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* 基金项目:郑州市科技攻关项目(编号:10TPGS485 － 2)
收稿日期:2011 － 09 － 30
(编辑 李亚峰)
文章编号:1001 － 6910(2012)01 － 0068 － 03 ·药学研究·
不同产地白芥子和黄芥子中芥子碱硫氰酸盐的含量比较
王海波
(河南省食品药品检验所，河南 郑州 450003)
摘要 目的:建立芥子碱硫氰酸盐的含量测定方法，并比较
不同产地白芥子和黄芥子中芥子碱硫氰酸盐的含量。方法:
采用高效液相色谱法，Phenomenex Luna C18(4． 6 mm ×250 mm，
5 μm)色谱柱，流动相为乙腈 － 0． 08 moL /L 磷酸二氢钾
(10∶ 90，体积比)，流速 1． 0 mL /min，柱温 30 ℃，检测波长
326 nm。结果:芥子碱硫氰酸盐在 0． 205 2 ～ 2． 052 0 μg 间
呈现良好的线性关系(r = 0． 999 96)，平均加样回收率为
103． 66%，RSD = 0． 62%。结论:本方法结果准确，重现性
好，操作简便，可用于芥子的控制质量。
关键词:高效液相色谱法;芥子;芥子碱硫氰酸盐;含量测
定;产地
中图分类号:R284 文献标志码:B
芥子为常用中药，始载于梁代《名医别录》，以
后历代本草中均有记载，自 1953 年以来被我国历版
药典收载。2010 版《中国药典》在芥子项下同时收
载了 2 个药材基源，即十字花科植物白芥 Sinapis al-
ba L．或黄芥 Brassica juncea (L．)Czern． et Coss．
的干燥成熟种子，前者习称白芥子，后者习称黄芥
子［1］。两种芥子的临床功效基本一致，但白芥子的
祛痰平喘作用强于黄芥子，黄芥子的毒性大于白芥
子，因此白芥子的市场需求量较大。由于两者的外
观性状相似，有不法商家把黄芥子用硫黄熏烤，冒充
白芥子销售，严重影响了临床用药的安全有效性。
芥子中含有大量的芥子碱类成分。芥子碱类成分为
一类季铵盐生物碱，广泛存在于十字花科植物中，代
表性分是芥子碱。芥子碱多以硫氰酸盐形式存在，
具有抗辐射、抗氧化、抗衰老、抗雄激素、降血压等多
种生物活性［2-3］。芥子碱的含量测定方法多为高效
液相色谱法［4］，此外还见有毛细管电泳法［5］和紫外
分光光度法［6］的报道。本文以芥子中的主要有效
成分芥子碱硫氰酸盐作为指标成分，以高效液相色
谱法测定不同产地的白芥子和黄芥子中芥子碱硫氰
酸盐的含量，并比较白芥子和黄芥子中芥子碱硫氰
酸盐的含量差异，以控制药材质量。此方法操作简
便，重现性好，分析快速准确。
1 药品、试剂与仪器
白芥子和黄芥子购于内蒙古和河北两地。芥子
碱硫氰酸盐对照品(批号 111721-200501，供含量测
定用) ，购自中国药品生物制品检定所;乙腈，色谱
纯，德国 MERCK公司产品;水为超纯水，临用新制;
其余试剂均为分析纯。Waters 2695 液相色谱仪，四
元泵，在线脱气器，二极管阵列检测器，Empower 色
谱工作站，美国沃特世科技有限公司产品;XR-
205SM-DR电子分析天平，瑞士 Precisa 公司产品;
KQ-300 型超声波提取器，40 kHz，300 W，昆山市超
声仪器有限公司产品。
2 方法与结果
2． 1 色谱条件及系统适用性试验
色谱柱为 Phenomenex Luna C18(4． 6 mm ×250 mm，
5 μm)色谱柱，流动相为乙腈 － 0． 08 moL /L 磷酸二
氢钾(10 ∶ 90，体积比) ，流速 1． 0 mL /min，柱温
30 ℃，检测波长 326 nm，进样量 10 μL，理论塔板数
按芥子碱硫氰酸盐峰计算应不低于 3 000。
2． 2 对照品溶液的制备
取芥子碱硫氰酸盐对照品适量，精密称定，用流
·86· 中医研究 2012 年 1 月 第 25 卷 第 1 期 TCM Res． January 2012 Vol． 25 No． 1
动相溶解并制成每 mL中含 0． 2 mg的溶液，即得。
2． 3 供试品溶液的制备
取本品细粉约 1 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，
加甲醇 50 mL，超声处理 20 min(功率 250 W，频率
20 kHz) ，滤过。滤渣再用甲醇同法提取 3 次，滤液
合并，减压回收溶剂至干，残渣加流动相溶解并转移
至 50 mL量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，
取续滤液，即得。
2． 4 方法学考察
2． 4． 1 检测波长考察
对芥子碱硫氰酸盐对照品和芥子药材供试品中
芥子碱硫氰酸盐色谱峰进行紫外吸收光谱扫描，结
果均在 326 nm处有最大吸收，且对照品和供试品色
谱中芥子碱硫氰酸盐色谱峰的紫外吸收光谱基本一
致，峰纯度较好。见图 1。
A．对照品色谱图;B．对照品光谱图;C．供试品色谱图;D．供试品光谱图
图 1 对照品与供试品的色谱图、光谱图
2． 4． 2 线性关系的考察
取不同浓度芥子碱硫氰酸盐对照品溶液，浓度
分别为 0． 205 20，0． 145 00，0． 102 60，0． 051 30，
0． 020 52 g /L，精密吸取 10 μL，注入液相色谱仪，测
定。以进样量(μg)为横坐标，以峰面积为纵坐标，
绘制标准曲线。结果:芥子碱硫氰酸盐在 0． 205 2 ～
2． 052 0 μg间线性良好，回归方程 Y = 1． 977 × 106X
－ 2 726(r = 0． 999 96)。见表 1。
表 1 芥子碱硫氰酸盐线性关系考察
进样量 X /μg 0． 205 2 0． 513 0 1． 026 0 1． 450 0 2． 052 0
峰面积 Y 392 311 1 033 080 2 014 873 2 860 824 4 058 112
2． 4． 3 精密度试验
取同一对照品溶液，连续进样 6 次，以芥子碱硫
氰酸盐峰面积计算，RSD =0． 30%。见表 2。
表 2 精密度试验结果
序号 1 2 3 4 5 6 平均值 RSD /%
峰面积 936 542 941 730 939 087 936 048 935 223 934 178 937 135 0． 30
2． 4． 4 稳定性试验
取同一供试品溶液，分别在 0，2，4，6，8，12 h 进
样，测定峰面积，以芥子碱硫氰酸盐峰面积计算，
RSD =0． 21%。结果表明供试品溶液在 12 h 内基
本稳定，见表 3。
表 3 稳定性试验结果
时间 /h 0 2 4 6 8 12 平均值 RSD /%
峰面积 3 082 934 3 080 038 3 084 194 3 087 980 3 072 308 3 030 174 3 072 938 0． 70
2． 4． 5 重复性试验
取同一批次样品制备 6 份供试品，测定芥子碱
硫氰酸盐平均质量分数为 0． 733%，RSD = 2． 00%，
表明重复性良好。见表 4。
·96·中医研究 2012 年 第 25 卷 第 1 期 TCM Res． January 2012 Vol． 25 No． 1
表 4 重复性试验结果
编号 1 2 3 4 5 6 平均值 RSD /%
质量分数 /% 0． 753 0． 733 0． 717 0． 734 0． 717 0． 746 0． 733 2． 00
2． 4． 6 加样回收率试验
取已知样品(芥子碱硫氰酸盐的质量浓度为
6． 99 mg /g)6 份，每份 0． 5 g，精密加入芥子碱硫氰
酸盐对照品的甲醇溶液(76． 48 mg /L)50 mL，按照
2． 3 项下方法操作，制备加样供试品溶液，测定芥子
碱硫氰酸盐的含量，计算回收率，结果见表 5。
表 5 加样回收率试验结果
称样量 / g 样品含量 /mg 对照品加入量 /mg 测得总量 /mg 回收率 /% 平均回收率 /% RSD /%
0． 5215 3． 645 3． 824 7． 625 104． 08
0． 5238 3． 661 3． 824 7． 625 103． 66
0． 4980 3． 481 3． 824 7． 475 104． 44
103． 66 0． 62
0． 5123 3． 581 3． 824 7． 525 103． 14
0． 5004 3． 498 3． 824 7． 425 102． 69
0． 5186 3． 625 3． 824 7． 600 103． 95
2． 4． 7 样品测定
将收集的不同来源的白芥子和黄芥子样品按
2． 3 项下的方法制成供试品溶液，取供试品溶液及
2． 2 项下对照品溶液各 10 μL，进样测定，结果见
表 6。
表 6 样品测定结果
来源 产地 质量分数 /%
白芥子
内蒙 0． 82
河北 0． 53
黄芥子
内蒙 0． 70
河北 0． 71
3 讨 论
3． 1 供试品溶液的制备方法
在实验中，选择比较了水浴加热回流和超声提
取两种提取方法，结果测得的芥子碱硫氰酸盐含量
无明显差别。因为超声提取使用方便，可操作性强，
所以选用超声提取作为提取方法。
3． 2 流动相的选择
原 2005版《中国药典》一部中采用梯度洗脱法测
定芥子中芥子碱硫氰酸盐含量，试验表明对照品保留
时间过短，分离度较差。笔者结合参考文献，采用十
八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈 －0． 08 moL /L
磷酸二氢钾(10∶ 90，体积比)为流动相，以芥子中的
主要有效成分芥子碱硫氰酸盐作为指标成分，建立
了高效液相色谱法测定本品中芥子碱硫氰酸盐的含
量，以控制药材及饮片质量。此方法操作简便，重现
性好，分析快速准确。
3． 3 白芥子和黄芥子中芥子碱硫氰酸盐的含量
由样品测定结果可知，芥子中芥子碱硫氰酸盐
的含量均符合 2010 版《中国药典》一部芥子碱硫氰
酸盐质量分数不得低于 0． 50%的限度规定，且不同
产地的白芥子含量差异较大。目前由于条件所限，
收集到的白芥子和黄芥子样品较少，尚不能根据实
验结果判断两种的芥子碱硫氰酸盐含量有无显著性
差异。在今后的研究中，可继续积累实验数据，比较
白芥子和黄芥子的芥子碱硫氰酸盐的含量规律。
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收稿日期:2011 － 09 － 23;修回日期:2011 － 11 － 29
(编辑 陶 珠)
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