全 文 ：药 物 研 究
The medicine study
基金项目:广西科技攻关项目 (桂科攻 11107010 － 3 － 4)。
作者简介:刘元，女，高级实验师，从事中药药理学研究与新药开发。E － mail:liuyuan0821@ vip. 163. com
HPLC法测定五爪风中补骨脂素的含量
刘 元1，2 宋志钊1，2
1. 广西中医药研究院，广西 南宁 530022;2. 广西中药质量标准研究重点实验室，广西 南宁 530022
【摘 要】 目的:建立五爪风中补骨脂素的含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法，以 Appollo － C18 色谱柱为分离柱，以乙腈
－水 (33:67)为流动相，246nm为检测波长，柱温为室温。结果:补骨脂素在 4. 5 ～ 72. 0μg /mL范围内，峰面积与其浓度呈良好线性关
系 (r = 0. 9997) ，平均回收率为 100. 3%，ＲSD为 1. 50% (n = 6)。结论:该方法简便、准确、重复性好，可作为该药材含量测定方法。
【关键词】 五爪风;补骨脂素;HPLC
【中图分类号】Ｒ284. 1 【文献标识码】A 【文章编号】1007 － 8517 (2013)16 － 0016 － 02
Determination of Psoralen in Ficus hirta Vahl by HPLC
Yuan LIU1，2，Zhi － zhao Song1，2
1． Guangxi Institute of Chinese Medicine ＆Pharmaceutical Scince，Nanning，Guangxi 530022，China;
2． Guangxi Key Laboratory of traditional Chinese medicine quality standards，Nanning，Guangxi 530022，China
Abstract:Objective To assay the content of Psoralen in Ficus hirta Vahl by HPLC． Method The Appollo － C18 (4. 6mm ×
250mm，5μm)column was used，the mobile phase consisted of acetonitrile － water (33:67) ，the detection wave length was 246nm
and the column temperature was room temperature． Ｒesuilts Linearity of Quercitr was good at 4. 5 ～ 72. 0μg /mL (r = 0. 9996)． The
average recovery of buddleodide was100． 3% with ＲSD less than 1． 50% (n = 6)． Conclution The method is simple，accurate and
repeatable，which can be applied in determination of Psoralen in Ficus hirta Vahl．
Key words:Ficus hirta Vahl;Psoralen;HPLC
瑶药五爪风系桑科榕属植物掌叶榕 ［Ficus simplicis-
sima Lour． var． hirta (Vahl)Migo］ 的根，别名五指毛桃、
五指牛奶、五爪龙、粗叶榕，为传统瑶药“七十二风”中
的五爪风［1］，具有健脾补肺、利湿舒筋之功效，主要用于
治疗脾虚浮肿、食少无力、肝炎、风湿痹痛、肺痨咳嗽等
症，瑶医作为治疗慢性病和病后体弱的常用药材。目前瑶
药五爪风尚未有法定标准，为了控制其质量，采用高效液
相色谱法测定五爪风中补骨脂素的含量，结果令人满意。
1 仪器与试药
日本岛津 LC － 20ATVP高效液相色谱仪，SPD － 20AVP
紫外检测仪;威玛龙色谱工作站;Appollo － C18 (4. 6mm ×
250mm，5μm) ;HH － S 恒温数显水浴锅，江苏金坛仪器
厂。乙腈为色谱纯，水为超纯水，其余所用试剂均为分析
纯。补骨脂素对照品 (中国药品生物制品检定所提供，批
号:110739 － 200310)。五爪风药材 6 批:20110509 (金
秀)、20110908 (金秀)、20111204 (武鸣)由本院黄云峰、
宋志钊同 志 采 集;20121220 购 自 金 秀 县 药 材 市 场;
20120424 购自玉林药市;20120615 购自南宁药材市场。以
上样品均由本院中药所鉴定。
2 方法与结果
2. 1 色谱条件 色谱柱:Appollo － C18 色谱柱 (4. 6mm ×
250mm，5mm) ;检测波长为 246nm;流动相:乙腈 － 水
(33:67) ;流速:1. 0mL /min;柱温为室温。理论塔板数
按补骨脂素峰计算不低于 3000。
2. 2 对照品溶液的制备 精密称取补骨脂素对照品
9. 00mg，置 50mL量瓶中用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，
制成 180μg /mL对照品溶液，备用。精密吸取上述对照品
溶液 1. 2mL，置 10mL 棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，
滤过，即得 (21. 6μg /mL)。
2. 3 供试品溶液的制备 取本品药材粉末 (过 40 目筛)
1. 0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇 25mL，
称定重量，加热回流 30min，放冷，再称定重量，用甲醇补
足缺失的重量，摇匀，滤过，即得。
2. 4 标准曲线及线性范围考察 精密称取补骨脂素对照品
9. 00mg，置 50mL量瓶中用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，
制成 180μg /mL对照品溶液，备用。分别精密吸取 180μg /
mL 补骨脂素对照品溶液 0. 25、0. 5、0. 75、1. 0、2. 0、
4. 0mL，分别置 10mL 量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，
进样 10μL，测定。以补骨脂素对照品进样浓度 μg /ml 为横
坐标 (X) ，峰面积积分值为纵坐标 (Y)绘制标准曲线，
得回归方程为:Y = 65979X + 69276，r = 0. 9997。结果表
明:补骨脂素进样浓度在 4. 5 ～ 72μg /mL之间与峰面积积分
值线性关系。
2. 5 精密度试验 分别吸取同一供试品溶液，进样 6 次，
依次测定，即得。测得供试品 ＲSD为 1. 40%。
2. 6 重复性试验 取同一批号 (20110908)样品，按供试
品溶液制备方法制备 6 份，分别进样，测定。结果测得补
骨脂素含量为 0. 372mg /g，ＲSD = 1. 44% (n = 6)。表明该
方法重复性良好。
2. 7 稳定性试验 取同一供试品溶液分别于 0、2、4、6、
8、10、12h进行测定。结果供试品中补骨脂素含量的 ＲSD
为 2. 10%，表明供试品溶液在 12h内保持稳定。
2. 8 加样回收试验 取已测知含量 (0. 372mg /g，批号
20110908)的供试品 0. 5g，精密称定，精密加入补骨脂素
对照品溶液 (180μg /mL)1. 0mL，精密加入甲醇相 25mL，
按供试液制备项下的方法制备。结果补骨脂素平均回收率
·61·
中国民族民间医药
Chinese journal of ethnomedicine and ethnopharmacy
药 物 研 究
The medicine study
为 100. 3%，ＲSD为 1. 50% (n = 6) ，结果见表 1。
表 1 加样回收试验结果 (n = 6)
样品中
含量
(μg)
对照品
加入量
(μg)
测得量
(μg)
回收率
(%)
平均
回收率
(%)
ＲSD
(%)
196. 3 180 375. 9 99. 8
196. 9 180 373. 5 98. 3
214. 3 180 394. 7 100. 2
215. 9 180 395. 0 99. 6
204. 2 180 386. 6 101. 2
202. 2 180 383. 7 102. 7
100. 3 1. 50
表 2 6 批五爪风药材中补骨脂素测量结果
样品批号 产地 含量 (mg /g)
20110509 金秀 0. 385
20110908 金秀 0. 372
20111204 武鸣 0. 586
20120424 玉林市售 0. 425
20120615 南宁市售 0. 675
20121220 金秀市售 0. 139
2. 9 样品测定 按供试液的制备及检测方法，测定 6 批五
爪风药材中补骨脂素含量，补骨脂素含量 (mg /g)在
0. 139 ～ 0. 675 之间，结果见表 2。
3 讨论
3. 1 五爪风的化学成分研究发现其含有补骨脂素［2］，对五
爪风中补骨脂素的含量测定方法进行初步探索，经过预实
验，多批五爪风药材中含有补骨脂素。因此五爪风中指标
成分补骨脂素的含量测定方法，可作为控制本品质量标准
的指标之一。
3. 2 对补骨脂素对照品溶液进行紫外扫描，结果其在
246nm处有最大吸收，故确定检测波长为 246nm。参照
《中国药典》2010 年版一部里有关补骨脂素含量测定方法，
以甲醇 －水、乙腈 －水为流动相，考察了多个比例，最后
确定乙腈 －水 (33:67)的比例较为适合。
3. 3 采用超声处理 30min、加热回流 1h、索氏提取 2h进行
提取方法考察，采用加热回流 1h补骨脂素含量最高，故采
用加热回流作为提取方法。采用甲醇、50%甲醇、流动相
作提取溶剂进行考察，甲醇提取补骨脂素含量较高，故采
用甲醇作为提取溶剂。以加热回流 30、60、90min 进行提
取时间考察，加热回流 30、60、90min，三者补骨脂素含量
无明显差别，从节省时间考虑，故加热回流提取时间定
为 30min。
参考文献
［1］ 戴斌，李钊东，丘翠嫦，等． “虎牛钻风”类传统瑶药的调查研究
［J］． 中国民族民间医药杂志，1998，31 (2) :28 － 34．
［2］ 轧霁，张晓琦，王英，等． 五指毛桃黄酮和香豆素类成分研究 ［J］．
林产化学与工业，2008，28 (6) :49 － 52．
(收稿日期:2013. 06. 14
檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾
)
(上接第 15 页)
应结果，说明该药材含有生物碱类成分。在预试验中，沙
塘木提取物的盐酸 －镁粉化学鉴别反应、醋酐 －硫酸化学
鉴别反应均为阴性结果，提示沙塘木药材中不含或几乎没
有黄酮类和皂苷类成分。
表 3 验证实验结果
试验号 1 2 3 4 5 6 x ＲSD (%)
浸膏得率 (%) 8. 05 8. 11 8. 28 8. 12 8. 29 8. 21 8. 17 1. 20
总生物碱提取率 (μmol /g药材) 58. 425 60. 484 60. 619 58. 357 61. 830 59. 563 59. 88 2. 27
滴定步骤是本次试验的关键，对 0. 02mol /L NaOH 溶
液进行浓度校正，要确保每次滴定终点的颜色一致，以保
证结果的真实性和准确性。在水浴挥发氯仿的步骤中，一
定要等到锥形瓶中的液体没有刺鼻味才能取下来等其冷却，
再进行下面的操作。
沙塘木作为白沙糖浆制剂中的君药，沙糖木生物碱在
其中起到怎样的重要药理作用，值得我们继续深入的研究。
参考文献
［1］ 贵州省药品监督局编． 贵州省中药材、民族药材质量标准 ［M］． 贵州:
科技出版社． 2003:203．
［2］ 朱桂花． 改进酸碱滴定法测定苦豆子总生物碱含量 ［J］． 时珍国医国
药，2012，23 (1) :81 － 83．
(收稿日期:2013. 06. 22)
·71·
中国民族民间医药
Chinese journal of ethnomedicine and ethnopharmacy