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凉山虫草与冬虫夏草中多糖的含量比较研究



全 文 :doi:10.3969/j.issn.1674-2257.2012.02.034
网络出版地址:http://www.cnki.net/kcms/detail/51.1705.R.20120521.2108.001.html
·论 著·
凉山虫草与冬虫夏草中多糖的含量比较研究
陈璐,万德光,陈斌儒,赵那,国锦琳*
(成都中医药大学中药材标准化教育部重点实验室,中药资源系统研究与开发利用省部共建国家重点实验室培育基地,成都 611137)
  【摘要】 目的 比较凉山虫草与冬虫夏草在多糖含量上的差异,为凉山虫草的资源开发利用提供依据。方法
 采用苯酚-硫酸法,以葡萄糖为对照品,测定凉山虫草与冬虫夏草中多糖含量。结果 凉山虫草样品多糖含量分
别为1.30%、1.44%,冬虫夏草样品多糖含量分别为2.02%、2.27%。结论 凉山虫草中含有丰富的多糖成分,含
量低于冬虫夏草。
【关键词】 凉山虫草;冬虫夏草;多糖
【中图分类号】 R282.71  【文献标志码】 A
Comparative Study on Polysaccharide of Cordyceps Liangshanensis and Cordyceps Linensis CHEN Lu,WAN De-
guang,CHEN Bin-ru,ZHAO Na,GUO Jin-lin (Pharmacy School of Chengdu University of TCM,State Key
Laboratory Breeding Base of Research and development of Chinese Medicinal Resources,Chengdu,Sichuan
611137,China)
【Abstract】 Objective To compare the polysaccharide content differences between cordyceps liangshanensis
and cordyceps sinensis,providing basis for the development and utilization of C liangshanensis.Methods Phenol-
sulfuric acid method was used,glucose was the standard,determining the content of polysaccharide.Results The
contents of C liangshanensis samples were 1.30%,1.44%,the contents of C sinensis samples were 2.02%,2.27%.
Conclusion The content of polysaccharide was rich in C liangshanensis,but lower than C sinensis.
【Key words】 Cordyceps liangshanensis;Cordyceps sinensis;Polysaccharide
基金项目:四川省教育厅青年基金项目(NO.11ZB050)
通讯作者:国锦琳
  冬虫夏草为麦角菌科冬虫夏草菌 Cordyceps
sinensis(Berk.)Sacc.寄生在鳞翅目蝙蝠蛾科昆虫
幼虫体上的幼虫尸体及子座的复合体[1],具有补肾
益肺、止血化痰之功效,在临床上常用于治疗久咳虚
喘、阳痿遗精、劳嗽咯血、腰膝酸软等肺肾疾病。由
于其严格的寄生性和对生态地理环境的特殊要求
(海拔3 000~5 000m高寒地区),野生资源十分稀
少,供需矛盾严重,使得冬虫夏草的替代资源、替代
品研究日益受到人们的重视,成为新的研究热点[2]。
凉山虫草为麦角菌科真菌凉山虫草Cordyceps
liangshanensis Zang,Liu et Hu寄生在鳞翅目昆虫
幼虫体上幼虫尸体及子座的复合体,为我国四川凉
山州和云南昭通市一带特有的虫草资源,与冬虫夏
草功效相似,在民间已有较长的药用历史,1992年
被收载入四川省中药材标准[3]。凉山虫草分布海拔
较低,对生态环境要求不高,资源量丰富,极有可能
发展成为一种优良的冬虫夏草替代资源。
有关凉山虫草的药材性状、显微鉴别、薄层色谱
鉴别等研究已有报道[4-6],但有关化学成分和分析的
报道很少。为此,本研究选择虫草多糖为评价指标,
进行凉山虫草与冬虫夏草的多糖含量比较研究,以
期为进一步开发和利用凉山虫草奠定基础。
1 材料与方法
试剂与仪器:葡萄糖为国药集团化学试剂有限
公司产品,重蒸苯酚、浓硫酸均为成都科龙化工厂产
品,水为超纯水。电子天平(SARTORIUS,BSA
124S),紫外可见分光光度计(上海尤尼柯,UV-
2000)。
药材:凉山虫草与冬虫夏草药材来源见表1,经
四川省食品药品检验所黎跃成主任药师鉴定确认为
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Cordyceps liangshanensis、Cordyceps sinensis,药材
粉碎(过二号筛),备用。
表1 虫草样品来源
药材代号 来源 基原 收集时间
L1 四川省凉山州雷波县马湖乡 C.liangshanensis  2009-10
L2 四川成都荷花池药材市场 C.liangshanensis  2012-04
S1 四川省甘孜州康定雅加梗 C.sinensis  2009-05
S2 西藏自治区那曲地区比如县 C.sinensis  2009-05
2 结果
2.1 对照品和供试品溶液的制备
对照品溶液的制备:精密称取葡萄糖对照品
6mg,置5mL容量瓶中,加蒸馏水溶解并定容,即
得1.2mg·mL-1葡萄糖对照品溶液;供试品溶液的
制备:取干燥至恒重的凉山虫草样品L1、L2,冬虫夏
草样品S1、S2各3份,每份0.1g,精密称定,各加入
蒸馏水20mL,称重,沸水浴加热4h,冷却至室温,
蒸馏水补足重量。过滤,取续滤液,即得供试品
溶液[7]。
2.2 标准曲线的制备
精密吸取上述对照品溶液0.1、0.2、0.4、0.8、
1mL至1mL 离心管中,用蒸馏水补足每管至
1mL,配置成浓度分别为120μg·mL-
1、240μg·
mL-1、480μg·mL-
1、960μg·mL-
1、1 200μg·mL-

的葡萄糖供试品溶液。各吸取0.2mL至具塞试管
中,加入1mL6%重蒸苯酚,5mL浓硫酸,混匀,室
温放置10min,40℃水浴15min,冷却至室温,摇
匀,在490nm处测定吸光度。以葡萄糖浓度为横
坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线,并求得回归
方程:Y=0.0009X+0.6977,r=0.9991,结果表明
葡萄糖浓度在120~1 200μg·mL-
1内线性关系
良好。
2.3 精密度试验
取葡萄糖对照品溶液(480μg·mL-
1)0.2mL
至具塞试管中,加入1mL6%重蒸苯酚,5mL浓硫
酸,混匀,室温放置10min,40℃水浴15min,冷却
至室温,摇匀,在490nm处测定吸光度。记录6次
测定值,计算RSD为0.93%,说明精密度良好。
2.4 稳定性试验
按2.1项下制备凉山虫草与冬虫夏草供试品,
取供试品溶液0.2mL,分别在0、2、4、8、12、24h按
2.7项下测定吸光度。计算得凉山虫草RSD为1.
92%,冬虫夏草RSD为2.14%,说明供试品溶液在
24h内稳定性良好。
2.5 重复性试验
取干燥至恒重的凉山虫草L1样品6份,每份
0.1g,精密称定,按2.1项下制备供试品溶液,按2.
7项下分别测定6份样品吸光度值,测得多糖的平
均含量为13.01mg·g-1,RSD为2.32%(n=6),说
明重复性良好。
2.6 加样回收试验
取干燥至恒重的凉山虫草L1样品9份,每份
0.1g,精密称定,置具塞试管中,按下表分别精密加
如葡萄糖对照品,按2.1项下制备供试品溶液,按
2.7项下分别测定含量,计算回收率,结果见表2,平
均回收率为100.65%,RSD=3.07%(n=9)。
表2 加样回收试验结果(μg,n=9)
Original  Added  Detected Recovery/% X/% RSD/%
130.1  200.00  338.5  102.51
130.1  200.00  326.6  98.91
130.1  200.00  322.4  97.65
130.1  150.00  273.9  97.74
130.1  150.00  286.2  102.13  100.65. 3.07
130.1  150.00  293.4  104.73
130.1  100.00  220.9  95.97
130.1  100.00  235.3  102.20
130.1  100.00  239.4  103.99
2.7 凉山虫草与冬虫夏草的多糖含量测定
取2.1项下制备各供试品溶液0.2mL至具塞
试管中,加入1mL 6%重蒸苯酚,5mL浓硫酸,混
匀,室温放置10min,40℃水浴15min,冷却至室
温,摇匀,在490nm处测定吸光度,3份求平均值,
含量测定结果见表3。
表3 多糖含量测定结果(n=3)
药材代号 基原 多糖含量(%)
L1 C.liangshanensis  1.30%
L2 C.liangshanensis  1.44%
S1 C.sinensis  2.02%
S2 C.sinensis  2.27%
3 讨论
真菌多糖(如茯苓多糖、银耳多糖、灵芝多糖等)
普遍具有免疫调节、抗肿瘤、抗氧化等广泛的药理活
性,成为近年来药用真菌化学成分研究的热点。现
代药理学研究证明,虫草多糖具有增强机体免疫、抗
肿瘤、抗肝损伤、降血糖以及防辐射、抗氧化等多种
药理活性,是虫草类真菌的主要活性成分之一,检测
此类成分含量的高低对虫草质量的评价有一定的意
义[7-10]。从测定结果看,凉山虫草中含有丰富的多
(下转第252页)
·942·成都医学院学报2012年第7卷第2期 Journal of Chengdu Medical Colege,2012,Vol.7,No.2
心理变化特点而不断动态变化,对减轻焦虑、消除恐
惧、缓解紧张、解除怀疑,以调动自身内在的康复能
力,增强机体免疫力,促进产后恢复有重要的现实
意义。
护理心理学作为一门实践性很强的应用学科,
已得到普遍认可并广泛用于临床护理实践。心理护
理作为现代护理模式的重要组成部分,已贯穿于临
床护理和手术的全过程。随着社会的发展,医学知
识不断普及和人们文化水平逐步提高,产妇自我保
健意识逐渐增强,住院和手术等都会产生一系列心
理问题,也迫切需要解释、指导及安慰[6]。本文通过
对124例产妇的临床分组护理发现,观察组及对照
组产妇入室后各种心理反应均存在显著统计学差
异,P<0.05,观察组入室后5min较对照组术前1
d的收缩压及心率存在显著差异,P<0.01,可见心
理护理的产妇不良心理反应情绪和收缩压及心率生
理指标明显缓解。通过对62例产妇术前的主动心
理护理,使91.30%例次产妇消除了术前不良心理,
明显稳定了收缩压和心率,对手术的成功及术后机
体恢复起到了重要作用。
同时,通过对产妇进行术期的主动心理护理,明
显增强了护士工作的自主性和自律性,产妇也感受
到了护士耐心细致的关怀,显著改善了护士的形象,
密切了护患关系。要做好心理护理,护士除了应具
备系统的专业理论知识,还需有过硬的护理技能、高
尚的道德情操、良好的个人素质,以高度的同情心和
责任感对待产妇,方能使产妇早日恢复。
参考文献
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(2012-03-12 收稿,2012-04-19 修回
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(上接第249页)
糖类成分,但含量低于冬虫夏草。
近年来由于冬虫夏草独特的功效以及人们健康
保健意识的提高,国内外尤其是国际市场对冬虫夏
草的需求量持续上升,供需矛盾日益严重,冬虫夏草
价格不断飙升,至2012年1月,国内中药材市场冬
虫夏草价格已达到15万元/kg(3 500条)。在如此
高昂的价格和野生资源日益枯竭的现状下,冬虫夏
草的替代品研究显得十分重要。从虫草属真菌中寻
找与之亲缘关系相近的品种,开发冬虫夏草替代资
源未来的发展方向。凉山虫草与冬虫夏草菌同为麦
角菌科虫草属,寄主同为鳞翅目昆虫,二者亲缘关系
相近、功效相似,极有希望发展成为一种优良的冬虫
夏草替代资源。但到目前为止,凉山虫草的研究工
作还刚刚起步,是否能成为冬虫夏草替代品,尚需进
行系统的化学成分及药理药效学等方面的研究
工作。
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