全 文 :北方园艺 2010(24):103 ~ 105 植物 ·园林花卉 ·
第一作者简介:祁金玉(1980-),女 ,硕士 ,助教 ,研究方向为森林保
护。 E-mail:qijinyu@126.com。
通讯作者:高国平(1961-),男 ,博士 ,教授 ,研究方向为森林保护。
收稿日期:2010-10-14
几种杀菌剂对裂褶菌的室内毒力测定
祁 金玉1 , 高 国平1 , 张 伟2
(1.沈阳农业大学林学院 ,辽宁沈阳 110866;2.凤城市林业有害生物防治检疫局,辽宁凤城 118100)
摘 要:在室内培养条件下 ,采用生长速率法测定了6种杀菌剂单剂及复配对林木病原腐朽
菌—裂褶菌的抑菌毒力。结果表明:药剂浓度与抑制作用呈显著的正相关关系 ,毒力回归方程的
相关系数都在 0.94以上;不同杀菌剂对裂褶菌的菌丝生长都表现出抑制作用 ,代森锰锌 、退菌特 、
可杀得 、多菌灵、石硫合剂和百菌清的 EC50分别为 33.79 、41.20、441.93 、475.23 、1 430.34和
4 117.42 mg/L;退菌特和代森锰锌按1∶3比例复配增效作用明显 ,按 1∶1比例复配略有增效 ,
按3∶1比例复配表现为相加作用。
关键词:腐朽病害;裂褶菌;杀菌剂;毒力测定
中图分类号:Q 948.9 文献标识码:A 文章编号:1001-0009(2010)24-0103-03
裂褶菌(Schizophy llum commune)是一种兼性寄生
菌 ,既能生长在枯立木和建筑储木上 ,导致木材腐朽;也
能侵染活立木 ,引起边材白色腐朽 ,并最终导致树木死
亡[ 1-2] 。据报道 ,在美国明尼苏达州和卡罗莱纳州 ,裂褶
菌分别能引起苹果属(Malus.spp)和桃属(Prunus.spp)
树木皮部腐烂 ,致使果树死亡[ 3-4] ;在辽宁铁岭林业科学
研究所苗圃 ,裂褶菌导致 5 a生京桃(Prunus persica)苗
木严重边材腐朽 ,腐朽率高达 88%,死亡率达 35%[ 5] 。
现对沈阳市公共绿地和行道树立木腐朽病害调查
时 ,在火炬树(Rhus typhina)、刺槐(Robinia pseudoaca-
cia)、臭椿(Ailanthus altissima)、稠李(Padus racemosa)、
杏树(Armeniaca vulgaris)等树种上均发现了裂褶菌侵
染危害 ,其子实体担子果在树干上单生或覆瓦状着色 ,
被害树木长势衰弱 ,甚至死亡。裂褶菌给园林树木造成
了很大危害 ,对裂褶菌以及林木腐朽病害的防治等问题
亟待解决。目前国内主要在一些营林措施方面研究较
多 ,而对立木腐朽病害防治的研究尚少 ,化学保护方面
鲜有报道[ 6] 。该试验使用 6种杀菌剂对裂褶菌进行毒
力测定 ,以期为实践中裂褶菌腐朽病害防治的药剂选择
提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.1.1 供试菌种 在樱花(Prunus serrulata)上采集新
鲜的裂褶菌子实体 ,用组织法分离培养获得纯菌株Sc ,
依据显微结构和培养特性 ,参考相关资料进行鉴定[ 7-8] 。
1.1.2 供试药剂 百菌清(75%可湿性粉剂 ,四川省广
汉市利邦生化厂)、多菌灵(50%可湿性粉剂 ,山东德州大
成农药有限公司)、可杀得(77%可湿性粉剂 ,美国杜邦公
司)、石硫合剂(45%结晶粉 ,宜宾川安高科农药有限责任
公司)、退菌特(50%可湿性粉剂 ,天津捷康化学品有限公
司)、代森锰锌(70%可湿性粉剂 ,利民化工有限责任公
司)。
1.2 试验方法
1.2.1 药剂配置 依据预试验各药剂最低有效抑制浓
度设置药剂浓度梯度[ 9] 。用无菌水将各药剂稀释成不
同浓度梯度药液 ,使用移液管取 2 mL不同浓度稀释液
加入盛有 18 mL 、温度降至 40 ~ 50℃的 PDA 培养基的
烧杯中 ,充分混匀后倒入培养皿中 ,配制成含不同药剂
浓度的 PDA培养基 ,百菌清 、多菌灵、可杀得 、石硫合剂
的浓度梯度都为20、100、200、1000 、2 000、10 000 mg/L;退菌
特浓度梯度为 10 、12.5 、25、50 、100 、200 mg/ L;代森锰锌
浓度梯度为 10、12.5、16.67 、25 、100 、200 mg/ L。每个浓
度处理设3次重复 ,试验重复3次 ,以加入等量无菌水的
PDA培养基为对照。用打孔器打取直径为 0.5 cm的菌
饼 ,移植于不同药剂浓度的培养基上 ,置于 25℃恒温培
养箱中培养。
1.2.2 杀菌剂毒力测定 采用生长速率法[ 10] ,培养7 d
后测量菌落直径(单位:cm),计测菌落净生长直径 ,计算
抑菌率{抑菌率(%)=〔(对照菌落直径-0.5)-(处理菌
落直径-0.5)〕/(对照菌落直径-0.5)×100%}。以浓
度剂量对数值 x 为横坐标 ,抑菌百分率的机率值 y 为纵
坐标 ,绘制毒力曲线 ,求出各药剂的毒力回归方程和相
关系数 ,并计算 EC50 。
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·园林花卉·植物 北方园艺 2010(24):103~ 105
表 1 药剂对裂褶菌菌丝生长的抑制作用
药剂 浓度/ mg·L-1 浓度对数
菌落直径
/ cm
抑菌率
/ % 机率值
对照CK - - 7.18 - -
百菌清 20 1.3010 6.33 11.79 3.8146
100 2.0000 5.97 16.90 4.0418
200 2.3010 5.63 21.54 4.2122
1 000 3.0000 5.17 28.04 4.4184
2 000 3.3010 3.90 45.68 4.8916
10 000 4.0000 2.63 63.32 5.3404
多菌灵 20 1.3010 6.37 11.33 3.7907
100 2.0000 5.67 21.08 4.1962
200 2.3010 4.97 30.83 4.4992
1 000 3.0000 3.37 53.11 5.0780
2 000 3.3010 0.90 87.47 6.1487
10 000 4.0000 0.67 90.71 6.3234
可杀得 20 1.3010 7.07 1.58 2.8502
100 2.0000 7.00 2.51 3.0412
200 2.3010 6.70 6.69 3.5003
1 000 3.0000 0.80 88.86 6.2190
2 000 3.3010 0.20 97.21 6.9133
10 000 4.0000 0.10 98.61 7.1993
石硫合剂 20 1.3010 6.73 6.22 3.4635
100 2.0000 6.23 13.18 3.8823
200 2.3010 5.40 24.79 4.3189
1 000 3.0000 4.03 43.83 4.8446
2 000 3.3010 3.13 56.36 5.1601
10 000 4.0000 0.21 97.08 6.8920
退菌特 10 1.0000 5.97 16.90 4.0418
12.5 1.0969 5.80 19.22 4.1302
25 1.3979 5.67 21.08 4.1962
50 1.6990 3.73 48.00 4.9499
100 2.0000 1.17 83.75 5.9843
200 2.3010 0.67 90.71 6.3234
代森锰锌 10 1.0000 5.70 20.61 4.1801
12.5 1.0969 4.73 34.08 4.5896
16.67 1.2219 4.63 35.47 4.6273
25 1.3979 3.83 46.61 4.9149
100 2.0000 1.83 74.47 5.6578
200 2.3010 1.43 80.04 5.8429
A 10 1.0000 6.07 15.74 3.9948
12.5 1.0969 4.77 33.80 4.5820
16.67 1.2219 4.13 42.59 4.8132
25 1.3979 2.97 58.80 5.2223
50 1.6990 2.23 68.98 5.4953
100 2.0000 0.80 88.89 6.2206
B 10 1.0000 5.13 28.70 4.4379
12.5 1.0969 4.37 39.35 4.7298
16.67 1.2219 3.40 52.78 5.0697
25 1.3979 2.60 63.89 5.3555
50 1.6990 2.33 67.59 5.4563
100 2.0000 1.10 84.72 6.0246
C 10 1.0000 6.97 3.24 3.1535
12.5 1.0969 6.27 12.96 3.8719
16.67 1.2219 5.67 21.30 4.2038
25 1.3979 4.63 35.65 4.6321
50 1.6990 3.23 55.09 5.1280
100 2.0000 1.17 83.80 5.9861
1.2.3 杀菌剂复配效果评价 将稀释同样倍数的退菌
特和代森锰锌药液按 A(1∶1)、B(1∶3)、C(3∶1)体积比
混合 ,复配剂A 、B、C 浓度梯度都为 10 、12.5 、16.67 、25、
50 、100 mg/L ,其余方法同上。该试验以退菌特为标准
药剂 ,计算各药剂毒力指数(TI),混合药剂的实际毒力
指数(ATI)、理论毒力指数(TTI)和共毒系数(CTC)[ 11] 。
共毒系数划分标准:CTC≥170为明显增效 ,120≤CTC<170
为略有增效 ,70≤CTC<120为相加作用 ,CTC<70为拮
抗作用[ 12] 。
2 结果与分析
2.1 药剂对裂褶菌的抑制作用
供试 6种杀菌剂对裂褶菌的菌丝生长都表现一定
的抑制作用 ,但抑菌毒力却差异明显。当浓度为
100 mg/L时 ,退菌特对裂褶菌的抑制率高达 83.75%,
其次是代森锰锌为74.47%,多菌灵 、百菌清和石硫合剂
分别为 21.08%、16.09%和13.18%,而可杀得的抑菌毒
力很弱 ,抑菌率只有 2.51%。在浓度为100 mg/L时 ,复
配剂 A 、B 和 C 的抑菌率很接近 ,分别为 88.89%、
84.72%、83.80%(表 1)。
2.2 毒力测定结果
供试杀菌剂毒力回归方程的相关系数都在0.94以
上 ,说明药剂浓度与抑制效果呈显著的正相关关系。
EC50是衡量药剂毒力大小的重要指标 ,EC50值越小表明
药剂的毒力越强 ,即相对毒力指数越大。在供试单剂中
代森锰锌的 EC50为 33.79 mg/ L , 相对毒力指数为
121.92 ,对裂褶菌的抑制效果最好;其次是退菌特 ,EC50
为 41.20 mg/L;再次是可杀得和多菌灵 , EC50都在
450 mg/L 左右;而石硫合剂和百菌清对裂褶菌的抑制
效果相对较差。退菌特和代森锰锌的混合配剂 A 、B和
C的 EC50都小于各自单剂的 EC50 ,其中复配剂 B(1∶3)
抑制效果最好 ,EC50为 18.92 mg/L ,相对毒力指数可达
217.71(表2)。
表 2 药剂对裂褶菌菌丝生长的抑制作用
药剂 毒力回归方程 相关系数
抑制中浓度
EC50
/ mg·L-1
相对毒力指数
百菌清 y=0.5675x+2.9487 0.9657 4 117.42 1.00
多菌灵 y=1.0354x+2.2610 0.9621 441.93 9.32
可杀得 y=1.9920x-0.3324 0.9404 475.23 8.67
石硫合剂 y=0.8640x+2.2737 0.9867 1 430.34 2.88
退菌特 y=1.8969x+1.9368 0.9658 41.20 100.00
代森锰锌 y=1.2189x+3.1365 0.9791 33.79 121.92
A y=1.9763x+2.2840 0.9678 23.67 174.03
B y=1.4241x+3.1814 0.9611 18.92 217.71
C y=2.5458x+0.9235 0.9780 39.93 103.19
2.3 复配药剂作用效果评价
由表 3可看出 ,退菌特和代森锰锌单剂对裂褶菌的
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抑制效果好 ,EC50小 ,因此对这 2种药剂进行复配试验。
退菌特和代森锰锌的混剂B抑制效果最好 ,共毒系数大
于170 ,表现出明显的增效作用;复配剂A的共毒系数在
120 ~ 170之间 ,略有增效作用;而复配剂 C表现出相加
作用 ,共毒系数在70 ~ 120之间。退菌特和代森锰锌的
混合配剂 A和B的抑菌效果均优于退菌特单剂和代森
锰锌单剂 ,而复配剂 C虽然表现出相加作用 ,但抑菌效
果不及代森锰锌单剂。
表 3 复配药剂的共毒系数
复配药剂 实际毒力指数 理论毒力指数 共毒系数 作用效果
A 174.06 110.96 156.86 略有增效
B 217.76 116.45 187.00 明显增效
C 103.18 105.48 97.82 相加作用
3 结论与讨论
试验结果表明 ,代森锰锌和退菌特对裂褶菌的抑制
效果较好 ,EC50分别为 33.79和 41.20 mg/L;退菌特和
代森锰锌按 1∶1、1∶3和3∶1比例混合都表现出一定
程度的相加或增效作用 ,其中按 1∶3混合增效作用
明显。
代森锰锌和退菌特对病原菌的抑制作用机理不同 ,
在防治中应交替使用[ 13] ;代森锰锌和退菌特混合使用不
仅可以提高杀菌效果 ,而且有利于延缓裂褶菌抗药性的
产生。在室外防治时药剂的施用时期 ,施用方式 ,气候
环境条件以及树木自身的耐药性等因素都会影响药剂
的使用和药效的发挥 ,因此室内试验的结果还有待于室
外试验进一步验证。
目前对林木腐朽病害防治的研究还很少 ,而且存在
明显的滞后性 ,一般在树木已腐朽到一定程度后才刮除
子实体 、进行涂药处理 ,或者直接清除腐朽枝干[ 14] 。能
否在树木腐朽病害将要发生或子实体形成前建立预警
机制 ,结合抚育管理和化学保护方法进行防治 ,尚待于
深入研究。
参考文献
[ 1] 曾祥谓,崔宝凯 ,徐梅卿 ,等.中国储木及建筑木材腐朽菌[ J] .林业科
学研究 , 2008 ,21(6):783-791.
[ 2] 戴玉成.中国林木病原腐朽菌图志[ M] .北京:科学出版社 , 2005:
81-82.
[ 3] Bergdahl D R, French D W.Association of wood decay fungi with de-
cline and mortali ty of apple t rees in Minnesota [ J] .Plant Disease , 1985, 69:
887-890.
[ 4] Adaskaveg J E, Miller R W , Gilbertson R L.Wood decay , lignicolous
fungi, and decline of peach t rees in South Carolina [ J] .Plant Disease , 1993,
77:707-711.
[ 5] 刘春静,庄严 ,孙向前,等.辽宁李属等苗木边材腐朽病研究初报[ J] .
林业科学研究 ,2003 ,16(6):783-785.
[ 6] 周仲铭.林木病理学[M] .北京:中国林业出版社 ,1990:206-207.
[ 7] 戴玉成.中国储木及建筑木材腐朽菌图志[M] .北京:科学出版社,
2009:226-227.
[ 8] 池玉杰.10种针阔叶树上常见的一年生多孔菌的培养特性[ J] .菌物
系统, 2003, 22(2):324-328.
[ 9] 阙海勇,蒋军喜 ,邓国辉 ,等.5种杀菌剂对车前草菌核病菌的毒力测
定和田间药效试验[ J] .江西农业大学学报 , 2009 , 31(1):82-84.
[ 10] 慕立义.植物化学保护研究方法[ M] .北京:中国农业出版社.1994:
79-81.
[ 11] 檀根甲,祝建平.杀菌剂生物测定计算方法及应用[ J] .安徽农学通
报 ,1998 ,4(1):27-28.
[ 12] 谭福杰,尤子平.农药复配与复配农药[ J] .南京农业大学学报, 1987,
10(增):95-97.
[ 13] 赵善欢.植物化学保护[ M] .北京:中国农业出版社, 2000:119-133.
[ 14] 杨旺.森林病理学[ M] .北京:中国林业出版社, 1996:27-28.
Toxicity Test of Fungicides to SchizophyllumCommune
QI Jin-yu1 , GAO Guo-ping1 , ZHANG Wei2
(1.College of Forest , Shenyang Agricultural University ,Shenyang , Liaoning 110866;2.Fengcheng Forest Pest Control and Quarantine Bureau ,
Fengcheng , Liaoning 118100)
Abstract:The toxicity of six single and mixed fungicides were determined on Schizophy llum commune by the mycelium
growth rate method.The results showed that the concentration of fungicide and resistance function were in positive
correlation , the correlation coefficient of toxicity regress equations were above 0.94.Each fungicide had some inhibitory
effect on mycelia grow th of S.commune , EC50 of mancozeb , tuzet , copperhydroxide , carbendazim , lime -sulphur and
chlorothalonil were 33.79 ,41.20、441.93 ,475.23 , 1 430.34 and 4 117.42 mg/ L separately;The mixture of tuzet and
mancozeb with 1∶3 had some synergism ,with 1∶1 had litt le synergism and with 3∶1 had additive effect.
Keywords:decaying disease;Schizophyl lum commune;fungicides;toxicity test
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