全 文 ：薄层扫描法测定何首乌 、 夜交藤中葱醒成分的含量
江苏省药品检验所 孙彤云 李建新.
提要: 本文利用 TCS 一 I A型双波长薄层扫描仪测定了何首乌、 夜交藤药材中葱酪成分
大黄素 、 大黄素甲醚的含量 , 并对两者的含量进行了比较 。 本法简便 、 准确 、 稳定 。
何首乌为寥科植物何首乌 ( P ol y g o n u m
二 u l t i f l o r u m T h u n b . )的块根 。 夜交藤为何
首乌的茎藤或叶茎藤 。 本文利用双波长薄层
扫描定量法测定了何首乌 、 夜交藤中大黄素 、
大黄素甲醚的含量 , 并对此进行了比较 。
何首乌 、 夜交藤由本所标本室提供并鉴
定 。 大黄素 、 大黄素甲醚对照 品由南京药学
院提供 。
薄层层析板 : 取青岛海洋化工厂硅胶 G
( 10~ 4 0拌1 ) , 常规铺板 , 1 1 0℃活化 l h r , 置
干燥器内备用 。
T C S一 I A 型双波长薄层扫描 仪 测 试 条
件见下表 。
时 , 滤过 。 滤液置水浴中浓缩至约 2m l , 点
样 。 并与大黄素 、 大黄素甲醚对照品点于同
一块薄板上 , 用展开剂 3展开 1 c0 m 。 结果供
试品溶液所显斑点 R ; 值与对照品溶液所显
斑点 R : 值一致 , 见图 。
{
!
·
I
1
, 何首乌样品液
2
. 夜交藤样品 ;夜
3
. 大黄索对照液
( R f “ 0
.
3 2 )
4
. 大黄索甲醚又少
照液( R r = 0 . 4了)
1 、
~ 一 狭 逢 扫描速度 纸迪m m八 R 1 1】1 1 八万 r玉 目 1 m m m m tn/ in /m i n
大黄素 反射法直
7 0 0 43 5 2 7
.
5 2 0
一 、 实验方法及结果
(一 ) 展开剂的选择及何首乌 、 夜 交藤的
薄层定性
1
. 展开剂的选择 : 见下 表 。 结果 , 展
开剂 3 。效果较好。
编号
}
展开” “及其组成 展开结果
1 氯仿 : 甲酸乙醋 : 甲酸 乙醇 ! R ;位太大 , 斑点
( 5
: 5 , 3
, 2 ) 或悦`条一】戌
2 石油醚 : 已烷 : 甲酸乙舫 : 同上乙醇 : 水 ( l , 3 : 3 : 2 , 。 . 5) 取上层液展开
3 环已烷 : 丙酮 : 甲俊乙醋 : R:俄适宜 , 斑乙醇 : 水 ( 1 : 3 . 5 : 1 . 6 : 1 , 1 . 5 ) 取点集中清晰 、 园整
上层液展开
4 环已烷 : 乙醚 : 甲酸乙酚 : 乙 R ,俏适宜 , 斑醇 : 水( 6 : 0 . 5 : 3 : 2 . 5 : 。 . 8 )取上艘点请晰 , 但稍横向液展开 扩散
2
. 薄层定性 : 分别取何首 乌 、 夜 交藤
粗粉 0 . 5 0 0 0 9 , 各加 氛仿 20 m l , 浸渍半 小
8
(二 ) 定量 条件 的选择
1
. 提取方法的比较 : 比较了何 首 乌 、
夜交藤用氯仿以索氏提取器提取及烧瓶回流
提取 , 提取液按 “ 供试品含量测定 ” 项 下 测
定 。 两者结果一致。 故可以用烧瓶回流提取
法代替索氏提取器提取法 。
2
. 水解时间条件比较 : 精密称 取 何首
乌 、 夜交藤粗粉各 4份 , 每份 1 . 0。。0 9 , 置
烧瓶中 , 加 S N 硫酸 40 m l , 直火分别缓缓回
流 i 、 2 、 3 、 4h r 。 再分别加氯仿 3 0m l 置水
浴中回流半小时 , 抽滤 , 滤液置分液漏斗中 ,
分取氯仿层 ; 再将酸液及残渣加氯仿 Z Om l ,
置水浴中回流 20 m in , 抽滤 , 分取氯仿 层 ,
如此反复提取至氯仿层近无色 , 合并氯仿液 ,
置水浴上浓缩至适量 , 移置 I Om l 容量瓶中 ,
加氯仿至刻度 , 摇匀 , 按 “ 供试品含量测定 ”
项下测定 , 结果表明何首乌 、 夜交藤中的葱
醒经水解 3 h r 即可完全 。
3
. 颜色稳定性考察 : 由于葱配成分 本
身具有颜色 , 因此不需显色即可扫描 。 至于
斑点颜色是否稳定 , 本文进行了颜色稳定性
中 成 药 研 究
考察实验 。 结果两者 4 2r h内颜色很稳 定 。
( 三 )标准曲线的制备
1
.对照品溶液的配制 :分别精密 称取
大黄素 、 大黄素甲醚对照品一定量 , 溶于氯
舫中 , 使最后浓度为 o . 15 m g / m l 。
2
. 薄层层离 : 精密量取上述两种对照
品溶液 2 、 4 、 6 、 8 、 1 0 、 1 2 、 1 6 、 2 0拌1 , 点
于 同一块薄层板上 , 用展开剂展开 10 c m 。
3 测定及绘图 : 将上述展开后 的大黄
素 、 大黄素甲醚斑点用 T C S一 I A 型双波 长
薄层扫描仪绘制轮廓曲线 , 然后计算峰面积 ,
用峰面积值作为纵坐标 , 点样量作 为横坐
标 。 编拟程序后 , 用 P C 一 1 5 0 0 型电子计算机
处理绘制标准曲线 。 结果大黄 素点样量 在
o
·
4~ 1
.
2拼g范围内线性较好 。 大黄素甲醚在
o
·
4~ 1
·
5“ g范围内线性较好 。
4
. 精密度实验 : 分别取大 黄素 、 大黄
素甲醚对照液同样量点于 四块硅胶薄层上 ,
展开 , 扫描 , 比较峰面积值 。 结果基本一致 。
大黄素标准差为 0 . 0 4 1 93 , 大 黄素甲醚标准
差为 0 . 0 9 9 7 9 。
(四 ) 何首鸟、 夜交藤中葱砚成 分 含童
测定
1
. 提取方法拟定 :
( 1) 游离葱醒提取 : 精密称取何首乌 、
夜交藤粗粉各 1 9 , 置烧瓶中 , 加氯仿 50 m :
水浴回流 hl r , 抽滤 。 残渣 以适量氯仿 洗涂
3 次 。 合并洗滤液 , 置水浴上浓缩至适量 。
移置 5m l 容量瓶中 , 加氯仿至刻度 , 摇匀 。
(2 ) 总葱酿提取 : 分别精密 称取何 首
乌 、 夜交藤粗粉 1 9 , 加 SN硫酸 40 m l , 直火
缓缓回流 3 hr , 余自“ 水解时间条件比较” 项
下再分别加氯仿 30 m l起 , 依法提取 。
2
. 供试品含量测定 : 大黄素测定 : 何首
乌提取液点样 4川 , 夜交藤提取液点样20 川。
大黄素 甲醚测定 : 何首乌提 取液点样
5川 , 夜交藤提取液点样 24 琳 。
点样后 , 展开剂 3 展开 10 o m , 扫描 。 计算
峰面积 , 从相应的标准曲线上查得相当贰元
的含量 , 按下式计算贰元含量 。 结果见下表 。
戒元含员终 “
标准曲线上相当戒元含量伽 g )
样品点样量 ( m g ) 大 10 0 0 X 10 0 0
药 材
易介~ 芝芝经
何 首 交 夜 藤
大黄素编 平均值几 大黄素甲醚 平均值、 }大黄 , 二 }平均 。 、 }大黄索甲醚荡 }平 、 : 、
乌一.门」
游 离 }一三里竺一 1 }一卫望竺` 一 } }望二兰乙一 } }一上竺七一 }
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结合葱醒 0 . 2 8 7 0 . 1 1 6 0 . 0 56 0 . 0 3 1
(五 ) 回收率实验
于何首乌或夜交藤提取液中 (大黄素 、 大
黄素甲醚含量 已精密测定 ) , 精密加入不 同
量 的大黄素 , 大黄素甲醚对照液 , 测定大黄
素点样 4川 , 测定大黄素甲醚点样 8川 , 余按
“ 供试品含量测定” 项下测定 , 结果见下表 。
成 ;全
}
平均值书
!
大 ;、 、 甲 ,
}
变异系数男
0
.
9 6 3 8
1
.
2 4 0 7
, 南京中医学院 84 届毕业生
二 、 讨论与小结
1
. 利用双波长薄层的扫描法测定 了 何
首乌 、 夜交藤中葱酮成分大黄素 、 大黄素甲
醚含量 , 方法准确 、 稳定 、 简便 。
2
. 实验结果证明 , 何首乌 、 夜交藤中主
要成分为大黄素 、 大黄素甲醚 , 两者成分基
本相同 。 但何首乌中大黄素 、 大黄素甲醚的
含量超过夜交藤 。
3
. 实验比较了索氏提取器提取与 大 烧
瓶回流提取 , 两者结果一致 , 但后者较为方
便 、 省时 。
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