全 文 ：第 26卷 第 7期
2 0 0 8年 7月
中 华 中 医 药 学 刊
CH INESE ARCH IVES OF TRAD IT IONAL CH INESE MED IC INE
Vo.l 26 No. 7
Ju.l 2 0 0 8
中华中医药
1586
学刊
草决明中多糖提取工艺研究
张 颖,徐晓燕,索 宁
(泰山医学院药学院,山东 泰安 271016 )
摘 要:目的:优化草决明中多糖的提取工艺并测定其含量。方法:以多糖的提取含量为评价指标,采用回流
提取法,通过正交实验研究不同温度、提取次数、提取时间、料液比对多糖提取量的影响 ,并筛选出最佳提取条件。
结果:提取温度 90e 、料液比 1: 20、提取 3次、提取 3h为草决明中多糖的最佳提取条件, 多糖的含量为 15122% ,
平均回收率为 99170% , RSD为 21 34%。结论:本方法简便、迅速, 草决明中多糖含量丰富, 为草决明在临床用药
的安全性和有效性提供科学依据。
关键词:草决明;多糖; 正交实验;提取工艺
中图分类号: R284. 2 文献标识码: A 文章编号: 1673 - 7717( 2008) 07 -1586 - 03
S tudying about Extraction ofW ater Solub le Polysaccharide of Cass ia Obtus ifo lia l
ZHANG Ying, XU X iao-yan, SUO Ning
( Departm ent of Pharm aceut ica lS cien ce, TaishanM ed icalC ollege, Taian 271016, Shandong, C hina)
Abstrac:tOb jective: Optim izeO rthogona l design was used to evalua te the in fluence o f d iffe rent variab le s affe cting the
wa ter so lub le po ly saccharide o fC assia obtusifo liaL s ex trac tion technology and de te rm ine con tents.Methods: A ssessm en t in-
dex w as ex traction de term ination o f que rcetin. O rthogona l de sign me thod and u ltrason ic ex trac tion technology w ere used fo r
study ing the effec t o f differen t tem pe ra ture, the rate of so lid to so lution, ultrasonic tim e and tim es for detec ting the best ex-
trac tion technica l cond ition. Results: The best ex tracting technical cond ition w as as fo llow s: 90e , the ra te o f solid to so lu-
tion( 1: 20), extrac ted fo r 3h every tim e, u ltrason ic 3 tim es; the con tents in C assia ob tusifo lial w as 15. 22% . The aver-
age recove ry w as 99. 70% , RSD w as 2. 34% . Conclusion: The m e thod w as quick and simp le w ith good repe tition , the
conten t o f wa ter so lub le po ly saccharide o f Cassia obtusifo liaL w as abundant and the re su lts can p rovide scientific basis of
safety and effectivene ss for clin ica l use o f Ca ssia ob tusifo liaL.
Keywords: C assia ob tusifo liaL; po ly saccharide; o rthogonal designe; ex trac tion techno logy
收稿日期: 2008 - 02 - 17
作者简介:张颖 ( 1972 - ),女,山东莱芜人,副教授,硕士,主要从事
天然药物化学实验教学与研究工作。
草决明 ( Cassia obtusifo liaL ), 又名决明子、马蹄决明、羊
明等。为豆科一年生植物决明 ( Cassiaab tusifo tia L )或小决
明 ( C. toraL)的成熟种子。主产于安徽、广西、四川、浙江、
广东等省 [1 ]。草决明是中医常用药之一, 5神农本草经6将
其列为上品。味苦、甘、咸,性微寒, 入肝、肾、大肠。具有清
热明目 [2 ]、润肠通便之功效,临床用途广泛, 民间习惯作为
咖啡代用品。现代药理研究表明, 草决明具有降压保
肝 [3 ]、增强机体免疫功能 [ 4]、滋补及抗衰老等多方面活性。
多糖是一切生命有机体必不可少的成分,多糖与免疫功能
的调节 [5 ]、细胞与细胞的识别、细胞间物质的运输、癌症的
诊断与治疗 [6 ]等有着密切的关系。进一步探讨草决明的
药用价值,本研究对其多糖的提取工艺进行了优化。
1 实验材料
111 仪器 电热恒温水浴锅 ( HH# SYII -N2C型, 北京市
长风仪器仪表公司 ); 分析天平 ( Adven turer,奥豪斯上海公
司 );循环水式真空泵 ( SHB - B
95A
型, 郑州长城科工贸有限
公司 );旋转蒸发仪 ( RE - 52A型, 上海亚荣生化仪器厂 ) ;
紫外分光光度仪 ( S /54, 上海精密科学仪器有限公司 ); 离
心机 ( LXJ - IIB型, 上海安亭科学仪器有限公司 ); 电热恒
温干燥箱 ( 202 - 2AB,天津泰斯特仪器有限公司 )。
11 2 药品与试剂 草决明 (购于泰安药店, 经泰山医学院
药学院中药学教授鉴定 ); 葡萄糖、苯酚 ( AR, 天津市大茂化
学试剂厂 ); 硫酸 (优级纯, 天津市化学试剂三厂 ); 去离子
水;无水乙醇、正丁醇、氯仿、丙酮、乙醚均为分析纯。
2 线性关系考察
21 1 标准溶液的配制 精确称取干燥至恒重的葡萄糖
2510mg, 加适量水溶解,转移至 100mL容量瓶中, 加水至刻
度,摇匀, 得 250Lg /mL储备液。
21 2 5% 苯酚试剂的配制 精确称取 182e 蒸馏后苯酚
5g,加水溶解于 100mL棕色瓶,置冰箱中备用。
21 3 标准曲线的绘制 精确移取葡萄糖储备液 0、5、10、
20、25、30m L, 置 100mL容量瓶中, 稀释定容。精密吸取
1. 0m L各标准液至 10mL刻度试管中,分别加入 5%苯酚试
液 0. 6m L, 摇匀, 加浓硫酸 3. 6m L, 充分摇匀, 室温放置
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DOI：10.13193/j.archtcm.2008.07.227.zhangy.084
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30m in。在 200~ 600nm之间扫描, 结果在 490nm处有最大
吸收。得回归方程 A= 0. 0128C -0. 1599( r= 0. 9992)。说
明在 12. 50~ 75. 00Lg /mL之间呈良好的线性关系。
3 提取工艺研究
311 正交实验安排 以 L9 ( 34 )正交表进行实验, 选择提
取时间、提取温度、提取次数和料液比 4个因素设计正交实
验,因素水平安排见表 1, 实验设计见表 2。
表 1 正交实验的因素和水平
因素
水平
A提取时间
( h)
B料液比
( g /v)
C提取温度
(e )
D提取次数
(次 )
1 2 1: 10 60 1
2 3 1: 15 80 2
3 4 1: 20 90 3
表 2 正交实验安排表
编号 提取时间
( h)
料液比
( g /v)
提取温度
( e )
提取次数
(次 )
药品质量
( g)
1 2( 1 ) 1B 10 ( 1) 60 ( 3) 2 ( 2) 30. 0016
2 3( 2 ) 1B 10 ( 1) 80 ( 1) 1 ( 1) 30. 1506
3 4( 3 ) 1B 10 ( 1) 90 ( 2) 3 ( 3) 30. 5748
4 2( 1 ) 1B 15 ( 2) 80 ( 2) 1 ( 1) 30. 4295
5 3( 2 ) 1B 15 ( 2) 90 ( 3) 3 ( 3) 30. 8663
6 4( 3 ) 1B 15 ( 2) 60 ( 1) 2 ( 2) 30. 3342
7 2( 1 ) 1B 20 ( 3) 90 ( 1) 3 ( 3) 30. 7275
8 3( 2 ) 1B 20 ( 3) 60 ( 2) 2 ( 2) 30. 5473
9 4( 3 ) 1B 20 ( 3) 80 ( 3) 1 ( 1) 30. 4441
312 提取工艺 准确称取 30g草决明于 1000m L圆底烧瓶
中,加入 250m L 80%乙醇,在 85e 水浴条件下回流 2次,每
次 2h, 过滤,残渣备用, 见图 1。
图 1 提取工艺示意图
4 实验结果
准确称取不同提取条件下多糖 10m g溶解, 定容至
100mL, 吸取 1m L于刻度试管, 按 2. 3项下操作,测定不同
提取液中多糖的含量,数据处理采用正交试验直观分析法,
统计不同水平的平均提取含量, 以极差 R( R为极大值与极
小值之差 )进行分析, 结果见表 3, 方差分析以时间 s =
01 018值最小, 见表 4。多糖含量 (% ) = ( c @ 100) /( w @
106) @ 100% , c为浓度 (Lg /mL ), w 为待测样品质量 ( g)。
多糖提取率 =粗多糖沉淀量 ( g) /草决明量 ( g) @ 100% , 草
决明多糖总量 =提取率 @草决明多糖含量。
表 3 正交实验结果与分析
序号 A时间
( h)
B料液比
( g /v)
C温度
( e )
D次数
(次 )
提取率
(% )
多糖含量
(% )
多糖总量
( g)
1 1( 2 ) 1( 1: 10) 3 ( 90) 2( 2 ) 5. 65 8. 91 0. 005034
2 2( 3) 1( 1: 10) 1 ( 60) 1( 1 ) 2. 44 7. 78 0. 001898
3 3( 4 ) 1( 1: 10) 2 ( 80) 3( 3 ) 5. 94 12. 10 0. 007187
4 1( 2 ) 2( 1: 15) 2 ( 80) 1( 1 ) 4. 57 8. 07 0. 003688
5 2( 3 ) 2( 1: 15) 3 ( 90) 3( 3 ) 8. 77 9. 81 0. 008603
6 3( 4 ) 2( 1: 15) 1 ( 60) 2( 2 ) 3. 91 11. 74 0. 004590
7 1( 2 ) 3( 1: 20) 1 ( 60) 3( 3 ) 4. 89 9. 78 0. 004782
8 2( 3) 3( 1: 20) 2 ( 80) 2( 2 ) 6. 40 11. 21 0. 007174
9 3( 4 ) 3( 1: 20) 3 ( 90) 1( 1 ) 7. 29 7. 61 0. 005548
X 1 0. 01350 0. 01412 0. 01919 0. 01680
X 2 0. 01768 0. 01688 0. 01127 0. 01113
X 3 0. 01733 0. 01754 0. 01805 0. 02057 E E x i j= K= K 1+ K 2+ K3
K 1 0. 004501 0. 004706 0. 006395 0. 005599 = 0. 01597
K 2 0. 005892 0. 005627 0. 003757 0. 003711 1 /pr @ ( E E xi j) 2
K 3 0. 005575 0. 005835 0. 006013 0. 006854 = 01000021
最优水平 A 2 B3 C1 D3
R 0. 001391 0. 001129 0. 002638 0. 003143
1 /r @E ( ki)
2
0. 000023 0. 000029 0. 00003 0. 000031
差方和 Q 0. 000002 0. 000008 0. 000009 0. 00001
均方 Q /f 0. 000001 0. 000004 0. 0000045 0. 000005
注: r为水平数; p为因素数; f为自由度; Q = 1 /r @ E ( ki) 2 -1 /p r@ ( E E x ij) 2。
表 4 方差分析表
因素 偏差平方和 自由度 F比 临界值
提取时间 0. 018 2 0. 464 4. 460
料液比 0. 008 2 1. 043v 4. 460
提取温度 0. 010 2 1. 913w 4. 460
提取次数 0. 033 2 0. 580v 4. 460
误差 0. 07 8
5 讨 论
从极差 R值和方差分析来看, 草决明中多糖提取含量
的影响因素主次顺序为提取温度 >料液比 >提取次数 >提
取时间;结合 K值, 90e 时草决明中多糖提取含量最高; 另
外,料液比对提取多糖影响也较大, 料液比越大多糖的提取
越完全,鉴于工业生产的可行性, 选择 1B20; 提取次数也有
影响,以 3次为宜; 提取时间影响最小, 根据结果选择 3h。
综合以上分析结果, 草决明中多糖的最佳提取条件为:
A 2B3C1D3,即采用 1B20料液比,在 90e 温度下, 提取 3次,
提取时间 3h。
6 多糖的含量测定
61 1 精密度考察 在 490nm下, 测定同一标准溶液吸光
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度 ( n = 6) , RSD为 2. 32% , 表明精密度良好。
612 稳定性实验 对同一样品每隔 2h测定其吸光度 ( n =
5) , RSD为 0. 283% ,结果表明相对稳定。
613 回收率实验 取草决明 30. 000g, 乙醇脱脂后,残渣中
加入适量葡萄糖对照品,在最佳提取条件下提取,测定回收
率,见表 5。
表 5 回收率试验 ( n= 5)
序号 已知量
( g)
加入量
( g)
测得量
( g)
回收率
(% )
平均回收率
(% )
RSD
(% )
1 0. 3600 0. 5844 0. 9597 101. 62
2 0. 4164 0. 4692 0. 8628 97. 43
3 0. 4266 0. 4968 0. 8955 96. 98 99. 70 2. 34
4 0. 3417 0. 3081 0. 6537 100. 60
5 0. 4302 0. 3669 0. 8121 101. 88
收稿日期: 2008 - 02 - 14
作者简介:李君玲 ( 1980 - ),女,辽宁海城人,助教,硕士,主要从事
天然药物活性成分及药物研发工作。
61 4 含量结果 称取适量草决明,在最佳提取条件下提取
多糖,结果见表 6。
表 6 样品含量测定结果 ( n = 3)
样品质量
( g)
吸光度值 A
( n= 3 )
多糖含量
(% )
多糖提取率
(% )
多糖总量
( g)
30. 0095 0. 707 15. 22 8. 64 0. 01315
本法提取的多糖含量很高,节省了大量的时间和溶剂,
从而降低了生产成本, 提高了经济效益,为开发新药, 利用
资源提供了理论参考。
参考文献
[ 1 ] 江苏新医学院.中药大辞典# 上册 [M ].上海:上海科技出版
社, 1986: 949.
[ 2 ] 韩昌志.决明子的明目作用 [ J ].中国医院药学杂志, 1993, 13
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1987, 3增刊: 90.
[ 4 ] 南景一.决明子对小鼠免疫功能影响的实验研究 [ J ].辽宁中
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[ 5 ] 田庚元. 天然多糖的研究和应用 (上 ) [ J ].上海化工, 2002
( 10) : 29 - 31.
[ 6 ] 田庚元. 天然多糖的研究和应用 (下 ) [ J ].上海化工, 2002
( 11) : 23 - 25.
正交设计优选沙苑子总黄酮的提取工艺
李君玲,王大伟
(宜春学院, 江西 宜春 336000)
摘 要:目的:研究沙苑子中总黄酮的提取工艺。方法: 以总黄酮含量为考察指标,采用正交实验法, 考察加醇
量、提取次数、提取时间、乙醇浓度 4个因素对提取工艺的影响。结果:最佳提取工艺为 A2B1C3D3,即药材加乙醇 20
倍量,提取 3次,提取时间 1h, 乙醇浓度 80%。结论:正交实验法优选沙苑子总黄酮的提取工艺简便、快速、准确。
关键词:沙苑子;总黄酮; 提取工艺
中图分类号: R284. 2 文献标识码: A 文章编号: 1673 - 7717( 2008) 07 -1588 - 02
Study on Extract ing F lavonoid Compounds from Astraga lus F lavone
LI Jun-ling, WANG Da-w ei
( Y ichun Un iversity, Yichun 336000, Jiangx,i Ch ina)
Abstrac:tObjective: Study on the ex trac ting flavono id com pounds from Astraga lus F lavone.M ethods: W ith dry extract
ra te and flavono id conten t as the inspection ind ica to rs, o rthogona l testw as used to investiga te the influence of fou r extrac-
ting factors( ethano l vo lum e, ex tracting, ex trac tion time and ethano l consistence) on the extrac ting process. R esults: The op-
tim um extrac ting process wa s A
2
B
1
C
3
D
3
, .i e. The ethano l vo lum e be ing 20 tim es o f the w eight of m edicina l ma teria,l ex-
trac tion fo r three time s and 1 hours each tim e, and 80% e thano l consistence. Conclusion: Op tim iza tion o f ex tracting pro ce ss
fo rA straga lus F lavone by orthogonal te st is a simp le, quick and accura tem e thod.
Keyw ords: a stragalus flavone; flavono id; ex tracting technology
沙苑子 ( Sem en astragali com p lanati)为豆科植物扁茎黄
芪 ( A straga lus comp lanatus R. B r. )干燥成熟的种子, 在历代
本草中曾以白蒺藜、沙苑、蒺藜子、潼蒺藜、沙蒺藜等名称入
药,具有温补肝肾、固精、益肝明目的功效 [1 ]。现代药理研
究表明其中的总黄酮类成分是降脂保肝作用的活性部
位 [2 - 5]。本文采用正交设计法探讨溶剂及用量、提取方法
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