全 文 ：学 报
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产皿第 16 卷第 3 期
1帕 2 年 9 月
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条斑紫菜固定化细胞育苗技术的应用试验
A P P L I C A T I O N O F B R E E D IN G T E C H N I Q U E W I T H
IM M O B I L I Z E D C E L L S I N P O 尺P H Y R A
Y E Z O E N S I S I N C U L T I V A T I V E
P R O D U C T I O N
王素娟 何涪民
(上海水产大学 , 2 0 0 09 0 )
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a n g S u扣a n a n d 瓜 P e 主m i n
(吕加” 口矛如 i F 翻丸e , 万。 。确 i。 。 , s落亡军, Z O x j沁 )
关键词
K E YW
条斑紫菜 ,固定化细胞 , 育苗
O R D S P o 犷岁几夕你 终 z哪碱 s , im m o b i l i : 。 d e e l l s , b r e e d i鳍
我国于 8 0 年代初 , 就开始了紫菜体细胞育苗的研究 。 赵焕登 、 张学 成 ( 1 9 8 1 , 19 队 ) , 方宗熙等
( 19 86 )
, 戴继勋等 ( 1分8 8) 报道了条斑紫菜体细胞直接附网育苗及其下海养殖试验研究 ;对于坛紫菜 ,方宗
熙等 ( 19 8 6) ,王素娟等 ( 19 87 ) ,戴继勋等 (拍 8 ) 报道了其体细胞直接附网育苗及其下海养殖试验研究 。
该育苗技术育苗时间至少需要 15 天左右 , 且育苗室占地面积大 , 在生产上难于推广。 最近 , 王素娟等
( 19 91 )根据条斑紫菜细胞团能释放一种类似单抱子的“ 袍子” 的特殊发育途径 , 成功地利用其放散的泡
子进行采苗及下海养殖试验 。 为使紫菜体细胞育苗技术更实用化 ,我们又采用了固定化细胞新技术 , 进
行条斑紫菜固定化细胞育苗及海上养殖试验 , 以克服细胞直接附网育苗的缺点 , 旨在缩短室内培养 时
间 ,节约育苗室占地面积 ,操作简便 ,能够广泛应用于紫菜养殖生产上 。
材 料 与 方 法
1
, 种藻来漂 本实验用的种藻采集子江苏启东市吕东乡海丰村海区的紫菜养殖架上 , 采集日期为
1 9 。年 3 月 ,采集的紫菜经阴干后 ,密封于双层塑料袋薄膜中 , 置于低温 ( 一 20 ℃ )冰箱中保存备用 。
2
. 种藻复苏 从冰箱中取出的种藻立即放入室温 (2 。℃ ) ,海水中复苏 3 天 ,并给予 12 L : 12 D 的光
照 , 加入一定量的氮和磷盐 ,让其充分复苏 。
3
, 细胞分离 用毛笔在消毒过海水中洗刷藻体 3 次 . 并除去藻体的边缘及基部 ,然后切成 l m m 急大
小的碎片 ,经消毒海水清洗后 , 放入酶液中 , 酶液由 0 . 7 甘露醇中加入 2 形海螺酶和 。 . 5男纤维素酶配制
而成。 酶解温度为 26 。一2 8℃ 二酶解时间为 1 甲 6se 3 . 。 小时 。 结束后 , 用尼龙筛绢过滤以除去大碎片 , 滤
液离心 6 分钟 ( 150 0 转 /分钟 ) ,除去酶液 ,再用比重为 1 , 。 30 海水冲洗 , 离心各三次 。 收集的细胞用来进
行悬浮培养 。
4
, 悬浮培养方法 把细胞放入水族箱 (3 。 、 4 0 、 10 c aln ) 中 60 升水体中 ,其细胞密度 为 1一 2 甲 s x
10
` 细胞 /m几。 用电力搅拌器进行搅拌悬浮培养 , 转速为 8。一 2 0。 转 /分 。
收 稿年月 : 1的 1 年 8 月廷的 2 年 3 月修改 。
26 6水 产 学 报 1 6卷
5
.培养条件 培养基为 M E S液 (加富海水培养液 ,文献仁2 〕) ,温度为 即。 C左右 ,光照强度为 1。沉卜一
3 00 Ohi x
,光源为灸光灯 ,光周期为 1肠 : 12 D 。
6
. 细胞固定 把网放入 7的过 的一定细胞密度的细胞液中 ,使细胞吸附在网上 , 再涂抹一定浓度
的褐藻酸钠于细胞网绳上 ,之后放入含有钙离子的海水中 ,使细胞固定于网绳上 .
7
甲 海上养殖 固定化细胞网放于江苏省启东市吕东乡海丰村梅区进行海上养殖 , 养殖方法为半浮
动筏式养殖 。
结 果 与 讨 论
(一 ) 海上育苗及养殖
19 9。年 g 一 10 月 , 我们在江苏省启东市吕东乡海丰村育苗室进行固定化细胞育苗试验 .
经 6夭悬浮培养的细胞或细胞团固定于 12 个维尼纶生产网上 ,于次日 ( 19 9 1年 10 月 6 日) 放下海
进行海上育苗及养殖。
细胞包埋于藻胶中 ,不易被海浪冲击掉 . 还能在大自然海洋中充分吸收养分快速生长 , 部分细胞直
接分裂形成单细胞苗 ,而大部分细胞能逐步先形成细胞团 , 然后放散抱子 , 抱子能立即附着萌发成抱子
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图 1 细胞苗紫菜收割重量变化 ( 19 9 1)
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苗。所形成的两种细胞苗仍具有放散单泡子的特
点 、生长到一定时 , 在一定温度条件下能大最放
散单抱子 , 单袍子就近附着萌发成苗 , 因此 , 随着
养殖时间增长 , 细胞苗网的紫菜苗越来越密 (见
图版 , 5 一 8 ) 。
经 2个月的养殖 , 细胞苗长可达 6一巧。 ,
苗的密度与细胞附着的多少有一定相关性 , 附着
细胞数越多 ,则细胞苗越密 (见表 1 ) 。 其中最好
的实验苗网能达到传统苗的最好水平 。
另外 , 我们还设置了一个空白网 , 放入海上
养殖 2 一 3 个月 , 网上几乎没有紫菜苗 ,这证明 ,
实验网上的苗是来 自于细胞苗 , 而不是来自于同
一海区的传统苗放散的单抱子苗 。
养殖近三个月后开始收割 , 从 扮 90 年 12 月 郊 日第一次收割 ,到 拍91 年 在月 21 日左右养殖结束 ,
共收割五次 (见图1 ) , 总计收割鲜重大约 邵。 公斤 , 折合每公顷产量为 12 6 0 公斤左右 , 高于当地的平均
产量 。 这说明用固定化细胞育苗能保证苗的密度 , 从而保证了紫菜的产量 .
(二 ) 不同附着细胞密度网苗密度的比较
在实验网中 ,共设置了 6 个不同细胞附着密度 ,即 : 1 x 10 细胞了网 ( 1 个网 ) , 5 、 1 .0 细胞 /网 ( 1 个
网沁1 “ 10 , 细胞 /网 ( 1 个网 ) , 2 ` 2 0 , 细胞 /网 ( 1 个网 ) , 3 减 10 , 细胞 z网 ( i 个网 ) , s x l o 了细胞 /网 ( 6 个
网 ) 。其结果见附表 。
从附表中可以看出 , 细胞数附着越多 , 细胞苗则越密 ,例如 6一 12 号网 ,细胞数附着最多达 6 x 10 f 细
胞 /网 , 其细胞苗最密 ,长势最好 ,养殖 2 个月后 ,其苗长达 10 一 15二 ,其苗密度接近于传统苗网的最好水
平 (见图版一 4 , 8 ) ; 而 1 号网 , 细胞苗分布不均匀 , 有的地方细胞苗较密 ,且其苗长可达 1吸m 左右 . 但
有的地方出现空白(见图版一 2 , 5 ) ; 2 号网也是如此 ,苗密的地方可达到 6一招号网的水平 (见图版一
6 )
,从整体来说 , 可达到传统苗网的中等水平 ; 3 一 6 号网的密度能达到传统苗网的中上水平 , 其苗长

28 6水 产 学 报 6 1卷
结 束 语
在高等植物的生物技术育种中 , “ 人工种子 ” 早已应用于农作物大面积生产了 , 而在紫菜育种中 , 固
定化细胞育苗还是首次使用 ,从上述结果看 , 该项技术是具有推广应用的实用价值 , 它可以把紫菜育苗
时间缩短 1 一 6天 ;另外再加上细胞悬浮培养技术的配套 , 能大大节约育苗室占地面积 , 从而降低育苗
固定资产的投资 。 因此说 ,紫菜固定化细胞育苗具有很大的经济效益及明显的社会效益 , 我们相信 , 随
着技术的不断配套和完善 ,该项技术在不远的将来 , 将会广泛地应用于生产上为我国及世界的紫菜养殖
业带来很大的发展 。
汇6 了
[ 7 ]
[ 8 〕
1 9 〕
参 考 文 献
方宗熙等 , 1能 6。 紫菜营养细胞的酶法分解和在水产养殖中的应用 。 海洋科学 , i 。 ( 3 :) 拐一4 70
王素娟等 ,工阳 6。 坛紫菜营养细胞和原生质体培养的研究 I 。 海洋与湖沼 , l双助 : 2灯一2 2 10
— ,工邻 7。 坛紫菜营养细胞和原生质体培养的研究1 。 直接下海养殖实验研究 。 海洋科学 , 1 1 ( 1 ) : 1一 o7中国科学院海洋研究所藻类实验生态组 、藻类分类形态组 , 1叨8 。 条斑紫菜的人工养殖 ,科学出版社 (京 ) 。
卢澄清 , 1 9 8习。 紫菜叶状体营养细胞的研究 。 1 . 条斑紫菜营养细胞的分离 、培养和长成小紫菜的观察 , 第一届
中国藻类学术讨论会文集 , 4 5~ 4 9 ,科学出版社 (京〕。
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赵焕登 、 张学成 , 198 1。 条斑紫菜营养细胞的分离与培养 , 山东海洋学院学报 , 1 1 ( l) :印一“ 。
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