全 文 ：炮制对黄芥子中芥子碱硫氰酸盐含量的影响
罗跃龙1，何华妙1，刘青凤2，徐德宏1，谭朝阳1
(1. 湖南中医药大学，湖南 长沙，410208;2. 湖南中医药大学湘杏学院，湖南 长沙，410007)
［摘要］ 目的:研究不同炮制条件下黄芥子中芥子碱硫氰酸盐含量的变化。方法:采用高效液相色谱法，Kromasil C18
(4. 6mm × 250mm，5μm)色谱柱，流动相为乙腈 － 0. 08mol /L磷酸二氢钾溶液(12∶ 88) ，检测波长 326nm。结果:芥子碱硫氰酸
盐在 0. 8 ～ 4μg范围内具有良好的线性关系，相关系数 r = 0. 9997，平均加样回收率 99. 23%，ＲSD为 3. 12%(n = 5)。结论:随
着炮制温度的提高和炮制时间的延长，黄芥子中芥子碱硫氰酸盐的含量不断降低，其最佳炮制条件为 140℃、5 ～ 10min。
［关键词］ 芥子碱硫氰酸盐;黄芥子;HPLC;炮制
［中图分类号］Ｒ282. 710. 2 ［文献标识码］A ［文章编号］1003 － 7705(2015)03 － 0154 － 02
基金项目:湖南省大学生研究性学习和创新性实验计划 2010年资助项目;湖南中医药大学校级生物工程重点学科资助项目
第一作者:罗跃龙，男，副教授，研究方向:中药资源及质量研究
通讯作者:谭朝阳，男，医学博士，副教授，研究方向:中药资源及质量研究，E － mail:tomtzy@ 163． com
Effect of processing on sinapine thiocyanate content in mustard［Brassica juncea(L. )Czern. et Coss.］
LUO Yue － long1，HE Hua － miao1，LIU Qing － feng2，XU De － hong1，TAN Chao － yang1
(1. Hunan University of Chinese Medicine，Changsha 410208，Hunan，China;
2. Xiangxing College，Hunan University of Chinese Medicine，Changsha 410007，Hunan，China)
Abstract:Objective:To study the changes in the sinapine thiocyanate content in mustard［Brassica juncea(L.)
Czern. et Coss.］under different processing conditions. Methods:High － performance liquid chromatography was per-
formed on a Kromasil C18 column(4. 6mm ×250mm，5μm)with a mobile phase of acetonitrile －0. 08mol /L potassium
dihydrogen phosphate solution(12∶ 88)at a detection wavelength of 326nm. Ｒesults:The content of sinapine thiocya-
nate showed a good linear relationship with peak area within 0. 8 － 4μg(r = 0. 9997) ;the average recovery rate was
9. 23%，and the relative standard deviation was 3. 12%(n = 5). Conclusion:The content of sinapine thiocyanate in
mustard decreases with the increase in temperature and duration of processing. The optimal processing temperature and
duration are 140℃ and 5 －10 min.
Key words:sinapine thiocyanate;mustard;high － performance liquid chromatography;processing
芥子为常用中药，味辛性温，能豁痰利气温肺，散结通
络止痛，临床上常用于消肿毒及袪痰等。中国药典 2010 年
版收载有两种药材基源，即十字花科植物白芥 sinapis
alba L.和芥 Brassica juncea(L. )Czern. et Coss. 的干燥成熟
种子，前者习称白芥子，后者习称黄芥子［1］。目前研究多集
中于白芥子，黄芥子研究较少。芥子碱是其主要成分之一，
多以硫氰酸盐形式存在。芥子内服多用炒制品，人们对白
芥子炒制过程中芥子碱硫氰酸盐含量变化进行了研究，但
结果并不一致［2 － 3］。本文通过研究黄芥子不同炮制条件下
芥子碱硫氰酸盐含量的变化，探讨其炮制的机制。
1 仪器与试药
日本岛津 LC － 10A 高效液相色谱仪;芥子碱硫氰酸盐
(中国药品生物制品检定所，批号 110702 － 200501，供含量
测定用) ;乙腈为色谱纯，其余均为分析纯;黄芥子购自湖南
廉桥市场，经作者鉴定为芥 Brassica juncea(L. )Czern. et
Coss. 的干燥成熟种子。
2 方法与结果
2. 1 炮制品的制备 取黄芥子药材 9份，每份 50g。其中3份
置烘箱中于 120℃分别烘制 5、10、15min，另 3份于 140℃分别烘
制 5、10、15min，其余 3份于 160℃分别烘制 5、10、15min。
2. 2 芥子碱硫氰酸盐测定的色谱条件 色谱柱:Kromasil
C18(4. 6mm × 250mm，5μm) ，流动相:乙腈 － 0. 08mol /L 磷
酸二氢钾溶液(12 ∶ 88)为流动相;检测波长:326nm;流速:
1. 0mL /min;柱温:30℃;进样量:20μL。芥子碱硫氰酸盐对
照品和黄芥子供试品色谱图见图 1。
2. 3 对照品溶液的制备 取芥子碱硫氰酸盐对照品适量，
精密称定，加流动相制成每 1mL含 0. 2mg的溶液。
2. 4 供试品溶液的制备 取样品研碎，取 1g，精密称定，精
密加入甲醇 50mL，称定重量，超声处理 30min(功率 250W，
频率 20kHz) ，放冷，用甲醇补足损失的重量，滤过，精密量取
续滤液 25mL，蒸干，残渣加流动相溶解并定容至 25mL 量瓶
中，用 0. 45μm的微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。
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第 31 卷第 3 期
2015 年 3 月 HUNAN JOUＲNAL OF TＲADITIONAL CHINESE MEDICINE
Vol. 31 No. 3
Mar 2015
芥子碱硫氰酸盐对照品
黄芥子供试品
图 1 HPLC图
2. 5 标准曲线的绘制 精密量取对照品溶液 2. 0、4. 0、
6. 0、8. 0、10. 0mL，置 10mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇
匀。精密量取 20μL，测定峰面积，以进样量为横坐标，峰面
积积分值为纵坐标，绘制标准曲线，其回归方程为 Y =
8. 85 × 107X － 3. 32 × 105，r = 0. 9997。芥子碱硫氰酸盐在
0. 8 ～ 4μg范围内呈良好线性关系。
2. 6 精密度试验 精密量取黄芥子生品供试品溶液 20μL，
连续进样 5 次，测定峰面积积分值，结果 ＲSD为 1. 8%
2. 7 稳定性试验 精密量取黄芥子生品供试品溶液 20μL，
分别于 0、3、6、9、12h 进样，测定峰面积积分值，结果 12h 内
ＲSD为 2. 8%。
2. 8 重复性试验 精密称取黄芥子生品 5 份，按 2. 4 项下
方法处理样品并测定，结果平均含量为 0. 534%，ＲSD
为 2. 7%。
2. 9 加样回收率 精密称取已知含量的黄芥子生品 5 份，
分别精密加入 0. 2008mg /mL对照品溶液 13mL，再精密加入
甲醇 37mL，按 2. 4 项下方法处理样品并测定，结果见表 1。
表 1 加样回收率(n = 5)
取样量(g) 样品中含量(mg) 加入的量(mg) 测得量(mg) 回收率(%) 平均回收率(%) ＲSD(%)
0. 5014 2. 6775 2. 6104 5. 2412 98. 21
0. 5032 2. 6871 2. 6104 5. 3214 100. 92
0. 5028 2. 6850 2. 6104 5. 2201 97. 12 99. 23 3. 12
0. 5075 2. 7101 2. 6104 5. 2198 96. 14
0. 5061 2. 7026 2. 6104 5. 4112 103. 76
2. 10 样品含量测定 取黄芥子各炮制品，按 2. 4 项下方法
处理样品并测定，按外标法计算含量，结果见表 2。
表 2 黄芥子各炮制品中芥子碱硫氰酸盐含量(%)
炮制温度 5min 10min 15min
120℃ 0. 514 0. 491 0. 487
140℃ 0. 490 0. 483 0. 430
160℃ 0. 457 0. 415 0. 382
3 讨 论
芥子的主要成分有白芥子苷、芥子酶、芥子碱、脂肪油、
蛋白质和黏液质等，其中白芥子苷经芥子酶的作用，水解生
成白芥子油，使药物具有强烈刺激气味。芥子炮制的主要
目的之一是杀酶保苷，灭活芥子酶以防止白芥子苷的降解。
后者在体内可缓慢水解，释放白芥子油而产生治疗效果［4］。
芥子碱也是芥子中主要成分之一，具有抗辐射、抗氧
化、抗衰老、抗炎、降血压、抗雄激素等多种生物活性［5］，药
典规定生品应不能低于 0. 50%，炒芥子不能低于 0. 40%。
张振凌等［2］的研究表明白芥子炮制后芥子碱硫氰酸盐含量
降低，其中“重炒”较“微炒”降得更多，但梁燕等［3］的研究认
为炒制后反而有所增加。
由于炒制时温度不易控制，故本文采用烘箱烤制的方
法来模拟炒制过程，以考察炮制温度和时间对芥子碱硫氰
酸盐含量的影响。实验结果表明，随着炮制温度的提高和
炮制时间的延长，黄芥子中芥子碱的含量在不断降低。经
160℃炮制 15min后，其含量降至 0. 382%，已达不到药典含
量限度规定。因此在保证酶被灭活的前提下，应尽量降低
炮制温度和减少炮制时间，以更多地保留芥子碱的含量。
实验结果同时说明芥子传统的炮制方法“清炒”是具有科学
的依据。
作者研究过炮制条件对芥子酶活性的影响，发现其炮
制条件应不低于 140℃，否则需较长时间才能达到将芥子酶
灭活(实验结果另文发表) ，结合本文的研究结果，可以确定
芥子的最佳炮制条件是 140℃、5 ～ 10min。
参考文献
［1］ 国家药典委员会 . 中华人民共和国药典(一部) ［M］. 北京:
中国医药科技出版社，2010:149.
［2］ 张振凌，杨海玲，张本山，等 . 炮制对白芥子中芥子碱硫氰酸
盐含量及煎出量的影响［J］. 中国中药杂志，2007，32(19) :
2067 － 2069.
［3］ 梁燕，赖庆水，刘强 . 炒制对白芥子中芥子碱硫氰酸盐含
量的影响［J］. 南方 医 科 大 学 学 报，2007，27 (10) :
1579 － 1580.
［4］ 欧敏锐，吴国欣，林跃鑫 . 中药白芥子研究概述［J］. 海峡药
学，2001，13(2) :1 － 3.
［5］ 柯木根，吴国欣，林燕妮，等 . 芥子碱的研究概况［J］. 中草
药，2007，38(9) :1436.
(收稿日期:2015 － 01 － 08)
·551·第 3 期 罗跃龙，何华妙，刘青凤，等:炮制对黄芥子中芥子碱硫氰酸盐含量的影响