全 文 :收稿日期:2001-06-06
基金项目:教育部重点资助项目(1999)
作者简介:杨建雄(1954—), 男 ,陕西子长人 , 陕西师范大学教授
文章编号:1001-3857(2002)02-0087-04
槐米提取液对小鼠抗氧化能力的影响
杨建雄1 , 王丽娟2 , 田京伟1
(1 陕西师范大学生命科学学院 , 陕西 西安 710062;2 西安交通大学理学院 , 陕西 西安 710049)
摘 要:研究了槐米提取液对小鼠抗氧化能力的影响.将 ICR雌性小鼠随机分为 5
组 ,正常对照组和模型对照组灌胃(ig)给水 0.4 mL/d ,大 、小剂量组分别 ig 给槐米提
取液 300 mg/(kg ·d)和 200 mg/(kg ·d);阳性药对照组 ig 给人参水煎液
4 g/(kg·d).20 d后 ,除正常对照组外的各组小鼠均禁食 16 h ,随即腹腔注射(ip)给四
氧嘧啶 50 mg/kg .3 d后 ,各组小鼠均处死 ,测定 Hb 、肝指数 、脾脂数 、肝糖原及肝脏
和血液的 SOD和 MDA.结果表明 ,槐米可显著降低四氧嘧啶引起的 SOD 、MDA 、Hb
异常增高 ,可显著提高肝糖原含量和四氧嘧啶引起的肝指数 、脾指数异常下降.槐米
可提高 ICR雌性小鼠的抗氧化能力.
关键词:槐米;抗氧化能力;小鼠
中图分类号:R285 文献标识码:A
槐米通常作为药材用于改善毛细血管的抵抗力 ,防止渗透性过高引起的出血症 ,有降低血
压 、降低血液胆固醇和抗炎的作用[ 1] .由于槐米富含芸香甙(芦丁)等黄酮类化合物 ,提示其具
有提高机体抗氧化能力的作用[ 2] .本项研究通过测定血液和肝脏超氧化物歧化酶(SOD)、丙二
醛(MDA)、血红蛋白(Hb)、肝糖原含量及肝指数 、脾指数等指标 ,探讨槐米对小白鼠抗氧化能
力的影响 ,为扩大槐米的应用范围提供实验依据.
1 材料和方法
1.1 材料
槐米于 1998年 10 ~ 11月间采集于陕西师范大学校园内 ,红参(阳性对照药)购自西安中
药店.ICR种雌性小鼠和饲料由陕西省中医研究院实验动物中心提供 ,体重 20 ~ 22 g;四氧嘧
啶为 Sigma公司产品 ,其余化学试剂为国产分析纯.
1.2 方法
1.2.1 槐米和红参水煎液的制备 槐米 50 g ,冷水洗净 , 60℃烘干研碎 ,用水适量煮沸 10
min ,趁热过滤 ,滤渣再加适量水煮沸 10 min ,趁热过滤 ,合并两次滤液 ,定容至 500 mL ,生药含
量为 0.1 g/mL.红参40 g 浸泡过滤 ,用组织捣碎机捣碎 ,煮沸10 min并过滤两次 ,合并滤液并
稀释至 160 mL ,生药含量为 0.25g/mL.
第 30卷 第 2期 陕西师范大学学报(自然科学版) Vol.30 No.2
2002 年 6 月 Journal of Shaanxi No rmal University(Natural Science Edition) Jun.2002
DOI :10.15983/j.cnki.jsnu.2002.02.023
1.2.2 动物分组与处理 ICR种雌性小鼠 60只 ,随机分为 5组 ,每组 12只.A 组为模型对照
组 ,E 组为正常对照组 ,均 ig 给蒸馏水 0.4 mL/d ,B组为大剂量组 ,C组为小剂量组 ,分别 ig 给
槐米提取液 300 mg/(kg·d)和 200 mg/(kg·d), D 组为阳性药对照组 , ig 给红参水煎液
4 g/(kg·d).各组动物均随机进食 、饮水 ,饲养室温度 22 ~ 27℃,光照和湿度随同自然变化.ig
给药20 d后 ,A 、B 、C 、D组小鼠均禁食 16 h , ip给四氧嘧啶 150 mg/kg ,3 d后 ,各组动物均称重
并眼眶采血 ,柠檬酸三钠抗凝 ,然后引颈处死 ,取肝脏 、脾脏称重 ,血样分别按一定比例加水制
成一定稀释度的溶血液 ,用于 SOD 、MDA和 Hb含量测定.肝脏用蒸馏水洗净 ,称取 0.5 g ,用
PBS(0.05mol/L , pH=7.8)5 mL低温匀浆 , 5 000 r/min离心 10 min ,上清液用于 SOD 、MDA
和肝糖原的测定.
1.2.3 测定方法 SOD 用邻苯三酚法测定[ 3] , MDA 用硫代巴比妥酸(TBA)比色法测定[ 4] ,
Hb用氯化高铁比色法测定[ 5] ,肝糖原用 3 , 5-二硝基水杨酸比色法测定[ 6] .
2 结果和讨论
2.1 槐米提取液对小鼠血液 SOD、MDA 、Hb的影响
槐米提取液对小鼠血液 SOD 、MDA 、Hb的影响实验结果见表 1.
表 1 槐米对血液 SOD、MDA和 Hb的影响( X±S)
Tab.1 Influence of Flos Sophora on SOD , MDA and Hb in blood of rats( X±S)
组别(n =10) A B C D E
SOD/(U·μL-1) 8.04±1.01 6.07±0.47 7.23±0.89 5.80±1.07 5.30±0.99
MDA/(mmol·100 mL-1) 28.71±6.45 17.80±3.92 20.23±2.37 21.08±5.53 12.61±4.02
Hb/(g·L -1) 175.20±22.21 136.97±13.34 137.57±15.14 153.56±18.36 142.36±28.04
经 t 检验显示 ,在血液 SOD活力方面 B 、D 、E 组与 A组相比 , B 、C 组与 E 组相比 ,B 组与
C 组相比均有显著性差异(P <0.05);C 组与 A 组相比 ,D组与 E 组相比 ,D组与 B组相比均
无显著性差异(P >0.05).即模型对照组的 SOD活力显著高于正常对照组 ,大剂量组和阳性
药对照组显著低于模型对照组 ,且大剂量组显著高于正常对照组 ,而阳性药对照组与正常对照
组无显著性差异 ,大剂量组降低血液 SOD 活力异常增强的作用显著大于小剂量组.模型对照
组SOD活力异常增强的原因 ,可能是四氧嘧啶引起体内自由基含量增加 ,导致了 SOD活力的
异常增强[ 7] .槐米提取液显著降低了四氧嘧啶引起的 SOD异常增强 ,可能与其中黄酮类消除
自由基的作用有关[ 8] .
在血液的 MDA含量方面 ,B 、C 、D 、E组与A组相比 ,B 、C 、D组与A组相比 ,B组与 D组相
比均有显著性差异(P <0.05);C组与 D组相比 ,B组与C 组相比均无显著性差异(P >0.05).
即血液中 MDA含量 ,模型对照组比正常对照组有显著性增高 ,而大剂量组 、小剂量组 、阳性药
对照组与模型对照组相比有显著性降低 ,但与正常对照组相比有显著性增高 ,大剂量组降低
MDA异常增高的作用略大于小剂量组 ,但二者无显著差异.MDA是脂质在自由基等因素作
用下氧化分解的产物 ,其含量的增高可能引发多种病变 ,加速机体衰老[ 9] .槐米提取液显著降
低四氧嘧啶引起的 MDA异常增高 ,说明其有明显的抗氧化作用 ,其机制亦可能与其中黄酮类
清除自由基的作用有关.
在Hb 含量方面 , B 、C 、D 、E 组与 A 组相比 , B 、C 组与 D 组相比均有显著性差异
88 陕西师范大学学报(自然科学版) 第 30 卷
(P<0.05),B 、C 、D组与 E 组相比 , B组与 C 组相比均无显著性差异(P>0.05).即模型对照
组的 Hb比正常对照组有显著性增高 ,而大 、小剂量组 、阳性药对照组与模型对照组相比有显
著性降低 ,且与正常对照组无显著性差异 ,大 、小剂量组的作用无明显差异.模型对照组 Hb异
常增高的原因 ,可能是四氧嘧啶加快了机体的氧化作用 ,导致了 Hb的异常增高 ,槐米提取液
显著降低四氧嘧啶引起的 Hb异常增高 ,再次表明其可提高小鼠的抗氧化能力.
2.2 槐米提取液对小鼠肝 、脾指数的影响
槐米提取液对小鼠肝 、脾指数的影响结果见表 2.
表 2 槐米对小鼠肝 、脾指数的影响( X±S)
Tab.2 Influence of Flos Sophora on liver and spleen indexes of rats( X±S)
组别(n =10) A B C D E
肝指数 4.88±0.44 5.52±0.58 5.54±0.78 5.49±0.38 5.61±0.60
脾指数 0.41±0.10 0.52±0.08 0.50±0.04 0.51±0.07 0.58±0.12
经 t 检验显示 ,在肝脏指数值方面 ,B 、C 、D 、E组与 A组相比有显著性差异(P <0.05),B 、
C 、D组与 E组相比 , B 、C组与 D组相比 ,B组与 C 组相比均无显著性差异(P >0.05).即模型
对照组的肝指数显著小于正常对照组 ,而大 、小剂量组 、阳性药对照组显著高于模型对照组 ,且
均接近正常对照组.大 、小剂量组的作用无明显差异.
在脾脏指数值方面 ,B 、D 、E组与 A组相比 ,C组和 D组相比 ,B组和 C 组相比均有显著性
差异(P <0.05),C 组与 A 组相比 ,B 、C 、D组与 E 组相比 , B 组与 D 组相比均无显著性差异
(P>0.05).即模型对照组的脾脏指数显著小于正常对照组 ,大剂量组 、阳性药对照组显著高
于模型对照组 ,且与正常对照组无显著性差异.小剂量组介于模型对照组和正常对照组之间 ,
与二者均无显著性差异.大剂量组的作用显著大于小剂量组.
四氧嘧啶引起肝脏指数和脾脏指数的显著下降 ,可能是由于自由基氧化不饱和脂肪酸 ,破
坏生物膜 ,造成肝 、脾细胞损伤的结果.槐米提取液可以防止肝 、脾指数的异常下降 ,进一步提
示其有清除自由基 、防止脏器细胞损伤的作用.
2.3 槐米提取液对小鼠肝脏 SOD 、MDA和肝糖原的影响
槐米提取液对小鼠肝脏 SOD 、MDA 和肝糖原的影响结果见表 3.
表 3 槐米对小鼠肝脏 SOD、MDA和肝糖原的影响( X±S)
Tab.3 Influence of Flos Sophora on SOD , MDA and glycogen in liver of rats( X±S)
组别(n =10) A B C D E
SOD/(U·g -1肝) 110.77±13.52 79.52±11.37 82.18±10.20 69.74±11.21 57.84±20.25
MDA/(mmol·g-1肝) 8.62±1.65 4.59±0.95 5.65±0.95 5.51±1.17 6.09±0.62
肝糖原/(mg·g-1肝) 7.12±0.45 7.55±0.31 8.58±0.35 7.87±0.36 7.41±0.49
经 t 检验显示 ,在肝脏的 SOD活力方面 ,B 、C 、D 、E 组与 A组相比 , B 、C组与 E 组相比均
有显著性差异(P <0.05),D组与 E组相比 ,B 组与C 组相比均无显著性差异(P >0.05).即模
型对照组肝脏 SOD活力显著高于正常对照组 ,大 、小剂量组 、阳性药对照组均显著低于模型对
照组 ,而在大 、小剂量组的作用无显著差异.
肝脏 MDA含量 , B 、C 、D组与 A组相比 ,B 、C 、D组与 E组相比 ,B组与 C组相比均有显著
性差异(P<0.05).即肝脏 MDA的含量模型对照组显著高于正常对照组 ,大 、小剂量组 、阳性
第 2 期 杨建雄 等:槐米提取液对小鼠抗氧化能力的影响 89
药对照组不但显著低于模型对照组 ,而且显著低于正常对照组 ,大剂量组的作用显著大于小剂
量组.
肝糖原含量 B 、C 、D组与 A组相比 ,B 、D 、E组与 C 组相比均有显著性差异(P <0.05),A 、
B 、D组与 E组相比无显著性差异(P>0.05),即肝糖原含量模型对照组比阳性对照组略有下
降 ,但差异不显著 ,而大 、小剂量组 、阳性药对照组均显著高于模型对照组.
槐米提取液对肝脏 SOD 、MDA 的影响与对血液 SOD 、MDA的影响趋势完全一致 ,且对肝
脏的影响更大些.槐米提取液可显著提高肝糖原含量 ,也有利于提高机体的抗氧化能力 ,且提
示槐米在提高机体抗应激能力 、解毒作用 、提高机体运动能力方面具有积极作用 ,同时也提示
槐米的某些成分对机体有一定的补益作用 ,有关问题有待深入探讨.
综上所述 ,槐米可提高机体的抗氧化能力 ,因而有可能提高机体的抗病能力 ,延缓机体的
衰老 ,且 300 mg/(kg·d)的剂量即可有显著作用.这些结果说明槐米及其水提取液可用于抗氧
化 、抗衰老药的开发 ,或用作功能性食品和保健品的添加剂.
参考文献:
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〔责任编辑 王 勇〕
Influence of Flos Sophora on antioxidative ability of rats
YANG Jian-xiong1 , WANG Li-juan2 , TIAN Jing-wei1
(1 College of Life Science , Shaanxi No rmal University , Xi′an , 710062 Shaanxi , China;
2 College of Science , Xi′an Jiao tong University , Xi′an , 710049 Shaanxi , China)
Abstract:ICR female mice are randomly divided into 5 g roups:Normal and model control groups
are ig dist illed w ater 0.4 mL.d-1 ;large-dosage and small-dosage groups are ig Flos Sophora 300
mg/(kg·d).After 20 d , all the mice , except for the normal control group are kept f rom food for
16 h , and then are ip allox an 150 mg/kg.3 d later , all the mice are killed , Hb , liver and spleen
indexes , liver gly cogen , SOD and MDA in blood and liver are measured.The results show ed that
Flos Sophora can lower obviously abno rmal content of SOD , MDA and Hb that are produced by
allox an , and also enhance obviously abno rmal decrease of liver and spleen indexes that are
produced by alloxan , and also enhance obviously the content of liver gly cogen.Conclusion:Flos
Sophora can enhance ant ioxidative ability of ICR female rats.
Key words:Flos Sophora;antioxidative ability;rat
90 陕西师范大学学报(自然科学版) 第 30 卷