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漏芦对四氯化碳肝损伤的保护作用



全 文 :延边大学医学学报2 0 0 0 年2 1月 第2 3 卷 第4 期
[实验研究〕
漏芦对四氯化碳肝损伤的保护作用
朴文花 , ,朴桂花 “ , 沈明花 ` ,金泰 日`
( 1
. 延边 大学医学院 生物化学教研室 , 吉林 ,延吉 1 3 30 0 ; 2 . 延 边社会精神病院 , 吉林 , 延吉 1 33 00 0)
2 5 7
〔摘要 」 【目的〕研 究漏芦水提物对大 鼠血清谷丙 转氨酶 、 谷草转氨酶活性和糖 原含量 的影响 . 〔方法 〕
在 四氯化碳 所致 的大 鼠急性肝损伤 的血清 中检测谷丙转氨酶 、 谷 草转氨酸活性及糖原含 量 ;在大 鼠肝 匀
浆中测定脂质过氧化产物丙 二 醛 . [结果 1漏芦水提物在体 内显著降低 因 四氯化碳所 致大 鼠血 清谷丙 转
氨酶和谷草转氨酶活性的升高 , 使糖原含量 显著增高 ; 在体外显著降低肝 匀浆脂质过氧化产物 丙二 醛含
量 . [结论」漏芦水提物对大 鼠四氯化碳肝损伤具有保护作用 .
[关键词 ] 肝疾病 ; 四 氯化碳 ; 丙氨酸转氨酶 ;天 冬氮酸氨基酸转移酶 ;丙 二 醛 ; 糖原 ;植物 , 药用
[中图分类号 ] R 2 8 5 [文献标识码 〕 A [文章 编号 1 1 00 0 一 1 82 4 ( 20 00】04 一 0 2 5 7 一0 2
p r o t e e t i v e a e t i o n o f t h e R h a p o n t i c u m 枷价 o r u m (工 )n C of r C C一4 一 i n d u e e d
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v e r d is e a s e s : C C 14 : a la n i n e a m i n o t r a n s f e r a s e ; a s p a r a t e a m i n o t r a n s f e r a s e : m a lo n d i a l d e h y d e ;
g l y e o g e n ; p l a n t s
,
m e d i e i n a l
祁州芦 为菊科 植物 R入a P o n t i c u n ; U n i f7 o r “ n ,
( L ) D C 的干燥根 , 广泛分布 于我 国华北 、 东北和西
北诸省 ,药源丰富 . 早在 《神农本 草经 》中就有芦 “ 下
乳汁… … 久服轻身益气 ,耳 目聪明 , 不老延 年 ” [` }的
[收稿 日期 ] 2 000 一 1 1一2 1
〔作者简介〕 朴文花 ( 19 68 一 ) , 女 (朝鲜族 ) , 硕士研 究生 ;朴
桂花 ( 1 9 7 1 一 ) , 女 (朝鲜族 ) , 检验 师 ; 金泰 日 ( 19 4 2 一 ) , 男
(朝鲜族 ) , 教授 .
记载 . 近年来许多学者对其化学成分及其抗氧化 等
方面进行 了研究 〔2 〕 ,但对其保肝作用方面 的研究 尚
未见报道 .
1 材料和试剂
1
.
1 药物 祁州漏芦根 , 产于延边长 白山地 区 . 水
提物 : 常水浸泡 30 m in , 煎煮 3 次 ,每次 40 m in ,合并
3 次滤液 , 3 0 0 0 转 / m in 离 心 1 5 m i n ,取上清液浓缩
成 0 . 5 9m/ L 水溶液备用
.
1
.
2 试 剂 硫代 巴 比妥酸为 M E R C K 公 司产 品 ,
DOI : 10. 16068 /j . 1000 -1824. 2000. 04. 008
2 8 5
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l段 ie ne e Ya nb ia n Uni ve r sit yDe e .2 00 0 Vo l.2 3 No. 4
谷草转氨酶 、谷丙转氨酶测试盒均为南京建成生物
研究所产品 ,其他试剂均为国产分析纯 .
1
.
3 动物 W ist a r 大鼠 , 由延边大学医学院实验动
物科提供 .
1
.
4 仪器 7 2 2 型分光光度计 , LXJ 一 64 一 01 型离心
机 , 电热恒温水浴箱 .
2 方法和结果
2
.
1 漏芦水提物对 四氯化碳所致肝匀浆丙二醛的
清除作用 肝匀浆制备 : 大 鼠断头处死后 ,立即取出
肝脏用生理盐水洗净 ,用滤纸吸干 、称重 ,按 1 : 10 的
比例加人预冷的 p H 7 . 4 , 10 m m ol 八 J T ir s 一盐酸缓冲
液制备肝匀浆 . 然后按表 1 进行操作 .
表 1 漏芦 水提 物对 四氮化碳所致肝匀浆丙二醛的影响
定 ,结果见表 2 、表 3 .
表 2 漏芦水提物 对四氮化碳肝损伤大 鼠谷丙转氨酶 , 谷草
转氨酶活 力的影响
组别 动物数 四氯化碳
(
n止月屯 )
血清谷草转氨酶
(抽m ” 1单位)
(j 士DS )
血清谷丙转氨酶
(肠m翻单位 )
(厉 士印 )
正常组
模型组
给药组
3 0 士 1 4
5
.
0
5
.
0
.
7 8 士 24 . 6 7
30 士 4 0 . 31 .
68
.
50 土 2 0 . 84 香
19 9
.
80 士 18 . 8 4
1 33
.
00 士 36 . 56 备
抖2853109
与模型组 比较 , , 尸 < 0 . 01
表 3 漏芦水提 物对 四氯化碳肝损伤大 鼠糖原 含且的影响
组别 四氯化碳
(
n 1
L k/ g )
糖原
( g馆 )
肝匀浆 四氯化碳 水提物实际浓度 丙二醛 清除率
( m L ) ( m L ) ( g L/ ) ( A
5 3 2
) ( % )
对照管 1 0 . 5 0 . 0 0 0 0 . 3 7 3
样品管 1 1 0 . 5 5 . 000 0 . 1 6 7 55 . 23
2 1 0
.
5 2
.
50 0 0
.
2 3 4 37
.
27
3 1 0
.
5 1
.
250 0
.
2 60 30
.
29
4 1 0
.
5 0
.
625 0
.
2 85 2 3
.
5 9
上述反应液 中再加入一定量 的 p H 为 7 . 4 , 10
m m ol 几 rT is 一盐酸缓冲液使之变为等体积 ,置于 ( 37
士 1 )℃水浴中振荡 30 m in 后取 出 , 加人 20 0 9几 三
氯醋酸 2 . 0 m L 以终止反应并使蛋 白质沉淀 , 静止
10 m i n
,
3 0 0 0 转 / m i n 离 心 1 0 m i n , 取 上 清液 2 . 0
m L
,加人 10 9几 硫代 巴 比妥酸 1 . o m L , 90 ℃ 煮沸
10 m in
,用 7 2 2 型分光光度计测波长 532 n m 的光密
度 ,其数据 凡 3 2表示丙二醛含 量的高低 . 由表 1 可
见 ,漏芦水提物具有抗氧化作用 , 能够抑制过氧化脂
质 (丙二醛 )的生成 .
2
.
2 漏芦水提物对 四氯化碳肝损伤大鼠的保护作
用 取 w i s t a : 大鼠 3 0 只 ,雄性 ,体重为 2 10 一 2 5 0 9 ,
分为正常组 、模型组和给药组 3 个组 . 给药组按 7 . 5
g众g 剂量灌胃 4 d , 正常组和模型组以等容积生理盐
水灌 胃 . 第 3 d ,模 型组和给药组按 5 . 0 m L人 g 剂量
背部皮下注射四氯化碳 , 正常组皮下注射等体积生
理盐水 . 皮 下注射 四氯化碳 24 h 后 , 断头处死 , 采
血 ,分离血清 . 用南京建成生物工程研究所制备的试
剂盒检测谷丙转氨酶 、 谷草转氨酶 、糖原用葱酮法测
正常组 1 0 0 . 0 5 . 3 3 士 1 . 8 7
模型组 9 5 . 0 4 . 3 3 士 1 . 1 2
给药组 1 0 5 . 0 8 . 28 士 3 . 0 6 ’
与模型组比较 , ` 尸 < 0 . 01
结果表明 , 漏芦水提物明显降低因 四 氯化碳所
致大鼠血清谷丙转氨酶 , 谷草转氨酶活性的升高 . 并
表明漏芦水提物显著提高糖原 的含量 .
3 讨论
漏芦根水提物在体外能抑制四氯化碳所致丙二
醛的生成 , 清除 自由基 . 目前 , 公认的四 氯化碳引起
肝损伤的机理为 四氯化碳在肝微粒 体细胞色 素 P -
45 0 激活下生成 自由基 C CI 二及 lC ’ , 这些 自由基 可
与肝细胞 内大分子发生共价结合 , 也可攻击 膜不饱
和脂质 , 引起脂质过氧化 , 使肝细胞损伤 〔3〕 , 细胞 浆
内谷丙转氨酶渗人血液 ,结果谷丙转氨酶活性升高 ,
丙二醛含量增加 , 而给予漏 芦水 提取物后对 四氯化
碳所致大 鼠血清谷丙转氨酶 ,谷草转 氨酶活性的升
高有明显降低作用 ,并能提高糖原含量 . 认为其保肝
机制可能是 因其 主要成分蜕皮激素 、噬 吩等 具有显
著的抗氧化作用而清除 自由基 z[] , 其具体机 制还 有
待于进一步研究 .
〔参 考 文 献〕
【1〕 清 . 顾观光重辑《神农本草 经 》卷二 [ M 〕. 北京 : 人 民卫
生出版社 , 1 9 5 5 . 38 .
「2」 曹燕 丽 , 龚树生 . 漏芦的研究近况 (综述 ) 〔J〕. 北京中医
学院学报 , 1 9 93 , 1 6 ( 5 ) : 56 .
[ 3〕 R e e k n a g e l R o , aC r b o n t e t r a e h lo r i d e h e p a t o x i e i t y : S r a t u s
q u o a n d f
u t u r e p r o s p e t s [ J 〕. IT · e n d : P人a r阴 a e o l cS i ,
1 9 83
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