全 文 ：棕叶茎叶提取物对啮齿目动物子宫的兴奋作用
唐祖年 , 　杨成芳 , 　韦玉先 , 　梁荣感
(桂林医学院 ,广西 桂林 541004)
收稿日期:2009-01-12
基金项目:广西教育厅资助项目(2007-34)
作者简介:唐祖年(1952-),男 ,副教授 ,研究方向:中草药药效学和生化药理学。 Tel:(0773)5895801E-mail:tangzunian@yahoo.com.cn
关键词:棕叶茎叶提取物;离体子宫;在体子宫;兴奋作用
摘要:目的:研究棕叶茎叶乙醇提取物对己烯雌酚预处理后大鼠 、小鼠 、豚鼠 、家兔离体子宫及家兔在体子宫平滑肌的兴
奋作用。方法:采用常规方法制备动物离体子宫标本 , 运用 BL-420生物信号系统记录离体与在体子宫平滑肌的活动 ,
以子宫收缩的幅度 、频率及收缩力作为指标 , 观察棕叶茎叶乙醇提取物对注射己烯雌酚后大鼠 、小鼠 、豚鼠 、家兔离体子
宫及家兔在体子宫平滑肌的影响 ,计算兴奋子宫的 IC50 ,以缩宫素为阳性对照。结果:棕叶茎叶 95%乙醇和 50%乙醇提
取物对大鼠 、小鼠 、豚鼠 、家兔离体子宫平滑肌有明显地兴奋作用 , 可加快收缩频率 、提高收缩张力(P<0.05, P<0.01),
并呈量效关系。 50%乙醇提取物对家兔在体子宫平滑肌也有显著兴奋作用(P<0.01)。结论:棕叶茎叶乙醇提取物对
啮齿目动物子宫的兴奋作用表明民间使用棕叶花治疗功能性子宫出血是有药理依据的。
中图分类号:R285.6　　　　　文献标识码:A　　　　　文章编号:1001-1528(2010)02-0192-05
Stimulatingactionofcapitatephryniumstemandleafextractontherodentani-
malsuterus
TANGZu-nian, 　YANGCheng-fang, 　WEIYu-xian, 　LIANGRong-gan
(GuilinMedicalColege, Guilin541004 , China)
KEYWORDS:extractofPalmophylumstemandleaf;isolateduterus;uterusinvivo;excitingefect
ABSTRACT:AIM:Tostudytheexcitingefectsofethanolextractofcapitatephrynium(PhryniumCapitatum
Wild)stemandleafontheuterinesmoothmuscleofrat、mice、guineapigandrabbitpretreatedbydiethylstilbes-
trol.METHODS:Conventionalmethodwasadoptedtoprepareanimaluterinespecimensbothinvivoandinvitro.
Diferentdosesoftheextractweregiventothespecimensandrecordedtheirtensility, frequencyandactivityofcon-
tractionwiththehelpofBL-420biologicalexperimentalsystem.IC50 oftheextractwascalculated, withoxytocinas
standardcomparison.RESULTS:95%ethanolextractand50%ethanolextractofcapitatephryniumandleafhad
obviouslystimulatingactionontheuterinesmoothmuscleofrat, mice, guineapigandrabbitinadose-dependent
mannerinvitro, whichincludeacceleratingcontractionfrequency, raisingtension(P<0.05, P<0.01).Inaddi-
tion, 50% ethanolextractalsohadasignificantstimulatingactiononuterinesmoothmuscleofrabbitinvivo(P<
0.01).CONCLUSION:Ethanolextractsofcapitatephryniumhaveanefectonrodentuterine.Smoothmuscle
indicatesthatclinicalapplicationofChinesepractitionerusedtotreatthedysfunctionaluterinebleedingprovestobe
efective.
　　棕叶(别名冬叶 、柊叶 、粽叶)[ PhryniumCapita-
tumWild(flower)]为竹芋科(Marantaceae)多年生
本草 ,分布广西 、广东 、云南等地 ,全草可入药。文献
记载:“全草味甘淡 ,性微寒 ,有清热解毒 ,凉血 、止
血和利尿之功效 ”。主治风热感冒或温病初起;血
热妄行所致吐血 、衄血 、咳血 、便血等;咽干喉痛 、声
音嘶哑 、饮酒过度 。广西少数民族民间用其花治疗
月经过多 、血崩(功能型子宫出血)及失音等疾病。
有文献报道棕叶 [ 1]花水提取物对非孕小鼠 、大鼠 、
豚鼠 、家兔离体子宫及对家兔离体子宫都有兴奋作
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用 。而棕叶茎叶提取物对动物离体子宫作用未见报
道 ,为进一步研究棕叶茎叶提取物对动物子宫的兴
奋作用 。本研究采用 BL-420生物机能实验系统 ,观
察棕叶茎叶 95%乙醇和再用 50%提取物对己烯雌
酚预处理后的大鼠 、小鼠 、豚鼠 、家兔离体子宫以及
家兔在体子宫平滑肌的影响 ,并以缩宫素为阳性对
照 ,记录子宫平滑肌的收缩幅度及频率 ,以 IC50比较
对离体子宫兴奋敏感性。
1　实验材料
1.1　药品与试剂
棕叶茎叶采自南宁地区(经桂林医学院药学系
生药教研室王育生副教授鉴定),晒干备用。取干
棕叶茎叶 1 700 g, 用中药材粉碎机粉碎后置于
10 000 mL圆底烧瓶中加 95%乙醇浸没 ,回流 1 h,
抽滤 ,重复上述操作 3次;药渣用 50%酒精浸渍 ,加
热冷凝回流 1 h,抽滤 ,重复 3次。分别用旋转蒸发
仪将二种组分浓缩 , 45℃烘干后置冰箱备用。
缩宫素注射液 ,河南辅仁怀庆堂制药有限公司 ,
批号 20060617;己烯雌酚注射液 ,天津金耀氨基酸
有限公司 ,批号 200701241。
1.2　动物
Wistar大白鼠 , ♀性 ,未孕 ,体重(220±20)g;昆
明种小鼠 ,体重(30±2)g;豚鼠 ,体重(300±20)g;
家兔 ,体重(2.2±0.2)kg;均由桂林医学院实验动
物中心提供 ,许可证号:SCXK(桂)2007-0001。
1.3　仪器
SYC-15超级恒温水浴 ,北京桑力电子设备厂;
旋转蒸发器 (RE-52AA):郑州长城科工贸有限公
司;BL-420生物机能实验系统:成都泰盟科技有限
公司。
2　方法
2.1　大鼠 、小鼠 、豚鼠和家兔离体子宫平滑肌张力
的测定
取正常未孕的大鼠 16只 、小鼠 16只 、豚鼠 16
只 、家兔 12只 ,实验前 24 h腹腔注射己烯雌酚 ,剂
量分别为大鼠 1 mg/kg、小鼠 2 mg/kg、豚鼠 1 mg/
kg、家兔 0.125mg/kg,人工造成动物动情前期或动
情期 ,以提高子宫敏感性。实验时大鼠 、小鼠脱颈椎
处死 ,豚鼠敲击头部处死 ,家兔耳缘静脉注入空气处
死 ,迅速剖腹取出子宫 ,分离子宫壁上附着的结缔组
织和脂肪组织 ,立即置于盛有营养液的玻璃皿中 。
将上述动物离体子宫标本阴道端系在盛有 20mL营
养液(大鼠用 DeJaion氏液 [ 2] 、小鼠用 Tyrode[ 3]氏
液 、豚鼠用 VanDyke-Hasting氏液 [ 2] 、家兔用 Krebs
氏液 [ 3] )的麦氏浴槽 L型通气管上 ,另一端与张力
换能器(大鼠和豚鼠用 0 ～ 5g张力换能器 、家兔用 0
～ 10 g张力换能器 、小鼠用 0 ～ 3 g张力换能器)相
连 ,通入氧气 ,每秒 1个小气泡 , 麦氏浴槽控温在
(36 ℃±0.5)℃。将 BL-420生物信号采集系统 ,
定标 ,调零 ,时间常数 T=DC, G=20 mv,滤波调节 F
=20 Hz(小鼠 F=50 Hz),扫描速度 S=12.50 s/
div[ 4] 。实验前负荷(小鼠 0.5g、大鼠 1 g、豚鼠 1 g、
家兔 2 g),待稳定 15 min后 ,开始实验 。加入 95%
乙醇组分和 50%乙醇组分溶液 , 由低浓度到高浓
度。给药后记录 10 min离体子宫的收缩活动 ,每加
入一个浓度药物待子宫平滑肌收缩达高峰后 ,更换
营养液 ,冲洗 3次 ,待离体子宫平滑肌稳定后 ,再加
下一个药物浓度。直到测出该段子宫平滑肌收缩的
最大效应(此时增加剂量不再增加收缩高度)。缩
宫素以单位(U)计算 ,给药方法同上。用 Windows
2000、MicrosoftExcel数据分析工具 ,计算 IC50 ,并计
算子宫收缩强度 、频率和子宫收缩活力。数据用 t
检验进行统计学处理。
2.2　家兔在体子宫平滑肌张力的测定
取♀性未孕家兔 24只 ,随机分生理盐水组 、棕
叶茎叶 50%乙醇提取物 0.8g/kg组 、棕叶茎叶 50%
乙醇提取物 0.4 g/kg组和缩宫素组 ,每组 6只 ,实
验前 24 h腹腔注射己烯雌酚 0.125 mg/kg,并禁食
不禁饮 12 h。戊巴比妥钠 30 mg/kg静脉麻醉固定
兔台上 ,下腹部与上腹部剪毛后沿中线切开下腹 ,暴
露子宫 ,在一侧子宫选取约 4 cm一段 ,两端缝线固
定于特制的玻璃筒底部 ,其中段缝一细线与张力换
能器相连[ 5] 。并在上腹部作一切口 , 找出十二指
肠 ,沿肠管穿一线 ,以便拉出肠管给药。描记子宫收
缩(前负荷 3g),给药前记录 40 min子宫正常收缩
曲线 ,十二指肠给药(缩宫素静脉给药)后分别观察
20、40、60、90 min子宫收缩情况。测量子宫收缩幅
度和收缩频率。实验数据用 t检验进行统计学处
理。
2.3　小鼠凝血时间的测定
取小鼠 40只 ,随机分生理盐水组 、棕叶茎叶
50%乙醇提取 1.5g/kg组 、棕叶茎叶 50%乙醇提取
0.75 g/kg组和三七组 [ 7] ,按不同剂量分别灌胃给
药 ,每天 1次 ,连续 5 d,末次给药 40 min后用内径
1mm的毛细玻璃管插入小鼠眼球静脉丛内取血 ,自
血液流入管内至 12 cm处后取出开始记时 ,每隔 30
s折断毛细管一小段(约 5 mm),观察有无血丝 ,计
算从毛细管采血到出现血丝时间 ,即为凝血时间。
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实验数据用 t检验进行统计学处理。
3　结果
3.1　棕叶茎叶 95%乙醇和 50%乙醇提取物对大
鼠 、小鼠 、豚鼠和家兔离体子宫平滑肌兴奋的 IC50测
定结果
以棕叶茎叶 95%组分和棕叶茎叶 50%乙醇组
分对每个动物离体子宫标本收缩最高振幅为
100%,依次计算出不同浓度收缩子宫百分率 ,以振
幅的百分数为 y轴 ,以最终浓度(mg/mL)为 x轴 ,代
入回归方程 y=ax+b,经计算机(Windows2000、Mi-
crosoftExcel数据分析工具)求出 a和 b,再求出平均
50%的效应即 IC50。结果见表 1。结果可见 50%乙
醇组分对大鼠离体子宫的兴奋作用更敏感 。
3.2　棕叶茎叶 95%乙醇和 50%乙醇提取物对大
鼠 、小鼠 、豚鼠和家兔离体子宫平滑肌兴奋强度 、频
率与活力的影响
按文献方法 [ 6]测定棕叶茎叶 95%和 50%乙醇
组分对大鼠 、小鼠 、豚鼠和家兔子宫收缩强度和频
率 ,并计算子宫活力(子宫活力 =平均强度 ×频率 ,
单位 g×次数 /10 min),结果见表 2 ～ 5。
表 1　 95%乙醇组分 、50%乙醇水溶液组分和缩宫素
组分对大鼠 、小鼠 、豚鼠和家兔离体子宫兴奋的 IC50
( x±s, 大鼠 、小鼠 、豚鼠 n=8, 家兔 n=6)
组别 大鼠 IC50 小鼠 IC50 豚鼠 IC50 家兔 IC50
95%乙醇提
取物 /(mg/mL) 0.55±0.41 0.63±0.46 0.50±0.29 0.59±0.28
50%乙醇提
取物 /(mg/mL) 0.25±0.09 0.49±0.23 0.68±0.21 0.79±0.35
缩宫素组
/(u/mL) 0.78±0.77 0.86±1.03 0.87±0.46 0.82±0.86
　　结果表明棕叶茎叶 95%乙醇和 50%乙醇提取
物对大鼠 、小鼠 、豚鼠和家兔离体子宫平滑肌收缩强
度均明显增强 ,子宫活力明显增加(P<0.05, P<0.
01),收缩频率大鼠与小鼠明显增加 ,而对家兔和豚
鼠子宫收缩频率无明显影响 。
3.3　棕叶茎叶乙醇提取物对家兔在体子宫平滑肌
兴奋作用的影响
棕叶茎叶 50%乙醇组分十二指肠给药对己烯
雌酚预处理后家兔子宫有明显兴奋作用 ,使子宫收
缩强度增加(P<0.05 , P<0.01),给药后 20 ～ 40
表 2　 棕叶茎叶提取物对大鼠离体子宫收缩强度 、频率与活度的影响( x±s, n=8)
组别 剂量 /(mg/mL) 张力 /g 收缩频率 /(次 /10min) 子宫活动力 /(g×次 /10min)
给药前 0.36±0.27 1.50±1.05 0.58±0.68
95%乙醇提取物 0.35 1.27±0.83＊ 7.05±3.55＊＊ 7.58±1.93＊＊
给药前 0.69±0.43 1.66±0.81 1.30±1.41
50%乙醇提取物 0.35 4.09±1.38＊＊ 5.46±1.79＊＊ 23.04±9.02＊＊
给药前 0.62±0.83 1.50±1.63 2.07±3.29
缩宫素 0.17U 2.33±0.88＊ 10.41±5.32＊＊ 29.41±6.54＊＊
　　注:与给药前比较 , ＊P<0.05, ＊＊P<0.01。
表 3　 棕叶茎叶提取物对小鼠离体子宫收缩强度 、频率与活度的影响( x±s, n=8)
组别 剂量 /(mg/mL) 张力 /g 收缩频率 /(次 /10min) 子宫活动力 /(g×次 /10min)
给药前 0.37±0.14 2.20±0.83 0.84±0.31
95%乙醇提取物 0.35 1.73±1.06＊ 16.88±5.392) 30.99±12.24＊＊
给药前 0.53±0.43 2.20±1.92 1.34±1.11
50%乙醇提取物 0.35 2.80±1.22＊＊ 17.72±7.08＊＊ 55.81±14.61＊＊
给药前 0.96±0.75 2.83±1.16 3.28±3.31
缩宫素 0.17U 3.45±2.01＊ 22.27±6.74＊＊ 82.89±29.58＊＊
　　注:与给药前比较 , ＊P<0.05, ＊＊P<0.01。
表 4　 棕叶茎叶提取物对家兔离体子宫收缩强度 、频率与活度的影响( x±s, n=6)
组别 剂量 /(mg/mL) 张力 /g 收缩频率 /(次 /10min) 子宫活动力 /(g×次 /10min)
给药前 0.95±0.52 3.50±1.37 3.80±2.46
95%乙醇提取物 0.35 3.12±1.77＊ 3.24±0.71 9.15±3.66＊＊
给药前 1.04±0.82 2.67±0.81 3.30±3.47
50%乙醇提取物 0.35 1.45±0.54＊＊ 3.12±0.44 6.18±1.02＊＊
给药前 0.57±0.46 1.70±0.91 1.00±0.87
缩宫素 0.17U 2.29±0.87＊＊ 5.05±2.64＊ 11.39±3.89＊＊
　　注:与给药前比较 , ＊P<0.05, ＊＊P<0.01。
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表 5　 棕叶茎叶提取物对豚鼠离体子宫收缩强度 、频率与活度的影响( x±s, n=8)
组别 剂量 /(mg/mL) 张力 /g 收缩频率 /(次 /10min) 子宫活动力 /(g×次 /10min)
给药前 0.31±0.22 1.17±1.03 0.63±0.58
95%乙醇提取物 0.35 3.65±1.20＊＊ 0.94±0.19 4.01±1.23＊＊
给药前 0.36±0.37 1.17±1.16 0.58±0.72
50%乙醇提取物 0.35 2.80±2.24＊ 1.74±0.48 8.14±2.37＊＊
给药前 0.85±0.92 1.80±1.92 3.26±4.34
缩宫素 0.12U 5.97±1.73＊＊ 1.85±0.74 11.33±4.30＊＊
　　注:与给药前比较 , ＊P<0.05, ＊＊P<0.01。
min起效 , 60 min达高峰 ,可维持 90 min以上。但对 家兔子宫收缩频率无明显影响。结果见表 6和表 7。
表 6　 棕叶茎叶 50%乙醇提取物对家兔在体子宫收缩强度的影响(g, x±s, n=6)
组别 剂量/(g/kg)
给药后不同时间 /min
20 40 60 90
生理盐水 - 0.35±0.38 0.57±0.63 0.43±0.52 0.26±0.28
棕叶提取物 0.8 1.92±0.65＊＊ 1.79±0.91＊ 2.23±0.85＊＊ 1.85±1.00＊＊
棕叶提取物 0.4 0.58±0.11 1.39±0.64＊ 1.78±1.13＊ 1.70±1.23＊
缩宫素 0.25U 3.32±1.53＊＊ 2.69±1.64＊＊ 2.31±1.43＊ 1.41±0.87＊
　　注:与生理盐水组比较 , ＊P<0.05, ＊＊P<0.01。
表 7　 棕叶茎叶 50%乙醇提取物对家兔在体子宫收缩频率的影响(次数 /10 min)( x±s, n=6)
组别 剂量/(g/kg)
给药后不同时间 /min
20 40 60 90
生理盐水 - 7.00±1.26 7.16±1.72 6.50±1.76 6.16±1.60
棕叶提取物 0.8 7.00±1.41 7.20±1.09 7.20±0.84 6.60±0.89
棕叶提取物 0.4 6.60±1.14 7.40±0.88 7.40±1.13 7.00±1.00
缩宫素 0.25U 10.00±1.582) 8.40±0.89 7.60±1.14 6.20±0.44
　　注:与生理盐水组比较 , ＊P<0.05, ＊＊P<0.01。
3.4　棕叶茎叶乙醇提取物对小鼠凝血时间的影响
棕叶茎叶 50%乙醇提取物连续灌胃 5 d,对小
鼠凝血时间的影响 ,结果见表 8。结果表明棕叶茎
叶 50%乙醇提取物无论大小剂量对小鼠的凝血时
间均无明显影响 。
表 8　 棕叶茎叶 50%乙醇提取物对小鼠凝血时间的
影响( x±s, n=10)
组别 剂量 /(g/kg) 凝血时间 /min
生理盐水 - 3.50±1.45
棕叶提取物 1.5 3.11±1.16
棕叶提取物 0.75 3.27±1.25
三七粉 3.0 3.44±1.50
4　讨论
功能失调性子宫出血(简称宫血)是由下丘脑-
垂体-卵巢轴神经内分泌功能失调而导致的异常子
宫出血 ,属祖国医学崩漏 、经量过多 、经期延长 、月经
先期或月经后期范畴 ,为妇科临床常见疾病 、疑难病
之一。现代医学治疗该病多用激素 、止血类药物及
清宫术 ,中医治疗该病有独特优势 [ 8] 。中医认为宫
血主要原因是冲任损伤 ,不能制约经脉所致 。治疗
原则是:塞流 、澄源 、固本 [ 9] ,经辨证分型论治可收
到良好效果。广西少数民族采用单味药 -棕叶花治
疗月经过多 、血崩 ,这在中医治疗宫血中并不多见。
为证明棕叶的有效性我们实验选择不同种属的动物
大鼠 、小鼠 、豚鼠和家兔对离体子宫兴奋作用 。结果
表明棕叶茎叶 95%乙醇和 50%乙醇提取物均能使
己烯雌酚预处理后的非孕大鼠 、小鼠 、豚鼠和家兔子
宫平滑肌的收缩张力明显提高 ,收缩频率增快 ,子宫
活力增强(P<0.05 , P<0.01)。从兴奋 4种动物离
体子宫平滑肌 IC50比较来看 ,以 50%乙醇组分对大
鼠子宫的兴奋作用更敏感 ,其 IC50为 0.25 mg/mL。
在体实验证明 50%乙醇提取物十二指肠给药对己
烯雌酚预处理后家兔子宫有明显兴奋作用 ,使子宫
收缩强度增加(P<0.05, P<0.01),给药后 20 ～ 40
min起效 , 60min达高峰 ,可维持 90min以上 。但对
家兔子宫收缩频率无明显影响 。凝血实验提示
50%乙醇提取物对小鼠凝血时间无明显影响 ,由此
可见民间用棕叶花治疗功能性子宫出血的主要药理
学作用可能是通过子宫收缩压迫血管止血而达治疗
目的 。对棕叶茎叶兴奋子宫的活性物质尚需进一步
分离提纯和鉴定。
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三草方提取物对肺腺癌 A549细胞的作用
贾晓斌 1, 2 , 　邵振中 1 , 　陈　彦 2＊ , 　袁海建3 , 　金晓勇 2
(1.江苏大学药学院 ,江苏 镇江 212013;2.江苏省中医药研究院中药新型给药系统重点实验室 ,国家中医药
管理局名医名方适宜剂型重点研究室 ,江苏 南京 210028;3.泰州职业技术学院 ,江苏 泰州 225300)
收稿日期:2008-11-08
基金项目:江苏省中医药领军人才项目(2006);江苏省自然科学基金(BK2006155)。
作者简介:贾晓斌(1966-),男 ,博士 ,研究员 ,研究方向:中药物质基础及新剂型开发。 E-mail:jxiaobin2005@hotmail.com
＊通讯作者:陈　彦 , Tel:(025)85637809
关键词:三草方;提取物;肺腺癌;A549细胞株
摘要:目的:研究三草方(夏枯草 、白花蛇舌草 、仙鹤草)的不同极性提取部位及其配伍后对人肺腺癌 A549细胞株增殖活
性的影响。方法:采用醇提取法和水提取法分别制备三草方的 95%、60%、30%醇提部位 、水提部位;以 MTT法测定水煎
液和各不同极性部位及其配伍后对 A549细胞的增殖活性的影响。结果:在三草方 60%醇提部位对 A549细胞的 IC50最
低;60%和 95%醇提部位配伍后有明显的协同抑瘤活性。结论:三草方的 95%和 60%醇提部位间的配伍具有良好的抗
肺癌作用。
中图分类号:R285.6　　　　　文献标识码:A　　　　　文章编号:1001-1528(2010)02-0196-04
EffectofSancaoprescriptionextractsonlungadencarcinomacelline(A549)
JIAXiao-bin1, 2 , 　SHAOZhen-zhong1 , 　CHENYan2＊ , 　YUANHai-jian3 , 　JINXiao-yong2
(1.ColegeofPharmacy, JiangsuUniversity, Zhenjiang212013 , China;2.KeyLaboratoryofNewDrugDeliverySystemofChineseMeteriaMedica, Jian-
gsuProvincialAcademyofChineseMedicine, KeyLaboratoryofScientificPreparationforClinicalEfectivePrescriptionofStateAdministrationofTraditional
ChineseMedicine, Nanjing210028 , China;3.TaizhouPolytechnicColege, Taizhou225300 , China)
KEYWORDS:Sancaoprescription;extract;adenocarcinomaoflung;A549 celsstrain
ABSTRACT:AIM:ToinvestigatetheethanolicandaqueousextractsfromSancaoprescription(Spicaprunelae,
Oldenlandiadifuse(wild)Roxb, Herbaagrimoniae)ontheproliferationofhumanlungadenocarcinomacelline
(A549).METHODS:95%, 60%and30% ethanolicextractandaqueousextractwerepreparedfromSancaopre-
scription.TheMTTassaywasusedtodeterminetheinhibitoryactionagainsttheproliferationofA549.RESULTS:
IC50 of60% ethanolicextractoverA549 wasoneofthelowestinextracts.Combinationof60% and90% ethanolic
extractshowedthesynergisticantitumouractivity.CONCLUSION:EthanolicextractofSancaoprescriptionhas
andefectonhumanhungadenocarcinoma(A549).
196
2010年 2月
第 32卷　第 2期
中 成 药
ChineseTraditionalPatentMedicine
February2010
Vol.32　No.2