全 文 ：用，其抑瘤活性的具体机制需要进一步研究。
参考文献:
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(收稿日期:2015-07-04)
檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽
文章编号:1673-2995(2015)06-0404-03 ·论 著·
超声波提取返魂草有效成分的工艺研究
张宏梅，崔佰吉 (吉林医药学院药学院，吉林 吉林 132013)
摘 要:目的 优化返魂草有效成分超声波提取工艺。方法 以返魂草中总黄酮含量为考察指标，通过单因
素实验考察超声时间、温度、功率等对返魂草有效成分含量的影响，采用正交设计实验法确定最佳提取工艺。
结果 超声提取最佳工艺为:乙醇浓度为 80%，提取温度为 50 ℃，提取时间为 120 min。结论 超声波提取法
提取时间短，操作方便，工艺稳定，重现性好，适于工业化生产。
关 键 词:返魂草;超声;提取工艺
中图分类号:Ｒ284． 2 文献标识码:A
Ｒesearch on ultrasonic extraction of the ingredient from Senecio cannabifoli-
us Less
ZHANG Hongmei，CUI Baiji (School of Pharmacy，Jilin Medical University，Jilin City，Jilin Province，132013)
Abstract:Objective To optimize the ultrasonic extraction process of Senecio cannabifolius Less． Methods The ul-
trasound time，the temperature and power were investigated by single element． The optimum extraction conditions were
investigated by orthogonal experiment with total flavonoids as the content index． Ｒesults The optimum extraction
condition as follows:ethanol concentration 80%，temperature of extraction 50 ℃ and times of extraction 120 min．
Conclusion The method is simple，convenient and can be controlled easily，and is suitable for the determination of
Senecio cannabifolius Less．
Key words:Senecio cannabifolius Less;ultrasound;extraction process
基金项目:吉林省教育厅科研资助项目(2014549)．
作者简介:张宏梅(1982 －)，女(汉族)，讲师，硕士．
—404—
第 36 卷 第 6 期
2015 年 12 月
吉 林 医 药 学 院 学 报
Journal of Jilin Medical College
Vol． 36 No． 6
Dec． 2015
DOI:10.13845/j.cnki.issn1673-2995.2015.06.002
返魂草为菊科千里光属植物返魂草(Senecio can-
nabifolius Less)的干燥全草，通常以全草入药，具有理
气化痰、清热消肿、止血镇痛等功效［1-3］。返魂草主要
生长在长白山地区，常用于感染性危重症病人的救
治，其单方制剂“返魂草颗粒”在临床上广泛应用，主
要用于治疗肺内感染、气管及支气管炎的治疗，效果
良好。返魂草中酚酸、黄酮类成分具有显著抗炎、抗
病毒的功效，是其发挥药效作用的主要活性成分。超
声波提取法是利用超声波产生的强烈振动、空化效
应、粉碎等作用，将植物药材中所含成分提取到溶剂
之中，有利于有效成分向提取溶剂转移，提高提取效
率。本研究以返魂草总黄酮含量为考察指标，优化返
魂草有效成分超声波提取法的最佳工艺，为返魂草工
业化生产提供理论依据［4］。
1 仪器与试药
紫外分光光度计(岛津 UV1800 日本);电子天平
(CAP225D Sartorius);冷冻干燥机(Scientz-12SN 宁波
生物科技股份有限公司);KQ-250DE 型数控超声波
清洗器(昆山市超声仪器有限公司);芦丁对照品
(100080 － 201409 中国食品生物制品鉴定研究院);
返魂草购于吉林市宝恩大药房，经吉林医药学院李景
华副教授鉴定为菊科千里光属植物返魂草(Senecio
cannabifolius Less)。
2 方法与结果
2． 1 返魂草总黄酮含量测定
精密称取芦丁对照品 16． 42 mg，置 10 mL 量瓶
中，加甲醇溶解，并稀释至刻度，得对照品储备液。精
密吸取对照品储备液 1． 0、2． 0、4． 0、6． 0、8． 0、
10． 0 mg置于 10 mL容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，定
容。分别精密吸取各对照品溶液 1． 0 mL置 25 mL量
瓶中，分别加入 30%乙醇 5 mL，混匀，加入 1 mL浓度
为 5%的亚硝酸钠溶液，混匀，放置室温 6 min，加入
1 mL浓度为 5%的硝酸铝溶液 0． 3 mL，混匀，放置室
温 6 min，再分别加入浓度为 4% 的氢氧化钠溶液
10． 0 mL，混匀，用 30%乙醇稀释至刻度，混匀，室温
放置 15 min 后于波长 510 nm 处测定吸光度。芦丁
对照品的浓度 C 为横坐标，吸光度 A为纵坐标，绘制
标准曲线，得回归方程 Y = 0． 4818X + 0． 0562(Ｒ =
0． 999 3)，表明芦丁在 0． 16 ～ 0． 64 mg /mL 的范围内
线性关系良好。
2． 2 供试品制备
返魂草药材粗粉，按照各处方要求称取适宜的药
材，置于三角瓶中，按照各处方项下的参数进行设定，
进行超声波提取。提取液浓缩、冷冻干燥、研成粉末，
计算出膏率。精密称取提取物粉末适量，置 50 mL具
塞三角瓶中，精密加入 25 mL 30%乙醇溶液，溶解，称
定重量，超声处理 30 min，放至室温，用 30%乙醇补
足减失重量、混匀，过滤即得。按照标准曲线的测定
方法进行总黄酮的含量测定。
2． 3 单因素考察实验
2． 3． 1 提取时间考察
按“2． 2”项方法进行总黄酮的提取，设定提取时
间分别为 45、60、90、120 min。随着提取时间的递增，
出膏率无显著变化，总黄酮含量呈现上升趋势，但是
上升趋势也不明显，在提取时间为 60 min 时，总黄酮
和出膏率均趋于稳定，实验结果见图 1。故选择提取
时间 60、90、120 min进行正交设计实验。
2． 3． 2 提取温度考察
按“2． 2”项方法进行提取，提取时间为 60 min，
提取温度分别定为 30、40、50、60 ℃，温度考察结果曲
线见图 2。随着提取温度的升高，总黄酮的含量有所
提高，但到达 50 ℃以上时，变化不明显，出膏率随着
提取温度的升高有所增加。综合考虑，选择 50 ℃为
最佳提取温度继续进行实验。
2． 3． 3 溶剂浓度考察
按“2． 2”项的方法提取，提取时间 60 min，提取
温度 50 ℃，考察溶剂浓度为 40%、50%、60%、70%、
80%的乙醇时，返魂草总黄酮含量及出膏率的变化，
结果见乙醇考察结果曲线图 3。由实验结果可知，随
着乙醇浓度的增加，总黄酮和出膏率均呈现上升趋势
的变化，结合实际情况，选择 60%、70%、80%进入正
交实验设计。
2． 4 供试品制备正交设计实验
通过单因素实验我们优选了超声波法提取返魂
草总黄酮的最佳工艺条件，为进一步优化提取工艺参
数，我们选择 L9(3
4)正交实验设计，考察提取时间，
温度，乙醇浓度，3 个因素进行正交实验，优选返魂草
总黄酮的提取工艺条件。各因素及水平见表 1，实验
结果见表 2，方差分析见表 3。
由实验结果可以看出，三个因素对于总黄酮的提
取影响效果为 A ＞ C ＞ B，即乙醇浓度 ＞提取时间 ＞
提取温度，方差分析结果我们可以看出乙醇浓度对于
整个结果的影响具有显著性(a = 0． 10)，经直观分析
—504—第 6 期 张宏梅，等．超声波提取返魂草有效成分的工艺研究
图 1 提取时间考察结果图 图 2 温度考察结果 图 3 乙醇浓度考察结果
表 1 因素水平表
水平 A乙醇浓度 /% B温度 /℃ C时间 /min
1 60 40 60
2 70 50 90
3 80 60 120
表 2 正交设计表及结果
No A B C 含量 /% 出膏率 /% 综合
1 1 1 1 5． 3 4． 5 9． 8
2 1 2 2 5． 7 3． 7 9． 4
3 1 3 3 6． 8 3． 5 10． 3
4 2 1 2 5． 9 4． 6 10． 5
5 2 2 3 7． 6 5． 8 13． 4
6 2 3 1 7． 4 4． 7 12． 1
7 3 1 3 8． 4 7． 1 15． 5
8 3 2 1 6． 4 6． 6 13． 0
9 3 3 2 6． 8 6． 5 13． 3
Ｒ1 9． 83 11． 93 11． 63
Ｒ2 12． 00 11． 93 11． 07
Ｒ3 13． 93 11． 90 13． 07
r 4． 10 0． 03 2． 00
表 3 方差分析结果
来 源 偏差平方和 自由度 F比 F临界值 显著性
乙醇浓度 25． 242 2 12． 774 9． 000 *
溶剂倍数 0． 002 2 0． 001 9． 000
时 间 6． 376 2 3． 227 9． 000
误 差 1． 98 2
的结果可以看出超声法提取返魂草总黄酮的最佳提
取工艺为:A3B2C3，即:乙醇浓度为 80%，提取温度为
50 ℃，提取时间为 120 min。
2． 5 验证实验
按“2． 4”项下返魂草总黄酮最佳提取工艺参数，
按照“2． 2”项下的过程进行 3 个批次的返魂草总黄酮
的提取。返魂草总黄酮含量结果见表 4。结果表明，
本工艺稳定，可操作性强，适合返魂草总黄酮的超声
波提取。
表 4 验证实验结果表(%)
组别 150301 150302 150303 均值
总黄酮 8． 22 8． 14 8． 16 8． 17 ± 0． 04
出膏率 6． 22 6． 31 6． 35 6． 29 ± 0． 07
3 讨 论
随超声提取时间的延长，细胞破裂的越来越完
全，提取率也随之增高。但是，随着植物组织中大量
细胞破裂，使溶液中杂质增多，黏度增大，而这些杂质
不但会影响有效成分的溶出，增大传质阻力，还会对
溶出的有效成分有一定的吸附作用。因此，当有效成
分溶出达最大时，延长时间使提取物的返魂草总黄酮
含量下降。
提取过程中，药材的粉碎程度对超声提取效果有
明显的影响。药材不经过粉碎处理，超声提取效果明
显没有经过粗粉的药材提取率高，但是药材粉碎也不
宜过细，防止大多数杂质的引入，进而影响药材有效
成分的含量。
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(收稿日期:2015-07-14)
—604— 吉林医药学院学报 2015 年 12 月 第 36 卷