 , 用极谱法进行测定 ( 2 ,>3 , 但一般
直流极谱灵敏度不高 。 本文研究了大黄素在 IL CI 一N H 4 O H 电解液中的脉冲极谱行为 , 在导
数脉冲极谱图上得到一个波形良好的脉冲极谱波 , 峰电位为一 o . 75 V ( vs s E C ) , 峰形对称 ,
在 6 . 4 X 10 ’ 6~ 3 . I X i 。 一 ” M 间峰高与浓度有很好的线性关系 。 据此建立了大黄素的极谱测定
方法 , 并应用于生药朱砂七中蕙醒类化合物的测定 。
实 验 部 分
仪器 、 药品 JM J一 I型多功能脉冲极谱仪 , 武汉半导体二厂产 。 汞柱高度为 62 。m , 电流范围 。 . 004
召 A c/ m 。 大黄素纯品 由川大黄中分离提取 , 精制后薄层检查无杂质点。 朱砂七生药 本所植物室供给 。
硅胶 G 青岛海洋化工厂薄层层析用 。
(一 ) 测定杂件的选择
1
. 支持电解质 分别选用 T L IC I一 N H 4o H , B r i t t o n一 R o b i n s o n , K H Z P o `一 N a o H 等
体系 , 观察了大黄素在这些体系中脉冲极谱波的波高与 p H 的变化关系 , 结 果 如 图 1 。 实
验结果证明了大黄素用以上三种支持电解质时 , p H 的变化对化合物的还原有 很 大 影 响 ,
p H < 6 时完全不出现极谱波 , p H在 6~ 8 时波型不稳定 , p H 在 8 . 5~ 9 . 0 时波高最大 , 且不
受 p H 的影响 , p H 一 10 时在 Br it o n一 R o ib sn o n 缓冲系统中波高降低 。 在上面三种体系中 ,
峰电位均随 p H的增加而向负电位移动 , 见图 2 。 比较以上三种电解质 , 认为 IL CI 一 N H 4O H
适用范围最宽且配制简便 , 因而选用 IL CI 为支持电解质 。
2
. 支持电解质浓度的影响 在 IL CI 的浓度为 0 . 05 ~ 0 . 2 M 时 , 对大黄素纯品进行测定 ,
试验结果表明 iL cl 的浓度对波高及电位无影响 。 本试验选用 。 . 1 M LI CI 溶液 。
3
. 大黄素浓度与波高的关系 按照上述测定条件 , 对不同浓度的大黄素进行测定 , 结
果表明在 6 . 9 x 1 0一 6~ 3 . 5 X 1 0一 M范围内浓度与波高呈线性关系 , 见图 3 。
本文于 19 8 3 年 3 月 片 日收到
DOI : 10. 16438 /j . 0513 -4870. 1984. 07. 008
52 0 药 学 学 报 9 1卷
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(二 )生药的测定
1
.提取 准确称取 0 .5 9生药置提取器中 , 分别用甲醇回流提取 1 , 2 , 3 h , 提取液移
人 25 m l 容量瓶中 , 用甲醇稀释至刻度 , 取一定量按上述极谱测定条件进行测定 , 提取 Z h
和 3 h 的结果一致 。 将提取 Z h 后的生药残渣再用甲醇提取 l h , 浓缩后进行薄层层析未出斑
点 ,用极谱法测定也无还原峰 , 说明生药用甲醇回流提取 Z h 即已提取完全 。
2
. 水解 参照文献 (4) 方法 , 对朱砂七中蕙醒试的水解时间 、 盐酸用量及提取溶剂进行
了试验 , 证明取 1 . 0 m l提取液加 0 . 2 m l 浓盐酸 , 在沸水浴上水解 30 m in 即可水解完全 。 水
解后用 10 m l 乙醚振摇 3 m in , 一次提取就可将蕙醒贰元提取完全 。
3
. 薄层层析 将五种蕙醒试元及生药提取液分别点于硅胶 G 薄板上 , 用 己烷 一乙醚一甲
酸乙醋 一二氯甲烷 一甲酸 ( 8 : 1 . 5 : 1 : 0 . 8 : 。 . 1) 展开 , 朱砂七中仅出现大黄素和大黄素甲醚斑点 ,
图 4 。 另在近原点处有一黄色斑点 (紫外光下为红色 ) , 但用氨蒸气熏时颜色不变 (不显红色 ) ,
且在极谱测定中不出现还原波 。 故此成分不是蕙醒类化合物 。 生药提取液水解后的薄层图谱
和水解前所出现的色点一样 。
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7 期 药 学 学 报 51 2
4
.薄层回收率试验 取一定量大黄素样品 , 点于硅胶 G 薄层上 , 用上述系统展开 , 挥
去溶剂后 , 定量刮下大黄素色点 , 用 5 m l 乙醇浸泡并离心 , 取一定量上清液加人电解 液 测 .
定 , 结果见表 1 。
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6
. 提取回收率 精密称取一定量生药粉于提取器中 , 加人一定量大黄素纯品 , 用甲醇
提取 , 取 1 m l 提取液 , 经水解 、 薄层分离后进行测定 , 结果见表 2 。
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(三 ) 拟定方法
1
. 标准曲线的制备 准确称取大黄素纯品约 3 m g 于 10 m l 容量瓶 中 , 用乙醇溶解 , 取
此溶液 5 0 , 1 0 0 , 1 5 0 , 2 0 0 , 2 50 群 l 于极谱池中 , 加乙醇至 4 . 0 m l , 并 加 o . i M L IC一溶液
4
.
0 m l 及 1滴稀氨水 ( 14 % ) , 通氮去氧 4 m in , 记录极谱图 , 绘制标准曲线 , 浓 度 在 。~ 7
召g /m l 范围与波高呈线性关系 。
2
. 生药样品的测定 精密称取朱砂七生药 0 . 5 9 , 置提取器中 , 用甲醇回流提取 Z h ,
定量移人 25 m l 容量瓶中 , 用甲醇稀释到刻度 。
(1 ) 游离葱酿的测定 取 10 川 上述提取液 , 点于硅胶 G 薄板上 , 点成条状 , 进 行薄
层层析后 , 挥去溶剂 , 在 3 6 5 n m 观察荧光 , 刮取大黄素和大黄素 甲醚的 色 点 于 5 m l 带 塞
试管中 , 加 5 m l 乙醇 , 振摇约 2 m in , 离心 , 吸取一定量 (大黄素取 1 . 0 m l , 大黄素甲醚取
4
.
0 m l) 上清液于极谱池中 , 加乙醇至 4 . 0 m l , 再加 0 . I M IL C I 溶液 4 . O m l 及 1 滴 稀氨水 ,
通氮去氧 4 m in , 记录极谱图 。
( 2 ) 结合型葱醒的测定 取生药提取液 1 . 0 m l 于 20 m l 带塞试管中 , 在 水浴上 挥去 甲
醇 , 残渣用 2 m l 蒸馏水溶解 , 加人 o . Z m l 浓盐酸 , 在沸水浴上加热水解 30 m in 并 不 断 振
摇 。 冷却 , 加 10 m l乙醚 , 振摇 3 m in , 放置片刻 , 吸取 5 m l 乙醚液 , 置于 10 m l 带塞试管
中 , 挥去乙醚 , 准确加人 0 . 5 m l 甲醇 , 吸取此甲醇溶液 10 川 , 同 ( 1) 法薄层层析及测定 ,
分别测得大黄素甲醚及大黄素的总量 , 减去各游离蕙醒即为结合型蕙醒 。
(3 ) 总葱酿的测定 同上法 ( 2) 乙醚提取 , 吸取 0 . 2 m l 乙醚液于极谱池中 , 挥去乙醚同
药 学 学 及 1 9卷
( 1)法测定 , 以大黄素为标准计算含量 。 朱砂七样品测定结果见表 3 。
T a b 3
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从表 3 看出 , 结合型蕙醒为大黄素甲醚及大黄素的贰 。
讨 论
1
. 大黄素薄层分离后不能放置太久 , 因硅胶对大黄素吸附较强 , 否则不易被乙醇洗脱 ,
导致结果偏低 。
2
.
o
.
I M iL c l 电解液为中性 , 可用于测定大黄素纯品 , 但在测定生药样品时 , 由 于展
开剂中含有少量甲酸 , 常不易挥净 , 而使电解液显弱酸性 , 根据 (一 ) 1 . 采用 IL C I~ N H `O H
体系 , 即在电解中加 1滴稀氨水 , 使溶液成碱性进行测定 。 我们试验了在 10 m l 电解液中 ,
加入 1~ 3 滴稀氨水 , p H 由 7~ 1 0 , 除使峰电位向负值移动外不影响峰电流 。
3
. 生药中不存在氧化型葱醒 , 试验中发现加人三氯化铁使生药提取液先氧化后再 水 解
和不加三氯化铁直接水解测定结果一样 。
参 考 文 献
1
, 全国中草药编写组编 : 全国中草药汇编 , 上册 , 3 74 页 ,
2
.
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3
.
A s a h i Y
,
e t a l ; P o l a r o g r a P h y o f a n t h r a q u i n o n e s a
1 9 7 4
4
. 何丽一 、 罗淑荣 : 中草药中葱醒衍生物分析方法的研究 .
5 5 5
, 19 8 0
人民卫生出版社 , 北京 , 1 9 7 5
H K a P6 a 3 o 月 a B a H T P a u e H e n o P只P o r P a中H砚 e e K H M
n d d i a n t h r o n e s o f r h u b a r b
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2 2 : 2 5 4 ,
1
. 中国大黄属植物成分的分离及含量测定 . 或 学 学 报 巧
7 期 药 学 学 报 2 53
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T h e e u r r e n t w a s P r o P o r t i o n a l t o t h e e o n e e n t r a t i o n i n t h e r a n g e o f 6
.
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