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凉山虫草的薄层色谱研究
陈璐1，万德光1，任艳1，谢婷1，雷艳1，国锦琳1，刘显福2
［摘要］目的:建立一种快速、有效的凉山虫草成分鉴别方法，完善药材的质量标准。方法:采用薄层色谱法，以腺苷为
对照品，以三氯甲烷 －乙酸乙酯 －异丙醇 －水 －浓氨水(5:2:6:0. 6:0. 13)为展开剂，对凉山虫草进行薄层分析。结果:10
批凉山虫草样品薄层色谱中，在与对照品色谱相同位置上均显相同颜色的斑点，且色谱斑点清晰，无拖尾，分离度良好。结
论:该方法简便，快速，结果准确度高，重现性好，药材用量少，是一种行之有效的凉山虫草鉴别方法。
［关键词］凉山虫草;腺苷;薄层色谱法
［中图分类号］ R 284. 1 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1674 － 926X(2010)02 － 0025 － 02
TLC study on Cordyceps liangshanensis /CHEN Lu1，WAN De － guang1，REN Yan1，XIE Ting1，LEI Yan1，GUO Jin － lin，LIU
Xian － fu2 / /(1． Pharmacy College，Chengdu University of Traditional Chinese Medicine，The Ministry of Education Key Laboratory of
Standardization of Chinese Herbal Medicine，Chengdu 610075，China;2． Ganzi Institute For Food and Drug Control，Kangding
626000，China)
［Abstract］Objective:To establish an effective quality control method of Cordyceps liangshanensis to perfect the quality stand-
ard．Method:TLC method was used． Adenosine was used as the reference substance and the mixture of chloroform，ethyl acetate，iso-
propanol，H2O and NH3·H2O (5∶ 2∶ 6∶ 0. 6∶ 0. 13)as the developing solvent． Result:The spots in the chromatogram of the test so-
lution corresponding to the position of adenosine had the same colour． Conclusion:The method is accurate and simple，and can be
used for the quality control of Cordyceps liangshanensis．
［Key words］Cordyceps liangshanensis;adenosine;TLC
发现一虫草新种，鉴定为麦角菌科真菌凉山虫草
C． liangshanensis Zang，Liu et Hu寄生在鳞翅目昆虫幼
［作者单位］ 1．成都中医药大学 中药材标准化教育部重点实
验室，四川 成都 610075
2．甘孜食品药品检定所，四川 康定 626000
［基金项目］ 国家自然科学基金资助项目(No． 30801522) ;四
川省中医药管理局资助项目(2008 － 11)
［作者简介］陈璐(1982 －) ，女，在读博士，研究方向:动物药
与中药生物技术
［通讯作者］国锦琳 Tel:13981938406
［收稿日期］ 2010 － 03 － 25
虫体冬虫夏草为我国三大名贵中药，因药源缺乏，长
期供不应求。1979 年，在四川凉山彝族自治州雷波县
上的子座及幼虫尸体的复合物［1］。研究发现凉山虫
草的化学成分、功效均与正品冬虫夏草相似，且分布
海拔较低、对生态环境要求不高，资源量丰富，人工培
育具有很大潜力，极有可能发展成为一种优良的冬虫
夏草替代资源［2，3］。然而，到目前为止，对于凉山虫草
的研究，进一步的成果较少，尤其是质量标准的制订
工作滞后，严重阻碍了凉山虫草的应用和资源开发。
本研究旨在建立一种快速、有效的鉴别凉山虫草成分
定性鉴别的方法，为凉山虫草质量标准的建立奠定基
础，为虫草的品质评价及资源开发提供依据。
在本试验中，用紫外分光光度计在 190 ～ 400 nm
波长范围内扫描，测定槲皮苷最大吸收波长 350 nm，
故检测波长选择为 350 nm。比较甲醇和水作为溶剂，
结果甲醇提取槲皮苷完全且杂质较少，选定甲醇作为
提取溶剂。参照文献报道［1，2］并经试验摸索，加入磷
酸改变流动相 pH值，结果峰形和分离度较好，最终确
定流动相为甲醇 － 0. 1%磷酸(45∶ 55)。本试验方法
重复性好，操作简便、灵敏、准确，为厚朴资源综合持
续利用提供了科学依据。
［参考文献］
［1］ 郑一敏，胥秀英，杨艳红． HPLC 测定菟丝子中金丝桃苷
与槲皮苷的含量［J］．华西药学杂志，2005，20(3) :261．
［2］ 江波，孙立立，杨书斌． HPLC 测定侧柏炭中檞皮苷与槲
皮素的含量［J］．中成药，2005，27(7) :792．
(责任编辑:李芸霞)
·52·中药与临床 Pharmacy and Clinics of Chinese Materia Medica 2010;1(2)
1 材料与方法
1． 1 材料
硅胶 GF254(青岛海洋化工厂) ，三氯甲烷、乙酸乙
酯、异丙醇、蒸馏水、浓氨水及无水乙醇均为分析纯，
腺苷对照品(中国药品生物制品检定所，批号:110879
－ 200202) ，凉山虫草药材 10 批(产自四川凉山州雷
波县，其中 1 号、10 号药材由四川省食品药品检验所
提供，其余购自西南药都，经四川省食品药品检验所
黎跃成主任药师鉴定确认)。
1． 2 方法［4，5］
1． 2． 1 对照品溶液的制备 取腺苷对照品，加 90%甲
醇制成每 1 mL中含 0. 5 mg的溶液作为对照品溶液。
1． 2． 2 供试品溶液的制备 取凉山虫草粉末 1 g，加
入 50%乙醇 10 mL，超声 30 min，过滤，滤液浓缩至约
0. 5 mL，加入无水乙醇 1 mL，置冰箱(－ 4 ℃)静置过
夜，离心，取上清液，浓缩，即为供试品溶液。
1． 2． 3 薄层板的制备取 硅胶 GF254 4 g，加 0. 5%羧
甲基纤维素钠溶液 12 mL，混合搅拌均匀，铺成 0. 5 mm
厚的薄层板，晾干，置于105 ℃烤箱中活化30 min备用。
1． 2． 4 点样及展开方式 分别吸取上述供试品溶液
10 μl、对照品溶液 5 μl，分别点于同一上述 GF254薄层
板上，展开 9 cm(温度 25 ℃，相对湿度 42%) ，取出，
晾干，置 254nm紫外光灯下检视。
2 结果
供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上显
相同颜色的暗斑，凉山虫草样品色谱图见图 1。
图 1 凉山虫草样品色谱图
3 讨论
3． 1 在薄层鉴别试验中，对 10 批凉山虫草样品进行
平行比较，各批样品中均检出明显的腺苷斑点，且腺
苷斑点与其它组分分离良好。10 批凉山虫草样品色
谱行为基本相同，腺苷斑点大小、颜色深浅的不同，提
示不同样品间腺苷含量的差异。
3． 2 曾比较过几种不同的展开系统: (1)三氯甲烷一
乙酸乙酯一异丙醇一水(5∶ 2∶ 6∶ 0. 6) ，展开槽的另一
侧用氨蒸气饱和［6］; (2)三氯甲烷 －乙酸乙酯 －异丙
醇 －水 －浓氨水(5∶ 2∶ 6∶ 0. 6∶ 0. 13) ;(3)三氯甲烷 －
乙酸乙酯 － 异丙醇 － 水 － 浓氨水(5∶ 2∶ 7. 5∶ 0. 6∶
0. 13)。系统(2)腺苷斑点清晰，分离度良好，经优选后
最终决定用系统(2)。
3． 3 凉山虫草中蛋白含量较高，若不进行前处理除
去大部分蛋白，拖尾非常严重，腺苷斑点也不明显。
曾采用两种不同的去除蛋白的方法: (1)加入 sevage
试剂(氯仿∶ 正丁醇 = 5∶ 1)1 mL，混匀，4000 r·min －1
离心 15 min，取上层清液;(2)加入无水乙醇 1 mL，混
匀，置冰箱(－ 4 ℃)静置过夜，4000 r·min －1离心 15
min，取上清液。薄层色谱结果显示方法(2)除杂效果
良好，经优选后最终选用方法(2)。
3． 4 以腺苷为对照品，用薄层鉴别凉山虫草的方法，不
仅耗费药材少，简便快速，而且经济，对仪器的要求也不
高，结果准确，实为一种较好的凉山虫草鉴别方法。
［参考文献］
［1］ 四川省卫生厅．四川省中药材标准(增补本) ［S］． 1992．
［2］ 胡若瑛．凉山虫草的研究［J］．中草药，1983，14(17) :35．
［3］ 李吉珍，胡若瑛，刘道庆，等．凉山虫草与冬虫夏草的药理
作用比较［J］．中药材，1990，13(3) :35．
［4］ 谈增毅，高蓉，高杨，等．凉山虫草和冬虫夏草化学成分的
比较［J］．中草药，1985，16(5) :4．
［5］ 张晓峰，刘海青，黄立成，等．中国虫草［M］．西安:陕西科
学技术出版社，2008:349．
(责任编辑:杨再国)
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