全 文 ：收稿日期:2012-02-07
作者简介:梁 冰(1981 -) ，女，实习研究员，主要从事中药质量标
准研究。
* 广西创新能力建设项目(编号:11-114-14D) ，广西壮药质量标准研究
项 目 (编 号:MZY20100042 ) ，广 西 自 然 科 学 基 金 项 目
(2010GXNSFD013044)资助。
＊＊通讯作者。
广西科学 Guangxi Sciences 2012，19(2) :149 ～ 151
高效液相色谱法测定广西壮药毛郁金中姜黄素的含量*
Determination of Curcumin in Rhizome of Curcuma aro-
matica by HPLC
梁 冰1，覃兰芳1，赖茂祥1，2＊＊，刘布鸣1，2，刘华钢3，赖克道1
LIANG Bing1，QIN Lan-fang1，LAI Mao-xiang1，2＊＊，LIU Bu-ming1，2，LIU Hua-gang3，LAI
Ke-dao1
(1．广西中医药研究院，广西南宁 530022;2． 广西中药质量标准研究重点实验室，广西南宁
530022;3．广西医科大学，广西南宁 530021)
(1． Guangxi Institute of Traditional Medical and Pharmaceutical Science，Nanning，Guangxi，530022，
China;2． Guangxi Key Laboratory of Tradtitonal Chinese Medicine Quality Stardands，Nanning，Guan-
gxi，530022，China;3． Guangxi Medical University，Nanning，Guangxi，530021，China)
摘要:采用 Ultimate(XB-C18)色谱柱，以乙腈-4%冰乙酸(48 ∶ 52)为流动相，流速 1． 0 ml /min，检测波长 430nm，
柱温为室温，建立高效液相色谱法(HPLC)测定广西壮药材毛郁金中姜黄素含量的方法。结果表明，姜黄素在
0． 00992 ～ 0． 08928μg范围内的峰面积与其浓度呈良好线性关系(r =0． 9995) ，平均回收率为 101． 28%，RSD为
1． 67% (n =6)。本方法准确，快速，重现性好，可以作为广西壮药材毛郁金的含量测定方法。
关键词:含量测定 姜黄素 毛郁金 HPLC
中图法分类号:O657. 7+2，R917 文献标识码:A 文章编号:1005-9164(2012)02-0149-03
Abstract:A HPLC method was established to determine Curcumin in rhizome of Curcuma aromatica ．
Ultimate XB-C18 column was used as chromatographic column． The mobile phase was acetonitrile-4%
acetic acid solution (48 ∶ 52)． The flow rate was 1． 0 ml·min－1 and the detection wavelength was set
at 430nm． The column temperature was maintained at room temperature． The calibration curve of Cur-
cumin was in good linearity over the range of 0． 00992 ～ 0. 08928(μg )． The average recovery was
101． 28%，with RSD of 1． 67% (n =6)． This method is convenient，sensitive，reliable and suitable for
determination of Curcumin in rhizome of Curcuma aromatica．
Key words:content determination，curcumin，Curcuma aromatica，HPLC
壮族是我国人口最多的少数民族，壮药是我国中
医药的重要组成部分，具有悠久的历史和丰富的内
涵。毛郁金是壮族常用药物之一，收载于《广西壮族
自治区壮药质量标准》第 2 卷。毛郁金来源于姜科
植物毛郁金的干燥根茎。毛郁金植物主要分布于广
西横县、灵山、南宁等地，其根入药具有行气解郁，凉
血破瘀和利胆作用，用于治疗胸闷胁痛，胃腹胀痛，黄
疸，吐血，尿血，月经不调，癫痫等病症［1，2］。近年来
的研究表明毛郁金还具有镇痛、止血［3］、抗炎［4］及免
疫抑制［5］等作用。目前有关壮药材毛郁金的化学成
分和姜黄素的测定方法还未见有报道。我们在研究
中发现毛郁金中含有姜黄素，本文采用 HPLC法测定
其含量，并进行了方法学研究，建立了一种 HPLC 法
测定毛郁金中姜黄素含量的方法。该方法简便、快
捷、准确，重现性好，可以用于考察研究毛郁金药材及
其同属其它中药质量。
1 实验仪器与试药
主要仪器是日本岛津 10A 高效液相色谱仪(LC
10AT VP 泵，SPD-10AVP 检测器)。试药姜黄素对照
品(批号:110823-201004)供含量测定用，由中国药品
941广西科学 2012 年 5 月 第 19 卷第 2 期
DOI:10.13656/j.cnki.gxkx.2012.02.006
生物制品检定所提供;毛郁金药材分别采自广西境内
不同产地，经广西中医药研究院赖茂祥研究员鉴定为
姜科植物毛郁金(Curcuma aromatica Salisb．)的干
燥根茎，植物标本存于广西中医药研究院标本馆;乙
腈(美国天地牌，色谱纯) ，水为纯净水，其余试剂为
分析纯。
2 实验方法与结果
2． 1 色谱条件
色谱柱 Ultimate柱(XB-C18，4． 6×250mm，5μm) ，
流动相:乙腈-4%冰醋酸(48 ∶ 52) ，流速 1． 0 ml /min，
检测波长 430nm，柱温为室温。理论塔板数以姜黄素
峰计应不低于 5000。在上述条件下，姜黄素对照品
与毛郁金药材供试品溶液的色谱图分别如图 1 和图
2 所示。
图 1 姜黄素对照品的 HPLC色谱
Fig． 1 HPLC chromatogram of curcumin
图 2 毛郁金药材供试品溶液 HPLC色谱
Fig． 2 HPLC chromatogram of Curcuma aromatica
2． 2 对照品溶液的制备
取姜黄素对照品约 12 mg 精密称定(准确值为
12． 4 mg) ，置入 10 ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇
匀，作为姜黄素对照品储备液 A;精密吸取 1 ml 姜黄
素对照品储备液 A，置入 10 ml 棕色量瓶中，加甲醇
至刻度，摇匀，作为姜黄素对照品溶液储备液 B;精密
吸取 1ml姜黄素对照品储备液 B，置 25 ml 棕色量瓶
中，加甲醇至刻度，摇匀，配制成浓度为 4． 96 μg /ml
的姜黄素对照品溶液。
2． 3 供试品溶液的制备
取毛郁金药材粉末(过 2 号筛)约 0． 5g，精密称
定，置入具塞三角瓶中，精密加入甲醇 10ml，称定重
量，先冷浸 30min，再超声处理 30min，静置，放冷至室
温，再称定重量，用甲醇补足缺失的重量，上清液用
0． 45μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得毛郁金药材
供试品溶液。
2． 4 线性关系考察
精密吸取上述姜黄素对照品储备液 B，制成浓度
分别 为 0． 992μg /ml、2． 976μg /ml、4． 96μg /ml、
6. 944μg /ml、8． 928μg /ml 的对照品溶液，进样 10μl
测定姜黄素峰面积，以浓度(C)为横坐标，以对照品
峰面积(A)为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程为
A =3． 29×104+8． 31×106C，r = 0． 9995，说明对照品溶
液进样浓度在 0． 992 ～ 8． 928(μg /ml)范围内，进样浓
度与峰面积呈良好的线性关系。
2． 5 精密度、稳定性和重复性试验
取上述对照品溶液(4． 96μg /ml)10μl，按 2． 1 项
色谱条件，连续进样 6 次，分析测定姜黄素峰面积，其
RSD为 0． 62 %(n =6) ，说明仪器精密度良好。取同
一份供试品溶液，于制备后 0、1h、2h、4h、6h、8h 注入
高效液相色谱仪，进样 10μl，测定姜黄素的峰面积，
其峰面积的 RSD =1． 05%(n = 6) ，说明供试品溶液
在 8 h 内保持稳定。取同一批号毛郁金药材(批号:
10120602)样品细粉 6 份，精密称定，分别按 2． 3 项下
供试品溶液的制备方法制备得供试品溶液后，在 2． 1
项色谱条件下分别进行测定，并计算姜黄素的含量，
其 RSD为 1． 46 %，(n =6) ，说明方法的重复性比较
好。
2． 6 加样回收率试验和样品测定
精密称取毛郁金药材细粉(批号:10120602;已知
含姜黄素 0． 0118%)6 份，每份约 0． 25g，置入具塞三
角瓶中，分别加入姜黄素对照品 49． 6μg，再分别加入
10ml甲醇做溶剂，称定重量，先冷浸 30min 再超声
30min后，静置，放冷却至室温，再称定重量，用甲醇
补足缺失的重量，用 0． 45μm微孔滤膜小心吸取上清
液，滤过，取续滤液为供试品溶液，各进样 10μl，测
定，按测得姜黄素峰面积值计算含量，计算回收率为
99． 80% ～ 103． 63%，RSD = 1． 6% (n = 6) ，详见表
1。加样回收率试验结果表明，加样回收效果良好，可
以满足测定要求。
表 1 加样回收率试验结果(n=6)
Table 1 Recovery of sample(n=6)
序号
No．
样品含量
Sample
contents
(g)
加入量
Addition
amount
(mg)
测得量
Observa-
tion(mg)
回收率
Recovery
(%)
平均回收率
Average
recovery
(%)
RSD
(%)
1 0． 0300 0． 0496 0． 0814 103． 63 101． 28 1． 61
2 0． 0298 0． 0496 0． 0809 103． 02
3 0． 0297 0． 0496 0． 0795 100． 40
4 0． 0296 0． 0496 0． 0792 100． 00
5 0． 0297 0． 0496 0． 0797 100． 81
6 0． 0296 0． 0496 0． 0791 99． 80
051 Guangxi Sciences，Vol. 19 No. 2，May 2012
取不同批号的 6 批样品，每批 2 份，精密称定，制
备供试品溶液。精密吸取供试溶液 10μl，按 2． 1 项
色谱条件测定的结果(表 2)比较理想。
表 2 样品中的姜黄素测定结果 (n=2)
Table 2 Content of Curcumin samples (n=2)
产地
Growting areas
姜黄素含量
Content of curcumin(%)
1 2
平均含量
Average
content
(%)
横县那阳
Hengxian Nayang 0． 024 0． 024 0． 024
横县莲塘
Hengxian Liantang 0． 017 0． 018 0． 018
横县校椅
Hengxian Xiaoyi 0． 017 0． 017 0． 017
灵山陆屋
Lingshan Luwu 0． 024 0． 024 0． 024
灵山沙坪
Lingshan Shaping 0． 017 0． 017 0． 017
南宁西郊
Nanning Xijiao 0． 016 0． 017 0． 017
3 结论
参照中国药典中有关检测姜黄素的项目，本实验
采用 430nm为检测波长，以乙腈 ∶ 4%冰醋酸(48 ∶
52)为流动相，样品中姜黄素与其他杂质峰完全分
离，并能在 20min内出峰完毕，达到分析要求。
本文以甲醇作为提取溶剂，用先冷浸 30min 再超
声 30min作为提取方法，建立高效液相色谱法测定广
西壮药毛郁金中姜黄素含量，结果准确，重复性良好，
对广西壮药毛郁金的质量控制有实际的应用意义，可
以为进一步制定毛郁金的质量标准提供科学的依据。
参考文献:
［1］ 广西壮族自治区食品药品监督管理局编．广西壮族自治
区壮药质量标准［M］．第 2 卷．南宁:广西科学技术出版
社，2011．
［2］ 全国中草药汇编编写组．全国中草药汇编［M］．上册．北
京:人民卫生出版社，1975．
［3］ 黄勇其，莫艳珠，耿晓照，等．黔产毛郁金的镇痛、止血作
用实验研究［J］． 现代中药研究与实践，2004，18(4) :
48．
［4］ 郭晓应，陈敏珠，徐叔云．郁金对大鼠抗炎作用［M］．药
学通报，1982，17(6) :1．
［5］ 李凌夫，贾宽，杨宝华，等．郁金 1 号注射液对正常小鼠
免疫功能的影响［J］．中医药学报，1987，27(2) :39．
(责任编辑:邓大玉)
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续表 2
Continued table 2
序号
No．
化合物
Compound
时间
(min)
分子式
Mole-
cular
formula
分子量
Mole-
cular
weight
相对百
分含量
Relative
content
(%)
匹配度
Matching
degree
(%)
10 油酸
Oleic acid 25． 21
C18H34O2 282 2． 16 95
11 叶绿醇
Phytol 25． 39
C20H40O 296 7． 70 91
12 硬脂酸
Stearic acid 25． 79
C18H36O2 284 3． 13 99
13 二十酸
Eicosanoic acid 32． 58
C20H40O2 312 1． 26 99
14 10，11-(4＇，5＇二甲
基苯并) ［3． 2］二
聚二甲苯
10，11-(4＇，5＇dime-
thylbenzo) ［3． 2］
paracyclophane
34． 36 C23H22 298 1． 00 90
15 二十一碳酸
Heneicosanoic acid 35． 75 C21H42O2 326 1． 20 97
16 二十二烷酸
Docosanoic acid 38． 25 C22H44O2 340 1． 00 99
17 邻苯二甲酸单乙
基己基酯
Phthalic acid
mono-2-
ethylhexyl ester
38． 62 C16H22O4 278 4． 23 91
18 二十三碳酸
Tricosanoic acid
40． 37 C23H46O2 354 1． 00 99
19 木质素酸
Lignoceric acid 42． 23
C24H48O2 368 1． 00 98
3 结论
本研究对广西特色药材尖尾枫石油醚部位脂溶
性成份进行化学成分分析，检出的 29 个化合物均为
首次在该植物中鉴定出。由于石油醚部位前流份主
要成分为脂肪、脂肪酸类，故进行甲酯化利于脂肪酸
类成分的 GC-MS分析鉴定。纯石油醚洗脱分离得到
的流份样品 A 鉴定出 11 个化合物，占总量的
76. 18%，主要为烯烃类，占 68． 49%;石油醚-乙酸乙
酯混合溶剂洗脱分离得到的流份样品 B鉴定出 19 个
化合物，占总量的 83． 27%，主要为脂肪酸、脂肪醇
类，占 50． 68%，其中棕榈酸含量最高，达到 14%。
参考文献:
［1］ 戴斌，李钊东．“虎牛钻风”类传统瑶药的调查研究［J］．
中国民族民间医药杂志，1998(2) :28-34．
［2］ 江苏新医药学院．中药大辞典:上册［M］．上海:上海科
学技术出版社，1986:875．
［3］ 丛浦珠，李笋玉．天然有机质谱学［M］．北京:中国医药
科技出版社，2003．
(责任编辑:邓大玉)
151广西科学 2012 年 5 月 第 19 卷第 2 期