全 文 ：中华理疗杂志 9 9 5 1年 n 月第 8 1卷第 4 期 · 20 9 ·
蚕砂光敏剂对瘤区微血管作用的电镜观察
徐敏源 陈 形 钟济 秀 李唯佳
光敏 剂在光 动 力学 疗 法 中己应用 于 临
床「’ 一 ’ j, 但对其机制尚未完全清楚 。 目前使用的
光敏剂主要是血叶琳衍生物 ( H P D ) , 蚕砂光敏
剂是我国传统中药蚕砂中提取的一种以叶绿三
酸 为主要成分的新型光敏剂 , 叶绿素衍 生物
(C P D ) 及提纯物 C P D 3 , 经临床和动物实验表
明 , C P D 对肿瘤的疗效和 H P D 相似 , 并具有皮
肤光毒反应轻 , 可 口服的优点 。 通过小鼠移植
瘤 , 使用 C P D 和 C P D 。 经光照后不同时间 , 对
瘤区微血管的作用进行了电镜观察 , 可见明显
损伤作用 , 为光敏剂治疗肿瘤提供科学依据 。
电镜样品制备及观察 , 上述各组每 只小鼠
的肿瘤块均一分为二按下列常规方法 : 透射电
镜 : 用 2 . 5 %戊二醛和 1%锹酸双固定后 . 丙酮
梯度脱水 ; 环氧树脂 E p o n , , ’ 包埋 ; L K B 一 s s o o l x l
型超薄切片机切片 , 其厚度约 7 o n m ; 铀一铅双
固定 ; H 一 6 0 0 A 型电镜观察 , 工作电压 7 k5 V . 放
大倍数 2 0 0 0一 2 0 0 0 0 。 扫描 电镜 : 用 2 . 5旦石戊二
醛和 1%锹酸双固定 ; H C P 一 2 型临界点干燥机
干燥 ; H U S 一 S G B 高真空涂膜机喷金 ; T S M 一 2 型
电镜观察 , 工作电压 20k v . 放 大倍 数 50 一
2 0 0 0
。
材料和方法 结果和讨论
蚕砂光敏剂 C P D 由民生药厂提供 , C P D 3
在实验室用 C P D 经聚丙烯酞胺 ( iB 。 一G e l )P 凝
胶层析提纯取得 。 肝癌腹水型小鼠由中国科学
院药物研究所购置 , 接种移植瘤的 NI H 小鼠由
浙江省动物中心购置 , 取小鼠肝癌腹水用生理
盐水以 1 : 1 稀释注射到小鼠耳壳皮下 , 注射量 `
为 0 . l m l/ 只 , 接种后 5 一 6 夭 , 肿瘤长至直径约
.0 sc m 进行实验 .
N IH 小鼠 8 0 只 , 体重 1 8~ 2 0 9 , 共分成
5 组 , ①空白组 (不给药 、 不照光 ) 5 只 ; ②不
给药照光 20 分钟组 5 只 ; ③给药不照光 , 给药
后 4 小时 , 各 5 只 ; ④给 C P D 加照光组共 30
只 , 分成 6 组 (5 只 /组 ) , 光照后 5 、 30 、 60 分
钟和 2 、 4 、 2 4 小时 ; ⑤给 C P D : 加光照组 3 0 只 ,
分成 6 组 (5 只 /组 ) , 光照后 5 、 30 、 60 分钟和
2
、
4
、
24 小时 。 给药用尾静脉注射 , 药量 为
s o m g / k g
, 给药后 4 小时用波长 6 6 0士 l o n m , 功
率密度 2 0 m w c/ m ’ 的红光照射 20 分钟 。
本课题受国家自然科学 基金和省测试墓金资助
作者单 位 : 3 1 。。 1 3 杭州 , 浙江省医学科学院
给药照光后 , 5 分种和 30 分钟各组的肿瘤
组织均可见到微血管解体 , 管壁的胶原纤维断
裂和管腔中淋巴细胞的破损 (附图 1 、 2) 。 给药 `
光照后 , 1 、 2 、 4 小时各组的肿瘤组织 , 尚可见
微血管和血管内皮细胞的破裂 , 管壁部分胶原
纤维断裂外溢 , 管腔中可观察到淋巴细胞和碎
片 (附图 3 、 4) 。 给药光照后 , 24 小时组的肿
瘤组织均未见有破损的微血管 。 单给药不光照
和单光照不给药和空白对照组原肿瘤组织细胞
的形态结构均无明显差别 。 C P D 和 C P D 3 对肿
瘤组织的杀伤作用差异无显著性 。
光敏剂 H P D 对肿瘤杀伤作用的机制已进
行了多方面的研究 , 有二种不同的观点 。 一种
认为光敏剂的杀伤作用最早发生在肿瘤组织的
微血管系统 , 由于微血管的损伤而导致血液循
环的阻断 , 引起肿瘤组织的缺血性坏死 ’ `一 ’ 。 另
一种认为其杀伤效应是对微血管系统和肿瘤细
胞同时受到损伤 , 而微血管的损伤只是一种杀
伤肿瘤组织的继发性因素 [ ,一 ’ 2 3 . 本实验结 果与
后一种观点一致的 。
蚕砂光敏剂对肿瘤组织的杀伤机制从超微