全 文 ：水红花子醇提物的抗脂质过氧化作用
张振明 ’ , 雷晓燕 2 , 许爱霞 ’ , 高湘 ’ , 葛斌 , ’ (l . 甘肃省人民医 院药剂科 , 甘肃 兰州 73姗 ; 2 . 甘肃省人民医院小儿科 , 甘肃 兰州
7 3仪以】)
摘要 : 目的 研究水红花子醇提物的抗脂质过氧化作用 。 方法 用 D 一半乳糖造衰老 小鼠模型 , 同时 馆相当于水红花子 0 . 6 ,
1
.
2
,
2
.
4
,
4
.
8 g’ k g 一 ’ · d 一 ’醇提物 , 观察其对衰老模型 小鼠抗氧化 系统的影响 。 结果 0 . 6 , 1 . 2 , 2 . 4 , 4 . 8 g’ 吨一 ’ · d 一 ’水红花子 醉
提物能使衰老模型 小鼠血清 、 肝 、 ’肾组织 中M DA 明显下降 ; so D 及 GS H一 xP 活力明显提高 ;脑组织 中 LF 明显下 降 。 结论 水
红花子醉提物有显著清除氧自由基 , 活性氧及抗脂质过氧化作用 。
关键词 : 水红花子醇提物 ; 氧自由基 ;活性氧 ;脂质过氧化
中图分类号 二R2 85 . 6 文献标识码 : A 文章编号 : 10 1 一 2494 ( 2 (x巧 ) 13 - “ , 1一 。
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, 五王邢八。 u 73 (D l 〕 , hC 。 ; 2 . 及卿功舰瓜 of eP 成山成巧 , 几印肠, : 产为胡蒯 of G Z璐 u F卜刀 icne , 乙刀 g 八, u 73 仪以 ) , 以毖朋 )
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K E Y WO川粥 : F I’t l C ust p O ly go I l I iOr e n t a lis ; oxy en if ℃ e ar 山cal s ; ac ivt e o x y e ;n iant il po pe ~ idat on
水红花子 ( Fur c tu s oP lygo in O ir e l l ta l is , F p O )为寥
科植物红寥的干燥果实 , 有消痕破积 ,健脾利湿功
效 。 现代国内研究资料表明 ,水红花子对艾氏腹水
癌和 肉瘤一 180 有一定抑制作用川 。 业已证明 , 自由
基可诱发肿瘤等多种疾病 。 本实验将对水红花子醇
提物 ( EF R ) )的抗脂质过氧化作用进行探讨 , 旨在为
开发中药类抗脂质过氧化剂及防治与自由基有关的
多种疾病提供理论依据 。
1 材料和方法
1
.
1 试剂及动物
丙二醛测试盒 ,超氧化物歧化酶测试盒 ,谷胧甘
肤过氧化物酶测试盒 (南京建成生物工程研究所 ) ,
其他试剂均为进 口或国产分析纯级产品 。
实验用昆明种清洁级小鼠 , 早 , 6 一 8 周龄 ,体重
(2 2 土 4 ) g (兰州生物制品研究所 , 合格证号 : 2以” -
05 1 )
。 水红花子 (市售 ) ,经甘肃省药品检验所宋平
顺主任药师鉴定为寥科植物红寥 ( oP 匀, ~ 诚 n -忿口花 L . )的干燥成熟果实 。
1
.
2 水红花子醇提物的制备
甚金项目 : 甘肃省自然科学基金计划项目 ( 3 2 3又 l确 2 5一 3)
作者简介 : 张振明 ,男 ,副主任药师 ’ 通讯作者 :葛斌 , 男 , 副主任药师
中国药学杂志 么刃5 年 7 月第 4O 卷第 13 期
用回流提取法 ,将药材适度粉碎 ,用体积分数为
80% 乙醇浸泡 24 h ,水浴中加热回流 ,放冷过滤 ,第 1
次回流 l h , 第 2 及第 3 次各约 0 . 5 h , 回收乙醇 , 浓
缩成浸膏状 ,用蒸馏水配成所需悬浮液 ,贮存备用 。
1
.
3 动物分组及给药川
实验用昆明种小鼠 91 只 , 随机分为 7 组 , 即对
照组 、衰老模型组 、 阳性对照组及试药组 。 采用 19
给药 ,试药 工组 , n 组 , m组 , W组分别 19 相当于水
红花子 0 . 6 , 1 . 2 , 2 . 4 , 4 . 8 9 · d 一 ’醇提物 。 阳性对照组
19维生素 E Zo grn · kg “ ’ · d 一 ’ 。 模型组和对照组 19
相当量的对照液 (只含防腐剂 ) 。 给药同时 ,模型组 ,
阳性对照组和试药组小鼠每天颈背部 s c s % D 一半乳
糖 ( D 一脚 ) 0 . s mL ,对照组 s c 等量注射用水 ,造模及
给药 7 周后进行各项指标测定 。
1
.
4 小 鼠血清 、 肝 、 肾组织 中过氧化脂质降解产物
M DA 的测定
用 珊A 比色法川 ,肝 、 肾组织用 irT s 缓冲液 ( p H
7
.
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2 0叹, 沙崎 , 脚 .刃 No . 13 · 9 1 ·
匀浆 ,取肝 、 肾匀浆 0 . l mL ,按测试盒操作法加入试
剂 ,反应终体积为 4 . 2 mL 。 反应管振荡混匀 , 水浴
中煮沸 40 而 n , 3 s o x g 离心 or 而 n ,上清液于 532
nI 处测吸光度 ( A )值 。
1
.
5 小鼠血清和肝 、 肾组织中 SOD 活力的测定
用亚硝酸盐法 〔4 J ,肝 、 肾组织用 irT s 缓冲液配成
1% 组织匀浆 ,取肝 、 ’肾匀浆 50 拜L ,按测试盒操作法
加人试剂 ,反应体积为 1 . S l l lL 。 反应管振荡混匀 , 37
℃恒温水浴中温育 40 而 n ,加入显色剂 10 而 n 后 , 于
5 0 ln 处测 A 值 。
1
.
6 小鼠血清和肝 、 肾组织中 G SH 一XP 活力的测定
用 m刊 B 法 5[] ,取 1% 肝 、 肾匀浆及 1 1l l n 10 1 . L 一 ’
G SH 各 0 . Z mL (对照管不含 GS H ) , 37 ℃水浴中预温
5 而 n , 按测试盒操作法加人试剂 , 37 ℃水浴中反应
5 而 n , 3 so x g 离心 or 而 n , 取上清液加人显色剂 ,
室温静置 巧 而 n ,于 41 2 nm 处测 A 值 。
1
.
7 小鼠脑组织中廿 的测定
用 so h al 法 6[] ,取小鼠大脑 l o grn , 加人 :2 1氯
仿一甲醇提取液 Z n止 ,充分匀浆 ,滤纸过滤 ,滤渣用提
取液洗涤 ,加提取液至 s mL ,测定荧光强度 (发射波
长 43 5 nl ,激发波长 365 ln ) 。
2 结 果
2
.
1 E F例 ) 对 D 一脚 致衰老模型小 鼠血 清中 MDA ,
so D 及脑组织中脂褐质 ( LF )的影响
D
一脚致衰老模型小鼠血清中 MD A 及脑组织中
LF 明显升高 ,血清中 SOD 明显下降 。 同时 19 相当
于水红花子 0 . 6 , 1 . 2 , 2 . 4 , 4 . 8 g’ 吨一 ` · d 一 ’醇提物 ,能
显著对抗血清中 M DA 及脑组织中 LF 升高 , 对抗血
清中 SO D 下降 ,见表 1。
表 1 E I;戮 )对 D 一脚 致衰老模型小鼠血清中 MDA , so D 及脑
组织中LF 的影响 . n = 10 j 土 `
T ab I D晚 e t of E FI 刃 on M DA an d SO D in s e r u r n , 出记 LF in
het b面ns of 而ce se in le m记 e l e a use d 场 D 一咧 . n = or , 无 土 5
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对照组
模型组
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加印为40012
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注 : l )尸 < 0 . 仿 , 2 ) 尸 < o 刀 l ,模型组与对照组比较 ; 3 ) 尸 > 0 .仍 , 4 ) 尸 < 0 . 05 , 5 ) 尸 <
0
.
01
,试药组与模型组比较
Note
: l )尸 < 0 .仍 , 2 )尸 < 0 . 0 1 珊 以价加】; 3 ) 尸 > 0 05 , 4 ) 尸 < 0 .仍 , 5 ) 尸 < 0 . 0 1 v s m司 e l
.2 2 E F pO 对 D 一卿 致衰老模型小鼠肝 、 肾组织 中
MDA
,
SO D 及 GS H一XP 活力的影响
D
一卿 致衰老模型小鼠肝 、 肾组织中 MDA 明显
升高 , so D 及 GSH一xP 活力均明显下降 。 同时 19 相
当于水红花子 0 . 6 , 1 . 2 , 2 . 4 , 4 . 8 g’ 吨 一 ’ · d 一 ’醇提物 ,
能显著对抗肝 、 肾组织中 M D A 升高 , so D 及 GS H一XP
活力下降 ,见表 2 。
表 2 E f P O 对 D 一蒯 致衰老小鼠肝 、 肾组 织中MD A , so D 及 CS H一xP 活力的影响 . n 二 10 j 土 `
T曲 2 E f 匕Zt of E P氏 ) on le v el , of M DA , so D an d G SH一XP in het il ver an d kl dn e y s of se in le m记 e l 而 ce e a us ed 场 D 一蒯 . n = or , 无 士 `
肝 肾组别— —M DA /卿卜 g ( orP ) 一 1 洲 )/ ~ 卜 g ( orP ) 一 ’ ( ; SF口咖刃卜 g (四 ) 一 ’ 袖刀脚加 l · g (帅 ) 一 ’ ,犯甲~ 卜以脚 ) 一 1 C3 H夕:毗月. 9 (叩 )一 ’梦夕乎护08391蛇5男对照组模型组V E组1几mW 5 .仿 士 1以7 . 65 士 0 . 842 )7 . 02 土 O, 703 )6 . 7 1士 0 . 8 7 3 )5 . 9 1士 1 . 《妈碑)4 . 98 士 0 . 95 4 )4 . 56 土 1 . 124 ) 54 . 5 士 2 . 4菊 .9 士 5 . 妙)5 1 . 7 土 4 . 23 )52 . 3 土 4 . 13 )59 . 3 土 3 , 护)61 7 土 3 . 84 )62 . 2 土 3 矛) 67 . 4 士 7 . 058 . 2 土 5 . 护)62 . 0 士 6 . 护)翻 . 6 士 5 . 少)68 . 6 士 5 . 护)7 1 4 士 6 . 梦)72 . 5 士 5 . 梦) 7 . 92 土 1 . 149 . 85 士 1 . 麟1 )8 . 4 土 1 . 113 )8 . 3 5 士 1 . 263 )7 . 17 士 1 .口 )6 . 6 1 士 1 .护 ).6 4 士 1 .铭月 ) 公 ` 3 士 4 . 75 1 5 士 6 . 72 )56 . 4 土 3 . 矛 )57 . 6 士 5 . 53 )6 1 . 5 士 5 . 94 )65 . 6 土 5 . 护)肠 6 土 3 . 9 乃 土 6 . 3. 2 土 8 4 1). 5 士 8. 2 士 5 .. 1士 9 ., 5 土 8 .l (X) . 1士 9 .注 : l ) p ( 众05 , 2) p < 0 .0 1 ,模型组与对照组比较卿尸 < .0 05 , 4 )P < 0 . 01 ,试药组与模型组比较Note : I )尸 < o 一 05 , 2 ) P < 0 . 0 1 vs on 闹 ; 3 ) 尸 < 0 . 05 , 4 ) P < 0 . 0 1 vs n l x le l3 讨 论小鼠长期注射 D 一蒯 是人造衰老小鼠模型的经典方法 ,衰老模型小鼠可出现代谢功能紊乱 , 自由基过剩 。 自由基过剩可诱发炎症 ,免疫失调 ,恶性肿瘤等多种疾病仁7」。本实验结果表明 , D 一脚 致衰老模型小鼠 19 相
当于水红花子 0 . 6 , 1 . 2 , 2 . 4 , 4 . 8 9 · k g 一 ’ · d 一 ’醇提物 ,
能使血清 、肝 、 肾组织中 M D A及脑组织中廿 显著下
降 ;能使血清 、 肝 、 肾组织中 SO D 及 GS H 一xP 活力显
著提高 ;这提示水红花子醇提物能显著清除 . O H 和
·
9 2
·
hC 认 产知王n J , 2伏万 汤d少, Vol . 刃肠 . 13
抗脂质过氧化 ;能显著清除 优 , 姚仇 及活性氧 。 可
见 ,水红花子醇提物有显著清除氧自由基 ,活性氧及
抗脂质过氧化作用 ,可能对上述与自由基有关的疾
病有防治作用 。
参考文献
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中国药学杂志 2 0 5 年 7 月第 如卷第 13 期
乌司他丁和氨甲环酸在体外循环中对血小板的影响
金秀国 , 方国安 ,刘波 ,刘晓光 ,庄晓玲 , 方汉波 (浙江舟山市人民医院血液学实验室 ,浙江 舟山 3 1拟 )
摘要 : 目的 探讨氛甲环酸 、乌司他丁在心肺转流 ( C P)B 中对血小板的保护作用及其临床意义 。 方法 在 41 例心脏手术患者
C P B 中 , 随机分别加入乌司他丁 (巧 例 ) 、 氛甲环酸 ( 14 例 )及生理盐水 (对照组 , 12 例 ) , 在全身肝素化前 ,肝素化后 or 而 n , 转流
so 而 n , 转流结束肝素中和 后 or 而 n 及术后 24 h 分 别检测血 小板数 ( PL】, ) 、 血小板最大聚集率 (以 GM )及血小板膜糖蛋 白
( C以 l a , C I又Z a , C历 l , C I巧Zp )阳性表达率和平均荧光强度 ( M FI )的 变化 。 结果 肝素化前 3 组各项 指标均无 明显差异 。 肝素
化后 10 而n CD6 2 p 阳性表达率和 M F I , 两用药组明显低于时照组 (分别为 尸 < 0 . 05 和 尸 < 0 . 01 ) ;转流 30 而 n 和转流结束肝素中
和后 10 而 n , 两用药组 P l月, , P A (; M及 CE吟Z a 的 M FI 与对照组相比明显增高 (分别为 P < 0 . 05 , 尸 < 0 . 01 和 尸 < 0 . 0 1 ) , 而 C以 l a ,
C6D 1
,
CD6 2 P 的 MF I和 C6D 2 p 阳性表达率明显减低 (分别为 p < 0 . 05 , 尸 < 0 . 01 和 尸 < 0 . 0 1 ) ;术后 24 h , 两用 药组 P I , , ,以 GM 及
C肠ZP 的 MFI 和 Cl兀 Zp 阳性表达率与对照组相比仍有明显差异 (分别为 p < 0 . 01 和 尸 < 0 . 0 1 ) 。 对照组术后 24 h 与肝素化前
比较 , P IT , PA MG 及 C l又 Z a , c伪 1 , C l为 Zp 的 M F I 和 Cl巧Zp 阳性表达率均存在明 显 差异 (分 别 为 尸 < 0 . 05 , 尸 < 0 . 01 和 尸 <
0
.
0 1 )
;两用药组术后 24 h 与肝素化前比较 , 只有以C M 及 C l巧Zp 阳性表达率存在明显 差异 (分别为 尸 < 0 . 05 和 尸 < 0 . 0 1 ) 。
两用药组同一 时间点 比较 , 只有术后 24 h 时间点的 C既 Zp 阳性表达率有明显差异 ( 尸 < .0 0 1 ) 。 结论 在体外循环中乌司他
丁与氛甲环酸均有一定的血小板保护作用 , 保护作用 两者差异很小 , 但氛 甲环酸的价格便宜 , 值得推广使用 。 体外循环中为
了更好地血液保护 , 仍应尽可能缩短 CBP 时间 。
关键词 : 体外循环 ;氨甲环酸 ;乌司他丁 ;血 小板
中图分类号 : R9 7 2 文献标识码 : A 文章编号 : 10 1 一 2 4男 (2 (X) 5 ) 13 一 峨X珍3 一以
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A仪刃砚A C T : O旧 J EC fl VE oT ivn e ist ga et het e fe c st an c I icl in c s ignj 6 e acn
e of u lin as ta t in a n r l tr a n e a n 刀 。 ` id on 讨a t e let d iur gn c an ll叩己 -
m o朋叮 b” 姐朋 .剐田 1习D D 6 41 叫 ie snt iw ht c aJ 心io p司m o n叨 b y l服 ~ 山vi (」e d iont d l配 e 脚usp at 诩 d o n l , 15 aP it en st ~ ived 山 n as 扭 t in
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( C供 la , C l” Z a , c既 l ,耐 c D石Zp ) ~ ~ uer d l犯 fo 此 he 详` ir aztr on , 10 and 30 m i n u tes ha r b”服 , 10 而 nu est 血 r ha l祖n n ne u tr al i二-
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M axr LJ
. 伍脾 n 触 r a di回 111`司 ot ~ y id ~ 仁J 〕
.
&俪记 尸 , 23 5
( 47 8 )
:
5加 . (收稿日期 : 2X( 又 ~ 08功 )
作者简介 : 金秀国 , 男 , 主管技师 ,在读研究生
中国药学杂志 20 5 年 7 月第 40 卷第 13 期
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:
( 05 80 ) 25 5今抖2 E 一` :lj x舒07 6@ 126 . ~
以众乙 尸爪之丽 J , 2仪 )5 j屿产 , Vol . 40 oN . 月 · 9 3