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灯台叶醇提物对Ｃ５７ＢＬ／６荷瘤小鼠免疫功能的影响
韩　芳（南京市白下区建中中医院，南京 ２１０００４）
摘要：目的　研究灯台叶醇提物对Ｃ５７ＢＬ／６荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法　建立Ｃ５７ＢＬ／６雄性小鼠腋下皮下注入Ｌｅｗｉｓ肺
癌小鼠移植瘤动物模型，将荷瘤鼠分为：正常组，荷瘤小鼠组，灯台叶醇提物低、中、高剂量组（０．２，１．０，５．０ｇ·ｋｇ－１），灌胃给药，
连续给药１４ｄ，分别测定其抑瘤率、Ｔ淋巴细胞亚群ＣＤ４＋／ＣＤ８＋；小鼠血清中白细胞介素－６（ＩＬ－６）、白细胞介素－１０（ＩＬ－１０）、干
扰素－γ（ＩＮＦ－γ）水平。结果　灯台叶醇提物高剂量组对肿瘤生长有明显的抑制作用（Ｐ＜０．０５），其抑瘤率为６４．９％；中、高剂量
组能显著提高荷瘤小鼠血清ＩＮＦ－γ、ＩＬ－６以及ＩＬ－１０的水平（Ｐ＜０．０５）；高剂量组对小鼠胸腺质量增加无明显影响，但抑制脾脏
增大；能够降低ＣＤ４＋／ＣＤ８＋比例，并且增强Ｔ淋巴细胞增殖能力（Ｐ＜０．０５）。结论　灯台叶醇提物具有提高荷瘤小鼠免疫功
能的作用。
关键词：灯台叶醇提物；荷瘤小鼠；抗肿瘤；免疫调节
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００４－２４０７．２０１３．０２．０２１
中图分类号：Ｒ９６５　　　文献标志码：Ａ　　　文章编号：１００４－２４０７（２０１３）０２－０１６８－０３
Ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｉｍｍｕｎｏｒｅｇｕｌａｔｉｎｇ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｅｔｈａｎｏｌ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｏｆ　Ａｌｓｔｏｎｉａｓｃｈｏｌａｒｉｓｏｎ
Ｃ５７ＢＬ／６ｔｕｍｏｒ－ｂｅａｒｉｎｇ　ｍｉｃｅ
ＨＡＮ　Ｆａｎｇ（Ｂａｉｘｉａ　Ｄｉｓｔｒｉｃｔ　Ｊｉａｎｚｈｏｎｇ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｏｆ　Ｎａｎｊｉｎｇ，Ｎａｎｊｉｎｇ　２１０００４，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｓｔｕｄｙ　ｔｈｅ　ｉｍｍｕｎｏｒｅｇｕｌａｔｉｎｇ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｅｔｈａｎｏｌ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｏｆ　Ａｌｓｔｏｎｉａｓｃｈｏｌａｒｉｓ（ＡＳ）ｏｎ　Ｃ５７ＢＬ／６ｔｕｍｏｒ－
ｂｅａｒｉｎｇ　ｍｉｃｅ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｌｅｗｉｓ　ｃｅｌｓ　ｗｅｒｅ　ｉｎｊｅｃｔｅｄ　ｓｕｂｃｕｔａｎｅｏｕｓｌｙ　ｉｎｔｏ　Ｃ５７ＢＬ／６ｍａｌｅ　ｍｉｃｅ　ｔｏ　ｍａｋｅ　ｘｅｎｏｇｒａｆｔ　ａｎｉｍａｌ　ｍｏｄｅｌｓ．Ｔｕｍｏｒ－
ｂｅａｒｉｎｇ　ｍｉｃｅ　ｗｅｒｅ　ｄｉｖｉｄｅｄ　ｉｎｔｏ　ｎｏｒｍａｌ　ｇｒｏｕｐ，ｔｕｍｏｒ－ｂｅａｒｉｎｇ　ｍｉｃｅ　ｇｒｏｕｐ，ＡＳ　ｌｏｗ，ｍｅｄｉｕｍ　ａｎｄ　ｈｉｇｈ　ｄｏｓｅ　ｇｒｏｕｐｓ（０．２，１．０　５．０
ｇ·ｋｇ－１）ｂｙ　ｉｎｔｒａｇａｓｔｒｉｃ　ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ　ｆｏｒ　１４ｃｏｎｓｅｃｕｔｉｖｅ　ｄａｙｓ．Ｔ　ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ　ｓｕｂｓｅｔｓ　ｏｆ　ＣＤ４＋／ＣＤ８＋；ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－６（ＩＬ－６），
ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ　ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－１０（ＩＬ－１０），ａｎｄ　ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ－γ（ＩＮＦ－γ）ｌｅｖｅｌ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｔｕｍｏｒ－ｂｅａｒｉｎｇ　ｍｉｃｅ　ｓｅｒｕｍ　ｗｅｒｅ　ｍｅａｓｕｒｅｄ　ｔｏ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ　ｔｈｅ
ｔｕｍｏｒ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ　ｒａｔｅ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｔｈｅ　ｈｉｇｈ－ｄｏｓｅ　ｏｆ　ＡＳ　ｅｘｈｉｂｉｔｅｄ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｎ　ｔｕｍｏｒ　ｇｒｏｗｔｈ（Ｐ＜０．０５），ａｎｄ　ｔｈｅ　ｉｎ－
ｈｉｂｉｔｉｏｎ　ｒａｔｅ　ｗａｓ　６４．９％．Ｍｅｄｉｕｍ　ａｎｄ　ｈｉｇｈ　ｄｏｓｅ　ｇｒｏｕｐｓ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｉｍｐｒｏｖｅｄ　ｔｈｅ　ＩＮＦ－γ，ＩＬ－６，ａｎｄ　ＩＬ－１０ｌｅｖｅｌｓ　ｉｎ　ｔｕｍｏｒ－ｂｅａｒｉｎｇ
ｍｉｃｅ　ｓｅｒｕｍ（Ｐ＜０．０５）．Ｈｉｇｈ－ｄｏｓｅ　ｇｒｏｕｐ　ｈａｄ　ｎｏ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｍｏｕｓｅ　ｔｈｙｍｕｓ　ｗｅｉｇｈｔ，ｂｕｔ　ｉｎｈｉｂｉｔｅｄ　ｓｐｌｅｎｏｍｅｇａｌｙ．Ｈｉｇｈ－
ｄｏｓｅ　ｇｒｏｕｐ　ｗａｓ　ａｂｌｅ　ｔｏ　ｒｅｄｕｃｅ　ｔｈｅ　ＣＤ４＋／ＣＤ８＋ｒａｔｉｏ　ａｎｄ　ｔｏ　ｅｎｈａｎｃｅ　Ｔ　ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ　ｃａｐａｃｉｔｙ（Ｐ＜０．０５）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ
ＡＳ　ｈａｓ　ａ　ｒｏｌｅ　ｔｏ　ｉｍｐｒｏｖｅ　ｔｈｅ　ｉｍｍｕｎｅ　ｆｕｎｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｕｍｏｒ－ｂｅａｒｉｎｇ　ｍｉｃｅ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：ｔｈｅ　ｅｔｈａｎｏｌ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｏｆ　Ａｌｓｔｏｎｉａ　ｓｃｈｏｌａｒｉｓ（ＡＳ）；ｔｕｍｏｒ－ｂｅａｒｉｎｇ　ｍｉｃｅ；ａｎｔｉｔｕｍｏｒ；ｉｍｍｕｎｏｒｅｇｕｌａｔｉｎｇ
　　恶性肿瘤是危害人类健康最严重的疾病之一，其
发病率呈逐年上升趋势，中药在肺癌的综合治疗中有
一定的特点。灯台树Ａｌｓｔｏｎｉａ　ｓｃｈｏｌａｒｉｓ　Ｒ．Ｂｒ．为夹
竹桃科鸡骨常山属植物，是云南傣族传统药物，分布
于云南、广东和广西等地。近年来对灯台叶的药理活
性研究较多［１－３］，前期研究发现灯台叶醇提物体外抑
制人宫颈癌 ＨｅＬａ细胞和人乳腺癌 ＭＣＦ－７细胞增殖
的作用显著［４］。本实验通过制作小鼠移植瘤模型，研
究灯台叶醇提物对小鼠Ｌｅｗｉｓ肺癌生长的影响，并进
一步研究其对荷瘤小鼠免疫功能的影响，借以探讨其
抗肿瘤机制。
１　仪器与材料
１．１　仪器　细胞培养板（美国Ｃｏｒｎｉｎｇ公司）；倒置
显微镜ＸＳＺ－Ｄ２（重庆光学仪器厂）；酶标仪、二氧化
碳培养箱均购自美国 Ｔｈｅｒｍｏ　Ｅｌｅｃｔｒｏｎ公司；ＦＡＣＳ
Ｃａｌｉｂｕｒ型流式细胞仪（美国ＢＤ公司）。
１．２　动物　Ｃ５７ＢＬ／６雄性小鼠，体质量（２０±２）ｇ，
购自上海斯莱克实验动物有限责任公司，许可证号
ＳＣＸＸ（沪）２００７－０００５。
１．３　瘤株　体外培养的Ｌｅｗｉｓ细胞，由南京凯基生
物技术有限公司提供。
１．４　药物　灯台叶购自安徽省亳州市联华医药有限
公司，原料粉碎，醇提２次后合并滤液，抽滤除渣，５０℃
减压蒸馏回收乙醇。灯台叶乙醇提取物低温烘干后研
成粉末备用，主要含有生物碱、黄酮和三萜类成分。
１．５　试剂　小鼠ＣＤ４＋、ＣＤ８＋、ＣＤ３
＋抗体，南京凯
基生物技术有限公司；新生牛血清（ＮＢＳ），兰州民海
公司产品；刀豆蛋白，购自美国Ｓｉｇｍａ公司；白细胞
介素－６（ＩＬ－６）、白细胞介素－１０（ＩＬ－１０）、干扰素－γ
（ＩＮＦ－γ）、ＥＬＩＳＡ试剂盒，购自北京普尔伟业生物科
技有限公司。
２　方法
２．１　荷瘤小鼠模型制备　离心收集Ｌｅｗｉｓ细胞，细
胞计数，将细胞密度调至１×１０７／ｍＬ，每只小鼠于腋
下皮下注入细胞瘤悬液１００μＬ，每组１０只。
２．２　对荷瘤小鼠肿瘤的抑制作用以及细胞因子水平
的影响　造模后２４ｈ随机分组并开始给药，实验分
为５组：正常组、模型组、灯台叶醇提物低、中、高剂量
组（０．２，１．０，５．０ｇ·ｋｇ－１），灌胃给药，每日１次，连
续给药１４ｄ，正常组和模型组小鼠给予等量生理盐
８６１ 西北药学杂志　２０１３年３月　第２８卷　第２期
ｈｔｔｐ：／／ＸＢＹＺ．ｃｂｐｔ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ
水。于末次给药２４ｈ后处死小鼠，称量瘤体质量，计
算各组的抑瘤率。小鼠眼球采血，收集血清，测定各
项免疫指标，以ＥＬＩＳＡ试剂盒检测对ＩＮＦ－γ、ＩＬ－６以
及ＩＬ－１０水平的影响。
２．３　小鼠脏器指数的测定和刀豆蛋白诱导的小鼠脾
淋巴细胞增殖　小鼠处死后取出胸腺、脾脏，用电子
天平称取其湿质量，然后根据体质量计算胸腺、脾脏指
数。取脾脏并制成细胞悬液。以ＤＭＥＭ培养基调整
细胞浓度至５×１０６／ｍＬ。在刀豆蛋白 （５μｇ·ｍＬ
－１）
作用下置３７℃、５％ ＣＯ２条件下培养７２ｈ。培养结
束后，离心，弃上清，每孔加入异丙醇２００μＬ，室温振
荡，在酶标仪上５５０ｎｍ处检测Ａ值。
２．４　对小鼠外周血Ｔ淋巴细胞亚群的影响　小鼠
血清用淋巴细胞分离液分离淋巴细胞，加入荧光标记
抗ＣＤ４＋和ＣＤ８＋抗体，４℃避光反应３０ｍｉｎ，３０
ｍｉｎ后用ＰＢＳ洗涤２次，用４００μＬ体积分数１％多
聚甲醛固定，以ＦＡＣＳ　Ｃａｌｉｂｕｒ型流式细胞仪（美国
ＢＤ公司产品）检测ＣＤ４＋和ＣＤ８＋细胞数。
２．５　统计学处理　应用ＳＰＳＳ　１０．０软件对数据进行
统计分析，结果用珚ｘ±ｓ表示，组间比较用ｔ检验。Ｐ
＜０．０５为有统计学意义。
３　结果
３．１　对小鼠肿瘤生长的影响　高、中、低剂量的灯台
叶醇提物对小鼠肿瘤的生长均具抑制作用，抑制率呈
剂量依赖性增加。与对照组比较差异有统计学意义
（Ｐ＜０．０５），见表１。
表１　灯台叶醇提物对小鼠肿瘤生长的抑制作用（珔ｘ±ｓ，ｎ＝９）
Ｔａｂ．１Ｔｈｅ　ｉｎｈｉｂｉｔｉｖｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ＡＳ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ｏｆ　ｔｕｍｏｒ
（珔ｘ±ｓ，ｎ＝９）
组别 剂量／ｇ·ｋｇ－１ 瘤质量／ｇ 抑瘤率／％
荷瘤对照 － ２．４２±０．６１ －
灯台叶醇提物 ０．２　 １．７１±０．５５＃ ２９．３
灯台叶醇提物 １．０　 １．２３±０．７１＃ ４９．２
灯台叶醇提物 ５．０　 ０．８５±０．６８＃ ６４．９
　注：与荷瘤对照组比较＃Ｐ＜０．０５
３．２　对荷瘤小鼠血清ＩＮＦ－γ、ＩＬ－６以及ＩＬ－１０水平
的影响　荷瘤对照组小鼠血清ＩＮＦ－γ、ＩＬ－６以及ＩＬ－
１０显著低于正常组（Ｐ＜０．０５），灯台叶醇提物高、中
剂量组血清ＩＮＦ－γ、ＩＬ－６以及ＩＬ－１０水平均显著高于荷
瘤对照组（Ｐ＜０．０５），低剂量组升高不显著（Ｐ＞０．０５）。
见表２。
３．３　对荷瘤小鼠Ｔ细胞亚群的影响　用流式细胞
仪测定荷瘤小鼠外周血中ＣＤ４＋Ｔ和ＣＤ８＋Ｔ细胞
的表达情况。灯台叶醇提物能够改善２种细胞数目
的异常，使其接近于正常水平。与荷瘤对照组比较差
异有统计学意义（Ｐ＜０．０５），见表３。
３．４　灯台叶醇提物对慢性疲劳小鼠脏器指数和淋巴
细胞增殖的影响　胸腺和脾脏指数能够反映免疫情
况。如表２所示，灯台叶醇提物对荷瘤小鼠的胸腺增
大没有拮抗作用，而对脾脏增大有抑制作用。末次给
药后取小鼠脾脏，体外用Ｃｏｎ　Ａ刺激，模型组小鼠Ｔ
淋巴细胞的增殖能力显著下降，灯台叶醇提物能够剂
量依赖性地提高其增殖能力，高剂量组几乎恢复到正
常水平（Ｐ＜０．０５）。见表４。
表２　灯台叶醇提物对荷瘤小鼠血清ＩＮＦ－γ、ＩＬ－６和ＩＬ－１０水平的影响（珔ｘ±ｓ）
Ｔａｂ．２Ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ＡＳ　ｏｎ　ＩＮＦ－γ，ＩＬ－６ａｎｄ　ＩＬ－１０ｌｅｖｅｌｓ　ｏｎ　ｔｕｍｏｒ－ｂｅａｒｉｎｇ　ｍｉｃｅ
组别 剂量／ｇ·ｋｇ－１　 ｎ　 ＩＮＦ－γ／ｐｇ·ｍＬ－１　 ＩＬ－６／ｐｇ·ｍＬ－１　 ＩＬ－１０／ｐｇ·ｍＬ－１
正常组 － １０　 ３６１．２±１２．４　 ７２．１±１１．３　 ９９．２±５．５
荷瘤对照组 － ９　 ２７７．５±１３．６＃ ３１．３±６．４＃ ３７．２±６．６＃
灯台叶醇提物 ０．２　 ９　 ２９５．６±１４．８　 ３８．５±８．５　 ４４．９±７．７
灯台叶醇提物 １．０　 ９　 ３０２．７±１５．９＊ ４２．５±６．２＊ ５７．５±１０．４＊
灯台叶醇提物 ５．０　 ９　 ３２１．４±１２．８＊ ５８．６±５．５＊ ７４．４±１１．８＊
　注：与正常对照组比较＃Ｐ＜０．０５；与荷瘤对照组比较＊Ｐ＜０．０５
表３　灯台叶醇提物对荷瘤小鼠Ｔ细胞亚群的影响（珔ｘ±ｓ）
Ｔａｂ．３Ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ＡＳ　ｏｎ　Ｔ　ｃｅｌ　ｓｕｂｓｅｔ　ｏｎ　ｔｕｍｏｒ－ｂｅａｒｉｎｇ　ｍｉｃｅ
组别 剂量／ｇ·ｋｇ－１　 ｎ　 ＣＤ４＋／ＣＤ３＋ （％） ＣＤ８＋／ＣＤ３＋ （％） ＣＤ４＋／ＣＤ８＋ （％）
正常组 － １０　 ６４．５±１．１　 ２８．１±２．１　 ２．３±０．４
荷瘤对照 － ９　 ７６．３±２．６＃ ２０．８±２．５　 ３．６±０．５＃
灯台叶醇提物 ０．２　 ９　 ７３．２±２．５　 ２２．１±３．５　 ３．３±０．４
灯台叶醇提物 １．０　 ９　 ７２．４±２．６　 ２５．２±３．５　 ２．８±０．５
灯台叶醇提物 ５．０　 ９　 ７０．６±１．５　 ２６．６±３．３　 ２．６±０．３＊
　注：与正常对照组比较＃Ｐ＜０．０５；与荷瘤对照组比较＊Ｐ＜０．０５
９６１西北药学杂志　２０１３年３月　第２８卷　第２期
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表４　灯台叶醇提物对荷瘤小鼠免疫指标的影响（珔ｘ±ｓ）
Ｔａｂ．４Ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ＡＳ　ｏｎ　ｉｍｍｕｎｅ　ｉｎｄｉｃａｔｏｒｓ　ｏｎ　ｔｕｍｏｒ－ｂｅａｒｉｎｇ　ｍｉｃｅ
组别 剂量／ｇ·ｋｇ－１　 ｎ 胸腺指数 脾脏指数 淋转刺激指数
正常组 － １０　 ２．４±０．７　 ４．２±０．７　 ２．４±０．５
荷瘤对照 － ９　 ３．４±０．６＃ ５．８±０．８＃ １．２±０．４＃
灯台叶醇提物 ０．２　 ９　 ３．３±０．２　 ５．４±０．６　 １．５±０．５
灯台叶醇提物 １．０　 ９　 ３．３±０．１　 ５．２±０．６　 １．７±０．６
灯台叶醇提物 ５．０　 ９　 ３．４±０．６　 ４．６±０．５＊ ２．１±０．５＊
　注：与正常对照组比较＃Ｐ＜０．０５；与荷瘤对照组比较＊Ｐ＜０．０５
４　讨论
机体的细胞免疫功能失调与肿瘤的发生和发展
有着密切的关系，Ｔ淋巴细胞浸润程度可直接反映机
体的抗肿瘤状态。当宿主免疫功能低下或者受到抑
制时，肿瘤的发生率明显增高，在肿瘤进行性生长时
肿瘤患者的免疫功能也能受到抑制［５－７］，二者互为因
果进而导致恶性循环并加剧肿瘤的危害。在机体的
抗肿瘤免疫反应中，主要依靠Ｔ淋巴细胞介导的细
胞免疫［４］。成熟的Ｔ淋巴细胞通常可分为ＣＤ４＋和
ＣＤ８＋２个亚群，其中ＣＤ４＋Ｔ淋巴细胞可产生大量
的细胞因子，而ＣＤ８＋Ｔ淋巴细胞在ＣＤ４＋Ｔ淋巴
细胞的辅助以及细胞因子的共同作用下，可杀伤肿瘤
细胞，初次的抗肿瘤免疫反应主要依赖ＣＤ８＋Ｔ淋
巴细胞和自然杀伤细胞的参与［８－１０］。
在本研究中，我们考察了灯台叶醇提物对小鼠肿
瘤的抑瘤作用以及对细胞因子分泌和ＣＤ４＋和ＣＤ８
＋Ｔ淋巴细胞数目的影响。研究表明，灯台叶醇提物
对小鼠肿瘤的生长均具抑制作用，且抑制作用呈剂量
依赖性增加，与对照组比较差异具统计学意义，与其
提高荷瘤小鼠血清ＩＮＦ－γ、ＩＬ－６、ＩＬ－１０的水平以及
ＣＤ４＋／ＣＤ８＋比值有关。以上结果表明，灯台叶醇
提物具有一定的抑瘤作用，同时从免疫细胞和免疫分
子水平提高荷瘤小鼠抗肿瘤免疫功能，可见灯台叶醇
提物的抑瘤作用与其改善免疫系统状态、增强机体抗
肿瘤能力有关，其确切的机制有待于进一步研究。
参考文献：
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ｍｕｎｅ　ｉｎｓｕｌｔ　ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ　ｉｍｍｕｎｏｔｏｘｉｃｉｔｙ　ｉｎ
ｃｈｒｏｎｉｃ　ｆａｔｉｇｕｅ　ｓｙｎｄｒｏｍｅ（ＣＦＳ）ｏｒ　ｍｙａｌｇｉｃｅｎｃｅｐｈａｌｏ－
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ｔｉｇｕｅ　ｓｙｎｄｒｏｍｅ［Ｊ］．Ｔｒｅｎｄｓ　Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ　Ｍｅｔａｂ，２００４，１５
（２）：５５－５９．
［９］　陈奇．中药药理研究方法学［Ｍ］．北京：人民卫生出版
社，２００６：７７７．
［１０］Ｓａｌｇａｌｅｒ　ＭＬ，Ｌｏｄｇｅ　ＰＡ．Ｕｓｅ　ｏｆ　ｃｅｌｕｌａｒ　ａｎｄ　ｃｙｔｏｋｉｎｅ
ａｄｊｕｖａｎｔｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ　ｏｆ　ｃａｎｃｅｒ［Ｊ］．Ｊ　Ｓｕｒｇ
Ｏｎｃｏｌ，１９９８，６８（２）：１２２－１３８．
（收稿日期：２０１２－０９－１９）
Ｓｒｃ激酶抑制剂对人肺癌顺铂耐药细胞Ａ５４９／ＤＤＰ多药耐药性的影响及机制
田　梅（天津市河东区中山门街社区卫生服务中心，天津 ３００１８１）
摘要：目的　研究Ｓｒｃ激酶抑制剂ＰＰ２对人肺癌顺铂耐药细胞Ａ５４９／ＤＤＰ多药耐药性的影响及机制。方法　以５和１０μｍｏｌ·Ｌ
－１
Ｓｒｃ激酶抑制剂ＰＰ２作用Ａ５４９／ＤＤＰ细胞２４ｈ后，应用 Ｗｅｓｔｅｒｎ　ｂｌｏｔ考察肿瘤细胞Ｓｒｃ磷酸化表达的变化，ＭＴＴ法检测细胞的
药物敏感性，流式细胞仪考察细胞Ｐ－ｇｐ表达的变化，Ｗｅｓｔｅｒｎ　ｂｌｏｔ及Ｒｅａｌ－ｔｉｍｅ　ＰＣＲ考察肿瘤细胞 ＭＤＲ１蛋白及ｍＲＮＡ表达的
变化。结果　Ｓｒｃ激酶抑制剂ＰＰ２可下调Ａ５４９／ＤＤＰ细胞Ｓｒｃ磷酸化表达，５和１０μｍｏｌ·Ｌ
－１　Ｓｒｃ激酶抑制剂ＰＰ２作用后，顺铂
对Ａ５４９／ＤＤＰ细胞的药物敏感性分别提高了１．３７和２．４７倍，细胞Ｐ－ｇｐ表达分别为对照组的６５．２％和４６．４％，ＭＤＲ１在蛋白
水平表达显著降低，ＭＤＲ１在ｍＲＮＡ水平的表达分别为对照组的５０．２４％ （Ｐ＜０．０５）和３７．６％（Ｐ＜０．０５）。结论　Ｓｒｃ激酶抑
制剂ＰＰ２可逆转Ａ５４９／ＤＤＰ细胞多药耐药性，其机制可能与降低细胞 ＭＤＲ１表达水平有关。
关键词：Ｓｒｃ激酶抑制剂；多药耐药；ＰＰ２；Ｐ－糖蛋白；多药耐药基因１
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００４－２４０７．２０１３．０２．０２２
中图分类号：Ｒ９６５　　　文献标志码：Ａ　　　文章编号：１００４－２４０７（２０１３）０２－０１７０－０５
０７１ 西北药学杂志　２０１３年３月　第２８卷　第２期