全 文 ：第 22 卷　第 1 期　　　　　　　　　　　　　植　　　物　　　研　　　究 2002年　1 月
Vol.22　No.1　　　　　　　　　　　BULLETIN OF BOTANICAL RESEARCH Jan., 　2002
中国角叉菜属(Chondrus)的分类研究:形态观察和 rbcL 序列分析
苏　乔1　栾日孝1　安利佳1　祖元刚2
(1.大连理工大学生物工程系 , 大连　116012)
(2.东北林业大学 , 哈尔滨 150040)
摘　要　采用 rbcL 序列分析结合传统形态观察的方法 ,对我国福建省平潭县和漳浦县 、山东省青
岛市及辽宁省大连市采集的角叉菜属样品进行了研究 。新鲜或硅胶干燥样品被用于总 DNA 提
取并用于 PCR反应 ,PCR扩增产物回收后直接用于测序反应 ,序列数据经 Clustal X1.8软件排序
后 ,采用 MEGA2.1软件根据 Kimura s双因子法计算遗传距离 ,并应用邻接法(neighbo r-joint-
ing)和最大简约法(Maximum Parsimony)构建系统树 ,Boo tst rap法(500次重复)评估分支可信度 。
研究表明:确认中国存在 Chondrus ocellatus 、Chondrus nipponicus 和Chondrus armatus 三种角叉
菜;原报道产于我国东南沿海的角叉菜 Chondrus ocellatus 应为 Grateloupia imbricata;原报道产
于大连小平岛的角叉菜 Chondrus yendoi 应为Mazzaella japonica 。
关键词　角叉菜属;分类;rbcL
TAXONOMIC STUDIES OF CHONDRUS ,
CHINA ON THE BASISOF MORPHOLOGY AND rbcL SEQUENCES
SU Qiao1　LUAN Ri-xiao1　AN Li-jia1　ZU Yuan-gang2
(1.Bioengineering Department , Dalian University of Technolog y , Dalian 116012)
(1.Nor theast Forestry University ,Harbin 150040)
Abstract　Morphological observations and rbcL sequence analyses of chondrus collected f rom Ping tan
and Zhangpu of Fujian province , Qingdao of Shandong province and Dalian of Liaoning province were
made.Total DNA were ext racted f rom fresh or silica gel-desiccated plants and used as templates fo r
polymerase chain reactions.Purified polymerase chain reaction products w ere direct ly sequenced.The
rbcL sequences w ere aligned using Clustal X1.8 computer program , then used to calculate distance
matrix w ith Kimura s tw o-parameter method and const ruct phy logenetic t rees by applying neighbo r
-joining and M aximum Parsimony analy ses using MEGA2.1 computer program.Bootstrap analyses
were carried out to evaluate statistical reliabili ty based on 500 resampling s of the data set.The results
indicated three Chondrus species in China:Chondrus ocellatus , Chondrus nipponicus and Chondrus
armatus.The results also suggested that Chondrus ocel latus which was described from specimen col-
lected at Southeast seashore of China should be Grateloupia imbricata and Chondrus yendoi which
was described from specimen collected f rom Xiao Pingdao , Dalian should be Mazzaella japonica.
第一作者简介:苏乔(1971-),女 ,讲师 ,博士研究生 ,主要从事植物系统学研究。
收稿日期:2001-10-22
Key words　Chondrus;taxonomy;rbcL
　　角叉菜属 Chondrus 海藻为大中型藻类 ,孢子
体与配子体同形 ,藻体扁圆 、扁压或扁平叶状 ,叉状
或不规则叉状分枝 ,有的在藻体边缘或藻体表面生
有可育小枝。藻体由皮层和髓部组成 ,皮层细胞小 ,
含色素体 ,髓部由丝状或圆柱状细胞组成。四分孢
子囊是由髓部特化了的丝状细胞转化而成 ,十字形
分裂 ,集生成孢子囊堆。囊果球形或亚球形 ,无髓丝
包围 ,埋入内皮层下或髓部丝体间 。本属在世界已
发现 9种 ,分布于寒温带海域 。其中北太平洋 7种 ,
北大西洋 1种 ,南太平洋 1种。早在 1904 年 , Gepp
曾以名录的形式报道了中国威海产 Cystoclonium
armatus[ Chondrus armatus(Harvey)Okamura] ;而
后 ,曾呈奎(1962 , 1983)、杭金欣(1983)、周贞英
(1983)等先后报道了产于我国广东 、福建和浙江的
Chondrus ocellatus Holmes[ 2 ,4 ,5] ;1998年 ,栾日孝和
张淑梅报道了产于大连的 Chondrus armatus (Har-
vey)Okamura 和 Chondrus yendoi Yamada et Mika-
mi[ 6] ;1999年 ,夏邦美报道了产于山东省的 Chon-
drus nipponicus Yendo
[ 7] ;共计4种 。上述报道是否
正确 ,学者意见并不完全一致 。夏邦美在《中国海藻
志》(1999)仅报道 C.nipponicus 一种 ,并在讨论中
指出曾呈奎等报道东南沿海产的 Chondrus ocella-
tusHolmes不属于角叉菜属。其它种鉴定正确与否 ,
该属在我国到底有几种 ,我们亦存有疑虑。
rbcL 序列分析已被广泛应用于红藻系统学分
析 , 被证明适用于科内属间 、种间系统分类研
究[ 8～ 14]曾对采自日本和欧洲的角叉菜样品进行了
rbcL 序列分析 ,序列数据可由 Genbank获得并加以
比较 。因此 ,我们决定采用 rbcL 序列分析结合传统
形态观察的方法 ,对采自我国福建省平潭县 、漳浦
县 、山东省青岛市和辽宁省大连市的角叉菜样品进
行进一步研究 。
1　材料与方法
1.1　材料
用于形态观察的标本共 9份 ,包括:Ch .ocella-
tus , 采自山东省青岛市汇泉角(AST20009205 ,
AST20009243);Ch.nipponicus ,采自辽宁省大连市小平
岛(AST20009221 、AST20009233和 AST20009266);Ch.
armatus ,采自大连市小平岛(AST20009223);Mazzaella
japonica ,采自大连市小平岛(AST20009222);Gratelou-
pia imbricata ,采自福建省漳浦县(AST20009151)和平潭
县(AST20009168)。标本保存在中国科学院海洋研究
所。
用于 rbcL 序列分析的样品见表 1。
　　表 1 用于 rbcL 序列分析的样品 、来源及登录号
Table 1　List of samples used in rbcL sequence analyses , reference and accession number.
样　品 Samples 来　　源 Reference 登　录　号 Accession number
AST20009221
Chondrus nipponicus
Ch.giganteus
AST20009205
Chondrus ocellatus
Ch.Verrucosus
Ch.Elatus
Ch.Armatus
AST20009223
Chondrus pinnulatus
Ch.Yendoi
Ch.Crispus
Phy llophora crispa
Mastocarpus stellatus
Mazzaella japonica
AST20009222
Grateloupia imbricata
AST20009168
辽宁省大连市 , 小平岛
F redericq and Hughey , direct submission
Hommersand , et al., 1994
山东省青岛市 , 汇泉角
Hommersand , et al., 1994
Hommersand , et al., 1994
Hommersand , et al., 1994
F redericq and Hughey , direct submission
辽宁省大连市 , 小平岛
F redericq and Hughey , direct submission
F redericq and Hughey , direct submission
Hommersand , et al., 1994
Hommersand , et al., 1994
Hommersand , et al., 1994
F redericq and Hughey , direct submission
辽宁省大连市 , 小平岛
Wang , e t al., 2000
福建省平潭县
AF294813
AF146200
U02986
AF294815
U02987
U02988
U02985
AF146201
AF294812
AF146202
AF146203
U02984
U02990
U02992
AF146213
AF294814
AB038607
AF299252
111 期　　　　　　苏乔等:中国角叉菜属(Chondrus)的分类研究:形态观察和 rbcL序列分析
图 1　Chondrus nipponicus　孢子体
1.具未成熟四分孢子囊藻体横切面观;2.具成熟四分孢子囊藻体横切面观;3.成熟四分孢子囊;4.未成熟四分孢子囊
Fig.1 Chondrus nipponicus Tetrasponrang ial plant
1.Transverse section of plant wi th young tet rasponrangia;2.Transverse sect ion of plant w ith mature tetrasponrangia;
3.Mature tet raspon rangia;4.young tetrasponrangia
1.2　方法
1.2.1　形态观察
形态观察采用新鲜或保存于福尔马林中的样
品 ,徒手切片并在显微镜下观察绘图。
1.2.2　DNA提取 、PCR扩增和测序
采用新鲜或硅胶干燥样品依照 Doyle等的方法
(1990)进行总 DNA提取 。
提取的总 DNA用于 PCR反应(大连宝生物公
司ExTag 试剂盒),扩增引物为 F -57 和 R-rbcS
(表 2)。PCR 反应条件为:94℃, 2min , 1 个循环;
94℃, 1min , 37℃, 2min , 72℃, 2min , 35 个循环;
72℃,8min , 1 个循环。PCR 反应在 PE 9700 上进
行。
PCR扩增产物经 1.5%琼脂糖凝胶电泳分离后
用Geneclean Ⅱ试剂盒依照厂家提供的方法回收.
PCR回收产物直接用于测序反应 ,引物见 2。
DNA测序在 ABI PRISM 377XL DNA Sequencer 上
完成(PE公司 ABI PRISM BigDye Terminator Cycle
Sequencing Ready Reaction Ki t)。
1.2.3　DNA序列分析
rbcL 序列数据用 Clustal X1.8软件(Thompson
等 1997)排序后 , 采用 MEGA2.1软件(Kumar 等
2001)Kimura s双因子法计算成对序列趋异值 ,并
应用邻接法(neighbor-jointing)和最大简约法
　　表 2 用于 rbcL 扩增和测序的引物
Table 2 Primers used for rbcL amplification and sequences
位置 Position 合成方向 Direction 序列 Sequence
F-57 正向 5-GTAAT TCCATATGCTAAAATGGG-3
F-577 正向 5-GTATATGAAGGTCTAAAAGGTGG-3
F-709 正向 5-GGTGAGATAAAAGGGCACTA-3
F-1099 正向 5-TTTGAACAAGATTGGGCATC-3
R-rbcS 反向 5-TGTGTTGCGGCCGCCCTTGTGTTAGTCTCAC-3
12 　　　　　　植　　物　　研　　究　　　　　　　　　　　　　　　　　　22 卷
图 2　Chondrus nipponicus　雌配子体
1.具囊果藻体横切面观;2.果胞系;3.果孢子囊;4.藻体横切面观
Fig.2 Chondrus nipponicus Female gametophyte
1.Transverse sect ion of plant w ith cystocarp;2.Procarp;3.Carposporangia;4.Transverse section of plant
(Maximum Parsimony)构建聚类图 , Bootstrap 法
(500次重复)评估分支可信度。
2　结果
2.1　形态观察
Chondrus ocellatus Holmes
藻体红褐色 ,常带绿色 ,软骨质 ,丛生 ,高 4cm ～
10cm 。固着器盘状 ,基部具亚圆柱形短柄 ,向上扁
压或扁平楔状。体叶状 ,多次叉状分支呈扇形 ,叶片
多纵向卷曲 ,腋角圆 ,枝端钝圆 ,枝宽 4mm ～ 14mm ,
厚 0.4mm ～ 0.55mm ,在主枝或分枝上有时生有副
枝。藻体可分成皮层和髓部 , 皮层厚 80μm ～
100μm ,可分外皮层和内皮层 ,细胞由外向内渐大 ,
外皮层由 5 ～ 8层细胞组成 ,横切面观细胞椭圆或亚
圆形 ,表层细胞长 4μm ～ 6μm ,宽 2.5μm ～ 3μm ,含
有色素体 ,内皮层由 2 ～ 4 层细胞组成 ,横切面观细
胞不规则星状或亚圆形 ,长 5μm ～ 6μm ,宽 4μm ～ 5.
5μm ;髓部厚 200μm ～ 280μm ,由无色丝状细胞组
成 ,髓丝稍与表面平行 ,多呈网状结构 ,粗细不甚均
匀 ,横切面观细胞长 25μm ～ 50μm , 宽 1.5μm ～
5μm ,长为宽的 5 ～ 25 倍 。孢子体与配子体同形 。
四分孢子囊集生呈深紫红色的小斑块 ,斑块稍高出
体表 ,正面观圆形 、椭圆形或不规则 , 长 0.4mm ～
1mm ,宽 0.3mm ～ 1mm 。四分孢子囊由靠近皮层的
髓丝形成 ,卵形 、椭圆或四角形等 ,十字形分裂 ,长
30μm ～ 50μm ,宽 25μm ～ 30μm 。雌雄异株。精子囊
由表皮细胞形成 ,卵形 , 长 2μm ～ 3μm , 宽 1μm ～
2μm ;囊果散生于藻体上部各处 ,正面观圆形或亚圆
形 ,直径 1mm ～ 2mm ,为一面凹陷 ,另一面凸起 ,迎
光观呈眼球状 ,果孢子囊球形或卵形 ,直径 10μm ～
20μm 。
Chondrus nipponicus (图 1 、图 2)
藻体紫红色 ,有时带绿 ,软骨质 ,丛生 ,高 9cm ～
14cm ,固着器盘状 ,近基部楔形 、扁圆或扁压 ,上部
扩展扁平叶状 , 多次叉状分支 , 主枝宽 0.6cm ～
2cm ,厚 500μm ～ 850μm ,分枝 、小枝宽 0.2cm ～ 0.6
cm ,厚 400μm ～ 600μm ,腋角圆 ,全缘或生有副枝 ,
枝端稍圆或微尖。藻体可分皮层与髓部 , 皮层厚
80μm ～ 100μm ,细胞由外向内渐大 ,含有色素体 ,皮
层又可分成外皮层和内皮层 ,外皮层由 5 ～ 7层细胞
组成 ,排列较整齐 ,横切面观细胞椭圆或亚圆形 ,表
层细胞长 2.5μm ～ 4μm ,宽 2μm ～ 3μm ,内皮层由 2
～ 3层细胞组成 ,细胞排列疏 ,横切面观细胞亚圆或
多角形 , 长 7μm ～ 15μm , 宽 7μm ～ 12μm;髓部厚
300μm ～ 650μm ,由丝状细胞组成 ,稍与表面平行呈
网状排列 ,细胞长 15μm ～ 30μm ,宽 1μm ～ 5μm ,长
131 期　　　　　　苏乔等:中国角叉菜属(Chondrus)的分类研究:形态观察和 rbcL序列分析
为宽的 5 ～ 30 倍。同型世代交替 ,四分孢子囊形态
不规则 ,卵形 、球形 、方形或多角形等 , 长 30μm ～
45μm ,宽 25μm ～ 30μm ,分布于藻体除基部外的各
部分 ,由髓细胞发育而成 ,集生 ,表面观呈深紫色隆
起斑块 ,斑块形状不规则 ,椭圆形 、圆形或长条状等 ,
多为 1mm ～ 3mm 。囊果仅分布于枝边缘或副枝上 ,
于藻体一面突起或两面突起 ,迎光不呈眼球状 ,果孢
子囊球形或卵形 ,直径 10μm ～ 20μm 。
Chondrus armatus
藻体紫褐色 ,软骨质 ,单生或丛生 ,分枝多 ,紧密
纠缠在一起 ,呈团块状 ,高 13cm ～ 15cm ,固着器盘
状。直立藻体线状 ,扁压或扁圆柱状。藻体宽 2mm
～ 4mm ,分枝宽 0.5mm ～ 2.5mm ,分枝多次 ,互生或
对生 ,呈不规则羽状 ,顶端多呈叉状 。在藻体上常常
生出很多副枝 , 末位小枝长短不一 ,宽 0.3mm ～
1mm ,枝端刺状 。皮层厚 70μm ～ 85μm ,含色素体 ,
横切面观细胞排列整齐 ,栅状 ,由外向内渐大;表皮
细胞椭圆形 ,长 5μm ～ 8μm ,宽 3μm ～ 4μm 。四分孢
子囊呈不规则卵球形 , 十字形分裂 , 长 33μm ～
55μm ,宽 30μm ～ 40μm ,多个在分枝皮层下集生形
成条形 、椭圆或圆形的深色斑块。囊果着生于小枝 、
次末位小枝的皮层下髓部 ,造成小枝外部膨胀呈亚
球形 , 横切面观亚圆形 , 长 700μm ～ 1200μm , 宽
700μm ～ 1000μm 。果孢子卵形 ,长 18μm ～ 35μm ,宽
17 ～ 20。
Grateloupia imbricata (图 3)
藻体紫红或红褐色 ,丛生 ,固着器盘状 ,高 2.
5cm ～ 5cm ,基部为短圆柱或扁压柄 ,向上呈楔形扁
平叶状扩展 ,复叉状分枝呈扇形 ,在主枝或分枝的叶
缘或叶面上生有副枝 , 枝宽 5mm ～ 15mm , 厚 0.
35mm ～ 0.45mm 。藻体可分皮层和髓部 , 皮层厚
80μm～ 120μm ,含有色素体 ,皮层又可分成外皮层
和内皮层 ,外皮层由 4 ～ 6层细胞组成 ,细胞较小 ,横
切面观细胞椭圆或亚圆形 ,表皮细胞长 5μm ～ 7μm ,
宽2.5μm ～ 3μm ,内皮层由 3 ～ 4 层细胞组成 ,细胞
稍大 ,横切面观多角形 ,细胞长 15μm ～ 25μm , 宽
15μm ～ 20μm ;髓部厚 180μm ～ 200μm ,细胞丝状 ,无
色 ,长 30μm ～ 50μm ,宽 4μm ～ 6μm ,长为宽的 6 ～ 8.
4倍 。同型世代交替。四分孢子囊生于藻体一次分
枝以上各处 , 椭圆形或长卵形 , 十字形分裂 , 长
40μm ～ 45μm ,宽 15μm ～ 20μm ,散生于外皮层细胞
间。雌雄同株。果孢生于外皮层深处 ,果孢枝由多
个细胞组成 ,成熟囊果球形或亚球形 , 直径 150μm
～ 250μm ,外部具有较多髓丝包围 ,散布藻体上部 ,
叶面呈小颗粒状突起;精子囊由表皮细胞形成 ,卵
形 、球形 ,长 4μm ～ 5μm ,宽 2μm ～ 3μm 。
Mazzael la japonica
藻体紫红色 ,软骨质 ,具荧光 ,丛生 , 叶状 , 高
10cm ～ 30cm 。固着器盘状 ,体下部具楔形柄 ,分枝
不规则 ,次数变化较大 ,主要形式为叉状 ,边缘常生
有副枝 ,通常枝宽 1cm ～ 6cm ,个别达 20cm ～ 30cm ,
厚200μm ～ 500μm 。藻体可分皮层和髓部 ,皮层厚
50μm ～ 80μm ,含色素体 ,由 5 ～ 7层细胞组成 ,外部
细胞较小 , 排列整齐 , 表层细胞圆形或椭圆形 , 长
2μm ～ 10μm ,宽 2μm ～ 3μm , 向内细胞渐大 ,排列疏
松 ,横切面观细胞亚圆形或多角形 , 直径 8μm ～
15μm;髓部位于皮层内 ,由无色髓丝组成 ,髓丝多与
表面平行 ,宽 2μm ～ 4μm 。孢子体与配子体同形 。
四分孢子囊卵形 、球形或短锥形 ,十字形分裂 , 长
75μm ～ 140μm ,宽 50μm ～ 60μm ,在皮层和髓之间形
成 ,集生 ,成熟的孢子囊堆在藻体形成稍隆起的椭圆
形深紫色斑块;囊果球形 ,散生 ,突出叶片两面 ,正面
观圆形 , 直径 0.5mm ～ 14mm , 囊果被厚 80μm ～
100μm ,产孢丝密集 ,细胞短而宽 ,果孢子囊球形 、卵
形或不规则 ,长 30μm ～ 50μm ,宽 25μm ～ 45μm 。
2.2　rbcL 序列分析
由Genbank获得的 Chondrus属 9个种 , Maz-
zaelar 属 1 个种 , 自测的 4 个样品及 Phy llophora
crispa 和 Mastocarpus stellatus 的 rbcL 序列数据
131-1260位共计 1130个碱基经 Clustal X1.8软件
排序后用于进一步分析 , Phyl lophora crispa 和
Mastocarpus stellatus 为外群 。其中变异位点 249
个 ,信息位点 123个 ,没有缺失和插入。
由 Kimura s双因子法计算的序列趋异值见表
3。
由应用邻接法(neighbo r-jointing)和最大简约
法(Maximum Parsimony)构建的聚类图(图 3 、图 4)
可见 ,Chondrus 属形成一个单系分支并获得 Boo t-
strap中等强度支持 ,分别为 70%和 79%。其中山
东省青岛市样品 AST20009205与 Chondrus ocella-
tus聚为一支;辽宁省大连市样品 AST20009221 与
Chondrus nipponicus 聚为一支;辽宁省大连市样品
AST20009223与 Chondrus armatus聚为一支 ,均得
到 Bootstrap 高度 支持 。辽 宁省 大连 市样 品
AST20009222与 Mazzaella japonica 形成一个单系
分支并得到 Bootst rap高度支持 。
福建省平潭县样品 AST20009168的 rbcL 序列
数据 155-1364位共计 1209个碱基被用于分析 ,其
与Grateloupia imbricata序列一致。
14 　　　　　　植　　物　　研　　究　　　　　　　　　　　　　　　　　　22 卷
　　表 3 角叉菜属和乌泽藻属序列差异表
　　Table 3 Pairwise sequence divergence values in Chondrus and Mazzaellar
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16
1 AST20009223
2 Ch.armatus 0.009
3 Ch.pinnulatus 0.008 0.016
4 Ch.yendoi 0.025 0.030 0.021
5 AST20009221 0.026 0.031 0.022 0.032
6 Ch.nipponicus 0.027 0.030 0.023 0.033 0.001
7 Ch.giganteus 0.026 0.031 0.022 0.034 0.012 0.011
8 AST20009205 0.027 0.030 0.023 0.033 0.016 0.017 0.018
9 Ch.ocellatus 0.030 0.029 0.026 0.034 0.017 0.016 0.017 0.007
10 Ch.verrucosus 0.033 0.038 0.031 0.038 0.025 0.024 0.025 0.030 0.029
11 Ch.elatus 0.032 0.037 0.030 0.040 0.026 0.025 0.026 0 .0270 .0260 .018
12 AST20009222 0.028 0.033 0.024 0.028 0.029 0.030 0.031 0.032 0.031 0.036 0.035
13 M.japonica 0.033 0.037 0.029 0.033 0.032 0.033 0.034 0.036 0.035 0.041 0.040 0.005
14 Ch.crispus 0.017 0.022 0.013 0.025 0.026 0.025 0.026 0.027 0.028 0.033 0.030 0.026 0.031
15 P.crispa 0.132 0.128 0.128 0.135 0.127 0.126 0.129 0.135 0.133 0.130 0.136 0.123 0.128 0.121
16 M.stellatus 0.137 0.137 0.134 0.135 0.134 0.133 0.131 0.138 0.135 0.139 0.141 0.126 0.131 0.133 0.113
图 3　Grateloupia imbricata
1.具囊果藻体横切面观;2.具四分孢子囊藻体横切面观(藻体下部);3.果胞
系;4.具四分孢子囊藻体横切面观(藻体中上部)
Fig.3 Grateloupia imbricata
1.Transverse section of plant with cy stocarp;2.T ransverse section of plant
with tetrasponrangia(lower par t of plant);3.Procarp;4.Transverse sec-
tion of plant with tetrasponrangia(upper and middle par t of plant)
151 期　　　　　　苏乔等:中国角叉菜属(Chondrus)的分类研究:形态观察和 rbcL序列分析
图 4　根据 rbcL 序列 , 应用 MEGA 软件邻接法获得的系统树 ,数字表示 bootstrap 值(500 次重复)。
Fig.4 Phylogenetic tree inferred from rbcL sequences with the neighbor-joining(NJ)method using
the M EGA computer program.The numbers indicate bootstrap values(500 replications)
图 5　根据 rbcL 序列 , 应用 MEGA软件最大简约法获得的系统树 ,数字表示 bootstrap 值(500次重复)。
Fig.5 Phylogenetic tree inferred from rbcL sequences with the Maximum Parsimony(MP)method using
the M EGA computer program.The numbers indicate bootstrap values(500 replications)
16 　　　　　　植　　物　　研　　究　　　　　　　　　　　　　　　　　　22 卷
3　讨论
3.1　确认中国存在 Chondrus ocellatus 、Chondrus
nipponicus 和Chondrus armatus 三种角叉菜
Chondrus ocellatus 与 Chondrus nipponicus 在
外形相似 ,主要区别是前者除基部外 ,囊果几乎散生
于藻体各处 ,在藻体上呈一面凸起 ,另一面凹陷 ,迎
光呈眼球状;而后者囊果着生藻体上部边缘或可育
小枝上 ,囊果在藻体一侧突起 ,或两侧突起 ,迎光不
呈眼球状(Yoshida et al.,1998)。我们在大连小平
岛 同 一 地 点 采 集 的 标 本 AST20009221 、
AST20009233和 AST20009266在形态上完全符合
Chondrus nipponicus的描述;AST20009221被用于
rbcL 序列分析 , 从聚类图看 ,其与 Chondrus nip-
ponicus聚为一支并得到 Bootstrap高度支持。我们
在青 岛汇 泉角 采集 的标 本 AST20009205 和
AST20009243在形态上也与 Chondrus ocel latus 的
描述相符;AST20009205 被用于 rbcL 序列分析 ,从
聚类图看 ,其与 Chondrus ocel latus聚为一支并同样
得到 Boo tst rap 的高度支持。另外 ,从序列趋异值
看 ,由 Genbank 获得的 Chondrus 属 9个种种间序
列趋异值为 1.1% ～ 4.1%;而 AST20009221 和
Chondrus nipponicus 序列趋异值仅为 0.1%,
AST20009205和 Chondrus ocellatus序列趋异值为
0.7%,均小于种间序列趋异值 。结合形态和 rbcL
序列分析 , 我们确认 AST20009221 、AST20009233
和 AST20009266 为 Chondrus nipponicus ;
AST20009205和 AST20009243为 Chondrus ocella-
tus。
Chondrus armatus 在形态上与 Chondrus pin-
nulatus很难区别 。主要不同之处是前者分枝很密
集 ,体幅较窄(2mm ～ 4mm),末位小枝和副枝尖 ,圆
柱或扁圆 ,分枝不规则 。后者分枝稍疏 ,体幅较宽
(2mm ～ 10mm),分枝较规则叉状 ,末位小枝和副枝
枝端稍钝 ,扁平(Yoshida et al., 1998)。大连市小平
岛样品 AST20009223 在形态上较符合 Chondrus
armatus的描述。从序列趋异值看 , AST20009223
和 Chondrus armatus 的序列趋异值为 0.9% , 与
Chondrus pinnulatus的序列趋异值为 0.8%,均小
于角叉菜属种间序列趋异值。从聚类图看 ,
AST20009223先与 Chondrus armatus聚为一支并
得到 Bootstrap高度支持。结合形态和 rbcL 序列分
析 ,我们确认AST20009223为 Chondrus armatus。
3.2 　原报道东南沿海产的 Chondrus ocel latus
Holmes 应为 Grateloupia imbricata
《中国经济海藻志》 、《福建海藻名录》和《Com-
mon Seaw eed China》等曾报道过 Chondrus ocella-
tus ,但夏邦美在《中国海藻志》(1999)明确指出“经
我们再次检查和切片 ,发现其四分孢子囊不应属于
角叉菜属 ,待深入研究后移至它属” 。我们从福建漳
浦县 、平潭县采集和 Chondrus ocel latus形态相似标
本 ,送请《福建海藻名录》作者陈灼华教授鉴定 ,认为
此种标本就是她们过去误报的 Ch.ocel latus。同时
她指出这个种应属蜈蚣藻属 。从形态结构看 ,我们
分别 从 福 建 漳 浦 县 、平 潭 县 采 集 的 标 本
AST20009151和 AST20009168与 Chondrus ocella-
tus有明显区别:Chondrus ocellatus 四分孢子囊集
生 ,产生于髓丝;而 AST20009151和 AST20009168
四分孢子囊散生于外皮层细胞间(图 3)。另外 ,根
据其四分孢子囊分布在除基部外的整个藻体 ,皮层
较厚 ,复叉状分枝呈扇形等特征及地理分布 ,初步判
断其为 Grateloupia imbricata (Yoshida et al.,
1998:713)[ 18] 。AST20009168被用于 rbcL 序列分
析 ,其与 Grateloupia imbricata 序列一致 。Wang 等
(2000)曾指出蜈蚣藻属形成一个单系群 ,种间序列
趋异值为 2.9%～ 8.1%,种内居群间序列趋异值为
0.0%～ 0.1%[ 19] 。结合形态和 rbcL 序列分析 ,我
们确认AST20009168为 Grateloupia imbricata 。
3.3　原报道大连小平岛地区产的 Chondrus yendoi
应为Mazzaella japonica
Mazzael la 属是 De Toni 1936 年建立 ,其主要
特征是:藻体叉状分枝或叶状 ,平滑或生有副枝。产
孢丝丝状体致密 ,短细胞 ,经常以末端管状细胞与髓
和次生丝状体相连 ,内部产孢丝扩展变宽 ,四分孢子
囊由初级皮层细胞转化而来 ,或产生于由内皮层或
髓细胞产生的次生丝状体。Mazzael la 属和 Chon-
drus属亲缘关系密切(Hommersand等 ,1994)[ 8] 。
Mazzael la japonica 和Chondrus yendoi 外形很
相似 ,主要区别为前者产孢丝丝状体致密 ,短细胞 ,
经常以末端管状细胞与髓和次生丝状体相连 ,内部
产孢丝细胞扩展变宽;后者产孢丝丝状体分散 ,丝
状 ,经常以次生纹孔联络与髓和次生丝状体相连 ,内
部产孢丝细胞保持狭长;和 M .hemisphaerica
(Mikami)Yoshida 在外形也相似 ,主要区别是前者
囊果球状 ,藻体两面隆起;后者囊果半球形 ,藻体一
面隆起(Hommersand , 1993)[ 20] 。我们根据栾日孝
等 1998年报道的 Chondrus yendoi 在大连小平岛采
集标本 AST20009222用于 rbcL 序列分析:从序列
趋异值看 , Hommersand 等(1994)报道 Mazzaella
属种 间 序 列 趋异 值 为 0.4% ～ 7.4%, 而
171 期　　　　　　苏乔等:中国角叉菜属(Chondrus)的分类研究:形态观察和 rbcL序列分析
AST20009222和 Mazzaella japonica 序列趋异值为
0.5%,略大于最小种间序列趋异值 。从聚类图看 ,
其与 Mazzaella japonica 形成一个单系分支并得到
Boo tst rap高度支持 ,而 Chondrus 属也形成一个单
系群并获得 Boo tst rap中等强度支持 。重新检查标
本 ,样品AST20009222产孢丝和囊果特点基本符合
Mazzael la japonica 模式标本的描述 。结合形态和
rbcL 序列分析 ,我们确认 AST20009222 为 Maz-
zaella japonica 。
参　考　文　献
1.Gepp , E.S..Chinese marine algae.J.Bot , 1904(42):161
～ 165 , pl.460
2.曾呈奎等.中国经济海藻志.北京:科学出版社 , 1962
3.Tseng , C.K..Common Seaweeds of China.Beijing:Science
P ress , 1983
4.杭金欣 , 孙建章.浙江海藻原色图谱.杭州:浙江科学技
术出版社 , 1992
5.周贞英 , 陈灼华.福建海藻名录.台湾海峡 , 1983 , 2(1):
91～ 102
6.栾日孝 , 张淑梅.大连角叉菜属(杉藻科)的研究.植物分
类学报 , 1998 , 36(3):268～ 272
7.夏邦美 ,张峻甫.中国海藻志.北京:科学出版社 , 1999 , 2
(5)
8.Hommersand , M.H., et al..Phylogenetic systematics and
biogeography of the Gigartinaceae (Gigar tinales , Rhodophy-
ta)based on sequence analysis of rbcL.Bot.Mar., 1994
(37):193～ 203
9.Hommersand M.H.et al..Recent developments in the sys-
tematics of the G igar tinaceae (Gigartinales , Rhodophy ta)
based on rbcL sequence analy sis and morpholog ical evidence.
Phycologial Research , 1999(47):139 ～ 151
10.F reshw ater , D.W., et al..A gene phylogeny of the red al-
gae(Rhodophy ta)based in plastid rbcL .Proc.Natl.A-
cad.Sci.USA , 1994(91):7281～ 7285
11.F reshw ater D.W., Fredericq S.&Hommersand M.H..A
molecular phylogeny of the Gelidiales (Rhodophyta)based
on analy sis of plastid rbcL nucleotide sequences.Journal of
Phycology , 1995 , 31:616～ 632
12.Freshwater , D.W.and Rueness , J..Phylogenetic relation-
ships o f some European Gelidium (Gelidiales , Rhodophy ta)
species , based on rbcL nucleotide sequence analysis.Phy-
cologia , 1994 , 33(3):187 ～ 194
13.Fredericq , S.and Ramirez , M.E..Systematic studies of
the Antarctic species of the Phyllophoraceae(Gigartinales ,
Rhodophy ta)based on rbcL sequence analysis.Hydrobio-
gia , 1996(326/ 327):137 ～ 143
14.F redericq , S.et al..The mo lecular systematics of some a-
gar- and carrageenan-containing marine red algae based
on rbcL sequence analy sis.Hydrobio logia , 1996(326/
327):125 ～ 135
15.Doyle , J.J.and Doyle, J.L..Isolation of plant DNA from
fresh tissue.Focus , 1990(12):13～ 15
16.Thompson , J.D.et al..The ClustalX windows interface:
flexible stra tegies for multiple sequence alignment aided by
quality analysis tools.Nucleic Acids Research , 1997(24):
4876～ 4882
17.Kumar , S., et al..MEGA2:Molecular evolutionary genet-
ics analy sis sof tw are, Bioinformatics(submitted)
18.Yoshida e t al..Marine A lgae of Japan.Tokyo , 1998
19.Wang , H.W., et al..Reinstatement of Grateloupia cate-
na ta (Rhodophy ta, Halymeniaceae)on the basis of mor-
phology and rbcL sequences.Phycologia , 2000 , 39(3):228
～ 237
20.Hommersand , M.H., et al..New perspectives in the tax-
onomy of the Gigartinaceae (Gigartinales , Rhodophy ta).
Hydrobiologia , 1993(260/261):105～ 120 , figs.1～ 41
18 　　　　　　植　　物　　研　　究　　　　　　　　　　　　　　　　　　22 卷