全 文 ：中国药业 !#$% &%’(%)*+,#)%-.·!·
!#年第 #$卷第 %期
两种十大功劳叶中生物碱成分的分析与比较!
刘 翔 ，刘布鸣 #，何开家 #，陈明生 #，林 霄 #
（$ 广西中医学院，广西 南宁 %&’’’； #$ 广西中医药研究院，广西 南宁 %&’’##）
摘要：目的 建立长柱十大功劳叶和阔叶十大功劳叶中药根碱、巴马汀、小檗碱的含量测定方法，比较两者的生物碱成分含量差异。方法 采
用反相高效液相色谱外标法同时测定。色谱柱为大连依利特 ()*+ ,-.+/ 01( 2 34柱（#%’ // 5 !$ 6 //，% !/），流动相为乙腈 2 ’$ #7磷酸
（#& 8 99），流速为 $ ’ /: ; /)*，检测波长为 #6% */，进样量为 ’ !:。结果 上述色谱条件下，盐酸药根碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱可以较
好地分离，线性范围分别为 ’$ ’’ !!! < ’$ ’9’ 96 !=（ ! > ’$ ??? ?），’$ ’’’ %% # < ’$ ’#% #! !=（ ! > ’$ ??? 6），’$ ’’’ ?#! ’ < ’$ ’!% #@ !=
（ ! > ’$ ??? @），平均回收率分别为 ?@$ 9!7，??$ &97，??$ @?7，#$分别为 #$ 67，$ 6#7，#$ !7 A % > ? B。结论 该测定方法简单，快速，
专属性、重现性好C结果准确可靠。
关键词：十大功劳叶；含量测定；药根碱；巴马汀；小檗碱；反相高效液相色谱法
中图分类号：!#$% &；!#% ’& 文献标识码：( 文章编号：&))* + $,-& .)&) /)0 + )))$ + )
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$ 盐酸药根碱 #$ 盐酸巴马汀
&$ 盐酸小檗碱
]$ 混合对照品溶液
3$ 供试品溶液（长柱十大功劳叶）
,$ 供试品溶液（阔叶十大功劳叶）
图 高效液相色谱图
阔叶十大功劳 7*6:%’* K2*>2’ A S+.G$ B ,H..$ 为小檗科十大功劳
属植物，其干燥叶为药材十大功劳叶，含有小檗碱、药根碱、尖刺
碱、巴马汀、小檗胺、木兰碱等成分 ^ _，功能清虚热、燥湿、解毒，临
床用于治疗肺痨咳血、骨蒸潮热、头晕耳鸣、腰膝酸软、湿热黄疸、
带下、痢疾、风热感冒、目赤肿痛、痈肿疮疡等症 ^ # _。药材市场上经
常以同属植物长柱十大功劳作为阔叶十大功劳使用。有人从长柱
十大功劳中分离提取到小檗碱、药根碱、巴马汀、异粉防己碱和
2谷甾醇 ^ & _。但两种十大功劳叶的含量测定方法均未见报道，为
了更有效地控制十大功劳叶药材的质量，比较两者的成分差异，笔
者以反相高效液相色谱（\4 2 K4:,）法测定两者中药根碱、巴马汀
和小檗碱的含量，报道如下。
& 仪器与试药
‘a%#’’3 型超声波仪（江苏昆山，6’ b，!’ UKP）；DT&#@] 型
分析天平（上海）；:,?’’’ 型高效液相色谱仪，bc#’’ 型通用多媒
体色谱工作站（南宁威玛龙公司）。阔叶十大功劳 7*6:%’* K2*>2’
A S+.G$ B ,H..$ 干燥叶，长柱十大功劳 7*6:%’* A(C>:()’*%* TH=*EQ$
干燥叶，经广西中医药研究院何开家副教授鉴定。盐酸药根碱对照
品（批号为 ’9&& 2 #’’’’%，供鉴别用），盐酸巴马汀对照品（批号为
’9&# 2 #’’%’6，供含量测定用），盐酸小檗碱对照品（批号为
’9& 2 #’’#’@，供含量测定用），均购于中国药品生物制品检定
所。乙腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯。
方法与结果
! # 色谱条件与系统适用性试验
色谱柱：大连依利特 ()*+ ,-.+/ 01( 2 34柱（#%’ // 5 !$ 6 //，
% !/）；流动相：乙腈 2 ’$ #7磷
酸（#& 8 99）；流速：$ ’ /: ; /)*；
检测波长：#6% */；柱温：室温；
进样量：’ !:。在此条件下，柱
效按盐酸小檗碱峰计算，理论
塔板数为 ! %’。盐酸药根碱、
盐酸巴马汀、盐酸小檗碱的分
离度分别为#$ @?，#$ &!，&$ 66，
均可完全分离（见图 ）。
! ! 溶液制备
精密称取盐酸药根碱对照
品 ?$ % /=、盐酸巴马汀对照品
?$ # /=、盐酸小檗碱对照品
’$ % /=，分别置 ’ /:量瓶，以
流动相稀释至刻度，作为对照品
贮备液（含盐酸药根碱 ’$ ?% = ; :，
盐酸巴马汀 ’$ ?# = ; :，盐酸小
檗碱 $ ’% = ; :）。分别精密吸取
上述贮备液 $ @，’$ #&，’$ ##/:，
混合于 #% /:量瓶中，用流动相
稀释至刻度，摇匀，得高质量浓
度对照品溶液（盐酸药根碱 !!$ @! != ; /:，盐酸巴马汀 @$ !6 != ; /:，
盐酸小檗碱 ?$ #! != ; /:）。精密量取高质量浓度对照品溶液 ’$ @ /:
用流动相定容至 ’ /:容量瓶，摇匀，作为低质量浓度对照品溶液
B ; /)*
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&#
药物研究
!广西自然科学基金资助项目，项目编号：桂科自 ’@&###6。
中国药业 !#$% &%’(%)*+,#)%-. ·!·
!#年第 #$卷第 %期
阔叶十大功劳叶
长柱十大功劳叶
南宁
桂林
南宁
百色（）
百色（#）
蒙山
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表 # 样品含量测定结果（ ! 4 #）
样品 产地
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样品含量 /!1 3 加入量 /!1 3 测得量 /!1 3 回收率（5） （5） #$%（5）
表 盐酸药根碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱加样回收试验结果（ ! 4 *）
注：$ 为盐酸药根碱，,为盐酸巴马汀，.为盐酸小檗碱，下表同。
（盐酸药根碱 (& !* !1 2 06、盐酸巴马汀 %& )+ !1 2 06、盐酸小檗碱
%& -’ !1 2 06）。取干燥叶粉碎，过 #% 目筛，取 %& #! 1，精密称定，置
#! 06 量瓶中，加入盐酸 7甲醇（ 8 %%）溶液约 #% 06，超声处理
)% 09:，放冷至室温，用盐酸 7甲醇（8 %%）溶液定容至刻度，摇匀，
滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液 % 06至蒸发皿中，水浴 )% ;
以下蒸干，放冷，残渣加入流动相使溶解，转移至 % 06量瓶，稀释
至刻度，摇匀，%& ’! !0微孔滤膜滤过，取续滤液，作为供试品溶液。
! # 方法学考察
线性关系考察：分别精密量取 #& # 项下对照品贮备液各 %& (+<
%& ’< %& ## 06，混合于 % 06 量瓶中，用流动相定容，制得混合对
照品溶液（盐酸药根碱 ()& !1 2 06，盐酸巴马汀 #& ++ !1 2 06，盐
酸小檗碱 #(& !1 2 06）。再分别取上述混合对照品溶液 %& %’<
%& !#< & %%< & ’+< & *) 06，置 % 06 量瓶中，用流动相定容至刻
度，制得 ! 个质量浓度的对照品溶液。按上述色谱条件进样 % !6，
以峰面积积分值为纵坐标、进样量（!1）为横坐标绘制标准曲线，得
盐酸药根碱回归方程 & 4 # = % 7 - 7 %& %% ，’ 4 %& *** *，进样量
线性范围是 %& %% ’’’ > %& %-% -) !1；盐酸巴马汀回归方程 & 4
# = % 7- 7 ( = % 7’，’ 4 %& *** )，进样量线性范围是 %& %%% !! # >
%& %#! #’ !1；盐酸小檗碱回归方程 & 4 # = % 7 - ? # = % 7 !，’ 4
%& *** +，进样量线性范围是 %& %%% *#’ % > %& %’! #+ !1。
精密度试验：精密吸取 #& #项下低质量浓度对照品溶液 % !6，
重复进样 ) 次。结果盐酸药根碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱峰面积
的 #$%分别为 @ ’)5 < & (#5 < & ++5。精密吸取 #& # 项下同一供
试品溶液 % !6，重复进样 ) 次。结果盐酸药根碱、盐酸巴马汀、盐
酸小檗碱峰面积的 #$%分别为 @ ’%5 < @ )%5 < & *%5。
稳定性试验：取同一供试品溶液，分别于 %，#，#’，’+，-# A 时
进样测定。结果盐酸药根碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱峰面积的
#$% 分别为 @ !(5 < @ ’5 < & #)5，表明供试品溶液在 ( B 内稳
定。
重现性试验：依法制备 ) 份供试品溶液并进样测定。结果盐酸
药根碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱平均含量分别为 %& ’# *，%& %+* %!，
%& %+ ! 01 2 1，#$%分别为 & ’-5，& *’5，#& #%5（ ! 4 )），表明方
法重现性良好。
加样回收试验：取样品细粉 * 份，约 %& #! 1，精密称定，分别
精密加入 #& # 项下高质量浓度对照品溶液 %& +< & %< & # 06，按供
试品溶液制备方法制备溶液并依法测定，计算回收率。结果见表 。
! $ 样品含量测定
分别取不同产地的样品细粉，按 #& # 项下方法平行制备 # 份
供试品溶液，在上述色谱条件下测定。结果见表 #。
! 讨论
试验结果表明，长柱十大功劳叶与阔叶十大功劳叶含有相同
的化学成分，但含量差异很大，即使为同种植物，不同产地的含量
差异也很大。
邢俊波等 C’ D曾发现盐酸药根碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱对照
品溶液在 #)! :0 波长处吸收值最大、灵敏度最高，故以此为测定
波长。试验中曾考察了超声提取、回流提取、索氏提取器提取 ( 种
方法，发现前两者巴马汀的含量差不多，但超声提取药根碱和小檗
碱的含量远高于其他两种方法，考虑到小檗碱对热不稳定性 C ! D及
操作简便性，故采用超声提取。高温条件下盐酸小檗碱易氧化变
质 C! 7 ) D，在蒸干甲醇时应注意水浴温度，经试验摸索，水浴温度 )% ;
蒸干与室温下自然挥干所测得含量无差异，而当水浴温度为 -! ;
时盐酸小檗碱含量减半，当以水蒸气蒸干时盐酸小檗碱含量仅为
)% ;水浴蒸干的 2 ’。
笔者建立的 EF 7 GF6.法可同时分离并测定阔叶十大功劳叶
与长柱十大功劳叶中的 ( 种小檗碱型生物碱，方法简便、准确，既
可用于十大功劳属植物中小檗碱型生物碱的考察，也可为含药根
碱、巴马汀、小檗碱药材和中药制剂的常规检验提供参考。
作者简介：刘布鸣，本文通讯作者，（电话）%-- 7 !++(’%!（电
子信箱）H9IJI09:1K LMANN& ON0& O:。
参考文献：
C D 宋德勋 & 两种功劳叶药材鉴别 C PD & 时珍国药研究< **-< + /’ 3 Q (’( 7 (’’&
C # D 国家中医药管理局《中华本草》编委会 & 中华本草 CR D & 上海Q上海科学
技术出版社，***Q (#% 7 (#&
C ( D 何开家 < 刘布鸣 < 卢文杰 & 长柱十大功劳的化学成分研究 /3 C P D & 华
西药学杂志< #%%+< #(（#）Q -# 7 -(&
C ’ D 邢俊波 < 徐今宁 < 吴 禾 < 等 & GF6. 法测定妇泰软胶囊中生物碱的含
量 C P D & 中国新药杂志< #%%!< ’ /# 3 Q ’+ 7 !%&
C ! D 彭宗玢< 朱天明 & 温度对盐酸小檗碱质量的影响 C P D & 时珍国医国药 <
#%%#< ( /% 3 Q ’!&
C ) D 朱天明<马伟东 & 盐酸小檗碱及其片剂中有关物质检查方法的探讨 C P D &
中国药品标准< #%%)< - /’ 3 Q )% 7 )&
收稿日期：#$$% & $! & #’；修回日期：#$$% & $( & )* +
药物研究