全 文 ：收稿日期:2014-11-20
基金项目:贵州苗药百尾参繁殖技术研究(黔省专合字(2012)148 号);贵州省药用植物繁育与种植人才基地(黔人领发［2013］15 号);贵
州省作物学重点建设计划项目(黔学位合字 ZDXK［2014］8 号)
作者简介:索贝贝(1987-)，女，在读硕士研究生，专业方向:作物栽培理论与技术;Tel:15185077005，E-mail:dsgzbeibei@ 163. com。
* 通讯作者:王华磊，Tel:13027865861，E-mail:whlgu@ 163. com。
万寿竹丛生芽诱导培养基的筛选
索贝贝，王华磊* ，赵 致，刘红昌，罗春丽，李金玲，罗夫来
(贵州大学农学院 /贵州省药用植物繁育与种植重点实验室，贵州 贵阳 550025)
摘要 目的:探索万寿竹组织培养中适合丛生芽诱导的培养基。方法:以万寿竹无菌苗具 1 个节的茎段为材
料，采用 L16(4
4)正交设计，研究了 6-BA浓度、KT浓度、NAA浓度及蔗糖含量对丛生芽增殖及生长的影响。结果:
6-BA浓度、KT浓度、蔗糖含量在较高水平能促进芽的增殖和生长，而随着 NAA浓度的加大，反而抑制芽的增殖和
生长。结论:万寿竹组织培养以具 1 个节的茎段进行诱导丛生芽时，选择培养基配方为 MS + 6-BA 1. 2 mg /L + KT
0. 45 mg /L +蔗糖 20 g /L，可明显提高万寿竹丛生芽的增殖能力。
关键词 万寿竹;丛生芽;培养基
中图分类号:Ｒ282. 2 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2015)06-1131-04
DOI:10. 13863 / j. issn1001-4454. 2015. 06. 004
万寿竹 Disporum cantoniense (Lour．)Merr．为百
合科万寿竹属多年生草本植物，其根及根茎入药，称
百尾参。百尾参别名又叫白味参、百尾笋、白龙须，
产地药农称之为打竹伞、稻谷伞、牛尾参、竹节
参〔1〕。其味甘、淡，性平，具有润肺止咳、健脾消积
的功效，可用于虚损咳喘、痰中带血、肠风下血、食积
胀满等症〔2，3〕。目前，有关万寿竹的研究报道主要
是关于其植物学特性、种子育苗及根茎移栽等方
面〔4-8〕。本试验开展万寿竹的组织培养研究，以茎段
为外植体诱导丛生芽，筛选出最优培养基配方，为建
立其快速繁殖体系奠定基础。
1 材料与方法
1. 1 供试材料
1. 1. 1 材料:试验材料为贵州省药用植物繁育与
种植重点实验室培养的万寿竹无菌苗，经笔者王华
磊教授鉴定为百合科植物万寿竹 Disporum cantoni-
ense (Lour. )Merr. 的无菌苗。
1. 1. 2 试剂:6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)，加拿大 BIO
BASIC公司;α-萘乙酸(NAA)，上海山浦化工有限公
司;激动素(KT)，国药集团化学试剂有限公司。
1. 2 试验方法 试验于 2014 年 3 ～ 6 月在贵州省
药用植物繁育与种植重点实验室进行。将万寿竹无
菌苗剪为 1 cm左右的具 1 个节的茎段，以 MS 为基
本培养基。试验采用 4 因素 4 水平 L16(4
4)正交试
验设计，试验因素水平见表 1。每一处理接种 4 瓶，
每瓶接入 5 株茎段，重复 3 次。所有培养基均添加
琼脂 6 g /L，pH为 5. 8 ～ 6. 0。培养基在 121 ℃下灭
菌 25 min，培养温度为(25 ± 2)℃，光照为 1 000 ～ 2
000 Lx，光照时间为 12 h /d。
表 1 万寿竹丛生芽诱导因子水平表
水平
因素
6-BA /
(mg /L)
KT /
(mg /L)
NAA/
(mg /L)
蔗糖 /
(g /L)
1 0 0 0 0
2 0. 3 0. 15 0. 02 15
3 0. 6 0. 30 0. 04 20
4 1. 2 0. 45 0. 08 30
1. 3 统计学方法 接种后第 80 天进行数据统计，
所得数据采用 EXCEL 2003 及 DPS 7. 5 进行统计分
析，其中，芽增殖数的统计方法为:接种后形成的芽
及芽状突起的总和。
芽增殖系数 =芽增殖数 /接种总芽数
芽高 =芽总高 /芽总数
优良率 =长势优良的芽数总和 /总芽数 × 100%
2 结果与分析
2. 1 6-BA、KT、NAA 浓度及蔗糖含量对万寿竹丛
生芽增殖系数的影响 由表 2 可知，增殖系数最高
的是处理 16，即 6-BA浓度 1. 2 mg /L、KT 浓度 0. 45
mg /L、NAA 浓度 0 mg /L、蔗糖含量 20 g /L，高达
6. 79;最低的是处理 12，即 6-BA 浓度 0. 6 mg /L、KT
浓度 0. 45 mg /L、NAA 浓度 0. 02 mg /L、蔗糖含量 0
mg /L，增殖系数为 0. 17;对增殖系数影响最大的是
蔗糖含量，极差 Ｒ 值为 3. 38，然后依次是 6-BA 浓
度、NAA浓度、KT 浓度。方差分析结果表明，影响
增殖系数的 4 个因素中 6-BA浓度、NAA浓度、蔗糖
含量的不同水平之间均差异极显著(P ＜ 0. 01)，而
KT浓度的不同水平之间差异不显著;由表 3 多重比
较结果可知，6-BA浓度以 1. 2 mg /L增殖系数最高，
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表 2 各处理对万寿竹丛生芽增殖系数的影响
处理
6-BA /
(mg /L)
KT /
(mg /L)
NAA/
(mg /L)
蔗糖 /
(g /L)
增殖
系数
1 0 0 0 0 0. 26eE
2 0 0. 15 0. 02 15 1. 45deDE
3 0 0. 30 0. 04 20 1. 60deDE
4 0 0. 45 0. 08 30 0. 95deE
5 0. 3 0 0. 02 20 2. 36cdCDE
6 0. 3 0. 15 0 30 3. 34bcBCD
7 0. 3 0. 30 0. 08 0 0. 22eE
8 0. 3 0. 45 0. 04 15 1. 46deDE
9 0. 6 0 0. 04 30 4. 24bBC
10 0. 6 0. 15 0. 08 20 3. 60bcCD
11 0. 6 0. 30 0 15 3. 26bcBCD
12 0. 6 0. 45 0. 02 0 0. 17eE
13 1. 2 0 0. 08 15 2. 37cdCDE
14 1. 2 0. 15 0. 04 0 0. 17eE
15 1. 2 0. 30 0. 02 30 4. 86bA
16 1. 2 0. 45 0 20 6. 79aA
极小值 1. 07 2. 14 1. 78 0. 20
极大值 3. 57 2. 48 3. 41 3. 59
极差 Ｒ 2. 48 0. 34 1. 63 3. 38
注:不同小写字母表示在 0. 05 水平上的差异显著性;不同大写
字母表示在 0. 01 水平上的差异显著性
为 3. 55，其次为 0. 6 mg /L 处理，再次为 0. 3 mg /L
处理，以 0 mg /L处理增殖系数最低，1. 2 mg /L处理
与 0. 3、0 mg /L 处理差异极显著(P ＜ 0. 01)，与 0. 6
mg /L处理差异显著(P ＜ 0. 05);KT浓度以 0. 3 mg /
L增殖系数最高，但与 0、0. 15、0. 45 mg /L 处理之间
差异不显著;NAA浓度以 0 mg /L 增殖系数最高，为
3. 41，随 NAA浓度的增加各处理的增殖系数逐渐降
低，且 0 mg /L处理与 0. 02、0. 04、0. 08 mg /L处理之
间差异极显著(P ＜ 0. 01)，而 0. 02、0. 04、0. 08 mg /L
处理之间差异不显著;蔗糖含量以 20 g /L 处理增殖
系数最高，0 g /L处理为最低，20 g /L处理与 0、15 g /
L处理之间差异极显著(P ＜ 0. 01)，与 30 g /L 处理
之间差异不显著。
2. 2 6-BA、KT、NAA 浓度及蔗糖含量对万寿竹丛
生芽芽数的影响 由表 4 可知，芽数最多的是处理
16，即 6-BA 浓度 1. 2 mg /L、KT 浓度 0. 45 mg /L、
NAA浓度 0 mg /L、蔗糖含量 20 g /L 处理，高达
160. 67 个。从极差分析结果来看，6-BA、KT、NAA
浓度及蔗糖含量对芽数影响顺序是蔗糖含量 ＞ 6-
BA浓度 ＞ NAA 浓度 ＞ KT 浓度。方差分析结果表
明，影响芽数的 4 个因素中 6-BA 浓度、NAA 浓度、
蔗糖含量的不同水平之间均差异极显著(P ＜0. 01)，
表 3 6-BA、KT、NAA浓度及蔗糖含量对万寿竹丛生芽增殖系数的影响
6-BA /(mg /L) 均值 KT /(mg /L) 均值 NAA/(mg /L) 均值 蔗糖 /(g /L) 均值
0 1. 07dC 0 2. 31aA 0 3. 41aA 0 0. 20cC
0. 3 1. 84cBC 0. 15 2. 14aA 0. 02 2. 21bB 15 2. 14bB
0. 6 2. 82bAB 0. 30 2. 48aA 0. 04 1. 87bB 20 3. 59aA
1. 2 3. 55aA 0. 45 2. 34aA 0. 08 1. 78bB 30 3. 35aA
注:不同小写字母表示在 0. 05 水平上的差异显著性;不同大写字母表示在 0. 01 水平上的差异显著性
而 KT浓度的不同水平之间差异不显著;由表 5 多
重比较结果可知，6-BA浓度以 1. 2 mg /L芽数最多，
为 79. 17 个，随 6-BA浓度的降低各处理的芽数逐渐
减少，1. 2 mg /L 处理与 0、0. 3 mg /L 处理差异极显
著(P ＜ 0. 01)，与 0. 6 mg /L处理差异不显著;KT 浓
度以 0. 45 mg /L 芽数最多，但与 0、0. 15、0. 30 mg /L
处理之间差异不显著;NAA 浓度以 0 mg /L 芽数最
多，为 79. 08 个，随 NAA 浓度的增加各处理的芽数
逐渐降低，且 0 mg /L 处理与 0. 02、0. 04、0. 08 mg /L
处理之间差异极显著(P ＜ 0. 01)，而 0. 02、0. 04、
0. 08 mg /L处理之间差异不显著;蔗糖含量以 20 g /
L处理芽数最多，0 g /L 处理为最低，20 g /L 处理与
0、15 g /L处理之间差异极显著(P ＜ 0. 01)，与 30 g /
L处理之间差异不显著。
2. 3 6-BA、KT、NAA 浓度及蔗糖含量对万寿竹丛
生芽芽高的影响 由表 4 可知，芽高最高的是处理
9，即 6-BA浓度 0. 6 mg /L、KT浓度 0 mg /L、NAA 浓
度 0. 04 mg /L、蔗糖含量 30 g /L 处理，苗均高为
6. 64 cm。从极差分析结果来看，6-BA 浓度、KT 浓
度、NAA浓度及蔗糖含量对芽高影响顺序是蔗糖含
量 ＞ NAA 浓度 ＞ KT 浓度 ＞ 6-BA 浓度。方差分析
结果显示，影响芽高的 4 个因素中 NAA 浓度、蔗糖
含量的不同水平之间差异显著(P ＜ 0. 05)，而 6-BA
浓度、KT浓度的不同水平之间差异不显著;由表 6
多重比较结果可知，6-BA 浓度在 0. 6 mg /L 时芽高
最高，达到 3. 80 cm，但与 0、0. 3、1. 2 mg /L处理之间
差异不显著;KT浓度以 0. 3 mg /L处理芽高最高，达
到 4. 09 cm，但与 0、0. 15、0. 45 mg /L 处理之间差异
不显著;NAA 浓度以 0 mg /L 处理芽高最高，达到
4. 40 cm，与 0. 02、0. 04 mg /L处理均差异不显著，但
与 0. 08 mg /L处理差异显著(P ＜ 0. 05);蔗糖含量
以 30 g /L处理芽高最高，达到 5. 42 cm，与 0 g /L处
·2311· Journal of Chinese Medicinal Materials 第 38 卷第 6 期 2015 年 6 月
理差异极显著(P ＜ 0. 01)，与 15 g /L 处理差异显著
(P ＜ 0. 05)，与 20 g /L处理差异不显著。
表 4 各处理对万寿竹丛生芽芽数、芽高、芽优良率
的影响
处理 芽数 /个 芽高 /cm 优良率 /%
1 6. 00hE 0. 59efB 2. 22eC
2 33. 00fghCDE 5. 51abcdA 80. 12abcA
3 36. 303efghCDE 5. 52abcdA 93. 97abA
4 25. 00ghDE 2. 93bcdefAB 71. 11bcAB
5 56. 33cdefgBCDE 3. 37abcdefAB 75. 72abcAB
6 71. 67bcdefBCD 5. 91abcA 81. 96abcA
7 4. 33hE 0. 11fB 3. 33eC
8 34. 00fghCDE 2. 47cdefAB 72. 45abcAB
9 95. 67bcB 6. 64aA 93. 013abA
10 90. 00bcdBC 3. 84abcdeAB 83. 33abcA
11 78. 00bcdeBCD 4. 54abcdAB 65. 03cdAB
12 3. 33hE 0. 15fB 8. 33eC
13 50. 00defgBCDE 2. 09defAB 71. 11dB
14 3. 67hE 0. 12fB 1. 67eC
15 102. 33bB 6. 19abA 95. 06aA
16 160. 67aA 6. 56aA 93. 33abA
注:芽体生长状况:长势旺盛记为优，长势一般记为良，生长无变
化或死亡记为差。不同小写字母表示在 0. 05 水平上的差异显著性;
不同大写字母表示在 0. 01 水平上的差异显著性
2. 4 6-BA、KT、NAA 浓度及蔗糖含量对万寿竹丛
生芽生长状况的影响 由表 4 可知，芽体生长状况
最好的是处理 15，即 6-BA 浓度 1. 2 mg /L、KT 浓度
0. 3 mg /L、NAA 浓度 0. 02 mg /L、蔗糖含量 30 g /L
处理，优良率高达 95. 06 %。生长状况最差的是处
理 14，即 6-BA浓度 1. 2 mg /L、KT浓度 0. 15 mg /L、
NAA浓度 0. 04 mg /L、蔗糖含量 0 g /L处理，优良率
仅为 1. 67%。从极差分析结果来看，6-BA 浓度、KT
浓度、NAA浓度及蔗糖含量对芽体生长状况优良率
的影响顺序是蔗糖含量 ＞ NAA 浓度 ＞ KT 浓度 ＞ 6-
BA浓度。方差分析结果显示，影响芽体生长状况优
良率的 4 个因素中 6-BA 浓度、KT 浓度的不同水平
之间差异不显著，而 NAA浓度的不同水平之间差异
显著(P ＜ 0. 05)，蔗糖含量的不同水平之间差异极
显著(P ＜ 0. 01);由表 7 多重比较结果可知，6-BA
浓度 0. 6 mg /L、KT浓度 0. 3 mg /L 时芽体生长优良
率最高，分别为 62. 43%、64. 21%，但均与其他 3 个
处理水平差异不显著;NAA 浓度以 0. 04 mg /L 处理
芽体生长优良率最高，达到 65. 13%，与 0、0. 02 mg /
L处理之间差异不显著，但与 0. 08 mg /L 处理差异
显著(P ＜ 0. 05);蔗糖含量以 20 g /L 处理芽体生长
优良率最高，达到 86. 46%，与 0、15 g /L处理差异极
显著(P ＜ 0. 01)，与 30 g /L处理差异不显著。
表 5 6-BA、KT、NAA浓度及蔗糖含量对万寿竹丛生芽芽数(个)的影响
6-BA /(mg /L) 均值 KT /(mg /L) 均值 NAA/(mg /L) 均值 蔗糖 /(g /L) 均值
0 25. 08bC 0 52. 00aA 0 79. 08aA 0 4. 33cC
0. 3 41. 58bBC 0. 15 49. 58aA 0. 02 48. 75bB 15 48. 75bB
0. 6 66. 75aAB 0. 30 55. 25aA 0. 04 42. 42bB 20 85. 83aA
1. 2 79. 17aA 0. 45 55. 75aA 0. 08 42. 33bB 30 73. 67aAB
注:不同小写字母表示在 0. 05 水平上的差异显著性;不同大写字母表示在 0. 01 水平上的差异显著性
表 6 6-BA、KT、NAA浓度及蔗糖含量对万寿竹丛生芽芽高(cm)的影响
6-BA /(mg /L) 均值 KT /(mg /L) 均值 NAA/(mg /L) 均值 蔗糖 /(g /L) 均值
0 3. 64aA 0 3. 17aA 0 4. 40aA 0 0. 24cB
0. 3 2. 97aA 0. 15 3. 85aA 0. 02 3. 81abA 15 3. 65bA
0. 6 3. 80aA 0. 30 4. 09aA 0. 04 3. 69abA 20 4. 82abA
1. 2 3. 74aA 0. 45 3. 03aA 0. 08 2. 24bA 30 5. 42aA
注:不同小写字母表示在 0. 05 水平上的差异显著性;不同大写字母表示在 0. 01 水平上的差异显著性
表 7 6-BA、KT、NAA浓度及蔗糖含量对万寿竹丛生芽芽体生长状况优良率(%)的影响
6-BA /(mg /L) 均值 KT /(mg /L) 均值 NAA/(mg /L) 均值 蔗糖 /(g /L) 均值
0 61. 71aA 0 54. 72aA 0 60. 64abA 0 3. 89bC
0. 3 58. 38aA 0. 15 61. 77aA 0. 02 64. 82aA 15 66. 37bB
0. 6 62. 43aA 0. 30 64. 21aA 0. 04 65. 13aA 20 86. 46aA
1. 2 59. 48aA 0. 45 61. 31aA 0. 08 51. 41bA 30 85. 29aA
注:芽体生长状况:长势旺盛记为优，长势一般记为良，生长无变化或死亡记为差。不同小写字母表示在 0. 05 水平上的差异显著性;不同
大写字母表示在 0. 01 水平上的差异显著性
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3 结论
本试验中以万寿竹无菌苗具 1 个节的茎段为实
验材料，在 MS +6-BA 1. 2 mg /L + KT 0. 45 mg /L +
蔗糖 20 g /L的培养基上培养效果最好，增殖系数、
芽数均为最高，分别为 6. 79、160. 67 个，芽高、芽体
生长优良率分别为 6. 56 cm、93. 33%。
培养基中的蔗糖，一方面为培养物的生长和发
育代谢提供所需的能量和底物，另一方面影响培养
基的渗透压〔9〕。本试验结果表明，万寿竹组织培养
在诱导丛生芽阶段，蔗糖含量为 20 g /L 时对增殖系
数、芽数、芽高、芽体生长优良率影响显著，且都极显
著的高于低含量处理，而与较高含量的处理差异不
显著。说明适当含量的蔗糖有利于万寿竹丛生芽的
形成和长势。
参 考 文 献
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