全 文 ：鹿茸草中木犀草素含量测定
张舒婷 ,任恒鑫 ,吴洪斌 ,崔培王申
( 佳木斯大学药学院 ,黑龙江佳木斯 154007)
摘要: 目的:建立高效液相色谱法测定鹿茸草中木犀草素的含量方法。方法: 采用 Agilent XDB C18 ( 5μm, 250× 4. 6mm )色
谱柱 ,以甲醇 - 0. 1%磷酸 ( 55: 45)为流动相 ,检测波长 350nm,流速 1. 0m L min- 1。结果: 在 25. 02～ 150. 12μg mL- 1质量浓度范
围内线性关系良好 ,平均加样回收率为 103. 1% , RSD为 1. 27% ( n= 6)。结论:所建立的含量测定方法简便可行 ,重复性良好 ,
可用于鹿茸草药材的质量监控。
关键词: 高效液相色谱 ;鹿茸草 ;木犀草素 ;含量测定
中图分类号: R587. 1　文献标识码 : B　文章编号: 1008- 0104( 2012) 03- 0032- 02
　　鹿茸草 ( Monochasma shea reri Max im. ex Franch. et Sa-
vat. )为玄参科植物绵毛鹿茸草的全草 ,味苦涩性凉 ,具有清
热解毒、祛风止痛、凉血止血的功效 ,主治感冒、咳嗽、肺炎发
热、疮疖臃肿等 [1, 2 ]。文献报道 ,鹿茸草中含有黄酮类、生物碱
类和皂苷类成分 [3] ,研究中发现具有抗氧化、镇咳、祛痰平
喘、抗菌抗炎、增强免疫和抗癌、抗肿瘤等多种生物活性的黄
酮类成分木犀草素含量较高 [4～ 13]。以鹿茸草中木犀草素作为
指标 ,建立准确可行的定量分析方法 ,对有效评价鹿茸草的
内在质量具有实际意义和研究价值 ,本究研采用 HPLC法测
定鹿茸草中木犀草素含量 ,所建立的定量方法简便 ,快速 ,准
确可靠 ,为鹿茸草的质量控制提供检验方法和依据。
1　 仪器与材料
Agilent 1200型高效液相色谱仪 , Agilent色谱工作站 ;木
犀草素标准品 ,纯度 99. 5% (上海永恒生物科技有限公司 ) ,
甲醇为色谱纯 (天津市科密欧化学试剂有限公司 ) , 7批样品
分别于 2011年购自浙江、福建、江西等不同地区 ,经佳木斯大
学宗希明高级实验师鉴定为鹿茸草。
2　 实验方法
2. 1　 色谱条件
色谱柱: Agilent XDB C18色谱柱 ( 5μm, 250× 4. 6mm) ,检
测波长 350nm ,流动相:甲醇: 0. 1%磷酸 = 55: 45,流速 1. 0m L
min- 1。在此条件下 ,样品能得到较好的分离 ,理论板数按木
犀草素计算均不得低于 6000。
2. 2　 对照品溶液制备
精密称取五氧化二磷减压干燥至恒重的木犀草素对照
品 12. 51 mg,加甲醇使溶解 ,并定容至 25m L,即得 ,作为对照
品贮备液。
2. 3　 供试品溶液的制备
取本品粉末约 ( 60目 ) 2. 0g ,精密称定 ,置具塞锥形瓶中 ,
精密加入 60%乙醇 50mL ,称定重量 ,加热回流 2h ,放冷 ,再称
定重量 ,用 60%乙醇补足减失的重量 ,滤过 ,取续滤液 ,即得。
2. 4　 方法学考察
2. 4. 1　 线性关系考察
精密吸取对照品贮备液 0. 5、 1、 1. 5、 2、 2. 5、 3m L分别置
10m L量瓶中加甲醇稀释至刻度 ,即得木犀草素标准系列溶
液。分别进样 10μL,按上述色谱条件测定木犀草素峰面积。以
峰面积为纵坐标 ,木犀草素进样浓度为横坐标 ,绘制标准曲
线。线性回归方程: Y = 40. 081x - 61. 933, r = 0. 9993, 在
25. 02～ 150. 12μg m L- 1范围之内呈良好的线性关系。
2. 4. 2　 精密度
取鹿茸草粉末 ,按供试品溶液制备方法制备 ,以上述色
谱条件重复进样 6次 ,木犀草素峰面积的 RSD为 0. 15%。
2. 4. 3　 稳定性
精密称取鹿茸草粉末 ,按供试品溶液制备方法制备 ,以
上述色谱条件分别于 0、 2、 4、 6、 8、 24h后进样测定。木犀草素
峰面积的 RSD为 0. 16%。结果表明 ,供试品溶液在 24h内稳
定。
(上接第 31页 )
A survey of medicinal plant resources on the campus of Jiamusi university
L IU Juan,W ANG Chao,CUI X ing, Z HAO Chao- yue ,GONG Meng- di ,
L IU J ie,W ANG Wen- bao, Z HAN G Ying - hui ,N IU Jun- qi
( College of Pharmacy of Jiam usi Universi ty, Jiamusi 154007, China)
Abstract: Objective: in order to meet the requirement of the internship of medicinal plant taxonomy and
the expansion of the theoretical know ledge for the students majoring in Pharmacy , and to cultivate students in-
nova tion spiri t of science and technology as w ell, it is necessary to conduct an investigation on the rich medicinal
plant resources on our campus and make a list of those common medicinal plants.Methods: through field investi-
gation, specimen collection, digi tal photog raph, info rmation search , interview s and expert consulting , the cam-
pus plants especially medicinal plants are surv eyed. Results: the surv ey show s that there are 74 species of medici-
nal plants, belonging to 33 families, and has very important medicinal value.
Key words: resource surv ey; medicinal plants; innovation of science and technolog y
·32·　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　黑龙江医药科学　 2012年 6月第 35卷第 3期
2. 4. 4　 重现性
精密称取鹿茸草粉末 6份 ,按供试品溶液制备方法制备 ,
依上述色谱条件测定 ,其 RSD为 0. 16%。
2. 4. 5　 回收率
精密称取已知含量的样品 6份 ,分别精密加入木犀草素
对照品适量 ,按供试品溶液制备方法制备 ,并按上述条件测
定木犀草素的含量 ,计算回收率 ,结果平均回收率为
103. 1% , RSD为 1. 27%。
2. 4. 6　 样品测定
按正文所述方法对鹿茸草药材粉末进行含量测定 ,每克
鹿茸草中木犀草素含量结果见表 1。
表 1　 鹿茸草样品含量测定结果
产地或来源 含量%
浙江宁波 0. 209
福建永安 0. 186
江苏淮安 0. 174
山东烟台 0. 150
江西丰城 0. 196
湖北武汉 0. 126
安徽芜湖 0. 104
3　 讨论
3. 1　色谱条件的优化
分别比较了不同配比的甲醇 - 0. 1%磷酸水溶液和乙腈
- 0. 1%磷酸水溶液 , 结果以本文所选用方法 ,即甲醇
- 0. 1%磷酸溶液 ( 55 45) 最佳 ,采用该流动相 ,样品中的木
犀草素峰形保留时间适宜 ,与杂质峰分离度大于 1. 5。
3. 2　 供试品溶液的制备方法研究
试验中分别比较了水提醇沉、 60% 乙醇溶液和 100%甲
醇溶液对同一批鹿茸草药材进行提取 ,结果 60%乙醇溶液的
提取率较高。同时分别考察了以 60%乙醇为溶剂的加热回流
提取法和超声提取法 ,并比较了不同的提取时间对木犀草素
提取率的影响 ,结果 ,加热回流 2 h的方法提取率最高 ,且方
法简单易行 ,因此 ,选择该方法制备供试品溶液。此外 ,本次
试验对提取溶剂用量进行了考察依次测定了 60% 乙醇 25,
50, 100, 150m L木犀草素的含量 ,结果表明采用 60%乙醇
50m L,加热回流 2h提取完全。
3. 3　 样品含量测定结果分析
由测定结果可知 ,不同来源的鹿茸草中木犀草素含量差
异较大 ,在 0. 104% ～ 0. 209% ,其中浙江、江西鹿茸草中木犀
草素含量较高 ,湖北、安徽鹿茸草中木犀草素含量较低 ;木犀
草素为鹿茸草中的重要活性成分 ,为保证鹿茸草临床疗效 ,
应对其进行定量控制。
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(收稿日期: 2012- 01- 10)
基金项目: 佳木斯大学大学生科技创新项目 ,编号: Dz2011- 056。
作者简介: 张舒婷 ( 1983～ )女 ,黑龙江佳木斯人 ,硕士 ,讲师。
Determination of luteol in in Monochasma sheareri Maxim
Z HAN G Shu- t ing , REN Heng- x in,WU Hong- bin,CUI Pei- shen
( College of Pharmacy of Jiam usi Universi ty, Jiamusi 154007, China)
Abstract: Objective: To develop an HPLC method for determination of luteolin in Monochasma sheareri
Maxim. Methods: The samples w ere separated on an Agilent XDB C18 ( 5μm, 250× 4. 6mm ) column with
methanol- phosphoric acid solution ( 55: 45) at a flow rate of 1. 0mL min- 1. The wave leng th was set at 350
nm and the column temperature w as 25℃ . Results: The standard calibration curv es w as linear in the ranges o f
25. 02～ 150. 12μg mL- 1 ( r= 0. 999 3) . The average recoveries of the method of luteolin were 103. 1% ( RSD
= 1. 27% ). Conclusion: The method established was successfully applied to quantify the luteolin in Monochasma
sheareri M axim collected in dif ferent places, w hich is helpful to control the quality.
Key words: HPLC; Monochasma sheareri Maxim; luteolin; assay
·33·HEILONGJIAN G MEDICINE AND PHARMACY Jun. 2012, Vo l. 35 No. 3