全 文 ：[ 作者简介] 王锦(1962-),男 , 理学硕士 , 副主任药师。研究
领域:基础药理及药物分析。联系电话:(024)25823552
·药学研究·
粗吻海龙对去势大鼠骨质疏松作用的研究
王锦 赵昕 李阳 (沈阳军区联勤部药品仪器检验所 沈阳 110026) 李发美 (沈阳药科大学)
摘 要 目的:研究粗吻海龙水 、醇提取液对成年雌性去势大鼠所致骨质疏松症的作用。方法:将雌性成年大鼠切除卵巢 , 8
周后测定有关指标 ,并与假手术组 、模型组和尼尔雌醇组进行了比较。结果:粗吻海龙水提取液灌胃组的骨灰重 、骨钙含量 、
骨断裂力均明显高于模型组(P<0.05)。结论:提示粗吻海龙提取液对去势大鼠造成的骨质疏松症有一定的治疗作用。
关键词 骨质疏松 粗吻海龙 去势大鼠
中图分类号:R285-5 文献标识码:A 文章编号:1008-049X(2003)10-0601-03
Effects of Trachyrhamphus Swrratus Extract on Osteoporosis of Ovariectomijed Rats
Wang Jin , Zhao Xin , Li Yang (I nstitute fo r Drug and Instrument Contro l of Shenyang M ilitary Region , Shenyang 110026 , P.R.
China);Li Famei(Shenyang Pharmaceutical University)
ABSTRACT Objective:To study an effect of Trachyrhamphus serratus extracts on ovariectomied female adult rats.Method:Water
and ethanol extracts of Trachy rhamphus serratus were administered daily to the rats fo r 8 weeks after being ovariectomied.Then , the
relative a indexes were determined and compared with the sham operation group , pattern g roup , and ny lestriol group.Result:Statis-
tical results showed that bone ash and calcium were sigmificantly higher in g roups treated with either ex tract than in pattern groups(P
<0.05)and that bone streng th was signidicantly in water ex tract treated rats.Conclusion:The study indicated that Trachyhamphus
swrratus ex tracts have theropeutical effects on osteoporosis in ovariectomied ra ts.
KEY WORDS Osteoporosis;Trachyhamphus serratus;Ovariectomied rat
海龙是传统的补益中药 ,具有温肾壮阳 、散结消
肿的作用[ 1] 。中国药典 2000 年版规定其为海龙科
动物海龙 、拟海龙或尖海龙的干燥体。广东民间尚
未以粗吻海龙的全体入药 ,应用同与海龙[ 2 ,3] 。海
龙广泛分布于我国东海和南海 ,货源充足 ,价格低
廉 ,有开发研究价值。本实验在中医肾主骨髓理论
指导下 ,对粗吻海龙水 、醇提取液对切除卵巢大鼠骨
质疏松的治疗作用进行初步观察研究 ,并与假手术
组 、模型组和尼尔雌醇组进行了比较。
1 材料和方法
1.1 药品与仪器
市售海龙 , 经鉴定为粗吻海龙(Trachgrham-
phus)的干燥全体(由沈阳药科大学生药鉴定研究室
许春泉教授鉴定),研细 ,取本品细粉两份 ,每份 60
g ,分别用水 、75%乙醇各 200 ml浸渍 8 h后 ,各回流
4 h ,过滤 ,滤液浓缩定容(乙醇提取液挥去乙醇 ,再
用适量吐温-80助溶)至 200 ml ,分别得水 、醇提取
液 ,每 1 ml相当于原生药 0.3 g;尼尔雌醇片(上海
第十二制药厂生产 ,批号:981001);测元素用水为四
重蒸馏水 NORLRND XR-36型骨密度仪(带有动物
软件 ,美国产);78-2 型片剂四用测定仪(上海黄海
药检仪器厂);AA-670型原子吸收分光光度计(日本
岛津);DT-100A型分析天平(北京精密仪器厂)。
1.2 动物
雌性Wistar 大鼠 ,50只 ,体重(238±18)g ,5 月
龄 ,沈阳军区总医院实验动物中心提供。
1.3 动物分组及处理
随机取 40只 ,按文献方法[ 4] ,用戊巴比妥钠(40
mg·kg-1)麻醉后 ,无菌条件下从腰锥两旁切口进入
腹腔背侧 ,完整摘除卵巢 ,止血后 ,逐层缝合 ,作为模
型组。其余 10只同法进入腹腔后 ,切除一段小肠系
膜 ,止血缝合 ,作为假手术组。8周后将模型组成活
大鼠随机分为 4组 ,如表 1。
表 1 动物分组及处置
组 别 处 置
模型组 切除双侧卵巢 ,不给药
假手术组 开腹后关腹 ,不切除卵巢
给药组(水提) 切除双侧卵巢 ,海龙水提液灌胃
给药组(醇提) 切除双侧卵巢 ,海龙醇提液灌胃
尼尔雌醇组 切除双侧卵巢 ,尼尔雌醇灌胃
1.4 实验方法
给药组以生药量 3 g·kg-1体重灌胃给药 ,每日
1次;假手术组 、模型组灌胃给与等容量蒸馏水;阳
性对照组以1.375 mg·kg-1体重给药 ,药片粉碎后
用蒸馏水混悬灌胃 ,每两周 1次 ,其余各天灌等量蒸
601中国药师 2003 年第 6 卷第 10 期
馏水 。各组大鼠分笼饲养 ,摄取标准大鼠饲料(沈阳
第六制药厂饲料厂),自由饮用自来水 ,动物室温为
(20±2)℃。各组灌胃 8周后 ,颈总动脉放血 ,处死
大鼠 ,将两后肢支离 ,去净皮肉 ,置于液体石蜡中保
存(4℃)。
1.4.1 骨密度测定 取右侧股骨用骨密度仪依法
测定 ,取两次平均值 。
1.4.2 骨断裂力测定 取上述测定骨密度后的右
侧股骨 ,置于片剂四用仪两个压板之间 ,依仪器操作
说明 ,沿距大转子端 1/3处的直径方向徐徐加压 ,直
到股骨断裂或破碎 ,读取压力表所示压力 ,即为骨断
裂力 。
1.4.3 骨干重 、灰重及去脂干重的测定 取左侧股
骨 ,用石油醚洗净其上的液体石蜡 ,精密称重 ,即为
湿重 ,置 105℃烘箱中干燥 6 h ,精密称重 ,即为干
重;将骨置具塞试管中 ,加氯仿-甲醇(3∶1)10 ml浸
泡过夜 ,倒掉溶剂 ,再加氯仿-甲醇(3∶1)10 ml将
试管置 40 ℃恒温水浴中 , 4 h 后重复一次 ,挥干溶
剂后 ,置 105 ℃烘箱中烘 40 min ,精密称重 ,即为去
脂骨重 。将处理好的样品置已恒重的坩埚中 ,置于
高温炉中 800 ℃灰化 6 h ,冷却至 200 ℃左右时取出
置干燥器中放至室温 ,精密称重 ,即为灰重。
1.4.4 骨的钙 、磷等元素含量的测定 将上述灰化
后的样品先用浓硝酸 1 ml溶解后加蒸馏水适量 ,移
至 100 ml容量瓶中 ,加蒸馏水至刻度 ,摇匀 ,即为样
品溶液。用 EDTA络合滴定法[ 5]测定钙 ,用磷钼酸
法测定磷 ,以原子吸收分光光度法[ 6]测定镁 、钾 。
1.4.5 统计方法 数据用 x ±s 表示;数据间方差
分析处理采用 ANOVA;组间比较采用 Dunnet 检
验。
2 结果
2.1 粗吻海龙提取液对去势大鼠骨断裂力的影响
如表 2 所示 ,假手术组 、水提取组 、醇提组及尼
尔雌醇组骨断裂力明显高于模型组(P<0.05)。
2.2 粗吻海龙提取液对去势大鼠骨密度的影响
所有给药组和假手术组的骨密度均略高于模型
组 ,但未见显著性差异(P >0.05),结果见表 2。
2.3 粗吻海龙提取液对去势大鼠骨干重 、骨灰重及
去脂干重的影响
表 3列出了各组动物的骨灰重与去脂干重 、骨
灰重与干重及去脂干重与干重之比 。粗吻海龙提取
液和尼尔雌醇给药组与模型组相比较 ,骨灰重与去
脂干重的比值显著升高(P <0.05),但假手术组升
高不明显 。而骨灰重与干重及去脂干重与干重之比
在各组间无显著性差异(P >0.05)。
表 2 粗吻海龙提取液对去势大鼠
骨断裂力和骨密度的影响
组 别 动物数(只)
骨断裂力
(kg)
骨密度
(g·cm-2×10-3)
模型组 8 12.4±2.2 0.103±7.08
假手术组 9 14.3±1.6＊ 0.106±5.96
尼尔雌醇组 9 14.1±1.1＊ 0.106±6.00
给药组(水提) 8 14.2±1.2＊ 0.108±4.04
给药组(醇提) 9 13.2±1.4＊ 0.107±7.95
注:模型组比较 , ＊ P<0.05
表 3 粗吻海龙提取液对去势大鼠骨干重 、
骨灰重及去脂干重的影响
组 别 动物数(只)
骨灰重/去脂
干重(%)
骨灰重/干重
(%)
去脂干重/
干重(%)
模型组 9 63.34±2.20 54.88±3.19 85.30±1.92
假手术组 10 65.88±2.28 56.41±2.79 85.60±1.62
尼尔雌醇组 10 66.55±1.87＊ 56.43±2.20 84.80±2.41
给药组(水提) 9 66.84±1.11＊ 55.42±1.16 82.91±1.05
给药组(醇提) 10 65.97±0.86＊ 56.01±0.87 84.90±1.01
注:与模型组比较 , ＊ P<0.05
2.4 粗吻海龙提取液对去势大鼠钙 、磷等元素含量
的影响
表 4所示为各组大鼠的骨钙 、磷 、镁和钾在去脂
骨中的含量。假手术组 、粗吻海龙水提组及尼二雌
醇组的钙/去脂干重值与模型组相比具有显著性差
异(P<0.05)。而其它元素无明显变化 。
表 4 粗吻海龙提取液对去势大鼠钙 、
磷和钾元素含量的影响(n ,mg·g-1)
组别 动物数 钙/去脂干重 磷/去脂干重 镁/去脂干重钾/去脂干重
模型组 9 25.11±1.26 11.37±0.73 2.25±0.48 0.17±0.02
假手术组 10 25.83±0.99＊11.49±0.75 2.19±0.33 0.17±0.01
尼尔雌醇组 10 26.14±1.22＊11.82±0.82 2.27±0.39 0.18±0.01
给药组(水提) 9 26.13±0.72＊11.19±1.10 2.50±0.48 0.17±0.02
给药组(醇提) 10 25.71±0.62 11.28±0.24 2.23±0.32 0.16±0.01
注:与模型组比较 , ＊ P<0.05
3 讨论
骨质疏松症的致病机理现在尚不完全清楚 ,但
其与雌激素分泌减少[ 7] ,降钙素[ 8] 、维生素 D3 调节
失控[ 9]有密切的关系 。现有的临床治疗药物主要
是雌激素类 ,长期使用有一定的毒副作用 ,且其目的
均为供给雌激素 ,而无法解决成骨细胞不足之根本。
祖国医学则认为骨质疏松症的病因主要是肾虚骨
痹 。故治疗以温肾壮阳为基本原则 ,粗吻海龙正是
温肾壮阳且毒副作用小的强壮补益中药。
粗吻海龙货源充足 、价廉易得 ,其水 、醇提取液
对切除卵巢 8周后的大鼠灌胃 8 周 ,测定了与骨质
有关的几种参数 ,研究了提取液对去势造成的骨质
602 China Pharmacist 2003 , Vol.6 No.10
尼美舒利对正常小鼠免疫功能的影响
黄晓佳 裘军 (华中科技大学同济医学院药学院药理教研室 武汉 430030)
摘 要 目的:研究尼美舒利对免疫功能的影响。方法:采用碳粒廓清法 、二硝基氟苯诱导迟发型变态反应试验法 、抗体形
成测定法及免疫器官重量法 ,评价尼美舒利对正常小鼠免疫功能的作用。结果:尼美舒利能增强二硝基氟苯诱导的迟发型变
态反应 ,并且提高抗体水平增加脾脏重量。结论:尼美舒利能增强细胞免疫和体液的免疫功能。
关键词 尼美舒利 迟发型变态反应 抗体 碳粒廓清 免疫增强
中图分类号:R965.2 文献标识码:A 文章编号:1008-049X(2003)10-0603-03
Effect of Nimesulide on Normal Mice s Immunologic Function
Huang Xiaojia , Qiu jun(Department of Pharmacolog y , School of Pharmacy , Tong ji Medical College , Huazhong University of Science
and Technology , Wuhan 430030 , P.R.China)
ABSTRACT Objective:To study the effect of nimesulide on immunologic function.Method:To evaluate the immunomodulatng ef-
fects of nimesulide by carbon clearance test , antibody formation test , dinitro fluorobenzene-induced delay type of hypersensitivity test
(DTH)and immune org an weight test.Result:The severity of dinitrofluorobenzene-induced delay type of hypersensitivity was en-
hanced by nimesulide , the antibody level and weight of spleen were increased.Conclusion:Nimesulide could improve the cellular and
humo ral immuno logic function.There is a need for further investig ation of mechanism.
KEY WORDS Nimesulide;DTH;Antibody;Carbon clearance;Immunologic enhancement
尼美舒利(nimesulide , NI)是一种非甾体抗炎药
(non-steroidal anti-inflammatory drugs , NSAIDs),可
选择性抑制环氧合酶-2(cyclooxygenase-2 ,COX-2),
具有很强的抗炎 、解热和镇痛作用 ,并有抑制人中性
粒细胞的突发性呼吸 ,消除炎症时体内过多的自由
基等多种作用 。临床上用于呼吸道炎症 、风湿性
[ 通讯作者] 裘军 , 药理学副教授 ,从事抗炎免疫药理学研究 ,
tel:027-83657813
和类风湿性关节炎 、骨关节炎 、手术后疼痛和水肿等
的治疗[ 1] 。
COX催化花生四烯酸转化为前列腺素(prostg-
landins;PGs),目前已明确有两个同功异构体 COX-
1和 COX-2 ,大多数组织中COX-1呈结构性表达 ,
维持机体的生理功能;COX-2 为诱导型表达 ,可被
多种因素如炎症 、缺氧 、损伤 、细胞因子 、有丝分裂原
等刺激后诱导产生 ,主要在炎症细胞如巨噬细胞 、树
突状细胞中表达 。据报道 ,对COX-1和COX-2均
疏松症的治疗作用。实验表明 ,水提取液使去势大
鼠的骨钙含量和骨灰重/脱脂干重的比值增加至假
手术组的水平 ,其效果与尼尔雌醇相似 ,说明粗吻海
龙能改善骨的钙化能力 ,使骨磷含量升高 ,而与骨质
量无直接关系的钾 、镁等元素含量则无明显变化 。
粗吻海龙水提取液组的骨裂力也与尼尔雌醇组和假
手术组相似 ,皆明显高于对照组(模型组),说明其具
有增强去势大鼠抗骨折能力的作用。这些结果表
明 ,粗吻海龙对去势造成的骨质疏松症有一定的治
疗作用。本实验中 ,骨密度的变化不明显 ,可能是由
于测量时仪器的精密度稍差的原因(同一根鼠骨重
复测定的 RSD>4%, n=6)。
本文只是一个初步的探讨 ,为应用温肾壮阳中
药治疗和预防骨质疏松症提供了一定的科学依据 ,
也为进一步探索骨质疏松症的致病机理提供了线
索 。
参 考 文 献
1 中国药典[ S] .2000年版一部.241
2 江苏新医学院.中药大辞典[ M ] .上海:上海人民出版社.1977.
1925
3 冉先德.中华药海[ M] .哈尔滨:哈尔滨出版社.1993.1821
4 沈霜.肾虚骨质疏松症动物模型的复制及相关指标测定[ J] .中国
中医骨伤科 , 1994 , 1(2):1
5 孙毓庆.分析化学[ M] .第三版.北京:人民卫生出版社.1985.175
6 张冠群.灵芝及虫草菌丝体中微量元素含量的分析[ J] .广东微量
元素科学 , 2000 , 7(4):43
7 刘慧姝 ,吕超.绝经妇女骨密度变化与雌激素 、生长激素水平的相
关关系初探[ J] .骨质疏松杂志 ,1996 , 2(1):12
8 刘忠厚主编.骨质疏松症[ M] .北京:化学工业出版社.1992.113
9 刘忠厚主编.骨质疏松症[ M] .北京:化学工业出版社.1992.96
(2003-01-28收稿 2003-06-10 修回)
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