全 文 ：山羊脾脏来源多肤 MA LD I一T O F一 M S
定性分析
杨兆勇 ’ , 张志斐2 , 苏秀兰 ’ ` l( . 内蒙古医学院分子生物学研
究中心 , 内蒙古 呼和浩特 01 《X)59 ; 2 河北医科大学药学院 , 河北 石
家庄 05 0 17)
中图分类号 : 9R 31 . 7 文献标识码 : B
10 1 一 2494 ( 2X() 5 ) or 一 0’7 97 一 0 1
文章编号 :
多肤类化合物广泛存在于 自然界中 , 可作为药物 、 疫苗 、
导向药物 、 诊断试剂 、 酶抑制剂及药物先导化合物等「’ 一 2〕。
脾脏是哺乳动物最大的外周淋巴器官 , 产生多种生物活性物
质 , 这些生物活性物质具有分子量小 、结构相对简单 、免疫原
性小等特点 。 本实验应用 M AI刀 I一m -F M S 对经前期诱导后
山羊脾脏中获得的多肤进行分析 , 为此种多肤的开发提供依
据 。
1 材 料
山羊脾脏 :取自经前期诱导后山羊 。 v oy age 卜 DE 翔 POR
型质谱仪 (美国 A BI 公司 ) ;其余试剂均为分析纯 。
2 方 法
2
.
1 山羊脾脏多肤的制备
为本实验室经生物工程方法由新鲜山羊脾制得 ,多肤浓
度经 L ”呵 法标定 ,浓度为 印 . 4 滩 ·毗 一 ` , 过滤除菌后封装 ,
4 ℃低温冰箱保存备用 。
.2 2 山羊脾脏多肤组成成分及各组分相对分子质量的测定
质谱条件 :激光 :叭 ;波长 : 37 lun ;激光的脉冲宽度 : Z ns ;
加速电压 : 25 (I 义) ;V 检测电压 : 1 750 ;V 基体 :芥子酸 。 所有
谱图均是 10 次累加的结果 , 未经任何圆滑处理 。 相对分
子质量用外标法校准 。 校准物见表 1。
表 1 外标校准标准物
物质名称 电荷数 平均相对分子质量 同位素峰相对分子质量
灿匆o t .纽坦 in + 1 1四 7 51 1 2肠 . 韶 5 3
AC n l (
e l ip l
一
17 )
+ 1 2 口泪 .46 2 (刃3 谈晒 7
A (万H ( e l ip l s 一刃 ) + 1 2 粼汤 .刀 2 46 5 . 198 9
A C IH (
e il夕 35 ) + 1 3 6 义} . 19 3 65 7 . 9四 4
L旧 u lin + 1 5 7 34
.皿 5 7刃 . 日犯 7
L` u i n + 2 2 肠 7 . 即 2 86 5 . 目粥 3
测定 :取样品 5 沙 、 基体溶液 5 沁 混匀 , 取 1 沙 滴于靶
片 ,空气中室温吹干后放人激光质谱仪中测试 。
3 结 果
经传统的多肤提取方法 , 由山羊脾脏中可获得淡黄色
多肤液体 。 经 M A ID I ,卫:) F~ M S 测定 , 山羊脾脏多肤主要由 3
种成分组成 , 其相对分子质量分别为 4 65 2 . % , 4 78 1 . 46 ,
4 9 8
.
53
。
4 讨 论
M A l l ) 1
一
DT -F MS是近年发展起来的一种主要用于展示生
物大分子相对分子质量分布的质谱仪图 ,具有信息含量高 、
无明显的组分歧视效应 (对无紫外吸收的组分不需要衍生就
可直接测定 )等优点。 其中 , 应用外标法对相对分子质量进
行校准速度快 (几分钟完成一次分析 ) 、 操作简便 , 同时可避
免标准物与待检样品间的相互干扰 。 与电喷雾质谱法 ( sE F
Ms )相比 , M A」J〕l一DT F/ MS 法对样品的基体要求低 ,质量测定
范围大 ,样品消耗少 ,可用于复杂体系中混合物的同时测定 ,
抗干扰能力强 , 是蛋白质 、 多肤等大分子分子量测定的首选
工具 。 本实验建立的 M A I工)1一m -F M S 山羊脾脏来源多肤分
析方法 , 同时为此多肤各组分的分离纯化及各组分理化性质
的研究提供理论依据 。
致谢 : 承蒙中国医学科学院蛋白组研究中心武淑珍老师的指
导与帮助 。
参考文献
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.
广
1
1如 2 0 汉洲 , 19 3 , 65 : 30 15
.
(收稿日期 : 2以又 一08 一 )
海南 山苦茶叶低极性油 状 物成分
的分析
郭玲 , 林连波 (海南医学院 ,海南 海口 5川 01)
中图分类号 : R284 . 2 文献标识码 : B
10 1
一 2 4叭 (2X( ) 5 ) ro 一 07 97 一 02
文章编号 :
山苦茶 。 轰“ 肠￡。 不峨戈
~
)系大敢科野桐属植物 〔` 〕 ,海南
广布 ,资源极其丰富 。 其叶香味浓郁 , 具有清热解毒 、利胆消
食之功效 , 民间广作保健茶饮料用以解油腻 、 助消化川 。 近
年来 ,海南医学院课题组成员在国家自然科学基金资助下 ,
开展了对海南山苦茶叶化学成分的研究 。 至今已得到单体
并鉴定出十几种 。 为了系统分析海南山苦茶叶的化学成分 ,
现采用 GC 一M S对海南山苦茶叶乙醇浸膏的石油醚部分的油
基金项目 : 国家自然科学基金资助项 目( 3叫以〕146 )
作者简介 :杨兆勇 , 男 ,硕士 ` 通讯作者 : 苏秀兰 ,女 ,教授 eT l : ( 0 10 ) 8 31 62 728
基金项 目 : 国家自然科学基金资助项目 ( 3侧双X) 8 8 )
作者简介 :郭玲 , 女 , 副教授 eT l : ( 08 98) 3 135 05 5 E 一。 l : hn , ), IO l i gn @ Z l c n . ~
中国药学杂志 2X() 5年 5月第 40 卷第 or 期
E
一 n` 111: 过 su @ is an . c om
以 。己于场。 m之 J , 2仪万 杨了, 侃 .叨 oN . 10 · 79 7
状物进行研究 ,共分离得到 27 个峰 ,鉴定了其 中 20 种化合
物 ,并用归一化法测定了各化学成分的相对含量 。
1 仪器与药材
H巧8叩 一 11巧 97 3 型气相色谱一质谱联用仪。 海南山苦茶
(材以切忿。 不进祀垃功出 )的叶采自海南省万宁市 , 经海南师范大学
钟义教授鉴定 。
2 实验方法
2
.
1 样品
取海南山苦茶干叶粗粉 7 . 5 吨 , 用 卯% 乙醇回流提取 3
次 ,分别为 1 . 5 , 1 . 0 和 0 . 5 h ,合并滤液 , 减压 回收溶剂 , 得
1 仪洲〕 m l流膏 。 加适量水稀释流膏 , 石油醚萃取 ,萃取液浓
缩 ,真空干燥 ,得干粉 113 9 。 取 8 9干粉用 3o 一 粼1〕目硅胶
拌样 , 湿法上硅胶柱 , 石油醚 一醋酸乙醋梯度洗脱 ,每流份 3X()
毗 。 收集石油醚一醋酸乙醋 ( 50 : l) 洗脱液 (流份 17 一 20 ) , 回
收溶剂 ,得样品 4 9 。 同法再上硅胶 H 柱 , 收集石油醚 一醋酸
乙醋 ( 1:0 1 一 10 : 2) 洗脱液 ,得橙红色油状物 2 9 。 并进行 GC -
MS 分离测定 。
2
.
2 GC
一
MS 测定条件
气相色谱条件 : PH 一 I下Ap 石英毛细管柱 (0 . 25 ~ x 30
m
,
0
.
25 脚 ;) 载气 :高纯氦气 ,分流比印 : 1 , 柱流量 1 . o mL ·
而 n 一 ’ ;程序升温 : 从 80 ℃开始 , 以 8℃ · 而n 一 ’升到 1印℃ ,再以
4 ℃ · 而n 一 ’升温到 250 ℃ ;进样 口温度 : 25 0℃ ; 进样量 1 . 0 汕 。
质谱条件 : lE 源 ;电离电压 70 Ve ,离子源温度 230 ℃ ,扫描范
围 4D 一 50 A UM 。
3 结 果
应用 C . M S 计算机联用技术对海南山苦茶叶中低极性
油状 物进行了分离 , 得到 27 个 色谱峰 , 经 与 1)A I,ABS F
M g l9 8
.
L 质谱库图谱对照 , 鉴定出 20 种化合物 , 用归一化法
测得各成分的相对含量 。 分析结果见表 1。
4 讨 论
海南山苦茶低极性油状物的化学成分主要为脂肪酸酷
类 ,占总含量 34 . 91 % ,其中主要有十八酸丁醋 (7 . 70 % ) , 亚
表 1 海南山苦茶低极性油状物 GC 一MS 分析结果
序号 化合物 相对分子质量 分子式 相对含量 / %
姗1628430塑肠职1 6 , 10- 二甲基一 5 , 9 一二烯一2 一十二酮
2 今氢氧基斗甲基 一 2一戊醛
3 6
,
10
,
1今三 甲基一2 一十五酮
4 十六酸乙醋
5 十八酸乙酷
6 油酸乙酉旨
7 亚油酸乙酉旨
8 9
,
12
,巧 一三烯十八酸甲醋
9 2
,
6
, 吞三 甲基 一二环「3 , 1 , l] 庚烷
10 二十六烷
1 1“ , 2,3
,
4,
“ ,
5,6
,
7卜八氢一 1 , 1 , 4 , 7 -
四甲基一 1一环丙基一甘菊环
12 异丙基亚油酸酷
13 二十一烷
14 二十八烷
15 棕搁酸
16 1
,
l
一二甲基丙基 一么乙基 已醋
17 棕搁酸 1 , 1一二亚甲基醋
18 亚油酸
19 十八酸丁醋
2D 7
,
ro
,
13
一三烯十六酸甲醋
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7
.
70
2
.
70
32拼朔5614姗0洲
油酸乙醋 (6 . 45 % ) ,棕桐酸 1 , 1一二亚甲基醋 ( 5 . 84 % ) 。 其次
是烷烃类 , 为 13 . 93 % ,其中 2 , 6 , 6 一三甲基 一二环〔3 , 1 , l] 庚烷
占 6 . 7 3 % 。 酸类含 or . 63 % , 以棕桐酸含量最高 , 达 7 . 94 % 。
另外还含有少量的醋 ( 5 . 23 % ) 、醛 (4 . 48 % ) 、酮 ( 2 . 63 % )等。
据报道 ,本研究中化学成分亚油酸具有药理活性 , 它是
维生素 E的基本脂肪酸成分 , 能降低胆固醇 、月一脂蛋白及其
他类脂质 , 可用于动脉粥样硬化症的防治图 。
参考文献
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技出版社 , 2以〕l : 580 .
(收稿 日期 : 2X( 岭一05 一20 )
中国药学杂志岛津杯第七届全国药物分析优秀论文评选交流会征文
1 征文内容 ①近几年国内外药物分析进展的综述 , 新理论 、 新技术 、新方法的应用和药物分析的方法学研究 ;②现代分析手
段和检测新要求在中药指纹图谱 、农药残留检测 、重金属检测及成分分析研究中的应用 ;③药品有关物质 、溶媒残留及手性成
分分析 ;④新剂型或基因工程药物的质量控制 ;⑤药动 、药代 、药物血药浓度监测 、 生物利用度和溶出度的研究论文 ;⑥药物分
析技术在打假中的应用 ;⑦药物及其制剂的快速分析检定新方法 ;⑧毒物快速分析的检定 ;⑨药物分析中的新发现 、新发明和
新改进 ;L新技术 、新方法的应用文分析仪器的使用经验 ;L计算机和数学在药物分析领域中的应用 。
2 征文要求 报送论文每篇字数限 歹X幻 字左右 (另页附中英文结构式摘要 ) ,综述限 80 1 】字以内(包括参考文献 ,并附英文题
目 ) ,要求未公开发表及未在全国性会议上交流过 (附单位介绍信 ) ,有一定创造性和指导意义 。 论文体例 、 格式请参见本刊
2X() 5 年第 l 期稿约 。 并将文稿软盘【FZ 书版 , W 6 rd 文本( . T XT )」一并寄至本刊编辑部。
3 其它事宜 本次会议通过论文交流后将由国内著名药物分析专家组成评委会 , 评选出一等奖 3 名 , 二等奖 6 名 , 三等奖 or
名。 征文截止时间 : 2朋 5 年 7 月 or 日 (暂定 ) , 以邮戳为准 。 稿件及信封请注明 (岛津征文 )字样并附单位介绍信 ,寄北京东四
西大街 42 号中国药学杂志编辑部收 。 邮编 : lX() 7 10 。 会议时间及地点 : 2X() 5年 9 月 (具体时间待定 ) , 地点 :西安 。 应征论文被
录用后 ,将通知作者 , 论文录用与否 ,一律不退稿 ,请自留底稿。
仁本刊讯 ]
79 8
· 伍认 月“ z用 及 J , 2仪万肠了, Vol .初 oN . 10 中国药学杂志 2X(] 5 年 5 月第 40 卷第 10 期