全 文 ：2008年总第40卷第7期
槐(SophorajaponicaL.)为豆科(Leguminosae)
植物,槐枝皮为槐的嫩枝皮,其作为药用历史悠久。
我们已对槐角、槐种子、槐树叶进行了系统的化学成
分研究,发现了大量的黄酮类成分[1-3]。目前,尚未见
有关槐枝皮成分的研究报道。为此,我们对采于南京
的槐枝皮进行了化学成分研究,现报告如下。
1 仪器与材料
药材采自江苏省南京市江宁区,原植物由中国
药科大学乔春峰博士鉴定。熔点测定用XT4双目体
视显微熔点测定仪测定(温度未经校正);红外光谱
用 NicoletImpact410型红外光谱仪测定;核磁共
振谱用 BrukerACF-400型核磁共振仪 (1H-NMR
400MHz,13C-NMR100MHz,DMSO-d6为溶剂,TMS
为内标)测定;ESI-MS测定使用 HP1100型质谱仪
(LC/MSD System,ESIMode)。SephadexLH-20为
Pharmacia公司产品进口分装,薄层层析及柱层析硅
胶均为青岛海洋化工厂生产,其余试剂为分析纯。
2 提取与分离
取干燥的槐枝皮 5.6kg,碾碎,经工业乙醇回流
提取得总浸膏,依次用石油醚、氯仿和正丁醇萃取,
取正丁醇部分的浸膏,湿法上样于 20倍量的硅胶
(200～300目)柱上,用氯仿-甲醇梯度洗脱,所得混
合物经硅胶柱反复层析,用Sephadex LH-20柱纯
化,得到化合物I-IX。
3 结构鉴定
化合物 I:黄色粉末,mp>300℃。易溶于甲醇、丙
酮,在365nm紫外光下显黄色荧光,氨熏后荧光加
强,盐酸-镁粉反应呈阳性,FeCl3反应呈阳性。1H-
NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:12.42(1H,s,5-OH),10.74
(1H,s,7-OH),9.57(1H,s,3′-OH),9.34(1H,s,3-OH),
9.29(1H,s,4′-OH),7.68(1H,d,J=2.0Hz,2′-H),7.54
(1H,dd,J=8.6,2.0Hz,6′-H),6.87(1H,d,J=8.5Hz,5′-H),
6.39(1H,d,J=2.0Hz,8-H),6.16(1H,d,J=2.0Hz,6-H)。
理化性质和光谱数据与文献[4]报道的槲皮素相符,
与槲皮素对照品薄层层析Rf值一致,故鉴定该化合
物为槲皮素(quercetin)。
化合物I:黄色粉末,mp>300℃。易溶于甲醇、丙
酮,在365nm紫外光下显黄色荧光,氨熏后荧光加强,
盐酸-镁粉反应呈阳性,FeCl3反应呈阳性。1H-NMR
(400MHz,DMSO-d6)δ:12.44(1H,s,5-OH),10.73(1H,s,
7-OH),10.08(1H,s,4′-OH),9.35(1H,s,3-OH),8.02(2H,
d,J=8.8Hz,2′,6′-H),6.91(2H,d,J=8.8Hz,3′,5′-H),6.42
(1H,d,J=2.0Hz,8-H),6.17(1H,d,J=2.0Hz,6-H)。与文献
[4]报道的山柰酚相符,与山柰酚对照品薄层层析Rf值
一致,故鉴定该化合物为山柰酚(kaempferol)。
化合物 II:淡黄色针晶 (MeOH),mp297℃～
298℃。溶于吡啶、热醇和热丙酮,不溶于水;盐酸-镁
粉反应呈阴性,浓硫酸反应呈黄色。1H-NMR
(400MHz,DMSO-d6)δ:12.96(1H,s,5-OH),10.87(1H,
s,7-OH),9.58(1H,s,4′-OH),8.32(1H,s,2-H),7.36(2H,
d,J=6.6Hz,2′,6′-H),6.82(2H,d,J=6.6Hz,3′,5′-H),6.38
(1H,d,J=2.0Hz,8-H),6.22(1H,d,J=2.0Hz,6-H)。理化
性质和光谱数据与对照品染料木素一致,故确定该
化合物的结构为染料木素(genistein)。
化合物 IV:白色粉末,mp220℃~221℃,盐酸-
镁粉反应呈阴性,硫酸反应呈亮黄色,Molish反应呈
阳性。化合物经酸水解,产物通过 HPTLC鉴定有染
料木素,通过 PC鉴定有葡萄糖,UVλmaxMeOH(nm):
316,300sh,260;IRνmaxKBr(cm-1):3410,2977,2944,1656,
1608,1582,1502,1497,1425,1380,1368,1307,1244,1187,
槐枝皮中黄酮类成分研究
王春桃 1 唐于平 2 周 玲 2 高浩学 2
(1.海南省药品检验所,海南海口570216;2.南京中医药大学,江苏南京210046)
摘 要 目的:研究槐(SophorajaponicaL.)枝皮中的化学成分。方法:采用硅胶柱反复层析、SephadexLH-20层析等技术手
段分离纯化单体,通过理化常数测定和光谱分析鉴定其化学结构。结果:从槐枝皮正丁醇萃取部分共分得8个化合物,它们的结构
确定为槲皮素(quercetin,I)、山柰酚(kaempferol,I)、染料木素(genistein,II)、染料木素7,4′-二葡萄糖苷(genistein7,4′-di-O-β-D-
glucoside,IV)、槐属双苷 (sophorabioside,V)、樱黄素 4′-O-β-D-葡萄糖苷 (prunetin4′-O-β-D-glucoside,VI)、槐属苷
(sophororicoside,VI)、染料木苷(genistin,VII)。结论:这些化合物均为首次从槐枝皮中分离得到,为进一步的活性筛选奠定了基础。
关键词 槐枝皮 黄酮 分离和提纯
中图分类号 R282.71 文献标识码 A 文章编号 1672-397X(2008)07-0065-03
治 法 方 药
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1070,1046;ESI-MS(m/z):657[M+2MeOH-H]-。1H-
NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:12.91(1H,s,5-OH),8.50
(1H,s,2-H),7.53(2H,d,J=8.5Hz,2′,6′-H),7.09(2H,d,J=
8.5Hz,3′,5′-H),6.74(1H,d,J=1.4Hz,8-H),6.51(1H,d,J=
1.4Hz,6-H),5.08(1H,d,J=7.1Hz,1′-H),4.92(1H,d,J=
6.8Hz,1′′-H),3.16~3.73(m,其他糖质子);13C-NMR
(100MHz,DMSO-d6)δ:155.3(C-2),124.2(C-3),180.6
(C-4),161.8(C-5),99.8(C-6),163.3(C-7),94.8(C-8),
157.5(C-9),106.3(C-10),122.4(C-1′),130.3(C-2′,
6′),116.2(C-3′,5′),157.4(C-4′),100.0(C-1′),73.3
(C-2′),76.6(C-3′),69.8(C-4′),77.2(C-5′),60.8
(C-6′),105.0(C-1′′),73.4(C-2′′),76.8(C-3′′),69.9
(C-4′′),77.3(C-5′′),60.8(C-6′′)。理化性质和光谱
数据与文献 [5]报道的染料木素7,4′-二葡萄糖苷一
致,故确定该化合物为染料木素 7,4′-二葡萄糖苷
(genistein7,4′-di-O-β-D-glucoside)。
化合物V:白色粉末,mp250℃~251℃,盐酸-镁
粉反应呈阴性,硫酸反应呈亮黄色,Molish反应呈阳
性。化合物经酸水解,产物通过 HPTLC鉴定有染料
木素,通过 PC鉴定有 D-葡萄糖和 L-鼠李糖;UV
λmaxMeOH (nm):325,261;IR νmaxKBr (cm-1):3400,2900,
1370,1650,1603,1563,1485,1176,1060,1010,880,805;
ESI-MS(m/z):577[M-H]-。1H-NMR(400MHz,DMSO-
d6)δ:12.91(1H,s,5-OH),10.94(1H,s,7-OH),8.39(1H,
s,2-H),7.49(2H,d,J=8.5Hz,2′,6′-H),7.05(2H,d,J=
8.5Hz,3′,5′-H),6.41(1H,brs,8-H),6.24(1H,brs,6-H),
5.13(1H,brs,1′′-H),5.06(1H,d,J=5.2Hz,1′-H),3.19~
3.89(m,othersugarprotons),1.20(3H,d,J=3.7Hz,6′′-
H);13C-NMR (100MHz,DMSO-d6)δ:154.5(C-2),
124.2(C-3),180.0(C-4),161.9(C-5),99.0(C-6),164.3
(C-7),93.7(C-8),157.6(C-9),104.4(C-10),121.9(C-
1′),130.2(C-2′,6′),115.6(C-3′,5′),157.0(C-4′),98.1
(C-1′),76.3(C-2′),77.4(C-3′),69.8(C-4′),76.8
(C-5′),60.5(C-6′),100.4(C-1′′),70.4(C-2′′),70.3
(C-3′′),71.8(C-4′′),68.2(C-5′′),18.0(C-6′′)。理
化性质和光谱数据与文献[5]报道的槐属双苷一致,
故确定该化合物为槐属双苷(sophorabioside)。
化合物 VI:白色粉末,mp168℃~169℃,盐酸-
镁粉反应呈阴性,硫酸反应呈黄色,Molish反应呈阳
性。化合物经酸水解,产物通过 HPTLC鉴定有樱黄
素,通过 PC鉴定有 D-葡萄糖;UVλmaxMeOH(nm):
260;IRνmaxKBr(cm-1):3416,2978,2933,1657,1612,1579,
1502,1432,1380,1235,1069,1046,1018;ESI-MS(m/z):
445[M-H]-。1H-NMR (400MHz,DMSO-d6)δ:12.91
(1H,s,5-OH),8.47(1H,s,2-H),7.52(2H,d,J=8.7Hz,2′,
6′-H),7.11(2H,d,J=8.7Hz,3′,5′-H),6.68(1H,d,J=
2.2Hz,8-H),6.43(1H,d,J=2.2Hz,6-H),4.91(1H,d,J=
7.3Hz,1′-H),3.88(3H,s,7-OMe),3.19~3.87(m,other
sugarprotons);13C-NMR (100MHz,DMSO-d6)δ:
154.7(C-2),124.0(C-3),180.2(C-4),161.7(C-5),
98.0(C-6),165.2(C-7),92.4(C-8),157.4(C-9),105.3
(C-10),122.1(C-1′),130.0(C-2′,6′),116.0(C-3′,5′),
157.3(C-4′),100.3(C-1′),73.1(C-2′),76.5(C-3′),
69.6(C-4′),77.0(C-5′),60.6(C-6′),56.0(7-OMe)。
理化性质与光谱数据与对照品樱黄素4′-O-β-D-葡
萄糖苷一致,故确定该化合物为樱黄素4′-O-β-D-
葡萄糖苷(prunetin4′-O-β-D-glucoside)。
化合物 VI:白色粉末,mp258℃~259℃,盐酸-
镁粉反应呈阴性,硫酸反应呈黄色,Molish反应呈阳
性。化合物经酸水解,产物通过 HPTLC鉴定有染料
木素,通过 PC鉴定有 D-葡萄糖;UVλmaxMeOH(nm):
327,261;IR νmaxKBr(cm-1):3300,1657,1608,1565,1502,
1178,1075,1045,1010,880,818;ESI-MS(m/z):431[M-
H]-。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:12.90(1H,s,5-
OH),10.89(1H,s,7-OH),8.38(1H,s,2-H),7.49(2H,d,
J=8.8Hz,2′,6′-H),7.10(2H,d,J=8.8Hz,3′,5′-H),6.40
(1H,d,J=2.2Hz,8-H),6.23(1H,d,J=2.2Hz,6-H),4.91
(1H,d,J=7.2Hz,1′-H),3.14~3.72 (m,othersugar
protons);13C-NMR(100MHz,DMSO-d6)δ:154.9(C-
2),124.8(C-3),180.6(C-4),162.4(C-5),99.6(C-6),
164.8(C-7),94.4(C-8),158.2(C-9),105.0(C-10),
122.5(C-1′),130.6(C-2′,6′),116.7(C-3′,5′),157.8
(C-4′),100.8(C-1′),73.7(C-2′),77.4(C-3′),70.3
(C-4′),77.0(C-5′),61.3(C-6′)。理化性质与光谱
数据与文献[5]报道的槐属苷一致,故确定该化合物
为槐属苷(sophororicoside)。
化合物VII:白色粉末,mp250℃~251℃,盐酸-
镁粉反应呈阴性,硫酸反应呈黄色,Molish反应呈阳
性。化合物经酸水解,产物通过 HPTLC鉴定有染料
木素,通过 PC鉴定有 D-葡萄糖;UVλmaxMeOH(nm):
327,264;IR νmaxKBr(cm-1):3443,3236,1658,1620,1580,
1497,1181,1088,1043,988,828;ESI-MS(m/z):431[M-
H]-。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:12.87(1H,s,5-
OH),9.53(1H,s,4′-OH),8.36(1H,s,2-H),7.34(2H,d,J=
8.4Hz,2′,6′-H),6.77(2H,d,J=8.4Hz,3′,5′-H),6.66(1H,
brs,8-H),6.41(1H,brs,6-H),5.06(1H,d,J=7.2Hz,1′′-
H),3.16~3.72 (m,othersugarprotons);13C-NMR
(100MHz,DMSO-d6)δ:154.5(C-2),122.5(C-3),
180.4(C-4),161.6(C-5),99.5(C-6),162.9C-7),94.5
(C-8),157.4(C-9),106.0(C-10),120.9(C-1′),130.1
(C-2′,6′),114.9(C-3′,5′),157.2(C-4′),99.8(C-1′′),
73.0(C-2′′),77.1(C-3′′),69.4(C-4′′),76.3(C-5′′),
60.6(C-6′′)。理化性质与光谱数据与对照品染料木
苷一致,故确定该化合物为染料木苷(genistin)。
治 法 方 药
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4 讨论
综上所述,我们从槐枝皮中分离得到2个黄酮
醇、1个异黄酮和5个异黄酮苷类成分,它们的结构
经波谱和化学方法确定为槲皮素(quercetin,I)、山柰
酚(kaempferol,I)、染料木素(genistein,II)、染料木素
7,4′-二葡萄糖苷(genistein7,4′-di-O-β-D-glucoside,
IV)、槐属双苷(sophorabioside,V)、樱黄素4′-O-β-D-
葡萄糖苷(prunetin4′-O-β-D-glucoside,VI)、槐属苷
(sophororicoside,VI)和染料木苷(genistin,VII),均为
首次从槐枝皮中分离得到。通过以上的研究基本弄清
了槐枝皮所含的主要化学成分黄酮类化合物,为今后
进一步研究其药物活性奠定了基础。
5 参考文献
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andidentificationofantioxidantsfromSophorajaponica.J.
AsianNat.Prod.Res.,2002,4(2):123
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[4] 唐于平,楼凤昌,王景华,等.银杏叶中黄酮类成分的研究.
中国药学杂志,2001,36(4):231
[5] 唐于平,楼凤昌,马雯,等.槐果皮中的异黄酮甙类成分.中
国药科大学学报,2001,32(3):187
(志谢:中国科学院上海有机化学研究所协助测定
核磁共振谱,中国药科大学分析测试中心测试质谱。)
第一作者:王春桃(1970-),女,主管药师,本科
学历,主要从事中药的检验与研究工作。
通讯作者:唐于平。电子邮箱:yupingtang@nju
tcm.edu.cn
收稿日期:2007-12-20
编辑:乔 婧 吴 宁
方剂药物配伍实质是方剂组成的药物之间相互
交错的复杂对应关系,这种药物之间、药物组团之间
的对应关系形成了一个单维结构的数据集合,数据之
间环环相扣,交错关联,信息量大。数据挖掘技术正是
通过对数据的特征、关系、聚类、趋向、偏差和特殊现
象的深层多维分析,来揭示数据间复杂、特殊的关系,
发现其隐含的规律。我们应用布尔关联规则,对四君
子汤类方进行了药物配伍规律方面的研究。
1 样本数据库的构建
四君子汤为治疗脾胃气虚的基础方,具有深厚的
临床实践基础,文献记载量大,能够收集到大量的临床
诊疗信息,故选择四君子汤类方作为分析对象。将数据
挖掘方法运用于四君子汤类方配伍规律的分析,一方
面能够发掘出四君子汤在历代临床使用中潜在的配
伍、加减变换规律,以验证和升华中医理论对四君子汤
类方的认识,更好的指导临床用药;另一方面,也对数
据挖掘技术运用于中医理论和临床的研究进行了方法
学的探讨。我们采用以方类方的方式,将四君子汤类方
界定为在药物组成、配伍规律上包含四君子汤或者其
基础配伍的一类方剂。具体选方标准如下:
(1)使用原方药物者:人参+白术+茯苓+炙甘草。
(2)包含以下药物结构者:人参+白术;人参+茯
苓;人参+白术+茯苓。
运用以上选方标准,从《中医方剂大辞典》[1]、《中
医类方辞典》[2]中收集自宋以后的四君子汤类方,共
967首,建立分析模版库。
2 数据挖掘方法
布尔关联规则是数据挖掘技术的方法之一,运用
布尔关联规则挖掘四君子汤类方药物配伍规律研究
张 昱 陈云慧 王 燕 袁学刚 蒋永光
(成都中医药大学,四川成都610075)
指导:周训伦
关键词 四君子汤 类方 数据挖掘 布尔关联规则
中图分类号 R289.5 文献标识码 A 文章编号 1672-397X(2008)07-0067-02
基金项目:四川省中医药管理局科研课题(2007XS17)
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