全 文 ：北方药学 2016年第 13卷第 7期
茅莓根、茎、叶不同药用部位抗炎作用的比较
杨柳青1 康 力 2 黄 镛 1（1.广东省中医院药学部 广州 510120；2.暨南大学药学院 广州 510632）
摘要：目的：观察茅莓根、茎、叶水提物的抗炎作用，为茅莓临床用药提供药理学依据。方法：将 SD大鼠随机分为空白对照组、阳性
对照组和茅莓根、茎、叶水提物高、中、低剂量组（18，12，6g·kg-1），分别采用角叉菜胶致大鼠足跖肿胀法和大鼠棉球肉芽肿法考察
抗炎作用。结果：茅莓不同药用部位高、中、低剂量组均能在一定程度上抑制由角叉菜胶引起的大鼠足跖肿胀度，其中茅莓叶高、中
剂量组在 2，3h有显著差异（P＜0.05），茅莓根高剂量组在 2h有显著差异（P＜0.05），其作用大小顺序依次为：茅莓叶>茅莓根>茅莓
茎；除了茅莓根低剂量组，茅莓根、茎、叶高、中、低剂量组降低大鼠棉球肉芽肿的重量（P＜0.05），其作用大小顺序依次为：茅莓叶>
茅莓根>茅莓茎。结论：茅莓根、茎、叶均有一定的抗炎作用，以茅莓叶作用最强。
关键词：茅莓 药用部位 抗炎 大鼠
中图分类号：R285.5 文献标识码：B 文章编号：1672-8351（2016）07-0131-03
The Study of the Effectanti-inflammatoryof Roots，Stems and Leavesfrom Rubus parvifolius L.
Yang Liuqing1 Kang Li2 Huang Yong1 （1.Pharmaceutical Department of Guangdong Provincial Hospital of TCM，Guangdong，
Guangzhou，510120，China. 2.Jinan University College of pharmacy，Guangzhou，510632，China.）
Abstract：Objective：To observe the anti -inflammatory effects ofroots， stems， leavesfor Rubus parvifolius L.，and provide the
pharmacological basis for clinical using.Methods：SD rats were randomly divided into control group，positive control group androot，
stem，leaf ofRubus parvifolius L.group，and there administration group was set high，medium and low dose（18，12，6g·kg-1），and using
models of carrageenan-induced paw edema and cotton-peller-induced granul- omaanti-inflammation effect was evaluated. Results：The
middle and high dose of the extract of leave of Rubus parvifolius L.couldsignificantly inhibit paw swelling in rats within 2，3 hours （P＜
0.05），and The high dose of the extract of root of Rubus parvifolius L.couldsignificantly inhibit paw swelling in rats within 2hours （P＜
0.05），the size of the order was：leaf> root> stem.In addition to the low dose of stems of Rubus parvifolius L，the granuloma quality was
significantly reduced by the extract compared with the control group （P＜0.05），the size of the order was：leaf> root> stem.Conclusion：
胃，对小鼠均无明显急性毒性产生。
表 5 丹参破壁饮片与传统饮片对小鼠急性毒性反应的观察结果（x±s）
注：各组间体重无明显差异。
4 讨 论
丹参是常用的活血化瘀中药，丹参及其化学成分具有抗心
肌缺血和改善血液流变学等作用[7，8]，本研究采用大鼠急性心肌
缺血模型和急性血瘀模型，评价比较丹参破壁饮片和传统饮片
在改善心肌缺血和血液流变学方面的药效，同时初步考察丹参
破壁饮片的急性毒性，为丹参破壁饮片这一新型饮片的有效性
和安全性提供依据。
垂体后叶素能使冠状动脉收缩，引起心肌供血不足[9]，同时
收缩全身小血管，导致心脏负荷加重，造成心肌缺血，并在心电
图上出现 T波抬升等表现。本研究采用舌下注射垂体后叶素造
成大鼠急性心肌缺血模型，通过心电图观察 T波抬升变化和采
用 NBT心肌染色法称量心肌缺血部分的质量评价药物对心肌
缺血症状的改善作用，实验结果表明丹参破壁饮片和传统饮片
均能有效改善心肌缺血大鼠的心电图异常并缩小心肌缺血范
围，丹参破壁饮片低剂量（94mg/kg）对心肌缺血大鼠的药效作用
即与丹参传统饮片（780mg/kg）相似。
肾上腺素注射和冷水浸泡可致血管收缩、血流变缓从而形
成血瘀的病理表现，本研究通过复制大鼠急性血瘀模型，测定血
液黏度和血小板聚集率以评价药物对血液流变学的改善作用，
实验结果表明丹参破壁饮片和传统饮片均能明显降低血瘀大鼠
的全血黏度、血浆黏度及血小板聚集率，说明两者均能显著改善
急性血瘀模型大鼠的血液流变学，较低剂量的丹参破壁饮片药
效与丹参传统饮片相似。
丹参破壁饮片是由传统饮片经超微粉碎制备而成的新型饮
片，由于将植物细胞壁破碎，可使存在于细胞壁中的主要有效成
分更好地溶出释放，同时提高药物在胃肠道的分散度和溶出度，
使药物的药效增强[10]。本研究表明，较低剂量的丹参破壁饮片对
心肌缺血和血液流变学的改善作用与丹参传统饮片相似，提示
丹参破壁饮片的药材利用率高于传统饮片。
急性毒性试验结果表明丹参传统饮片和破壁饮片以一日最
大给药量 120g/kg灌胃，对小鼠均无明显急性毒性产生，提示丹
参破壁饮片在应用中与传统饮片具有相似的用药安全性。
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*通讯作者
组别
动物数
n
死亡数
n
给药前体
重（g）
给药后 3d
体重（g）
给药后 5d
体重（g）
给药后 7d
体重（g）
对照组
丹参传统饮片组
丹参破壁饮片组
10
10
10
0
0
0
19.3±0.7
19.4±0.7
19.1±0.8
22.8±2.1
22.5±1.9
23.1±2.1
24.7±2.7
25.0±3.1
25.7±3.3
28.1±3.4
29.6±2.5
30.2±3.2
131
北方药学 2016年第 13卷第 7期
茅莓（Rubusparvifolius L.）为蔷薇科悬钩子属植物，分布于
河北、山西、陕西、四川、湖南及华东等地[1]。茅莓是一种传统民
间中药，在民间有着悠久的应用历史，据医学古籍《本草拾遗》记
载，该植物具有“止血活血、散淤定痛、清热解毒之功效，可内服、
外敷”。另据《中药大辞典》记载，茅莓根、茎和叶均可药用，具有
清热凉血、散结止痛、利尿消肿等功效，用于治疗肠炎、肝脾肿
大、黄疸、慢性肝炎、跌打肿痛、风湿骨痛、泌尿系统感染等[2]。但
由于各地用药习惯不同，如广东、山东等地多以茅莓根入药，而
其不同药用部位，化学成分和药理作用是否有所区别，目前文献
研究报道较少，仅有谭明雄[3]报道了茅莓根和叶挥发油的抑菌作
用。为了进一步挖掘其药用潜能，更好利用民间药物资源，本文
对茅莓根、茎、叶等部位抗炎作用进行研究，为其临床用药提供
药效学依据。
1 材 料
实 验 动 物 ： 动 物 SPF 级 SD 大 鼠 （合 格 证 号 ：
44007200015974），雌雄各半，体重 180～220g，由广东省医学实
验动物中心提供。
仪器与试药：AUY220型分析天平（日本岛津），PV-200型
足肿容积测量仪（成都泰盟科技有限公司）；茅莓采集于广东省
高要市，经广州中医药大学中药鉴定教研室鉴定为蔷薇科悬钩
子属植物茅莓 Rubus parvifolius L．的干燥全草；水提物的制备：
将茅莓的根、茎、叶不同药用部位用枝剪分开，然后切段（1～
2cm），干燥，加 10倍量水回流提取 3次，合并滤液，减压浓缩至
相当于含生药 1g·mL-1的药液，冷藏保存，备用。角叉菜胶（Sig－
ma公司，批号 127H-1524）；阿司匹林（山东新华制药股份有限
公司，批号 20150513）；乙酸泼尼松（广东金葫芦制药有限公司，
批号 140712）；其他试剂为分析纯。
2 方 法
2.1 对大鼠足跖肿胀的影响[4]：取 SD大鼠 110只，雌雄各半，随
机均分为 11组，即空白对照组，阳性对照组，茅莓根、茎、叶提取
物高、中、低剂量组。阳性对照组按 0.1g·kg-1给予阿司匹林混悬
液，空白对照组给予等量生理盐水（NS），茅莓根、茎、叶提取物
高、中、低 3个剂量组分别按 18，12，6g·kg-1，灌胃给药，每日 1
次，连续 5d。末次给药前先用足跖容积测量仪测定大鼠右足跖
容积，给药 0.5h后，予每只大鼠右后足跖（右后足掌心向踝关节
方向） 注射 1%角叉菜胶 0.1mL 致炎，分别测量给药后
1，2，3，4，5h大鼠右足跖容积，计算足跖肿胀度。
足跖肿胀度=肿胀后各时间点足跖容积－肿胀前足跖容积
2.2 对大鼠肉芽组织增生的影响 [4]：取 SD 大鼠 110 只，雌雄各
半，随机均分为 11组，即空白对照组，阳性对照组，茅莓根、茎、
叶提取物高、中、低剂量组。在无菌条件下将 2个 20mg高压灭
菌脱脂棉球分别滴加 10万 U·mL-1青霉素 0.1mL，50℃烘箱烘
干后，分别植入大鼠两侧腹股沟皮下，缝合伤口，手术当天开始
灌胃给药，阳性对照组按 0.01g·kg-1给予乙酸泼尼松，空白对照
组给予 0.1g·kg-1生理盐水（NS），茅莓根、茎、叶提取物高、中、低
3个剂量组分别按 18，12，6g·kg-1，给药 1次/d，连续 7d，d8颈椎
脱臼致死，取出棉球及包裹在外边的肉芽组织，置 70℃烤箱放
置 1 h后，电子天平称重，减去原棉球质量，即为肉芽肿净重。
2.3 统计学方法：采用 SPSS17.0统计学软件进行处理，数据以
（x±s）表示，多组间比较采用单因素方差分析，实验数据采用 t
检验，P＜0.05为差异有统计学意义。
3 结 果
3.1茅莓根、茎、叶水提液对大鼠足跖肿胀的影响：茅莓叶高、中、
低剂量组均能在一定程度上抑制由角叉菜胶引起的大鼠足跖肿
胀度，其中茅莓叶高、中剂量组在 2，3h有显著差异（P＜0.05），茅
莓根高剂量组在 2h有显著差异（P＜0.05），其作用大小顺序依次
为：茅莓叶>茅莓根>茅莓茎，结果见表 1。
表 1 茅莓根、茎、叶水提物对角叉菜胶所致大鼠后足跖肿胀的影响
（x±s，n=10）
注：与对照组比较 1）P＜0.05，2）P＜0.01；与阳性组比较 3）P＜
0.05，4）P＜0.01。
3.2茅莓根、茎、叶水提液对棉球诱导的大鼠肉芽组织增生的影
响：结果表明，除了茅莓根低剂量组，茅莓根、茎、叶高、中、低剂
量组降低大鼠棉球肉芽肿的重量（P＜0.05），其作用大小顺序依
次为：茅莓叶>茅莓根>茅莓茎，结果见表 2。
表 2 茅莓根、茎、叶水提液对大鼠棉球肉芽肿的影响（x±s，n=10）
注：与对照组比较 1）P＜0.05，2）P＜0.01；与阳性组比较 3）P＜
0.05，4）P＜0.01。
4 讨 论
本实验结果显示，茅莓根、茎、叶均具有一定的抗炎作用，其
对大鼠角叉菜胶所致足跖肿胀和大鼠棉球肉芽肿均有一定程度
的抑制作用，综合比较，其大小顺序为茅莓叶>茅莓根>茅莓茎。其
作用强弱可能与其化学成分有一定的相关性，研究表明，茅莓中
含有化学成分包括：微量元素类、糖类、色素类、三萜及其苷类、黄
酮、酚类、甾体及其苷类，茅莓叶中大量的挥发油类成分等[5]，茅
莓叶抗炎作用最强，因此，我们推断挥发油可能是其发挥抗炎作
用的有效成分。对于其抗炎作用物质成分的筛选，还有待研究。
茅莓全草均可以入药，研究表明茅莓不同部位化学成分有
一定差异，本实验研究结果表明，茅莓根、茎、叶抗炎作用的强弱
有一定差异，因此，临床上对于疾病的治疗其用药部位选择应该
组别
剂量
/g·kg-1
V（致炎前足
跖体积）/mL
致炎后不同时间的足跖肿胀度/mL
1h 2h 3h 4h 5h
对照组 0.1 1.04±0.17 0.33±0.124） 0.67±0.114） 0.74±0.134） 0.70±0.173） 0.59±0.09
阿司匹林 0.1 1.10±0.16 0.12±0.152） 0.34±0.142） 0.40±0.122） 0.54±0.182） 0.53±0.11
18 1.06±0.19 0.26±0.144） 0.52±0.121）4） 0.63±0.151）4） 0.64±0.143） 0.52±0.14
茅莓根 12 1.11±0.17 0.28±0.194） 0.55±0.184） 0.65±0.164） 0.66±0.123） 0.55±0.21
6 1.17±0.08 0.29±0.084） 0.57±0.144） 0.70±0.194） 0.69±0.223） 0.56±0.19
18 1.16±0.10 0.29±0.154） 0.56±0.164） 0.65±0.114） 0.66±0.193） 0.54±0.16
茅莓茎 12 1.12±0.14 0.31±0.124） 0.58±0.124） 0.69±0.104） 0.68±0.113） 0.58±0.15
6 1.09±0.17 0.31±0.134） 0.61±0.114） 0.71±0.144） 0.69±0.133） 0.58±0.10
18 1.15±0.25 0.24±0.104） 0.48±0.131）4） 0.60±0.131）4） 0.63±0.133） 0.50±0.17
茅莓叶 12 1.14±0.19 0.24±0.144） 0.51±0.191）4） 0.63±0.211）4） 0.65±0.153） 0.54±0.12
6 1.19±0.13 0.25±0.144） 0.55±0.104） 0.69±0.124） 0.67±0.203） 0.56±0.13
组别 剂量/g·kg-1 肿胀度/mg
对照组 0.2 111.23±25.474）
乙酸泼尼松 0.01 47.94±13.562）
18 73.25±19.392）4）
茅莓根 12 84.52±25.421）4）
6 92.15±16.944）
18 74.77±17.332）4）
茅莓茎 12 86.32±20.121）4）
6 90.04±19.431）4）
18 71.24±22.342）4）
茅莓叶 12 80.27±14.211）4）
6 89.97±15.691）4）
The roots，stems，leaves of Rubus parvifolius Lhad effects of anti-inflammatory，and the leaves was strongest.
Key words：Rubus parvifolius L. Medicinal parts Anti-inflammatory Rats
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北方药学 2016年第 13卷第 7期
组别 γ-GCS mRNA TGF-β1mRNA
正常组 0.26±0.051 0.18±0.042
狼疮组 0.21±0.032 0.24±0.061
γ-GCS及TGF-β1在MRL/1pr雌性小鼠肾组织表达研究
张北平 刘树锋 王 海 谭 校（汕头大学医学院附属粤北人民医院风湿免疫科 韶关 512026）
摘要：目的：对狼疮小鼠肾组织 γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶（γ-GCS）表达水平进行研究，发现 γ-GCS的表达量改变在转化生长因子
β1（TGF-β1）促纤维化中的作用。方法：以 C57BL/6小鼠为对照，荧光定量 PCR法检测 MRL/1pr雌性小鼠肾组织 γ-GCS和 TGF-
β1的 mRNA表达。结果：狼疮小鼠组肾组织中 γ-GCS的 mRNA及蛋白表达减少，TGF-β1的 mRNA表达水平升高，与 C57BL/6小
鼠组比较有显著差异（P<0.05）。结论：γ-GCS表达降低导致谷胱甘肽（GSH）合成减少，抗氧化能力减弱，促使肾间质纤维化。
关键词：狼疮性肾炎 转化生长因子 γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶
中图分类号：R593.24+2 文献标识码：B 文章编号：1672-8351（2016）07-0133-01
系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus，SLE）是一种
累及多系统的疾病，狼疮性肾炎（lupus nephritis，LN）是最常见
器官损害，免疫损伤联合炎症反应，导致肾组织中活性氧簇含
量增加[1]，同时抗氧化剂 GSH含量减少，氧化-抗氧化失衡造成
组织损害，最终发展到肾间质纤维化的不可逆性损害。转化生
长因子（TGF-β1）与 LN肾间质纤维化过程中最重要的促纤维
化因子，表达影响着肾组织的纤维化进展。谷胱甘肽（GSH）是机
体最重要的抗氧化损害物质，在 LN中起到重要作用，γ-谷氨酰
半胱氨酸合成酶（γ-GCS）为合成 GSH的关键限速酶，γ-GCS的
活性和表达水平直接影响 GSH的水平，是维持细胞内 GSH稳
态的主要决定因素。本研究在 MRL/1pr雌性小鼠模型中，从转
录水平研究 TGF-β1和 γ-GCS在狼疮鼠肾组织的表达，探讨
GSH合成限速酶 γ-GCS在 MRL/1pr的表达在 LN 肾氧化应激
及间质纤维化中的作用。
1 资料与方法
1.1 研究资料：正常组小鼠：SPF级 C57BL/6小鼠；自发性狼疮性
肾炎模型组：MRL/1pr雌性小鼠，各 10只，均为雌性。
1.2实验方法：试剂 Trizol Reagent（Invitrogen公司），PrimeScriptTM
RT-PCR试剂盒（宝生物工程有限公司），PCR引物合成（上海英
骏生物技术有限公司）。两组小鼠培养至 16周时断颈处死，无
菌环境下取出肾脏，用 Trizol Reagent分别提取两组小鼠肾组织
总 RNA（按照试剂盒方法操作）。用荧光定量 PCR方法检测总
RNA中 TGF-β1、γ-GCS的 mRNA水平，反应按照试剂盒说明
采用 2步法完成。设计引物：内参 GAPDH（150bp）F：TGTGTC－
CGTCGTGGATCTGA，R：TTGCTGTTGAAGTCGCAGGAG；TGFβ1
（92bp）F：TTTCCGCTGCTACTGCAAGTC，R：AGGGCTGTCTG－
GAGTCCTCA；γ -GCS（132bp）F：TGCACATCTACCACGCAGT－
CAA，R：GAACATCGCCTCCATTCAGTAACA，实验条件 95℃
5min→94℃ 10s→59℃，33个循环。以稀释的 cDNA浓度梯度制
作标准曲线。
1.3 统计学方法：数据以均数±标准差（x±s）表示，SPSS18.0软件
处理，t检验。P<0.05为有显著差异。
2 实验结果（表 1）
TGF-β1半定量 PCR结果：狼疮组 TGF-β1mRNA的表达
高于正常组（P<0.05）。狼疮组 γ-GCS的 mRNA表达较正常组减
少（P<0.05）。
3 讨 论
肾间质纤维化是 LN发展到终末期的表现，是 SLE最常见
死亡原因。多项研究认为，LN肾组织内大量氧自由基通过多种
途径造成肾组织损害，这种损害和患者机体 GSH降低有关[2]。研
究认为 LN肾组织 TGF-β1过度表达导致了肾间质纤维化。研
究表明小鼠胚胎成纤维细胞 GSH可以阻断 TGF-β1引起的纤
溶酶原激活物抑制物-1mRNA的表达，促进细胞外基质降解；狼
疮患者体内 GSH水平下降，是机体内氧化-抗氧化失衡的主要
原因，其降低水平和疾病活动有相关性[4]，这个结论与本项研究
中 GSH合成限速酶 γ-GCS表达降低（P<0.05）的结果是一致
的。γ-GCS的 mRNA表达降低，必然导致 GSH水平降低。因此
认为，SLE患者体内 GSH降低是消耗增加和产生减少共同导致
的。目前考虑炎症损伤及免疫学损害使肾组织 GSH消耗并 γ-
GCS表达减少，氧化损害加剧导致纤维化因子 TGF-β1过度表
达，肾间质纤维化。
综上，GSH在狼疮性肾炎发展到纤维化过程中有重要作用[5]，
本研究认为 γ-GCS在 MRL/1pr小鼠肾组织表达减少可能是导
致肾组织 GSH降低的根本原因，也是 LN肾组织氧化应激加重
的重要原因，外源性补充 GSH或增强表达 γ-GCS可从根本上
提高肾组织 GSH水平，可能减缓肾间质纤维化进程。
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