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鹿茸粉对四氯化碳急性肝损伤的保护作用



全 文 :第 37卷 第 7期 东 北 林 业 大 学 学 报 Vol.37 No.7
2009年 7月 JOURNALOFNORTHEASTFORESTRYUNIVERSITY Jul.2009
鹿茸粉对四氯化碳急性肝损伤的保护作用
夏彦玲 李和平 宋伟杰
(东北林业大学 ,哈尔滨 , 150040)
  摘 要 利用四氯化碳构建小鼠急性肝损伤模型 , 测定小鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活
性 , 观察肝组织病理学形态 ,分析肝损伤程度 。结果显示:鹿茸粉中 、高剂量组与四氯化碳模型组相比 ALT、AST水
平显著降低(P<0.01), 小剂量组差异不显著(P﹥ 0.05), 中 、高剂量组发生肝细胞坏死的动物例数减少 , 病变程
度减轻。鹿茸粉对小鼠四氯化碳急性肝损伤有保护作用 ,且呈剂量依赖性。
关键词 鹿茸粉;四氯化碳;肝损伤
分类号 R961ProtectiveEffectofAntlerPowderonAcuteHepaticInjuryInducedbyCarbonTetrachloride/XiaYanling, LiHe-ping, SongWeijie(ColegeofWildlifeResources, NortheastForestryUniversity, Harbin150040, P.R.China)//JournalofNortheastForestryUniversity.-2009, 37(7).-132 ~ 133Amodelofacutehepaticinjuryinducedbycarbontetrachloride(CCl4)wasestablishedusingmiceasexperimentalobjects.Alanineaminotransferase(ALT)andAspartateaminotransferase(AST)inserumweremeasured, andthepatho-logicalchangesoflivertissuewerealsoobserved.Resultsshowedthat, comparedwiththeCCl4modelgroup, theactivitiesofALTandASTdecreasedsignificantlyinthemiddleandhighdosegroupsofantlerpowder, andthenumberofanimalswithhepatocytenecrosiswasloweredandthedegreeofpathobiologicalchangeswaslightened.Whileinthelow-dosegroup, thedifferencesintheactivitiesofALTandASTwerenotsignificant.Itindicatesthatantlerpowderhasaprotectiveefectonliverinjuryinducedbycarbontetrachlorideandtheprotectiveeffectisrelatedtoantlerpowderdose.Keywords Antlerpowder;Carbontetrachloride;Liverinjury
  鹿茸(角)是绝大多数鹿科动物雄性的第二性征 ,是雄性
鹿科动物所生长的一种尚未骨化的幼角。传统上的鹿茸是指
梅花鹿和马鹿未骨化的幼角 ,即梅花鹿茸和马鹿茸。鹿茸性
温 , 味甘咸 , 《本草纲目》记载鹿茸具有 “生精补髓 , 养血益阳 ,
强健筋骨 , 治一切虚损”之功效 [ 1]。 笔者以四氯化碳造模 , 研
究鹿茸粉对小鼠四氯化碳急性肝损伤的保护作用。
1 试验材料
鹿茸粉:自制 ,取鹿茸 , 燎去茸毛 ,刮净 , 劈成碎块 ,干燥并
用万能粉碎机粉碎 ,过 100目筛后即得。 (鹿茸:由国家林业
局野生动植物检测中心提供的马鹿鹿茸。)
四氯化碳:批号 20070208,天津市东丽区天大化学试剂厂 ,
临用前用无菌花生油配成体积分数为 0.1%的 CCl4油溶液。
血清检测试剂盒:批号 20071204, 南京建成生物工程研
究所。
昆明系小白鼠 , 雄性 , 6 ~ 8周龄 , 60只 , (20±1)g, 购自哈
尔滨市汉方试验动物中心。
2 试验方法
CCl4急性肝损伤模型建立 将 60只(20±1g)健康雄性
小鼠随机分为 6组 , 每组 10只 , 分别为空白组 、模型组 、阳性
对照组(联苯双酯 , 150mg/kg)、鹿茸粉小剂量组(5%)、鹿茸
粉中剂量组(10%)、鹿茸粉高剂量组(15%)。空白组和模型
组小鼠每天灌胃生理盐水 0.01 mL/g, 各治疗组分别灌胃给
予相应药物 0.01mL/g, 连续 7d。末次给药 1h后 ,模型组 、阳
性对照组和各治疗组分别按 0.01mL/g剂量腹腔注射 0.1%
第一作者:夏彦玲 ,女 , 1974年 10月生 , 东北林业大学野生动物
资源学院 ,讲师。
通信作者:李和平 ,东北林业大学野生动物资源学院 ,教授。
收稿日期:2008年 9月 22日。
责任编辑:张建华。
CCl4油溶液 , 空白组腹腔注射等体积的生理盐水。禁食 , 不
禁水。 16h后处死小鼠采集血液样品和肝组织样品。
血清学指标 谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)检
测方法按照试剂盒说明进行。
组织病理学检查 取右叶肝脏以 10%中性甲醛固定 , 常
规脱水 , 石蜡包埋 、切片 、HE染色供常规光镜观察病理变化。
统计分析 所有试验数据以 x±S表示 , 应用 SPSS13.0
软件处理试验数据。
3 试验结果
3.1 鹿茸粉对 CCl4急性肝损伤小鼠血清转氨酶的影晌
与空白组比较 , 模型组小鼠血清 ALT、AST水平显著升高
(P<0.01), 与模型组比较 , 鹿茸粉中 、高剂量和联苯双酯均
能显著降低小鼠血清中升高的 ALT、AST活性(P<0.01), 鹿
茸粉小剂量组与模型组相比差异不显著(P﹥ 0.05),见表 1。
表 1 鹿茸粉对 CCl4急性肝损伤小鼠 ALT、AST活性的影响
组  别 ALT/U· L-1 AST/U· L-1
空白组 30.12±1.27 34.84±2.98
模型组 256.70±22.61** 268.25±54.21**
鹿茸粉小剂量组 249.14±34.41 272.52±40.72
鹿茸粉中剂量组 184.12±23.24■■ 195.31±45.31■■
鹿茸粉高剂量组 137.59±20.49■■ 173.19±56.50■■
联苯双酯组 127.41±20.32■■ 154.59±50.17■■
  注:与 CCl4 模型组比较:■P<0.05, ■■P<0.01;与空白组比
较:*P<0.05, **P<0.01。
3.2 鹿茸粉对 CCl4急性损伤小鼠肝脏组织病理学的影晌
光镜下可见空白组小鼠肝小叶以中央静脉为中心呈放射
状排列 , 肝细胞索排列整齐 ,肝细胞呈多边形 , 核大而圆 ,细胞
分界清(图 1);模型组肝损伤较为严重 ,主要表现为肝小叶结
构模糊 , 肝细胞胞浆疏松 , 细胞呈气球样病变 , 大量细胞变性
坏死 ,脂肪变性 ,并伴有炎细胞浸润(图 2);与模型组比较 , 鹿
DOI :10.13759/j.cnki.dlxb.2009.07.042
茸粉小剂量组改善不明显 , 肝细胞坏死 、脂肪变性 、炎性浸润
仍很严重 , 但肝细胞肿胀程度略有减轻(图 3);联苯双酯组
(图 4)和鹿茸粉中剂量组(图 5)、高剂量组(图 6)情况较模
型组有所改善 , 肝内病灶发生率下降 , 脂肪变性 、坏死程度及
炎性浸润均明显减轻 , 仅见少量肝细胞变性和点状坏死 , 肝小
叶轮廓较清晰。总的说来 , 鹿茸粉大剂量组的效果优于中剂
量组 , 但不如联苯双酯组。
图 1 空白组(×400)
图 2 模型组(×400)
图 3 鹿茸粉小剂量组(×400)
图 4 联苯双酯组(×400)
图 5 鹿茸粉中剂量组(×400)
图 6 鹿茸粉高剂量组(×400)
4 讨论
CCl4是急性肝损伤试验中的常用药品 , CCl4性肝损伤是
由于自由基的形成及引发的链式过氧化反应所致 [ 2] 。 CCl4
在肝微粒体细胞色素 P-450激活下生成 CCI3+, 这些自由基
可与肝细胞内大分子发生共价结合 , 也可攻击膜不饱和脂质 ,
引起脂质过氧化 , 导致膜脂质流动性降低 、钙泵抑制 、谷胱甘
肽活性抑制 、肝微粒和线粒体功能丧失 、肝细胞内钙稳态失调
及代谢紊乱 , 引起肝细胞损伤 [ 3] 。四氯化碳引起急性肝损伤
在形态学上主要表现为肝小叶中央区坏死和脂肪变性 , 血清
学检查可见血清 ALT和 AST升高 [ 4] ,并能灵敏地反映肝损伤
的程度。本试验结果与文献报道一致 , 说明造模成功。
试验表明 , 经 CCl4处理后 ,模型组与空白组比较 , 小鼠血
清 ALT和 AST均明显升高(P<0.01);鹿茸粉小剂量组与模
型组比较差异不显著(P﹥ 0.05);鹿茸粉中 、高剂量组和联
苯双酯组与模型组比较 , 血清中 ALT和 AST下降程度明显
(P<0.01)。病理形态学观察亦显示鹿茸粉中 、高剂量组可
明显减轻 CCl4小鼠肝脏病理损害 , 脂肪变性 、气球样病变减
轻 ,炎性细胞明显减少 , 对受损肝细胞起到了良好的保护作
用。试验结果表明 , 鹿茸粉对四氯化碳所致小鼠急性肝损伤
具有明显的保护作用 , 其保护机制可能是鹿茸粉中的活性成
分可以抑制自由基导致的细胞质膜损伤而带来的细胞变性或
坏死 ,从而减轻 CCl4急性肝损伤。
参 考 文 献
[ 1]  江苏新医学院.中药大辞典.下册 [ M] .上海:上海人民出版社 ,
1977:2232-2235.
[ 2]  AnitaK.Interactionofhypoxiaandcarbontetrachloridetoxicityin
hepatocytemonolayers[ J] .ExperimentalandMolecularPathology,
1989, 50:183-192.
[ 3]  ShigaA, KakamuS, SugiyamaY, etal.Acutetoxicityofpierisin-
1, acytotoxicproteinfromPierisrapae, inmouseandrat[J].Toxi-
cologicalSciences, 2O06, 31:123-137.
[ 4]  徐叔云 ,卞如濂 ,陈修.药理实验方法学 [ M].3版.北京:人民卫
生出版社 , 2002:1346-1347.
133第 7期             夏彦玲等:鹿茸粉对四氯化碳急性肝损伤的保护作用