全 文 ：书第 39 卷 第 11 期 东 北 林 业 大 学 学 报 Vol． 39 No． 11
2011年 11 月 JOURNAL OF NORTHEAST FORESTRY UNIVERSITY Nov． 2011
1)国家自然科学基金(30972083)、吉林省科技发展计划项目
(20090574)资助。
第一作者简介:胡薇，女，1966 年 1 月生，吉林农业大学生命科学
学院，副教授。
收稿日期:2011 年 2 月 24 日。
责任编辑:张建华。
梅花鹿 IGF1 全长 cDNA克隆及在鹿茸组织的表达1)
胡 薇 孟星宇 田玉华 刘 宁
(吉林农业大学，长春，130118)
摘 要 为了检测梅花鹿鹿茸组织 IGF1 基因的 mRNA 表达水平，利用 TRIzol 试剂法分别提取鹿茸真皮、间
充质、前软骨和软骨组织总 RNA，逆转录合成 cDNA。根据 GenBank已发表的相关序列设计梅花鹿 IGF1 基因特异
引物并克隆 IGF1 基因，将 IGF1 基因 DNA 序列递交 GenBank，并利用相对荧光定量 Real － time PCR 法检测 IGF1
在鹿茸顶端不同部位组织的转录表达丰度。研究结果表明:成功获得了梅花鹿鹿茸组织 IGF1 基因全长编码区
cDNA(GenBank登录号为 HQ890468) ，该基因长 465 bp，编码 154aa 长度的多肽;与马鹿、牛、羊、马、猪、人和小鼠
IGF1基因进行同源性分析显示，IGF1基因与马鹿、牛和羊同源性最高，核苷酸序列分别为 99． 78%、98． 28%和 97． 85%;
氨基酸序列分别为 99． 35%、98． 05%和 97． 40%。相对荧光定量 PCR差异分析发现，IGF1 基因在鹿茸顶端不同部
位组织均有表达。其中，在前软骨和软骨组织的表达水平明显高于真皮和间充质组织。
关键词 梅花鹿;鹿茸;胰岛素样生长因子 1;cDNA克隆;荧光定量;表达
分类号 Q786
Cloning of a Full-Length cDNA Encoding Insulin-Like Growth Factor I and Its Expression in Antler Tissue /Hu
Wei，Meng Xingyu，Tian Yuhua，Liu Ning(College of Life Sciences，Jilin Agricultural University，Changchun 130118，
P． R． China)/ / Journal of Northeast Forestry University． － 2011，39(11)． － 71 ～ 75
The study was to detect expression of Insulin-Like Growth Factor I (IGF1)from antler tip tissue to provide a theoreti-
cal basis for the molecular mechanism of antler growth． Total RNA was isolated from dermis，mesenchyme，pre-cartilage
and cartilage layers in growing antler tip tissue respectively． A pair of primers was designed according to the homology re-
gion of IGF1 among other species． The cDNA sequence of IGF1 gene was cloned by RT-PCR technology． Then，real-time
PCR was used to detect the expression level of IGF1 in the antler tip． Results showed that the complete coding sequence of
IGF1 gene was obtained (GenBank accession No:HQ890468)． It has 465 base pairs in length，encoding a predicted pro-
tein of 154 amino acids． Bioinformatic analysis based on IGF1 genes of red deer，cattle，sheep，horse，pig，human and
mouse showed that the homologies of IGF1 to red deer，cattle and sheep were 99． 78%，98． 28% and 97． 85%，and the
homologies of protein were 99． 35%，98． 05% and 97． 40% respectively． Results of fluorescence quantification showed
that IGF1 was expressed in all the tested organs in antler tip tissue，but its transcript level in cartilage and pre-cartilage
layers was much higher than that in mesenchyme and dermis layers．
Keywords Sika deer;Antler;Insulin-like growth factor 1;cDNA cloning;Fluorescence quantification;Expression
鹿茸是鹿的第二性征，是在一定生理条件下额骨部长出
的骨质性组织，其生长发育受特定的分子机理调控。即鹿茸
的独特之处就在于它的每年更新，这在哺乳动物中绝无仅有，
因而其成为研究器官再生的理想模型［1 － 2］。鹿茸生长速度为
每天 1 ～ 2 cm，是任何哺乳动物组织和器官无法比拟的，其相
应表皮层也生长很快，以便覆盖新增长的骨质［3］。因此，人
们推测其中可能存在特殊的促进骨和上皮组织快速生长的活
性物质，控制并刺激鹿茸的生长。早在 1991 年，新西兰学者
Suttie等［4］就发现，一种对多种细胞和组织增殖具有刺激作
用的多肽类物质———胰岛素生长因子(insulin － like growth
factor，IGF) ，可能是促进鹿茸生长的刺激因子。其中，IGF1 和
IGF2 是有效的促进骨细胞分裂剂，但 IGF2 对成骨细胞的作
用较 IGF1 弱［4］。Rosen［5 － 6］等学者也证明 IGF1 在体内有促
进骨形成的作用。因此，IGF1 既可促进成骨细胞的骨形成作
用，又可促进破骨细胞的骨吸收作用，在骨重建过程中起着重
要作用。目前，已从许多动物体组织中分离得到 IGF1，并且
各类动物的 IGF1 基因序列和氨基酸序列在 NCBI 数据库中
均可以检索到。但是，未见有关东北梅花鹿 IGF1 基因全长
cDNA方面的报道，而 IGF1mRNA 的表达调控研究更少。但
由于 mRNA水平的定量检测是反映 IGF1 合成、分泌最直接、
最灵敏的途径，对进一步研究 IGF1 的功能具有重要的促进作
用。因此，本研究旨在通过梅花鹿 IGF1 基因编码区全长 cD-
NA的克隆与序列分析，以及利用相对荧光定量 Real Time
PCR技术检测鹿茸顶端组织 IGF1 基因的 mRNA 表达水平，
为深入研究 IGF1 的功能及对鹿茸生长的调节作用提供可参
考的理论依据。
1 材料与方法
1． 1 试验材料
新鲜东北梅花鹿鹿茸于 2010 年 6 月采自吉林农业大学
试验鹿场 1 头 3 岁左右的健康雄鹿，保存于液氮中带回实验
室备用。TRIzoL试剂购自 Invitrogen 公司，pMD － 18T vector、
Ex Taq DNA聚合酶、AMV逆转录酶、限制性内切酶 XbaⅠ和
EcoRⅠ、DL － 2000 Marker购自 TaKaRa 公司，Real Master Mix
购自长春宝泰克公司。
1． 2 样品制备
根据组织结构和生长特点，将鹿茸顶端组织大致分为真
皮层、间充质层、前软骨层和软骨层［7］。使用消毒处理过的
手术刀在离鹿茸顶端 4 cm处沿垂直鹿茸生长轴方向切断，切
取真皮层、间充质层、前软骨层和软骨层组织各 100 mg，于液
氮中保存。
1． 3 鹿茸顶端组织总 RNA提取与双链 cDNA的获得
按照 Trizol操作手册分别提取真皮层、间充质层、前软骨
层和软骨层样品总 RNA，1． 0%琼脂糖凝胶电泳和紫外分光
法检测总 RNA质量。以提取的总 RNA为模板，以 Oligo － dT
为引物，以逆转录酶 AMV反转录合成双链 cDNA。
1． 4 IGF1 基因全长 cDNA克隆与序列分析
参照 GenBank 中相关序列，设计 IGF1 基因特异性引物
(上游引物:ATGGGAAAAATCAGCAGTCTT和下游引物:CTA-
CATTCTGTAGTTCTTGTTTCCT) ，以软骨组织 cDNA 为模板进
行 PCR扩增，利用 DNA凝胶回收试剂盒回收 PCR产物，将回
收产物连接到 pMD18 － T载体上，转化大肠杆菌 DH5α中，涂
板并于 37 ℃培养。挑取转化菌落，接种于 LB液体培养基，37
℃振荡培养过夜，采用碱裂解法小量提取质粒并将鉴定正确
的重组质粒送 TaKaRa 公司测序。获得的梅花鹿 IGF1 基因
序列递交 GenBank(登录号:HQ890468)。并将测序结果分别
与 GenBank 中马鹿(EF _157842)、牛(NM _001077828)、羊
(NM_001009774)、马(EU018459)、猪(DQ784687)、人(NM_
000618)和小鼠(NM_001111275)的序列进行同源性分析。
1． 5 相对荧光定量 PCR 法检测 IGF1 基因在鹿茸顶端组织
的表达丰度
合成用于 IGF1 基因的特异引物(上游引物 5 － TGT-
GATTTCTTGAAGCAGGTGA － 3 和下游引物 5 － CGTG-
GCAGAGCTGGTGAAG －3) ，扩增片段长度为 96 bp。以鹿的
持家基因 actin(GenBank 登录号:AY345228)作为内参基因，
合成 actin引物(上游引物 5 － TGACCCTTAAGTACCCCATCGA －
3和下游引物 5 － TTGTAGAAGGTGTGGTGCCAGAT － 3) ，扩
增片段长度为 85 bp。IGF1 探针序列为(5 － TGCCCGTCA-
CATCCTCCTCGC– 3)。
以鹿茸组织 cDNA为模版，PCR 分别扩增 IGF1 和 actin。
PCR体系:cDNA模板 6． 0 μL，上下游引物各 0． 5 μL，PCR Mix
15 μL，ddH2O 3． 0 μL，总体积为 25 μL。反应条件:94 ℃预变
性 5 min，94 ℃ 30 s，60 ℃ 30 s，72 ℃ 30 s，进行 30 个循环。采
用 Real Master Mix 试剂和 7500 Real Time PCR System 分析
IGF1 基因在真皮、间充质、前软骨和软骨组织中的表达丰度。
Real － time PCR体系:1 ng总 RNA反转录的 cDNA，上下游引
物各 5 pmol，10 μL real Master Mix，总体积为 25 μL。反应条
件:94 ℃激活 DNA聚合酶 2 min;94 ℃变性 20 s;60 ℃复性 30
s;68 ℃延伸 45 s;进行 40 个循环。随后做 PCR产物的扩增曲
线分析，使用 StepOne Software v2． 1 软件分析 IGF1 相对内参
actin基因的差异表达 Ct 值(Ct 为荧光达到荧光阈值的循环
数)。
2 结果与分析
2． 1 鹿茸顶端组织总 RNA的提取
各样品总 RNA经 1%琼脂糖凝胶电泳检测后，28 S、18 S
和 5 S 3 条带清晰可见(图 1) ，表明所提取的鹿茸真皮、间充
质、前软骨和软骨组织总 RNA 质量符合定量 PCR 分析用标
准，未发生 RNA明显降解。
2． 2 IGF1 基因的全长 cDNA克隆
IGF1 基因 PCR扩增产物经 1%琼脂糖凝胶电泳得到约
465 bp的 1 条特异性条带(图 2) ，与预期结果相符。提取重
组质粒，用 XbaI和 EcoRI 双酶切质粒 pMD － 18T － IGF1(图
3) ，从图 3 中可看出，可获得与目的带大小相符的电泳条带
465 bp，表明克隆基本成功。
图 1 鹿茸顶端组织总 RNA提取结果
1 ～ 4．软骨、前软骨、间充质和真皮组织总 RNA。
图 2 IGF1 基因的 PCR扩增结果
M． DL － 2000 Marker;1、2． IGF1 基因 PCR扩增产物。
图 3 重组质粒 pMD －18T － IGF1 双酶切鉴定结果
M． DL － 2000 Marker;1、2． 重组质粒 pMD － 18T － IGF1 双酶切产物
(EcoRI /XbaI) ;3．重组质粒 pMD18T － IGF1。
27 东 北 林 业 大 学 学 报 第 39 卷
2． 3 IGF1 基因的全长 cDNA序列分析
梅花鹿 IGF1 基因与 GenBank中马鹿、牛、羊、马、猪、人和
小鼠的核苷酸和氨基酸序列 Blast 分析结果显示:梅花鹿
IGF1 基因编码区全长 cDNA为 465 bp，其中与马鹿、牛和羊的
序列同源性最高，核苷酸序列同源性分别为 99． 78%、98． 28%和
97． 85%(图 4) ;氨基酸序列同源性分别为 99． 35%、98． 05%
和 97． 40%(图 5) ，肽链长度均为 154 个氨基酸;而马、猪、人
和小鼠 4 个物种 IGF1 的核苷酸序列为 462 bp，肽链长度皆为
153 个氨基酸。
图 4 梅花鹿、马鹿、牛、羊、马、猪、人及小鼠 IGF1 基因核苷酸序列分析结果
．代表与梅花鹿碱基相同，* 代表碱基缺失。
37第 11 期 胡 薇等:梅花鹿 IGF1 全长 cDNA克隆及在鹿茸组织的表达
图 5 梅花鹿、马鹿、牛、羊、马、猪、人及小鼠 IGF1氨基酸序列分析结果
．代表与梅花鹿氨基酸相同;* 代表氨基酸缺失。
2． 4 IGF1 基因在鹿茸顶端组织中的表达丰度
以鹿茸顶端组织 cDNA 为模版，PCR 分别扩增 actin 和
IGF1。actin扩增长度为 85 bp，IGF1 扩增片段长度为 96 bp，
见图 6。利用 Real time PCR的方法，使用梅花鹿 actin作为内
源参照基因，每个样本做 3 个重复，检测 IGF1 基因在鹿茸组
织不同部位的表达丰度。图 7 为 IGF1 基因相对荧光定量
PCR扩增曲线，从图中可看出，荧光定量动力学曲线指数区明
显，斜率较大且固定，应为较理想的扩增曲线，说明荧光定量
PCR方法检测的结果具有较好的灵敏性和准确性。通过数据
统计分析发现，在鹿茸顶端组织不同部位 IGF1 基因 mRNA
表达水平存在明显的表达差异，间充质、真皮、前软骨和软骨
组织中 IGF1 基因的表达量呈递增趋势，见表 1。
图 6 IGF1 和 actin的 PCR扩增结果
1 ～ 4． actin的扩增产物;M． DL － 2000 Marker;5 ～ 8． IGF1 的扩增产物。
3 讨论
近年来，许多学者利用分子生物学、细胞生物学、组织胚
胎学等技术从基因、蛋白质、细胞等角度研究了鹿茸再生问
题，特别是鹿茸软骨骨化过程的组织学特性已经得到深入研
究［8］。但关于鹿茸发育的分子机理，至今仍不十分清楚。而
胰岛素样生长因子等细胞因子对鹿茸生长的作用还缺乏详细
的基础试验数据。已知 IGFs包括 IGF1 和 IGF2，是由 70 个氨
基酸组成的具有内分泌、自分泌及旁分泌特性的单链多肽，对
机体生长发育起着重要调节作用［9 － 10］。IGFs 能促进成骨细
胞分化、增殖，对鹿茸的生长起重要作用，目前已经得到学者
的普遍认可［11 － 12］，但由于其调控机理非常复杂，并且对 IGF1
基因 mRNA的表达调控研究相对较少，这在一定程度上也反
映出国内外对于该领域的研究较为缓慢。
图 7 IGF1 基因的 PCR扩增曲线
横坐标为 PCR扩增循环数;纵坐标为 PCR产物的量。
近来许多动物和人的 IGF1 已经研究得较透彻，但 Gen-
Bank中关于鹿类生长因子基因序列的检索较少，梅花鹿 IGF1
基因编码区全长 cDNA 尚未得到克隆。本文根据马鹿、牛和
羊的 IGF1 基因序列设计引物，通过 RT － PCR 技术克隆了
IGF1 基因 cDNA全部编码序列，并获得 GenBank 登录号。其
开放阅读框为 465 bp，该序列与其它 7 个物种的 IGF1 核苷酸
序列高度同源，其中与马鹿的 IGF1 核酸序列同源性最高;氨
基酸序列同源性分析显示:梅花鹿 IGF1 基因共编码 154 个氨
基酸，与马鹿、牛和羊 IGF1 肽链的结构完全一致，其它 4 个物
47 东 北 林 业 大 学 学 报 第 39 卷
种马、猪、人和小鼠 IGF1 肽链为 153 个氨基酸，这说明 IGF1
进化非常保守。在梅花鹿 IGF1 氨基酸序列中具有与其它 7
个物种相同的 6 个保守的半胱氨酸残基，可形成 3 个二硫键，
这对于维持 IGF1 的空间结构起到关键作用。
表 1 鹿茸顶端不同组织 IGF1基因表达水平的检测结果(n =3，珋x ± s)
顶端
组织
actin扩增循
环数(Ct1)
IGF1 扩增循
环数(Ct2)
相对定量结果
(2 － ΔΔCt2)
以间充质表达
量为 1 标准化
间充质 11． 470 ± 0． 156 1 25． 268 ± 0． 317 0 0． 000 1 1． 000
真 皮 17． 239 ± 0． 115 0 28． 724 ± 0． 367 5 0． 000 3 4． 969
前软骨 17． 861 ± 0． 144 7 28． 300 ± 0． 262 0 0． 000 7 10． 260
软 骨 17． 953 ± 0． 424 0 27． 912 ± 0． 164 8 0． 001 0 14． 310
注:Ct代表荧光达到荧光阈值的循环数;2 － ΔΔCt2代表目的基因相对于内参
基因的定量。
检测基因表达水平的方法有 Northern 杂交、原位杂交和
定量 PCR 等多种方法，但这些方法很难对起始模板准确定
量。荧光定量 PCR技术不仅达到了 PCR 从定性到定量的飞
跃，而且它具有特异性更强、灵敏度高、重复性好、定量准确等
优点成为基因工程研究中的重要工具［13］。本文利用 Real
time PCR方法，以梅花鹿 actin 作为内源参照基因，对梅花鹿
IGF1 在鹿茸顶端 4 种不同组织进行了表达水平分析。结果
表明:IGF1 在检测的所有组织中均有不同程度的表达，该结
果具有很好的重复性和稳定性，且检测结果用拷贝数来表示
起始模板的含量，相对半定量 RT － PCR中的比较值更为准确
可靠。同时分析发现:IGF1 在软骨和前软骨组织中表达量最
高，真皮层和间充质层中表达量较低。已有研究提示:在鹿茸
快速生长期，IGF1 对软骨生长过程的影响较大，软骨组织骨
化速度超过茸皮层组织生长速度，这进一步说明 IGF1 是鹿茸
再生过程中软骨生长的主效因子之一。总之，本文只是针对
IGF1 基因在东北梅花鹿这个物种上进行了初步的研究，获得
可供参考和利用的基础试验数据，但要将 IGF1 的功能研究透
彻，还需今后国内外学者大量的实验研究去证实。
参 考 文 献
［1］ Kierdorf U． Deer antler regeneration:cells，concepts，and contro-
versies［J］． J Morphol，2007，268(8) :726 － 738．
［2］ 鲍加荣，杨福合，荣敏，等． 鹿茸发育研究进展［J］． 特产研究，
2008(2) :64 － 67．
［3］ 郝丽，李和平，严厉．东北梅花鹿鹿茸尖端组织全长 cDNA 文库
的构建［J］．东北林业大学学报，2009，37(11) :120 － 122．
［4］ Suttie J M，White R G，Breier B H，et al． Photoperiod associated
changes in insulin-like growth factor-1 in reindeer［J］． Endocrinolo-
gy，1991，129(2) :679 － 682．
［5］ Rosen H N，Chen V，Cittadin A，et al． Treatment with growth hor-
mone and IGF － 1 in growing rats increase bone mineral content but
not bone mineral density［J］． Bone Miner Res，1995，10(9) :1352
－ 1358．
［6］ Boudignon B M，Bikle D D，Kurimoto P，et al． Insulin-like growth
factor I stimulates recovery of bone lost after a period of skeletal un-
loading［J］． J Appl Physiol，2007，103(1) :125 － 131．
［7］ Li C，Suttie J M． Tissue collection methods for antler research［J］．
Eur J Morphol，2003，41(1) :23 － 30．
［8］ Li Chunyi，Suttie J M，Clark D E． Histological examination of
antler regeneration in red deer (Cervus elaphus) ［J］． The Anatomi-
cal Record Part A，2005，282A(2) :163 － 174．
［9］ Rosen C J，Pollak M． Circulating IGF － 1:New perspectives for a
new century［J］． Trends in Endocrinology and Metabolism，1999，10
(4) :136 － 141．
［10］ Price J，Allen S． Exploring the mechanisms regulating regenera-
tion of deer antlers［J］． Philosophical Transactions of the Royal
Society of B，2004，359(5) :809 － 822．
［11］ 崔昊震，尹明浩．鹿茸生长因子的研究现状［J］．延边大学医学
学报，2006，29(1) :70 － 72．
［12］ 冯海华，闭兴明，赵丽红，等．胰岛素样生长因子 1 对不同生长
时期鹿茸生长中心细胞体外增殖的影响［J］．中国组织工程研
究与临床康复，2007，37(11) :7373 － 7376．
［13］ 赵焕英，包金风．实时荧光定量 PCR技术的原理及其应用研究进
展［J］．中国组织化学与细胞化学杂志，2007，16(4):

492 －497．
(上接 66 页)
3 结论与讨论
方翅网蝽是入侵昆虫，发生严重时，对其寄主树种悬铃木
的光合作用影响很大。笔者在调查时发现，二球悬铃木受方
翅网蝽的危害程度存在明显差异，这种差异与悬铃木树体枝
叶性状有较为密切的关系。本研究以二球悬铃木枝叶浓密程
度和叶片大小为指标，将合肥市二球悬铃木行道树划分Ⅰ型
(大叶浓密)和Ⅱ型(小叶稀疏)。2 种类型二球悬铃木受方
翅网蝽危害前和危害后叶绿素质量分数差异的变化表明，后
期Ⅰ型叶片叶绿素质量分数显著低于Ⅱ型叶片是方翅网蝽对
2 种类型二球悬铃木危害程度的差异造成的，而不是 2 种类
型悬铃木叶片本身叶绿素质量分数的差异。
内含物的测定结果表明，造成方翅网蝽对 2 种二球悬铃
木危害的差异主要与可溶性糖、氨基酸、单宁、酚酸等物质在
2 种类型二球悬铃木中的含量差异有关。主成分分析表明，
二球悬铃木的可溶性糖、甘氨酸、没食子酸和单宁是影响方翅
网蝽危害的主要贡献因子。
二球悬铃木方翅网蝽虫口密度与其树体中的可溶性糖质
量分数、单宁质量分数呈显著相关，而与总氨基酸、总酚酸等
质量分数不存在显著相关。这种现象的出现，可能是基于这
些内含物含量在 2 种类型悬铃木中没有显著差异而获得的结
论，但并不意味着方翅网蝽的繁殖和发育对这些物质不存在
密切的生态关系。此外，不同内含物对方翅网蝽繁殖和发育
机理在文中没有得到揭示，因此，有关方翅网蝽与二球悬铃木
之间更多的生态协同关系有待进一步研究揭示。寄主对害虫
的忌避物质很多，除酚酸类物质外，还有蛋白质抑制剂、纤维
素、木质素等［11 － 12］。因此，关于方翅网蝽寄主的忌避物质尚
需进一步深入研究。
参 考 文 献
［1］ 钦俊德．昆虫与植物的关系［M］．北京:科学出版社，1987:51 －53．
［2］ Soria S，Munoz A，Torre R，et al． Corythucha ciliata (Say，1832)
(Heteroptera:Tingidae)in the Madrid community［J］． Boletín de
Sanidad Vegetal Plagas，1991，17:440．
［3］ Prado C E． Presence in Chile of Corythucha ciliata (Say) (Hemip-
tera:Heteroptera:Tingidae) ［J］． Revista Chilena de Entomología，
1990，18:53 － 55．
［4］ 李传仁，夏文胜，王福莲． 悬铃木方翅网蝽在中国的首次发现
［J］．动物分类学报，2007，32(4) :944 － 946．
［5］ 王福莲，李传仁，刘万学，等．新入侵物种悬铃木方翅网蝽的生物学
特性与防治技术研究进展［J］．林业科学，2008，44(6):137 －142．
［6］ 李绍勤，董立坤，夏文胜，等．悬铃木方翅网蝽的发生特点与防
治对策［J］．湖北植保，2008(1) :12 － 13．
［7］ 夏文胜，刘超，董立坤，等．悬铃木方翅网蝽的发生与生物学特
性［J］．植物保护，2007，33(6) :142 － 145．
［8］ 李合生． 现代植物生理学［M］． 北京:高等教育出版社，2002:
129 － 137．
［9］ 蒋高明．在应用实践中不断发展的植物生理生态学［J］．植物生
态学报，2001，25(5) :513 － 513．
［10］ 李宝华，程龙飞，胡振华． 主成分分析应用于池杉材积的主要
影响因素［J］．中国农村小康科技，2010，17(11) :34 － 37，59．
［11］ 王琛柱，钦俊德．植物蛋白酶抑制素抗虫作用的研究进展［J］．
昆虫学报，1997，40(2) :212 － 218．
［12］ 陆群，张玉凤．植物性次生物质对光肩星天牛成虫作用机理的
初探［J］．内蒙古林业科技，1997(4) :3 － 6．
57第 11 期 胡 薇等:梅花鹿 IGF1 全长 cDNA克隆及在鹿茸组织的表达