全 文 ：学 报
Journal of China Pharmaceutical University 2011，42(6) :551 － 554
山绿茶总黄酮抑制实验性大鼠良性前列腺增生的作用观察
盛树东
*，于有江，王冬艳，钱小妹，肖望书
(扬州环境资源职业技术学院，扬州 225127)
摘 要 48只雄性 SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、前列康组和山绿茶总黄酮高、中、低剂量组(80，40，20 mg /kg)
6组，对去势大鼠注射丙酸睾酮造成的良性前列腺增生症(BPH)模型(模型组去势注射丙酸睾酮，对照组去势未注射丙酸
睾酮) ，用前列康和山绿茶总黄酮高、中、低剂量对前列腺增生模型大鼠灌胃;模型组、对照组以生理盐水灌胃，连续 5 周。
测定大鼠前列腺湿重比，大鼠血清总酸性磷酸酶(ACP)、非前列腺特异性酸性磷酸酶(NPAP) ，计算前列腺特异性酸性磷酸
酶(PAP)。光学显微镜下观察前列腺组织的形态变化。结果表明，山绿茶总黄酮高、中剂量组(80，40 mg /kg)的前列腺湿
重指数、血清 PAP活性与模型组比较均明显降低，差异有显著性(P ＜ 0. 01) ，与前列康组相似;显微镜下山绿茶总黄酮高剂
量(80 mg /kg)对上皮细胞形态与模型组相比有明显改变:腺腔中分泌物积聚，可见前列腺结石，与正常组的前列腺细胞结
构基本相接近。说明山绿茶总黄酮具有抑制前列腺增生的作用。
关键词 山绿茶总黄酮;前列腺增生;酸性磷酸酶;形态结构;抑制作用
中图分类号 R965 文献标识码 A 文章编号 1000 － 5048(2011)06 － 0551 － 04
Inhibition of Hainan holly leaf extract on rats with experimental benign prostat-
ic hyperplasia
SHENG Shu-dong* ，YU You-jiang，WANG Dong-yan，QIAN Xiao-mei，XIAO Wang-shu
Yangzhou Vocational College of Environment and Resources，Yangzhou 225127，China
Abstract 48 rats were randomly divided into 6 groups: a normal control group，a model group of benign prostat-
ic hyperplasia( BPH) treated by subcutaneous injection of testosterone propionate，a positive control group ( rat in
model group treated with Qianliekang by orally) and Hainan holy leaf extract ( HHLE) groups ( rat in model
group treated with HHLE by orally) ． After treating 5 weeks，the rat prostate wet weight，the index of prostate gland
( PI) ，the serum acid phosphatase ( ACP) ，non-prostate-specific acid phosphatase ( NPAP) and PAP were meas-
ured． Morphological changes of the prostate tissue under optical microscope were observed． Results showed that
prostate wet weight，PI and serum PAP of high and medium dose groups were obviously decreased compared with
the model group，with a significant difference ( P ＜ 0． 01) similar to that of Qianliekang． High-doses group ( 80
mg /kg) improved the morphological changes of the prostate characterized by reducing interstitial fibrosis，increas-
ing secretions in the glandular cavity and prostate calculi showing eosinophilic，which were similar to those of the
normal group． HHLE has inhibitive effect on BPH induced by testosterone propionate in rats．
Key words Hainan holly leaf extract; benign prostatic hyperplasia; acid phosphatase; morphological structure;
inhibition
This study was supported by Program of Jiangsu Health Department ( No． J201009)
良性前列腺增生症(benign prostate hyperplasia，
BPH)俗称前列腺肥大，以前列腺中叶增生为实质
改变的一组症候群，是老年男性的常见病。60 ～ 69
岁年龄段老人中重度 BPH 患病率为 50% ～ 60%，
70 ～ 80 岁年龄段的患病率则高达 80% ～ 90%［1］。
随着我国进入老龄化社会，前列腺增生的发病率呈
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* 收稿日期 2011-07-06 * 通讯作者 Tel:0514 － 87432020 E-mail:yzssd@ sohu． com
基金项目 江苏省卫生厅资助项目(No． J201009)
学 报 Journal of China Pharmaceutical University 第 42 卷
现上升趋势。前列腺增生过程中性激素水平的改
变与其他致病因素互相关联。从中药中提取的化
学成分具有抑制雄性特征、抗炎、抑制前列腺素合
成、抑制细胞增殖和松弛平滑肌细胞的作用，能改
善临床症状，另外，还具有副作用轻微、可长期服
用、易为患者接受等优点，这为该病的治疗提供了
一条较好的途径。山绿茶(Ilex hainanensis Merr)
为冬青科冬青属植物海南冬青的干燥叶，含黄酮
类、三萜酸类、绿原酸、鞣酸及山绿茶苷等成分［2］，
具有清热解毒、平肝潜阳、活血化瘀的功效。本实
验观察了山绿茶的主要活性成分山绿茶总黄酮
(Hainan holly leaf extract，HHLE)对大鼠实验性前
列腺增生模型的影响。
1 材 料
1. 1 药 品
山绿茶总黄酮(中国药科大学中药教研室提
供，65%) ;丙酸睾丸酮注射液(上海第九制药厂，
规格 25 mg /mL) ;橄榄油(进口分装，用作丙酸睾
丸酮稀释剂) ;前列康普乐安片(浙江康思贝制药
股份有限公司) ;酸性磷酸酶(ACP)试剂盒(南京
建成生物工程研究所)。
1. 2 动 物
清洁级健康雄性 SD 大鼠 48 只，2 月龄，体重
180 ～ 220 g，扬州大学比较医学动物中心提供，合
格证号:SCXK(苏)2007-0018。
2 方 法
2. 1 分组与给药
参照大鼠前列腺增生模型制备方法［3］，取 2 月
龄雄性大鼠 48 只，随机取 8 只为正常对照组，其余
40 只进行造模:用戊巴比妥钠(30 mg /kg)腹腔注
射麻醉，经阴囊行无菌手术，摘除双侧睾丸，缝合伤
口前滴加青霉素 2 滴。手术后 7 d 将大鼠随机分
为 BPH模型组、阳性对照(前列康)组、山绿茶总黄
酮高、中、低剂量组。每日一次皮下注射丙酸睾酮
5 mg /kg，连续 4 周。前列康组(570 mg /kg)和山绿
茶总黄酮高、中、低剂量组(80，40，20 mg /kg)分别
灌胃，正常对照组、模型组以等量生理盐水灌胃，每
日一次，连续给药 5 周［4］。
2. 2 取材与检测
连续灌胃给药 5 周，于末次给药后 24 h，自股
动脉取血分离血清，用 α-萘酚磷酸盐法比色测定
总酸性磷酸酶(ACP) ，用 L-酒石酸法比色测定非
前列腺特异性酸性磷酸酶(NPAP) ，前列腺特异性
酸性磷酸酶(PAP)= ACP － NPAP。称量空腹大鼠
体重，用颈椎脱臼法处死大鼠，立即打开下腹部，剥
离前列腺周围组织，分离取出前列腺，称其湿重，以
前列腺重量指数(腺体重 /体重)作为前列腺增生
的指标［3］。取部分腺体固定于 10%甲醛中，依次
经 70%、80%、90%、100%乙醇脱水，石蜡包埋，切
片，HE染色，高倍镜下观察前列腺的组织病理学
改变，以组织形态学改变作组间比较，评价山绿茶
总黄酮抑制前列腺增生的作用。
2. 3 统计学处理
采用 SPSS 17. 0 和 Excel 2003 软件进行统计
学分析，计量资料以表示，两组间比较采用 t 检验，
P ＜ 0. 05 为差异有统计学意义。
3 结 果
3. 1 山绿茶总黄酮对大鼠前列腺重量指数的影响
前列康组和山绿茶总黄酮不同剂量组两项指
标明显降低，后者呈剂量依赖关系，与模型组比较
有显著性差异 (高、中剂量组 P ＜ 0. 01;低剂量组
P ＜ 0. 05)。结果见表 1。
Table 1 Effect of HHLEa on the prostate wet weight and prostate index
induced by testosterone propionate in rats(珋x ± s，n = 8)
Group
Dose /
(mg /kg)
Wet weight /
mg
Prostate index
/(mg /g)
Control 227 ± 14. 62＊＊ 1. 12 ± 0. 11＊＊
Model 417 ± 21. 16 1. 97 ± 0. 08
Qianliekang 264 ± 42. 68＊＊ 1. 21 ± 0. 17＊＊
HHLE 80 267 ± 35. 57＊＊ 1. 32 ± 0. 23＊＊
40 303 ± 60. 60＊＊ 1. 45 ± 0. 29＊＊
20 389 ± 20. 29* 1. 83 ± 0. 13*
aHainan holy leaf extract
* P ＜ 0. 05，＊＊P ＜ 0. 01 vs model group
3. 2 山绿茶总黄酮对大鼠血清酸性磷酸酶活性的
影响
模型组大鼠血清 ACP、PAP 水平显著升高，与
正常对照组比较有显著差异(P ＜ 0. 01)。山绿茶
总黄酮对血清 ACP、PAP 水平的抑制呈剂量依赖
性，低剂量组引起的变化无显著性差异(P ＞
0. 05) ，各组血清 NPAP活性无明显变化(表 2)。
3. 3 对前列腺组织形态学的影响
前列腺组织切片结果显示，模型组腺上皮多为
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第 6 期 盛树东等:山绿茶总黄酮抑制实验性大鼠良性前列腺增生的作用观察
单层柱状上皮，可见腺腔炎症细胞浸润，腺腔内分
泌物明显减少，腺泡间纤维性结缔组织明显增生，
显微镜下成纤维细胞明显增多，血管扩张，上述改
变符合前列腺增生的形态学改变。山绿茶总黄酮
组上皮细胞形态与模型组有明显不同，腺腔中分泌
物积聚，可见前列腺结石，呈嗜酸性。结果见图 1。
Table 2 Effect of HHLE on the serum ACP，NPAP and PAP of rats induced by testosterone propionate(珋x ± s，n = 8)
Group Dose /(mg /kg) ACP /(U /L) NPAP /(U /L) PAP /(U /L)
Control 18. 71 ± 1. 96＊＊ 8. 07 ± 2. 05 10. 64 ± 1. 69＊＊
Model 36. 62 ± 3. 87 10. 25 ± 2. 19 25. 36 ± 3. 05
Qianliekang 23. 03 ± 1. 87＊＊ 10. 13 ± 2. 11△ 12. 9 ± 2. 55＊＊
HHLE 80 22. 38 ± 2. 15＊＊ 9. 86 ± 1. 83△ 12. 52 ± 1. 50＊＊
40 28. 42 ± 2. 93* 9. 37 ± 2. 03△ 19. 05 ± 3. 35*
20 34. 94 ± 2. 11△ 10. 43 ± 1. 48△ 24. 51 ± 1. 61△
ACP:Acid phosphatase;NPAP:Non-prostatic acid phosphatase;PAP:Prostatic acid phosphatase
* P ＜ 0. 05，＊＊P ＜ 0. 01，△P ＞ 0. 05 vs model group
Figure 1 Effect of HHLE on the prostate histomorphology in the rat
model (HE，× 200)
A:Model group;B:HHLE group(20 mg /kg) ;C:HHLE group (80 mg /
kg)
4 讨 论
前列腺增生是由间质和上皮依不同比例混合
增生的疾病，近年研究显示性激素代谢失衡可能与
BPH的发病有密切关系，雌激素在其发病中的作
用机制越来越受到重视［5］。Suzuki 等［6］研究发
现，40 岁后男性出现了雌 /雄激素比例增加的现
象，雌激素通过与雄激素的协同作用，在 BPH的发
病机制中可能起主要作用。由于雄激素逐渐减少，
使雌 /雄激素比例上升，破坏了正常状态下雌雄激
素相互抑制的动态平衡，致雄激素对雌激素的抑制
作用减弱，雌激素促前列腺基质细胞增殖的刺激作
用被释放出来，引起间质细胞增殖。有学者认为，
雄激素不但可直接促进间质细胞增生，还可通过间
质上皮相互作用刺激上皮组织增生［7］。本研究采
用 SD大鼠去势后皮下注射丙酸睾酮法复制前列
腺增生模型，经检测，模型组前列腺重量、指数均较
正常对照组增加(P ＜ 0. 01) ;显微镜下可见，前列
腺腺体、间质增生，与文献报道一致［8］。
黄酮类化合物是一类具有较强生物活性的化
合物，是 5 种植物雌激素的主要类型之一［9］。与雌
激素不同的是，植物雌激素同时具有雌激素和抗雌
激素的作用，对雌激素受体有着独特的作用，与选
择性雌激素受体调节剂有着类似的效果［10］。
对上述 BPH模型采用山绿茶总黄酮进行实验
性治疗发现，山绿茶总黄酮各组能对抗大鼠前列腺
增生，可使前列腺重量指数明显低于模型组，统计学
检验差异有显著性，山绿茶总黄酮高剂量组与前列
康组相近;形态学观察，山绿茶总黄酮对上皮细胞形
态与模型组相比有明显改变:腺腔中分泌物积聚，可
见前列腺结石，呈嗜酸性，形态与正常组的前列腺细
胞结构基本相接近。对前列腺增生引起的形态变化
有改善作用，与模型组比较有显著性差异。
由于血清中 PAP 主要来自前列腺组织，故血
清 PAP活性的变化可以反映前列腺状态。模型组
血清 PAP 升高，与正常对照组比较有显著差异。
Rennie等［11］认为 PAP 的合成和分泌依赖雄激素
的存在，而雌激素可在雄激素作用的基础上影响其
活性。山绿茶总黄酮可发挥其植物雌激素样作用，
中剂量和高剂量均可明显抑制血清 PAP 升高，说
明其对前列腺组织生长的抑制作用。总之，山绿茶
总黄酮能明显改善大鼠前列腺增生，是山绿茶抑制
前列腺增生的有效部位。
山绿茶不同炮制品中的黄酮类成分含量都比
较高［2］，将其作为抑制前列腺增生类药品或保健
品值得进一步研究开发。
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学 报 Journal of China Pharmaceutical University 第 42 卷
参 考 文 献
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·新 进 展·
10 个正在开发的热点治疗性疫苗(2)
5. AE37(Antigen Express公司) 适应证:乳腺癌
AE37 表达于约 75% ～80%的乳腺癌，同时也经常存在于前列腺癌中，卵巢癌和其他癌症的 HER2 受体的片段共
存，刺激免疫系统。同样，AE37 最初定位也是 HER2 的表达水平过低不适合赫赛汀治疗乳腺癌患者的辅助治疗。
AE37目前正在进行Ⅱ期临床试验，该试验涉及 200 多例淋巴结阳性或高风险淋巴结阴性乳腺癌患者。今年 8 月，
Antigen Express公司报告说:“在中位数为 17 个月的随访中，AE37 治疗 HER2 表达低水平的患者复发率是对照组的
一半。”
6. Nexvax2(ImmusanT公司) 适应证:乳糜泻
Nexvax2是一只实验性的治疗性疫苗，含有 3个关键谷蛋白衍生肽，该疫苗治疗的目标，是通过每周或每月的注射，使
乳糜泻患者对谷蛋白的毒性作用脱敏。
7. ADXS-HPV(Advaxis公司) 适应证:子宫颈、头颈部癌
Advaxis公司通过设计使中单核增生性李斯特菌分泌抗原 /佐剂的融合蛋白，这些融合蛋白被认为将使所有人类对
中单核增生性李斯特菌具有强大的免疫反应，进而直接对抗癌症。
8. CRS-207(Aduro Biotech公司) 适应证:胰腺癌
Aduro Biotech公司的胰腺癌疫苗 CRS-207 进入Ⅱ期临床。CRS-207 的Ⅰ期试验数据令人鼓舞。该项研究包括 17
例多种癌症(间皮瘤、非小细胞肺癌、卵巢癌和胰腺癌)。尽管传统上，此阶段的患者平均存活时间仅 3 ～ 5 个月，但
CRS-207 治疗的 17 例患者的平均存活时间为 15 个月以上。
9. PEV7(Pevion Biotech公司) 适应证:复发性外阴阴道念殊菌病
10. GI-4000(Globe Immune公司) 适应证:胰腺癌
GlobeImmune公司开发的 Tarmogens技术是用于研究治疗癌症和传染性疾病的靶向分子免疫原。利用 Tarmogens
技术开发的肿瘤候选物 GI-4000 是一种治疗 Ras蛋白变异引起的胰腺癌的疫苗。
(医药经济报，本刊有删节)
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