全 文 ：收稿日期:2011 － 12 － 11
基金项目:中山市医学科研立项课题(J2011077)
作者简介:卓斌(1973 －) ，男，主管中药师，研究方向:医院中药制
剂研究。
患者中实证 73 例、虚证 6 例，虚实夹杂 6 例，在 6 例虚证患
者中，复发型占 5 例，6 例虚实夹杂患者中，5 例为复发型患
者，说明初发者发病是以实证居多，复发型患者因并且迁延
日久，或伤气、或耗血、动血，或体质偏弱，易外感风热、湿
邪，导致虚证、虚实夹杂证。因此对复发型过敏性紫癜患者
辩证论治过程中，扶正，健脾、补肾作为治疗重点。对初发
患者治疗重点在于驱邪，祛风、凉血、化湿、活血为主。
综上所述，通过对 85 例过敏性紫癜患者的分析，我们
认为过敏性紫癜患者发病原因中上呼吸道感染及扁桃体感
染为重要发病原因，这与中医中外感和热毒致病观点一致。
在对过敏性紫癜患者中医药治疗过程中，应把握治疗在治
疗上应掌握治血、治火、治气三原则，早期在于清热、祛风、
除湿，病情反复发作者，治疗上偏重于补气、健脾、益肾。虚
实夹杂者，在扶正同时，兼顾驱邪。
参考文献
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140．
［2］ 禤国维，范瑞强．皮肤性病中医治疗全书［M］．广州:广东科
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医教育，2000，19(2) :56 － 58．
第 30 卷 第 5 期
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中 华 中 医 药 学 刊
CHINESE ARCHIVES OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
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正交设计优化复方田基黄胶囊总蒽醌测定方法
卓斌1，刁军飞1，陈文秀2，张文霞1，郑雪青1，曾聪彦1
(1．广州中医药大学附属中山中医院，广东 中山 528400;2．中山市宝元制鞋厂职工医院，广东 中山 528400)
摘 要:目的:研究复方田基黄胶囊中总蒽醌的最佳提取工艺。方法:采用回流提取法，以紫外分光光度法测
定提取液中总蒽醌含量为指标，以氯仿用量、回流时间、硫酸用量、萃取次数为考察因素，采用 L9(3
4)正交实验法
优选复方田基黄胶囊的最佳测定方法。结果:最佳条件为:氯仿用量为 30mL，回流时间为 120min，硫酸用量为
20mL，萃取次数为 3 次。结论:该测定方法稳定，安全，简便易行。
关键词:复方田基黄胶囊;总蒽醌;正交试验;测定方法
中图分类号:R284． 1 文献标识码:A 文章编号:1673 － 7717(2012)05 － 1109 － 02
复 方 田 基 黄 胶 囊 为 我 院 经 验 复 方 制 剂 (粤
Z20071007) ，由田基黄、虎杖、重楼、连翘、桑寄生、木通、黄
芪等 9 味药组成，具补肝肾、清热利湿之功，经过几十年的
临床验证，该制剂用于急慢性肝炎［1］，疗效确切。虎杖为
该复方主要药味之一，具有清热解毒，利胆退黄，祛风利湿
等作用［2］，临床可用于传染性肝炎。本文以虎杖中总蒽醌
为指标，采用正交实验法，系统的考察氯仿用量、提取时间、
硫酸用量、萃取次数对指标成分的影响，通过紫外分光光度
法测定不同提取条件下复方田基黄胶囊总蒽醌含量。
1 仪器与试药
UV －2550型紫外可见分光光度计(日本岛津) ;BS2243
型电子分析天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司)。三氯
甲烷、乙醇(均为分析纯) ，硫酸溶液为化学纯;大黄素对照
品(中国药品生物制品检定所，批号:756 －9803) ;田基黄(批
号 101201)、重楼(批号 101201)、连翘(批号 101201)、桑寄生
(批号 101201)、木通(批号 101201)、黄芪(批号 101007821)、
白矾(批号 101201)、复方田基黄胶囊(批号:20101012)均购
自广州致信中药饮片有限公司，经鉴定均符合《中华人民共
和国药典》2010版 1部规定。
2 方法与结果
2． 1 测定波长的选择
2． 1． 1 对照品溶液的制备 精密称取大黄素 3． 7mg，精密
称定，置 25mL容量瓶中，加乙醇溶解并定容至刻度，摇匀，
即得对照品溶液。
2． 1． 2 供试品溶液的制备 取复方田基黄胶囊 5 粒，去
壳，混匀，研末，精密称取 0． 5g 至圆底烧瓶中，分别加入三
氯甲烷 30mL和 2． 5mol /L 硫酸 20mL 溶液，置 80℃水浴锅
中加热回流 120min，冷却至室温，分取氯仿层，水溶液在用
氯仿萃取 3 次，每次 5mL，合并氯仿层，蒸干，残渣加乙醇溶
解，转移至 50mL容量瓶中。
2． 1． 3 阴性对照品制备 按处方比例称取除虎杖外的其
他药材，按处方制备工艺制成阴性样品，精密取阴性样品粉
末 0． 5g，按“2． 1． 2”项下方法制成缺虎杖的阴性对照溶液。
2． 1． 4 波长的确定 取对照品、阴性对照品、供试品溶液
各适量，以乙醇为空白对照，于 400 ～ 700nm 范周内进行扫
描，结果显示对照品及供试品在 440nm 波长处处有最大吸
收，与文献［3］报道基本符合，故本实验选择 440 nm 作为检
测波长，结果见图 1。
2． 2 标准曲线的绘制
精密吸取对照品溶液 1． 5、2、2． 5、3、3． 5、4mL 分别置
于 50mL容量瓶中，乙醇定容至刻度，摇匀，以乙醇为空白
对照，分别于 440nm 处测定吸光度(A)。以浓度(C)为横
坐标，吸光度(A)为纵坐标，绘制标准曲线，并进行线性回
归，得到回归方程:A = 0． 0574C + 0． 0027，r = 0． 9997，表
明大黄素在 4． 44 ～ 28． 80mg·L －1范围内与吸光度呈良好
的线性关系。
2． 3 正交试验设计
2． 3． 1 因素水平设置 根据虎杖的主要化学成分蒽醌类
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DOI：10.13193/j.archtcm.2012.05.183.zhuob.055
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溶解性特点，选择三氯甲烷为溶剂，对其氯仿用量、提取时
间、硫酸用量、萃取次数为考察因素，以总蒽醌的提取量为
评价指标考察不同提取条件对复方田基黄胶囊总蒽醌提取
率的影响。因素水平设置见表 1。
a．大黄素对照品 b．供试品 c．阴性对照品
图 1 对照品及供试品吸收光谱
表 1 提取条件对复方田基黄胶囊总蒽醌含量的影响
水平
A /氯仿用量
(mL)
B /回流时间
(min)
C /硫酸用量
(mL)
D /萃取
次数
1 20 90 15 1
2 25 120 20 2
3 30 150 25 3
表 2 复方田基黄胶囊总蒽醌提取正交实验结果
试验号
A/氯仿
用量
(mL)
B/回流
时间
(min)
C/硫酸
用量
(mL)
D/萃取
次数
总蒽醌含量(mg/g)
K1 K2 K3 珚K
1 1 1 1 1 0． 6098 0． 7159 0． 6934 0． 6730
2 1 2 2 2 0． 6591 0． 7428 0． 6713 0． 6911
3 1 3 3 3 0． 6603 0． 7185 0． 7211 0． 7000
4 2 1 2 3 0． 6452 0． 7141 0． 7307 0． 6966
5 2 2 3 1 0． 6965 0． 7549 0． 5253 0． 6589
6 2 3 1 2 0． 6833 0． 6795 0． 4705 0． 6111
7 3 1 3 2 0． 6766 0． 7959 0． 7611 0． 7446
8 3 2 1 3 0． 7345 0． 7785 0． 7803 0． 7644
9 3 3 2 1 0． 7408 0． 7441 0． 7768 0． 7529
K1 2． 0641 2． 1142 2． 0485 2． 0848
K2 1． 9666 2． 1144 2． 1406 1． 9610
K3 2． 2619 2． 0639 2． 1034 2． 1610
R 0． 2953 0． 0505 0． 0921 0． 2000
2． 3． 2 正交试验及结果
精密称取本品内容物粉末 0． 5g，共 9 份，按正交试验
表 L9(3
4)安排进行实验，方案及结果见表 2，方差分析见表
3。由表 3 极差分析可知，各个因素间作用的主次为 A ＞ D
＞ C ＞ B。4 种因素的 K 值显示各个因素不同水平的影响
程度为 A3 ＞ A1 ＞ A2，B2 ＞ B1 ＞ B3，C2 ＞ C3 ＞ C1，D3 ＞ D1 ＞
D2，表 2 方差分析结果表明，氯仿用量在提取过程中对总蒽
醌量有显著性差异，而回流时间、硫酸用量以及萃取次数对
总蒽醌的含量不具有显著性差异。综合直观分析和方差分
析，复方田基黄胶囊总蒽醌含量测定的最佳提取条件为 A3
B2C2D3，即氯仿用量为 30mL，回流时间为 120min，硫酸用量
为 20mL，萃取次数为 3 次。
表 3 方差分析
因素 SS f MS F Sig．
萃取次数 0． 006 2 0． 003 0． 653 0． 532
硫酸用量 0． 005 2 0． 002 0． 515 0． 606
回流时间 0． 002 2 0． 001 0． 163 0． 850
氯仿用量 0． 044 2 0． 022 4． 645 0． 024
Error 0． 084 18 0． 005
Total 13． 317 27
2． 3． 3 验证实验 按照选定条件 A3B2 C2D3，称取复方田
基黄胶囊内容物粉末 5 份，照含量测定方法进行验证，结果
见表 4。结果该提取条件下的总蒽醌(0． 7684mg /g)平均含
量比正交实验结果中的总蒽醌平均含量最高者(0． 7644
mg /g)高，表明该提取条件可作为总蒽醌含量测定的最优
提取条件。
表 4 复方田基黄胶囊总蒽醌含量测定
实验号 1 2 3 4 5
总蒽醌含量
(mg /g)
0． 7315 0． 7629 0． 7610 0． 7507 0． 8360
总蒽醌平均含量
(mg /g)
0． 7684
3 讨 论
本实验将虎杖中蒽醌苷类水解成游离的蒽醌苷元，采
用硫酸水解，氯仿萃取，将游离的蒽醌苷元溶解于氯仿中，
挥干氯仿，乙醇溶解作为供试品溶液。通过分析比较，选取
氯仿用量、硫酸用量、提取时间、萃取次数为主要的影响因
素对复方田基黄胶囊的测定方法进行考察。从氯仿用量对
总蒽醌的提取量来看，30mL 的用量最有利于总蒽醌的提
取，说明在该用量条件下提取最为完全;从回流时间上看
90min和 120min的提取时间差别很小，但与 150min的提取
时间相比差别较大，150min 蒽醌的提取量明显少于 90min
和 120min，其原因可能是提取时间过长导致蒽醌类成分发
生分解;从硫酸用量上看，硫酸用量 20mL 与 25mL 对蒽醌
的提取量差别不大，但与 15mL比相差较大，表明硫酸用量
20mL或 25mL 对蒽醌的提取量影响不大，但 20mL 用量稍
微大于 25mL，原因可能是过量的硫酸用量也会加速蒽醌类
的分解;从萃取次数看，萃取 3 次比萃取 1 次和萃取 2 次均
有比较大的差别，说明萃取 3 次才是最佳的萃取次数。方
差分析结果表明除氯仿用量对提取效果有显著影响外，其
余 3 种因素的影响均不显著。
综合以上研究结果，本实验最终确立 A3B2C2D3的实验
方案为分光光度法测定复方田基黄胶囊总蒽醌的最佳条
件。
参考文献
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