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不同配方培养基对树舌灵芝子实体培养的影响



全 文 :EDIBLEFUNGI食用菌 2008(3)
能有效的调控O2/CO2浓度,生产出的杏鲍菇商品性好。
3.3 亚麻屑质地干硬,吸水慢,易扎袋造成污染。因此,使用
前亚麻屑必须经粉碎至 0.5cm以下,同时要提前一天浸
泡,吸水软化,才能保证培养料水分足,装袋时亚麻屑不扎
袋。
不同配方培养基对树舌灵芝子实体培养的影响
竹文坤 贺新生 苏艳秋 王 茂
(西南科技大学生命科学与工程学院,四川绵阳621000)
摘 要 用木屑及麸皮为原料设计 10个配方、再选用 11种不
同树种树枝分别对树舌灵芝进行栽培试验,测定菌丝体生长速
度、子实体形成情况、产量、物料消耗。结果表明,在10种麸皮
添加量的配方中,树舌灵芝栽培培养基的麸皮最适添加量为
5%~10%,树舌灵芝菌丝体、子实体生长及生物学效率最佳的培
养基配方为:木屑 95%,麸皮 5%;在 11种树枝培养基中,菌丝
体生长最快的树种是苦楝树,子实体产量最高的是枫树。
关键词 树舌灵芝 呼吸消耗 生物学效率 麸皮用量
文章编号 1000-8357(2008)03-0030-02
树舌灵芝 Ganodermaapplanatum(Pers.exGray.)Pat,又称
平盖灵芝、老牛肝、扁木灵芝,扁芝、老母菌、枫树菌等,通常叫
做树舌,是一种大型担子菌,生于阔叶树枯立木、倒木和伐桩
上,多年生,长达20余年[1]。树舌对温度适应性强,我国23个
省区都有分布[2],广泛分布于欧洲、亚洲、北美洲的其他国家
[3]。近十几年的研究表明树舌中含有多糖、甾体类化合物、三萜
酸、氨基酸、微量元素等,具有抗肿瘤抗放射、抗衰老、抗病毒
和免疫调节等药理作用[4]~[8],具有良好的应用前景。
树舌目前的开发利用程度还较低,已开发出的产品主要
是复方树舌片,用于肝炎的治疗,其在药用及保健品方面具有
很大的开发价值。树舌的供应来源于野生资源的采集,无法满
足日益扩大的保健品、天然药物市场。
国内外对树舌灵芝的研究报道较少,试验通过研究木屑
培养基麸皮添加量和不同树种培养基对树舌菌丝体及子实体
影响,初探树舌栽培工艺,为树舌的人工栽培奠定基础。
1 材料与方法
1.1 供试菌株 树舌灵芝,Ganodermaapplanatum(Pers.ex
Gray.)Pat,标本采集地点:绵阳市青义镇,采集日期:2005年
11月8日。组织分离得到纯菌种,菌株编号:Ga.1108。
PDA培养基:马铃薯 200g,葡萄糖 20g,水 1000mL,pH
自然。原种培养基:棉子壳 80%,麸皮 20%,另加风干料总重
生石灰1%,料水比1∶1.1。
1.2 试验方法
1.2.1 子实体栽培料麸皮添加量试验 以木屑为主要原料,
麸皮为氮源,麸皮的用量为 0%~45%,配方设计如表 1所示。
配方中加入风干料总重1%的生石灰,含水量约为1∶1.1。
按配方称料,加水混匀,填入已称重罐头瓶,等量装料,重
复 6次,装瓶,封口,标记,121℃灭菌 40min,接种。25℃避
光培养至菌丝体满瓶。取出满瓶料,放入盛有少量水的盆
中,以湿报纸覆盖,保持少量散射光,继续培养,间断补足水
分,保持盆中较高湿度,利于出菇。出菇后,减少遮蔽范围,增
强散射光,促其发育。子实体弹射大量孢子,表示其成熟,采
摘子实体。
1.2.2 不同树种对树舌菌丝生长及出菇影响试验 采集不同
树种的直径约 1cm的枝条,切成1~2cm木段。用水浸泡4h,
取出木段,装在有孔容器中,至无水滴出。将木段均匀分装到
500mL罐头瓶中,封口。121℃灭菌 40min,自然冷却,接种,
培养及出菇方法同1.2.1。
1.3 测定方法 ①菌丝体生长速度测定参考文献[10];②子实
体干重的测定[11];③培养料呼吸消耗测定参考文献[12]。
2 结果与分析
2.1 子实体形态特征 如图 1所示,瓶栽子实体较小,无柄,
菌盖直径(10~30)mm×(10~40)mm,厚 1~2cm,呈半圆形或
不规则,表面褐色,不平整,皮壳胶角质,边缘呈白色,光滑,用
手触摸变浅褐色。菌肉浅栗色。菌盖反面呈白色,菌管密集,孔
圆形,垂直向下。子实体成熟后,弹射大量褐色孢子,在瓶体上
堆积,形成长×宽×高为(20~40)mm×(3~5)mm×(1~3)mm左右
的孢子堆。
瓶栽子实体与自然条件下生长和以往覆土栽培试验的
(图 2)子实体相比较,瓶栽子实体个体较小,形状不规则,菇
体较干燥,无同心环纹棱。
2.2 麸皮添加量对菌丝体生长速度的影响 菌丝在 10种配
方中均能生长,麸皮含量较高的培养料中菌丝体生长速度较
收稿日期:2007-10-29
表1 培养基配方
编号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
木屑/% 100 95 90 85 80 75 70 65 60 55
麸皮/% 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45
图1 瓶栽子实体形态!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
30- -
EDIBLEFUNGI食用菌 2008(3)
图2 覆土栽培(左)及自然条件下生长(右)的树舌子实体
表2 菌丝体生长速度和满瓶天数
麸皮添加量/% 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45
平均满瓶天数/d 13.211.812.715.217.520.819.220.019.518.7
平均长速/(mm·d-1) 8.911.310.08.47.06.25.65.55.66.2
满瓶时菌丝体密度 ﹣ ﹣ + + + + ++ ++ +++++
表3 出菇情况及子实体产量
注:﹣表示稀疏,+表示适中,++比较浓密,+++浓密。
麸皮添加量/% 0 5 10 15 20 25 30354045
情况出菇 + + + + + + - - - -
子实体平均鲜重/g 3.82 4.185.253.283.381.87 - - - -
子实体平均干重/g 2.22 3.122.841.962.501.22 - - - -
最大子实体干重/g 2.60 3.733.792.813.233.18 - - - -
子实体平均含水量/% 41.8825.3645.9040.2426.0434.75- - - -
注:+表示出菇;﹣表示没有出菇。
慢,洁白,整齐浓密;麸皮含量较低的培养料中菌丝体生长速
度较快,稀疏。结果如表2,配方2中的菌丝体生长速度最快,
稀疏,满瓶天数最短。麸皮添加量高的配方6~10的菌丝生长
速度较慢,整齐浓密,满瓶天数长。
2.3 麸皮添加量对出菇和子实体产量的影响 试验结果如
表3。麸皮添加量30%以上配方不出菇。对子实体产量做方差
分析,F=18.253>>F0.05(14,30)=3.22,表明配方对子实体产量
的影响极显著。麸皮用量为 5%时,子实体平均产量最高;麸
皮用量 10%时,子实体单个产量最高;麸皮用量超过 30%,不
出菇。分析结果显示子实体平均鲜重(y1)和子实体平均干重
(y2)与麸皮添加量(x)的关系:y1=-0.0182x2-0.4132x+5.1518,
y2=-0.0153x2-0.2146x+3.1553。
2.4 物料平衡计算 试验结果如表4。对培养料进行物料衡
算试验的结果表明,子实体产量越高,呼吸消耗量越大,总呼
吸消耗率越高,剩余的废料减少。
平均计算,求出:子实体干重:呼吸消耗:剩余料干重=1∶
10~20∶20~60。表明树舌子实体干重与栽培中呼吸消耗的干物
质差距较大。麸皮添加 5%的配方2的物料有效利用率最高。
2.5 不同树种树枝对树舌菌丝体生长和出菇影响 结果如
表5。苦楝树中菌丝体生长最快,达11.7mm/d,10d满瓶。水
冬瓜树中菌丝体生长最慢,有明显抑制作用。方差分析,F0.01
(11,9)=2.38>F=1.8996,表明 11种树种对菌丝体生长速度影
响不显著。
出菇阶段,6种树种栽培不出菇。培养 5个月后,培养料
表面出现不同程度的污染。第11个月后,相继又有3瓶出菇,
第12个月,又有几瓶出现子实体原基。表明树舌具有较强的
抗污染能力和出菇能力。在出菇的树种中,枫树栽培的最大子
实体干重为2.67g,远高于其它树种。
3 小 结
3.1 麸皮添加量试验及不同树种栽培试验中,子实体形态不
规则,比以前的覆土出菇和野外采集得到的子实体在形态
上差异较大:子实体较小,形状不规则,菇体较干燥,无同心
环纹棱。随着麸皮添加量增大,菌丝体生长速度减慢,浓密
度增加,呼吸消耗量递减。分析表明,木屑中添加麸皮作为
氮源的比例为 10%左右。对 10个配方培养料做出菇方差分
析和呼吸消耗分析,结果表明麸皮添加量对子实体干重的
影响极显著。麸皮添加量为 5%时,子实体干重产量最高,物
料有效利用率也最高,子实体干重∶呼吸消耗∶剩余料干重=1∶
9∶20;添加量为 10%时,子实体单个产量最高;添加量超过
30%时,不出菇。综合分析表明,木屑培养基中最佳麸皮添加
量为 5%~10%。
3.2 11种树种栽培,最利于菌丝体生长的是苦楝树,最利于
出菇的是枫树,水冬瓜树对菌丝体有明显抑制作用。方差
分析表明,菌丝体在不同树种中生长差异不显著。出菇分
析表明,枫树栽培子实体产量最大。生产中,枫树木屑应作
为栽培主要原料。笔者认为,不同树种木段栽培试验中,由
于树种间纤维密度不同,导致装瓶料质量不同,对菌丝体
生长速度和出菇的影响较大,应采用木屑法栽培,做进一
步研究。
参 考 文 献
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[2] 戴芳澜.中国真菌总汇[M].北京:科学出版社,1979,467-468.
[3] 赵继鼎,张小青.中国真菌志第十八卷灵芝科[M].北京:科学出
版社,2000,116-119.
[4] 陈体强,徐 洁,吴锦忠.福建省常见灵芝的氨基酸分析比较[J].
海峡药学,2004,16(5):1-4.
[5] SankyoCo.,Ltd.Antitumorpolysaccharidesfrom Ganodermaap-
planatum[J].Japan:JP.58093702,1983.
[6] SinghP,RangaswamiS.ChemicalComponentsofGanoderma
表4 出菇前后干物质量变化
编号
原料
干重/g
菌丝体满瓶
时干物质量/g
剩余料
干重/g
子实体
总干重/g
总呼吸
消耗量/g
总呼吸
消耗率/%
子实体干重:呼吸
消耗:剩余料干重
1 500.00 475.32 319.95 13.05 167.13 36.01 1:13:38
2 500.00 468.03 256.32 25.01 218.67 48.74 1:9:20
3 500.00 493.43 259.32 21.59 219.10 48.14 1:10:23
4 500.00 458.85 348.92 12.07 139.02 30.22 1:12:41
5 500.00 483.69 304.70 17.89 177.42 39.06 1:10:28
6 500.00 457.35 309.57 8.48 181.95 38.09 1:21:58
7 500.00 458.41 345.29 0.00 154.71 30.94 -
8 500.00 456.70 347.46 0.00 152.54 30.51 -
9 500.00 460.72 371.55 0.00 128.45 25.69 -
10 500.00 486.38 335.44 0.00 164.56 32.91 -
注:子实体干重为去水分后的重量,罐头瓶栽出菇一次。
表5 不同树种满瓶平均天数及菌丝体生长速度
树种 青冈树 构树 苦楝树 枫树 松树 玉兰树 香樟树 油桐树 柳树 桑树 水冬瓜树
平均满瓶天数/d 12 12 10 12 13 16 11 10 11 11 40
菌丝体平均
生长速度/(mm·d-1)
10.1 9.6 11.7 10.7 9.2 8.5 11.0 10.9 9.9 9.7 7.1
出菇情况 是 否 是 是 是 否 否 是 否 否 否
最大子实体干重/g 0.57 - 0.79 2.670.47 - - 0.94 - - -
31- -
EDIBLEFUNGI食用菌 2008(3)
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不同配方培养料栽培宁香8号试验
丁李春 阮瑞国 郑长奇
(福建宁德市农业科学研究所,福安350003)
摘 要 试验结果表明,配方①(松杉木屑 77%,麦麸 20%,石
膏2%,蔗糖1%)为最适宁香8号生长的培养料配方。该配方培
养料的菌丝生长势最强,子实体形态最佳,产量最高,生物学效
率达83.4%。
关键词 香菇 培养料配方 菌丝生长势 子实体产量
生物学效率
文章编号 1000-8357(2008)03-0032-02
香菇栽培的材料主要是阔叶树木屑,而阔叶树资源在
减少,为解决这一问题。笔者于 1997-2000年采用多孢分离
技术,筛选 1个适应松杉木屑栽培的新菌株宁香 8号[2],
2001-2005年来对宁香 8号松杉木屑培养料进行筛选试
验,探讨不同松杉木屑培养料对宁香 8号菌丝生长和子实
体产量的影响,为大面积推广应用提供参考。现将试验结果
报道如下。
1 材料与方法
1.1 供试菌株 宁香8号菌株系福建省宁德市农科所选育,
申香12、L26、Cr04、Cr03(福建省菌物中心引进)。
母种培养配方:PDA培养基马铃署200g,葡萄糖20g,琼
脂 20g加松杉木屑煮液 1000mL(松杉木屑 200g,加水
1000mL煮沸 30min,取其滤液加水至 1000mL);原种和栽
培培养基配方:松杉木屑 78%,麸皮 20%,蔗糖 1%,石膏粉
1%,含水量60%,pH值自然。
1.2 供试培养料配方 松杉木屑颗粒为 1~3mm,来自福建
福安溪柄茜洋锯木厂。阔叶树木屑颗粒为 1~3mm,来自浙
江仓南工艺玩具厂。试验配方:①松杉木屑 77%,麸皮
20%,石膏 2%,蔗糖 1%;②松木屑 77%,麸皮 20%,石膏
2%,蔗糖 1%;③杉木屑 77%,麸皮 20%,石膏 2%,蔗糖
1%;④阔叶树木屑 77%,麦麸 20%,石膏 2%,蔗糖 1%。松
杉木屑为新鲜松杉木屑,没有通过任何处理(其中配方①
松杉木屑各占 50%混合)。
1.3 试验方法 采用随机区组设计[3],每种培养料配方设3个
重复,每个重复20袋,按各配方称料,搅拌均匀,含水量60%,
采用 12cm×45cm×0.05cm聚乙塑料袋,每袋装干料 350g。
按闽东地区常规方法装袋[4],高压灭菌,接种,栽培管理,发菌
时测定各配方的菌丝生长状况,采收时测定各配方子实体生
长状况及各品种产量。
1.4 观察测定方法 ①菌丝生长状况测定:菌丝生长速度和
长势间隔 5d测定,取平均值,进行 LSR测验[5]-[6]。菌丝生长
势表示:+表示菌丝生差,++生长一般,+++生长旺盛。②子
实体生长状况测定:测定各配方培养料子实体,菌盖大小,
菌肉厚薄,菌柄长短、粗细;子实体产量、生物学效率。③香
菇营养成分检测:蛋白质测定采用凯氏定氮法,脂肪测定采
用索氏提取法,碳水化合物测定采用苯酚-硫酸法,粗纤维
测不定采用重量法,灰分测定采用重量法,水分测定采用恒
重法[7]。
2 结果与分析
2.1 菌丝生长状况 试验结果表明,不同配方培养料对宁香
8号菌丝生长速度和生长势有一定的影响(表1)。从表1可以
看出,在不同配方培养料中,配方④对照和配方①宁香8号菌
丝生长速度较快,平均生长速度分别为 5.23mm/d,菌丝生长
势最强。方差分析结果表明,配方④(对照)和配方①培养料菌
丝生长速度和生长势与其余配方培养料的菌丝生长速度和生
长势相比较,差异均达到极显著水平。
2.2 子实体生长影响 试验结果表明,不同配方培养料对宁
香 8号子实体有明显的影响(表 2)。配方①宁香 8号子实体
经济性状最好。
试验结果表明,不同配方培养料对宁香8号子实体产量
和生物学率有明显的影响(表3)。配方①、④的宁香8号子实
体产量及生物学效率与其余配方培养料的子实体产量及生物
学效率相比较,差异均达到极显著水平。
2.3 香菇营养成分检测 松杉木屑与杂木屑栽培的香菇的
营养成分检测结果详见表4。松杉木屑栽培的香菇与杂木屑
收稿日期:2007-10-17
基金项目:福建省宁德市科技局重点科技项目(编号:2004Z08)。
!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
表2 不同配方培养料的宁香8号子实体经济性状
配方
子体实形态
菌盖直径/cm 菌肉厚度/cm 菌柄长度/cm 菌柄粗细/cm
① 6.60 1.60 4.16 1.08
② 5.80 0.84 8.34 1.05
③ 4.40 0.60 7.30 0.80
④ 7.60 1.50 5.60 1.12
表1不同配方培养料对宁香8号菌丝生长速度和长势的影响
配方
菌丝
长势
菌丝生长速度/(mm·d-1) 差异显著性
1 2 3 0.05 0.01
① +++ 4.98 5.36 5.05 a A
② ++ 4.46 4.38 4.66 b B
③ + 3.33 3.41 3.16 c C
④ +++ 5.30 5.38 5.01 a A
32- -